專利名稱：N－(芳基/雜芳基)氨基酸衍生物、包括這些衍生物的藥用組合物以及用這些化合物抑制β ...的制作方法
相關(guān)申請(qǐng)的相互參考本申請(qǐng)要求美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)第60/＿,＿號(hào)(該申請(qǐng)根據(jù)37 C.F.R.§1.53(b)(2)(ⅱ)由1996年11月22日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)第08/755,334號(hào)轉(zhuǎn)變而來)的權(quán)益，該申請(qǐng)通過引用其全部結(jié)合到本文中作為參考。發(fā)明背景發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及抑制β-淀粉樣肽釋放和/或其合成的化合物，并因此在治療阿爾茨海默氏病中具有實(shí)用性。本發(fā)明也涉及包含這類化合物的藥用組合物以及抑制β-淀粉樣肽釋放的方法。參考文獻(xiàn)以下出版物、專利和專利申請(qǐng)?jiān)诒旧暾?qǐng)中以上標(biāo)數(shù)字引用1Glenner等，“阿爾茨海默氏病新的腦血管淀粉狀蛋白的純化和鑒定的初步報(bào)道”，Biochem.Biophys.Res.
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所有以上出版物、專利和專利申請(qǐng)均通過引用全部結(jié)合到本文中作為參考，其程度與每個(gè)單獨(dú)的出版物、專利或?qū)＠暾?qǐng)專門而單獨(dú)地表明通過引用全部結(jié)合到本文中作為參考一樣。本領(lǐng)域的狀況阿爾茨海默氏病(AD)是一種退行性腦病，其臨床特征在于進(jìn)行性記憶、認(rèn)知、推理、判斷和情緒穩(wěn)定性的喪失，它逐漸導(dǎo)致深度精神退化(mental deterioration)，最終導(dǎo)致死亡。AD為老年人中進(jìn)行性精神障礙(癡呆)的非常常見的原因，據(jù)信在美國(guó)為死亡的第四個(gè)主要醫(yī)學(xué)原因。已經(jīng)在世界范圍的人種和人種群中觀察到AD，并是目前和未來的主要的公眾健康問題。目前估計(jì)該病僅在美國(guó)就影響大約二至三百萬人。目前AD是不可治愈的。目前已知沒有有效預(yù)防AD或逆轉(zhuǎn)其癥狀和進(jìn)程的療法。
患有AD的個(gè)體的大腦表現(xiàn)出特征性損害，稱為老年(或淀粉狀蛋白)斑、淀粉樣血管病(淀粉狀蛋白在血管中沉積)和神經(jīng)原纖維纏繞。大量的這些損害，特別是淀粉狀蛋白斑和神經(jīng)原纖維纏繞，一般在患有AD的患者中對(duì)記憶和認(rèn)知功能重要的人腦的幾個(gè)區(qū)域中發(fā)現(xiàn)。更有限解剖分布的少數(shù)這些損害也在不具有臨床AD的大多數(shù)老年人的腦中發(fā)現(xiàn)。淀粉狀蛋白斑和淀粉樣血管病也特征鑒定了第21對(duì)染色體三體性(唐氏綜合征)個(gè)體的大腦和具有Dutch類型淀粉狀蛋白病的遺傳性大腦出血(HCHWA-D)。目前，AD的確診通常需要在死于此病的患者腦組織中或極少情況下在侵入性神經(jīng)外科手術(shù)期間取出的腦組織小活檢樣品中觀察上述損害。
AD和上述其它疾病的淀粉狀蛋白斑和血管淀粉樣沉積(淀粉樣血管病)特征性的主要化學(xué)組分，為大約39-43個(gè)氨基酸的約4.2千道爾頓(kD)蛋白，稱為β-淀粉樣肽(βAP)，或有時(shí)為Aβ、AβP或β/A4。G1enner等人1首先純化β-淀粉樣肽，并提供部分氨基酸序列。在美國(guó)專利第4,666,8292中描述了前28個(gè)氨基酸的分離步驟和序列的數(shù)據(jù)。
分子生物學(xué)和蛋白化學(xué)分析已經(jīng)表明，β-淀粉樣肽為大得多的前體蛋白(APP)的小片段，APP通常由各種動(dòng)物(包括人)的許多組織中的細(xì)胞產(chǎn)生。對(duì)編碼APP的基因結(jié)構(gòu)的了解已經(jīng)證明，β-淀粉樣肽被蛋白酶從APP切下，作為肽片段產(chǎn)生。β-淀粉樣肽片段從APP切下以及隨后作為淀粉狀蛋白斑在腦組織和腦血管壁和腦膜血管壁中沉積的精確的生物化學(xué)機(jī)制目前尚不清楚。
幾方面的證據(jù)表明，進(jìn)行性β-淀粉樣肽腦沉積在AD發(fā)病中機(jī)理起初期(seminal)作用，并可以數(shù)年或數(shù)十年先于認(rèn)知癥狀出現(xiàn)。參見例如Selkoe3。最重要的證據(jù)是這樣一個(gè)發(fā)現(xiàn)，即在具有遺傳決定(家族性)形式的AD的幾個(gè)家族中，APP的770個(gè)氨基酸的同種型的人氨基酸717的錯(cuò)義DNA突變可以在受影響成員中發(fā)現(xiàn)，而在未受影響的成員中沒有發(fā)現(xiàn)(Goate等4；Chartier-Harlan等5；和Murrell等6)，該突變形式稱為瑞典變異體。1992年報(bào)道了在瑞典人家族中發(fā)現(xiàn)的賴氨酸595-甲硫氨酸596變?yōu)樘於０?95-亮氨酸596(參考695同種型)的雙突變(Mullan等7)遺傳連鎖分析已經(jīng)證明，這些突變以及APP基因中的某些其它突變是這類家族中受影響成員AD的特異性分子原因。另外，已經(jīng)鑒定APP的770個(gè)氨基酸同種型的氨基酸693的突變?yōu)棣?淀粉樣肽沉積病HCHWA-D的原因，而在其它情況下，在某些非HCHWA-D的患者中，于氨基酸692處由丙氨酸向甘氨酸的變化引起類似AD的表型?；谶z傳的AD病例中APP的這些突變和其它突變的發(fā)現(xiàn)證明，APP的改變和其β-淀粉樣肽片段的沉積隨后可以引起AD。
盡管在了解AD和其它β-淀粉樣肽相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制(underlying mechanisms)方面已取得進(jìn)展，但仍需要開發(fā)治療所述疾病的方法和組合物。理想的是，所述治療方法最好基于能夠抑制β-淀粉樣肽釋放和/或其合成的藥物。
本發(fā)明概述本發(fā)明涉及發(fā)現(xiàn)一類抑制β-淀粉樣肽釋放和/或其合成的化合物，因此它們可用于在易患AD患者中預(yù)防AD和/或治療患有AD的患者，以抑制其病情的進(jìn)一步惡化。具有上述性質(zhì)的該類化合物由以下式Ⅰ定義
Ⅰ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自酰基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、鹵代、氫、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環(huán)稠合形成雜芳基或雜環(huán)，Rb和Rb’獨(dú)立選自氫、鹵代、硝基、氰基、三鹵代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當(dāng)Rc為氫時(shí)，那么Rb和Rb’或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個(gè)選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、鹵代、氰基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，
(e)雜芳基，和(f)含有1-3個(gè)選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、鹵代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團(tuán)連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個(gè)碳原子的烷基、1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基、1-4個(gè)碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環(huán)；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-鹵代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環(huán)，(i)-NR’R”，其中R’和R”獨(dú)立選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)，以及R’和R”結(jié)合形成具有2-8個(gè)碳原子、任選還含有1-2個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子的環(huán)基團(tuán)，并任選被一個(gè)或多個(gè)烷基或烷氧基取代，和當(dāng)R3含有至少3個(gè)碳原子時(shí)，X也可以為-CR4R4Y’，其中每個(gè)R4獨(dú)立選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，Y’選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，前提為當(dāng)R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的芐基時(shí)，那么X不為-C(O)OCH3。
因此，在其一個(gè)方法方面，本發(fā)明涉及抑制細(xì)胞中β-淀粉樣多肽釋放和/或其合成的方法，該方法包括給予這種細(xì)胞以上式Ⅰ化合物或式Ⅰ化合物的混合物，給予量應(yīng)足以抑制細(xì)胞釋放和/或合成β-淀粉樣多肽。
因?yàn)棣?淀粉樣多肽的體內(nèi)產(chǎn)生與AD的發(fā)病機(jī)理相關(guān)8,9，因此式Ⅰ化合物也可以與一種藥用組合物結(jié)合使用，以預(yù)防性和/或治療性地預(yù)防和/或治療AD。因此，在另一方法方面，本發(fā)明涉及在有發(fā)展為AD風(fēng)險(xiǎn)的患者中預(yù)防AD發(fā)作的預(yù)防性方法，該方法包括給予所述患者一種藥用組合物，所述藥用組合物包含藥學(xué)上惰性的載體和有效量的一種上述式Ⅰ化合物或式Ⅰ化合物的混合物。
在另一方法方面，本發(fā)明涉及一種治療性方法，治療患有AD的患者，以便抑制該患者病癥的進(jìn)一步惡化，該方法包括給予所述患者一種藥用組合物，該組合物包含藥學(xué)上惰性的載體和有效量的一種上述式Ⅰ化合物或式Ⅰ化合物的混合物。
在上述式Ⅰ中，R1取代的苯基優(yōu)選為4-取代的、3,5-二取代的或3,4-二取代的苯基，其中在3位和/或5位的取代基如上述Rb和Rb’定義，在4位的取代基如上述Rc定義。特別優(yōu)選的3,5-二取代的苯基包括(如)3,5-二氯苯基、3,5-二氟苯基、3,5-二(三氟甲基)苯基和3,5-二甲氧基苯基等。特別優(yōu)選的3,4-二取代的苯基包括(如)3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、3-(三氟甲基)-4-氯苯基、3-氯-4-氰基苯基、3-氯-4-碘代苯基、3,4-亞甲基二氧基苯基等。特別優(yōu)選的4-取代的苯基包括(例如)4-疊氮基苯基、4-溴代苯基、4-氯代苯基、4-氰基苯基、4-乙基苯基、4-氟代苯基、4-碘代苯基、4-(苯基羰基)苯基和4-(1-乙氧基)乙基苯基等。
其它優(yōu)選的R1取代基包括(例如)2-萘基、喹啉-3-基、2-甲基喹啉-6-基、苯并噻唑-6-基、苯并噻唑-2-基、5-吲哚基、苯基、2-萘基等。
優(yōu)選的R2選自1-4個(gè)碳原子的烷基、1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基、1-4個(gè)碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與連接碳原子的芳基或雜芳基原子不是鄰位。特別優(yōu)選的R2取代基包括(例如)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、-CH2CH2SCH3和苯基等。
優(yōu)選的R3取代基包括烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和仲丁基等；取代的烷基如α-羥基乙基、-CH2-環(huán)己基、芐基、對(duì)-羥基芐基、3-碘代-4-羥基芐基、3,5-二碘代-4-羥基芐基、-CH2-引哚-3-基、苯基、-(CH2)4-NH-BOC、-(CH2)4-NH2、-CH2-(1-N- 芐基-咪唑-4-基)、-CH2-咪唑-4-基、-CH2CH2SCH3、-(CH2)4NHC(O)(CH2)4CH3和-(CH2)yC(O)OR5，其中y為1或2,R5氫、甲基或叔丁基、苯基等。
優(yōu)選的X取代基包括-C(O)Y基團(tuán)，其中Y為甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、氨基-NH2)、N-(異丁基)氨基、N-甲氨基、N,N-二甲氨基和N-芐氨基等，以及其中X為-CH2OH等。
本發(fā)明也提供包括藥用惰性載體和上述式Ⅰ化合物的新的藥用組合物。
用于本發(fā)明的方法和組合物的特別優(yōu)選的化合物包括(如)下列化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，其中R2和R3基團(tuán)的立體化學(xué)優(yōu)選由L-氨基酸衍生N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]纈氨酸N-異丁酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠蘇氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸乙酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸叔丁酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酰胺N-(3,4-二氯苯基)丙氨酸N-(1-羥基-3-甲基-2-丁基)酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸N,N-二甲基酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸N-甲基酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]異亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠色氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠天冬氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-N-BOC-賴氨酸甲酯N-[N-苯并噻唑-6-基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨酰基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-1-芐基組氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠谷氨酸γ-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠亮氨酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]谷氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-(3,5-二碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-(3-碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)甘氨?；鵠-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-Nε-(己?；?賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠苯丙氨酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N-甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-β-環(huán)己基丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N,N-二甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠甲硫氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N,N-二甲基)-酰胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基己酰胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N-甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠組氨酸甲酯N-[N-(喹啉-3-基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-苯并噻唑-2-基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨酰基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N-芐基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)苯基甘氨酰基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己醇N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二-(三氟甲基)苯基)丙氨?；鵠苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二甲氧基苯基)丙氨酰基]-2-氨基己酸甲酯。
本發(fā)明進(jìn)一步提供新的式Ⅲ化合物
Ⅲ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自?；⑼榛?、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、鹵代、氫、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環(huán)稠合形成雜芳基或雜環(huán)，Rb和Rb’獨(dú)立選自氫、鹵代、硝基、氰基、三鹵代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當(dāng)Rc為氫時(shí)，那么Rb和Rb’或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個(gè)選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、鹵代、氰基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個(gè)選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、鹵代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團(tuán)連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個(gè)碳原子的烷基、1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基、1-4個(gè)碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環(huán)；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-鹵代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環(huán)，(i)-NR’R”，其中R’和R”獨(dú)立選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)，以及R’和R”結(jié)合形成具有2-8個(gè)碳原子、任選還含有1-2個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子的環(huán)基團(tuán)，并任選被一個(gè)或多個(gè)烷基或烷氧基取代，和當(dāng)R3含有至少3個(gè)碳原子時(shí)，X也可以為-CR4R4Y’，其中每個(gè)R4獨(dú)立選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，Y’選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，前提為當(dāng)R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的芐基時(shí)，那么X不為-C(O)OCH3，另外的前提為不包括下列已知的化合物當(dāng)R1為苯基，R2為甲基，X為-C(O)NHΦ時(shí)，那么R3不是甲基、異丙基、異丁基；和當(dāng)R1為苯基，R2為甲基，X為-C(O)NH2時(shí)，那么R3不是芐基。優(yōu)選的式Ⅲ化合物包括下列表Ⅰ列出的化合物
Ⅲ
發(fā)明詳述如上所述，本發(fā)明涉及抑制β-淀粉樣多肽釋放和/或其合成的方法，并因此在治療阿爾茨海默氏病中具有實(shí)用性。然而，在詳細(xì)描述本發(fā)明之前，首先定義以下術(shù)語。定義術(shù)語“β-淀粉樣多肽”是指分子量大約為4.2kD的39-43個(gè)氨基酸的肽，該肽與Glenner等人1描述的蛋白形式大致同型，包括正常β-淀粉樣多肽的突變和翻譯后修飾。無論為何種形式，所述β-淀粉樣多肽均為大跨膜(membrane-spanning)糖蛋白的大約39-43個(gè)氨基酸的片段，稱為β-淀粉樣前體蛋白(APP)。其43個(gè)氨基酸的序列為1Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr11Glu Val His His Gln Lys Leu Val Phe Phe21Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys Gly Ala31Ile Ile Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val41Ile Ala Thr(SEQ ID NO:1)或?yàn)榕c其基本同型的序列。
“烷基”是指優(yōu)選具有1-10個(gè)碳原子、更優(yōu)選具有1-6個(gè)碳原子的一價(jià)烷基。該術(shù)語的例子有諸如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、正己基等。
“取代的烷基”是指優(yōu)選1-10個(gè)碳原子、具有1-3個(gè)選自以下的取代基的烷基烷氧基、取代的烷氧基、?；Ⅴ０被?、酰氧基、氨基、氨基?；被Ｑ趸?、氰基、鹵素、羥基、羧基、羧基烷基、環(huán)烷基、氧酰基氨基、硫羥基、取代的硫代烷氧基、芳基、雜芳基、雜環(huán)、硝基和一-和二-烷基氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-環(huán)烷基氨基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環(huán)氨基以及具有選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)的不同取代基的不對(duì)稱二取代胺。
“亞烷基”是指優(yōu)選具有1-10個(gè)碳原子、更優(yōu)選具有1-6個(gè)碳原子的二價(jià)亞烷基。該術(shù)語的例子有諸如亞甲基(-CH2-)、亞乙基(-CH2CH2-)、亞丙基異構(gòu)體(例如-CH2CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-)等。
“烷芳基”是指優(yōu)選在亞烷基部分中具有1-10個(gè)碳原子、在芳基部分中具有6-10個(gè)碳原子的-亞烷基-芳基。這類烷芳基的例子為芐基、苯乙基等。
“烷氧基”是指“烷基-O-”基團(tuán)。優(yōu)選的烷氧基包括例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基、1,2-二甲基丁氧基等。
“取代的烷氧基”是指“取代的烷基-O-”基團(tuán)，其中取代的烷基如上所定義。
“烷基烷氧基”是指“-亞烷基-O-烷基”基團(tuán)，這里亞烷基和烷基如上定義。這類基團(tuán)包括例如亞甲基甲氧基(-CH2OCH3)、亞乙基甲氧基(-CH2CH2OCH3)、正亞丙基異丙氧基(CH2CH2CH2OCH(CH3)2)、亞甲基叔丁氧基(-CH2-O-C(CH3)3)等。
“烷基硫代烷氧基”是指“-亞烷基-S-烷基”基團(tuán)，其中亞烷基和烷基如上定義。這類基團(tuán)包括例如亞甲基硫代甲氧基(CH2SCH3)、亞乙基硫代甲氧基(-CH2CH2SCH3)、正亞丙基異硫代丙氧基(-CH2CH2CH2SCH(CH3)2)、亞甲基硫代叔丁氧基(-CH2SC(CH3)3)等。
“鏈烯基”是指優(yōu)選具有2-10個(gè)碳原子、更優(yōu)選具有2-6個(gè)碳原子和至少1個(gè)、優(yōu)選1-2個(gè)烯不飽和位點(diǎn)的鏈烯基。優(yōu)選的鏈烯基包括乙烯基(-CH=CH2)、正丙烯基(-CH2CH=CH2)、異丙烯基(-C(CH3)=CH2)等。
“取代的鏈烯基”是指如上定義的具有1-3個(gè)選自以下取代基的鏈烯基烷氧基、取代的烷氧基、?；Ⅴ０被?、酰氧基、氨基、氨?；?、氨基酰氧基、氰基、環(huán)烷基、氧基酰氨基、鹵素、羥基、羧基、羧烷基、硫羥基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、芳基、雜芳基、雜環(huán)、硝基、以及一-和二-烷氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-環(huán)烷基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環(huán)氨基、和具有選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)的不同取代基的不對(duì)稱二取代胺。
“鏈炔基”是指優(yōu)選具有2-10個(gè)碳原子、更優(yōu)選具有2-6個(gè)碳原子和具有至少1個(gè)、優(yōu)選1-2個(gè)炔不飽和位點(diǎn)的鏈炔基。優(yōu)選的鏈炔基包括乙炔基(-C≡CH)、炔丙基(-CH2C≡CH)等。
“取代的鏈炔基”是指如上定義的具有選自以下的1-3個(gè)取代基的鏈炔基烷氧基、取代的烷氧基、?；?、酰氨基、酰氧基、氨基、氨酰基、氨基酰氧基、氰基、環(huán)烷基、氧酰基氨基、鹵素、羥基、羧基、羧烷基、硫羥基、硫代烷氧基、取代硫代烷氧基、芳基、雜芳基、雜環(huán)、硝基、以及一-和二-烷氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-環(huán)烷氨基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環(huán)氨基、和具有選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)的不同取代基的不對(duì)稱二取代胺。
“?；笔侵竿榛?C(O)-、取代的烷基-C(O)-、環(huán)烷基-C(O)-、芳基-C(O)-、雜芳基-C(O)-和雜環(huán)-C(O)-，其中烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)如上定義。
“酰氨基”是指-C(O)NRR基團(tuán)，這里每個(gè)R獨(dú)立地為氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，而每個(gè)烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)如上定義。
“氨酰基”是指-NRC(O)R基團(tuán)，這里每個(gè)R獨(dú)立地為氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，而每個(gè)烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)如上定義。
“酰氧基”是指基團(tuán)-OC(O)-烷基、-OC(O)-取代的烷基、-OC(O)-環(huán)烷基、-OC(O)-芳基、-C(O)O-雜芳基和-C(O)O-雜環(huán)，這里烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)如上定義。
“氨基酰氧基”是指-NRC(O)O-烷基、-NRC(O)O-取代的烷基、-NRC(O)O-環(huán)烷基、-NRC(O)O-芳基、-NRC(O)O-雜芳基和-NRC(O)O-雜環(huán)，這里R為氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，而每個(gè)烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)如上定義。
“氧酰氨基”是指基團(tuán)-OC(O)NR-烷基、-OC(O)NR-取代的烷基、-OC(O)NR-芳基、-OC(O)NR-雜芳基和-OC(O)NR-雜環(huán)，這里R為氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，而每個(gè)烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)如上定義。
“芳基”是指具有單環(huán)(例如苯基)或多個(gè)稠環(huán)(例如萘基或蒽基)的6-14個(gè)碳原子的不飽和芳族碳環(huán)基團(tuán)。優(yōu)選的芳基包括苯基、萘基等。
除非對(duì)芳基取代基定義另外進(jìn)行限制，否則這類芳基可任選地用1-3個(gè)選自以下的取代基取代羥基、酰基、酰氧基、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、鏈烯基、取代的鏈烯基、鏈炔基、取代的鏈炔基、氨基、氨?；?、酰氨基、氨基酰氧基、氧酰氨基、芳基、芳氧基、羧基、羧基烷基、氰基、鹵素、硝基、雜芳基、三鹵甲基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、一-和二-烷氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-環(huán)烷氨基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環(huán)氨基、以及具有選自烷基、取代的烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)等的不同取代基的不對(duì)稱二取代胺等。優(yōu)選的取代基包括烷基、烷氧基、鹵素、氰基、硝基、三鹵甲基和硫代烷氧基。當(dāng)為如此取代時(shí)，這樣的芳基有時(shí)稱為“取代的芳基”。
“芳氧基”是指基團(tuán)芳基-O-，其中所述芳基如上定義，包括也如上定義的可任選取代的芳基。
“羧烷基”是指基團(tuán)-C(O)O-烷基和-C(O)O-取代的烷基，這里烷基和取代的烷基如上定義。
“環(huán)烷基”是指具有3-20個(gè)碳原子的單環(huán)或多個(gè)稠環(huán)(包括與環(huán)烷基環(huán)稠合的芳環(huán))的環(huán)烷基，它可任選地用1-3個(gè)烷基取代。這類環(huán)烷基包括例如單環(huán)結(jié)構(gòu)，諸如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)辛基、1-甲基環(huán)丙基、2-甲基環(huán)戊基、2-甲基環(huán)辛基等；或多個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)，諸如金剛烷基等。
“環(huán)烯基”是指具有單環(huán)或多個(gè)稠合環(huán)和至少一個(gè)內(nèi)部不飽和點(diǎn)的4-8個(gè)碳原子的環(huán)烯基，它可任選地用1-3個(gè)烷基取代。合適的環(huán)烯基的實(shí)例包括例如環(huán)丁-2-烯基、環(huán)戊-3-烯基、環(huán)辛-3-烯基等。
“鹵代”或“鹵素”是指氟、氯、溴和碘，最好是氯或者是溴。
“雜芳基”是指具有2-10個(gè)碳原子和環(huán)內(nèi)具有1-4個(gè)選自氧、氮和硫的雜原子的一價(jià)芳族基團(tuán)。
除非對(duì)雜芳基取代基定義另外限制，否則這類雜芳基可任選地用選自以下的1-3個(gè)取代基取代羥基、?；?、酰氧基、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、鏈烯基、取代的鏈烯基、鏈炔基、取代的鏈炔基、氨基、氨酰基、酰氨基、氨基酰氧基、氧酰氨基、芳基、芳氧基、羧基、羧烷基、氰基、鹵素、硝基、雜芳基、三鹵甲基、硫代烷氧基、取代硫代烷氧基、一-和二-烷氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-環(huán)烷氨基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環(huán)氨基、以及具有選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)的不同取代基的不對(duì)稱二取代胺等。這類雜芳基可以具有單環(huán)(例如吡啶基或呋喃基)或多個(gè)稠環(huán)(例如中氮茚基或苯并噻吩基)。優(yōu)選的雜芳基包括吡啶基、吡咯基和呋喃基。當(dāng)為如此取代時(shí)，這樣的雜芳基有時(shí)稱為“取代的雜芳基”。
“雜環(huán)”或“雜環(huán)的”是指具有單環(huán)或多個(gè)稠環(huán)、具有1-12個(gè)碳原子和環(huán)內(nèi)具有1-4個(gè)選自氮、硫或氧的雜原子的單價(jià)(即一個(gè)連接點(diǎn))飽和或不飽和基團(tuán)。
除非對(duì)雜環(huán)取代基定義另外限制，否則這類雜環(huán)基可任選地用1-3個(gè)選自以下的取代基取代羥基、酰基、酰氧基、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、鏈烯基、取代的鏈烯基、鏈炔基、取代的鏈炔基、氨基、氨?；?、酰氨基、氨基酰氧基、氧酰氨基、芳基、芳氧基、羧基、羧烷基、氰基、鹵素、硝基、雜芳基、三鹵甲基、硫代烷氧基、取代硫代烷氧基、一-和二-烷氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環(huán)氨基、以及具有選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)的不同取代基的不對(duì)稱二取代胺等。這類雜環(huán)基可以具有單環(huán)或多個(gè)稠環(huán)。優(yōu)選的雜環(huán)包括嗎啉代、哌啶基等。
雜環(huán)基和雜芳基的實(shí)例包括但不限于呋喃、噻吩、噻唑、噁唑、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、中氮茚、異吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、異喹啉、喹啉、2,3-二氮雜萘、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、異噻唑、吩嗪、異噁唑、吩噁嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、哌啶、哌嗪、二氫吲哚、鄰苯二甲酰亞胺、1,2,3,4-四氫異喹啉、4,5,6,7-四氫苯并[b]噻吩、噻唑、噻唑烷、噻吩、苯并[b]噻吩、嗎啉代、哌啶基、吡咯烷、四氫呋喃基等。
“硫羥基”是指基團(tuán)-SH。
“硫代烷氧基”是指基團(tuán)-S-烷基。
“取代的硫代烷氧基”是指基團(tuán)-S-取代的烷基。
“硫代芳氧基”是指基團(tuán)芳基-S-，其中所述芳基如上定義，包括如上定義的可任選取代的芳基。
“硫代雜芳氧基”是指基團(tuán)雜芳基-S-，其中所述雜芳基如上定義，包括如上定義的可任選取代的芳基。
在式Ⅰ化合物中，Rb和Rc可以與苯環(huán)稠合形成雜芳基或雜環(huán)。以該方式稠合時(shí)得到具有下式結(jié)構(gòu)的稠合的雙環(huán)
其中Rb’與上述定義相同，A為稠合的雜芳基或雜環(huán)基，這些術(shù)語定義如上，其中苯環(huán)的兩個(gè)原子包括在存在于雜芳基或雜環(huán)基的總原子數(shù)內(nèi)。此類稠合的環(huán)系的實(shí)例包括如吲哚-5-基、吲哚-6-基、硫代萘次甲-5-基、硫代萘次甲-6-基、異硫代萘次甲-5-基、異硫代萘次甲-6-基、indoxazin-5-基、indoxazin-6-基、苯并噁唑-5-基、苯并噁唑-6-基、anthranil-5-基、anthranil-6-基、喹啉-6-基、喹啉-7-基、異喹啉-6-基、異喹啉-7-基、噌啉-6-基、噌啉-7-基、喹唑啉-6-基、喹唑啉-7-基、苯并呋喃-5-基、苯并呋喃-6-基、異苯并呋喃-5-基、異苯并呋喃-6-基等。
“藥學(xué)上可接受的鹽”是指式Ⅰ化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，所述鹽衍生自種種本領(lǐng)域熟知的有機(jī)和無機(jī)相反離子，僅僅作為實(shí)例包括鈉、鉀、鈣、鎂、銨、四烷基銨等；而當(dāng)該分子含有一個(gè)堿性官能度時(shí)，包括有機(jī)或無機(jī)酸的鹽，諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、草酸鹽等。
化合物的制備通過幾種多樣化的合成途徑，而相對(duì)于化合物制備的容易性、原料的市場(chǎng)可得性等選定具體途徑，容易地制備上述的式Ⅰ化合物。
在一個(gè)合成方法中，首先向分子中引入氨基酸NH2CH(R2)COOH或其酯的R1基團(tuán)。此后，使R1NHCH(R2)COOH或其酯與胺NH2CH(R3)C(O)Y偶合，從而得到其中X為-C(O)Y的式Ⅰ化合物。
同樣，對(duì)-C(O)Y進(jìn)行還原得到-CH2OH等。
向氨基酸NH2CH(R2)COOH或其酯引入R1基團(tuán)可以通過數(shù)種途徑完成。例如，使鹵代乙酸與伯胺偶合可以形成如下面反應(yīng)(1)所示的氨基酸
其中R1和R2如上定義，而X優(yōu)選為鹵代基團(tuán)，如氯代或溴代?；蛘呖梢允褂貌皇躯u代的離去基團(tuán)，如三氟甲磺酸酯、甲磺酸酯、對(duì)甲苯磺酸酯等。另外，在該反應(yīng)中可以使用1的適當(dāng)?shù)孽ァ?br> 反應(yīng)(1)只涉及在提供氨基酸3的條件下，將合適的鹵代乙酸衍生物1與伯芳基/雜芳基胺2偶合。該反應(yīng)由如Yates等10所述，可以通過將約化學(xué)計(jì)算量的鹵代乙酸1與伯芳基/雜芳基胺2在適當(dāng)?shù)亩栊匀軇┤缢?、二甲基亞?DMSO)中混合進(jìn)行。該反應(yīng)使用過量的堿如碳酸氫鈉、氫氧化鈉等以清除反應(yīng)中產(chǎn)生的酸。該反應(yīng)優(yōu)選在約25℃至約100℃進(jìn)行至反應(yīng)完全，一般為1至約24小時(shí)。該反應(yīng)在美國(guó)專利號(hào)3,598,859中有描述，在此引入作參考。反應(yīng)完成后，通過常規(guī)方法包括沉淀、層析、過濾等方法回收N-芳基/N-雜芳基氨基酸。
在反應(yīng)(1)中，各種試劑(鹵代乙酸1、伯芳基/雜芳基胺2和醇3)是本領(lǐng)域熟知的，并且每種試劑可由商業(yè)獲得。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，通過常規(guī)N-芳基化使R1基團(tuán)與丙氨酸酯(或其它適當(dāng)?shù)陌被狨?偶合。例如，將化學(xué)計(jì)算量或微微過量的氨基酸酯溶于適當(dāng)?shù)南♂寗┤鏒MSO中，與鹵代芳基化合物X-R1偶合，其中X為鹵代基團(tuán)，如氟、氯或溴，R1與上述定義相同。該反應(yīng)在過量的堿如氫氧化鈉存在下進(jìn)行，以便清除反應(yīng)中產(chǎn)生的酸。該反應(yīng)一般于15℃至約250℃進(jìn)行約1至24小時(shí)完成。反應(yīng)完成后，可以通過常規(guī)方法包括層析和過濾等回收N-芳基氨基酸酯。
在再一個(gè)實(shí)施方案中，可以用下面反應(yīng)(2)說明的方法還原氨化適當(dāng)?shù)?-氧代羧酸酯(如丙酮酸酯)可以制備酯化的式Ⅰ氨基酸
其中R1和R2與上述定義相同。
在反應(yīng)(2)中，將約化學(xué)計(jì)算量的2-氧代羧酸酯6和芳胺2在惰性稀釋劑如甲醇、乙醇等中混合，在得到胺(未示出)的條件下處理反應(yīng)溶液。然后在常規(guī)的條件下，用適當(dāng)?shù)倪€原劑如氰基硼氫化鈉、H2/鈀炭等還原形成的胺形成N-芳基氨基酸酯5。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，還原劑為H2/鈀炭，可以將其摻入到最初的反應(yīng)介質(zhì)中，這樣可以在一罐方法中在位進(jìn)行胺還原，得到N-芳基氨基酸酯5。
該反應(yīng)優(yōu)選在約20℃至約80℃、于1-10atm壓力下進(jìn)行至反應(yīng)完成，一般為1至約24小時(shí)。反應(yīng)完成后，可以通過常規(guī)方法包括層析、過濾等方法回收N-芳基氨基酸酯5。
隨后進(jìn)行酯5的水解得到相應(yīng)的羧酸衍生物。
制備N-芳基氨基酸的另一個(gè)實(shí)施方案包括用氨基酸的胺基團(tuán)對(duì)氟代苯進(jìn)行芳基親核取代。
然后在本領(lǐng)域熟知的常規(guī)條件下，使羧酸衍生物5與式NH2CH(R3)C(O)Y(其中R3和Y與上述定義相同)偶合。此偶合可以得到式Ⅰ化合物。隨后對(duì)其進(jìn)行修飾(如還原)得到另外的式Ⅰ化合物。
當(dāng)Y為酯基時(shí)，可以使用常規(guī)的酯轉(zhuǎn)移方法以制備具有不同的酯基的式Ⅰ化合物。本領(lǐng)域已知各種用來進(jìn)行酯轉(zhuǎn)移的技術(shù)，每種技術(shù)用衍生自相應(yīng)的醇或硫代醇的不同的酯基取代所述酯基團(tuán)，在某些情況下可以使用催化劑如異丙醇鈦(Ⅳ)以利于反應(yīng)的進(jìn)行。在一種技術(shù)中，首先在適當(dāng)?shù)南♂寗┤缂妆街杏脷浠c處理醇或硫代醇得到相應(yīng)的醇化鈉或硫代醇化鈉，然后將其進(jìn)行酯轉(zhuǎn)移。該技術(shù)的效能使其特別適于使用高沸點(diǎn)和/昂貴的醇。
在另一個(gè)酯轉(zhuǎn)移技術(shù)中，將待酯轉(zhuǎn)移的酯置于大量過量的進(jìn)行酯轉(zhuǎn)移的醇或硫代醇中。然后加入催化量的氫化鈉，在常規(guī)條件下該反應(yīng)快速進(jìn)行得到所需的酯轉(zhuǎn)移產(chǎn)物。因?yàn)樵摲桨感枰褂么罅窟^量的醇或硫代醇，因此當(dāng)所述醇比較便宜時(shí)該方法特別有用。
酯轉(zhuǎn)移提供了一個(gè)在上述式Ⅰ化合物上得到不同的酯取代基的多種方法。在所有這些情況下，用于進(jìn)行酯轉(zhuǎn)移的醇和硫代醇均是本領(lǐng)域熟知的，大多數(shù)可由商業(yè)獲得。
制備本發(fā)明酯的其它方法包括如首先將酯水解為游離酸、接著在堿如碳酸鉀存在下用鹵代烷基進(jìn)行O-烷基化。
制備式Ⅰ化合物的其它方法在下面實(shí)施例中提供。
其中X為-CR4R4Y’的化合物可以通過在肽偶合化學(xué)中熟知的標(biāo)準(zhǔn)的偶合條件下，使如氨基醇H2NCHR3CR4R4OH與R1NHCHR2C(O)OH偶合而容易地制備，該反應(yīng)使用熟知的偶合試劑如碳二亞胺并可以使用或不使用熟知的輔助劑如N-羥基琥珀酰亞胺、1-羥基苯并三唑等。如果需要，在Y’上可以使用保護(hù)基團(tuán)以在偶合中保護(hù)該基團(tuán)。當(dāng)Y’為氨基時(shí)特別需要適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基團(tuán)。
該反應(yīng)一般在惰性非質(zhì)子傳遞溶劑如二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿、乙腈、四氫呋喃中進(jìn)行。反應(yīng)完成后，可以選擇性去除Y’上的保護(hù)基團(tuán)得到所需化合物。
當(dāng)Y’為-OH或-SH時(shí)，用熟知的化學(xué)方法進(jìn)行這些基團(tuán)的合成后轉(zhuǎn)化以得到相應(yīng)的酯(即-OC(OR5)、二硫化物(即-SSR5)和-SSC(O)R5基團(tuán)。例如，酯合成反應(yīng)僅需要在適當(dāng)?shù)孽セ瘲l件下用適當(dāng)?shù)乃崛缫宜?R7=甲基)、酰鹵(如酰氯)或酸酐反應(yīng)。
當(dāng)一個(gè)R4基團(tuán)為氫時(shí)，對(duì)-CHR4OH基團(tuán)進(jìn)行合成后氧化得到酮衍生物。或者，通過使適當(dāng)?shù)陌被}酸鹽與氨基酸的末端羧基偶合可以制備此類酮化合物。
在這些合成方法中，原料(如丙氨酸)可能含有手性中心，因此當(dāng)使用外消旋的原料時(shí)，產(chǎn)生的產(chǎn)物為非對(duì)映體或R,S對(duì)映體的混合物。或者，可以使用原料的手性異構(gòu)體，并且如果使用的反應(yīng)方案不使該原料外消旋化，那么可以獲得手性產(chǎn)物。此類反應(yīng)方案可以包括手性中心在合成過程中轉(zhuǎn)化。
因此，除非另外說明，否則本發(fā)明的產(chǎn)物為非對(duì)映異構(gòu)體(如果存在兩個(gè)或多個(gè)手性中心)或R,S對(duì)映體(如果存在一個(gè)手性中心)的混合物。然而最好是，當(dāng)需要手性產(chǎn)物時(shí)，那么該手性產(chǎn)物相應(yīng)于L-氨基酸衍生物。或者，手性產(chǎn)物可以通過純化技術(shù)獲得，所述技術(shù)從R,S混合物中分離對(duì)映體，以提供一種或另一種立體異構(gòu)體。這類技術(shù)是本領(lǐng)域眾所周知的。
藥用制劑當(dāng)用作藥劑時(shí)，式Ⅰ化合物通常以藥用組合物的形式給予。這些化合物可以通過各種途徑給予，包括口服、直腸、經(jīng)皮、皮下、靜脈、肌內(nèi)和鼻內(nèi)途徑。這些化合物作為注射組合物和口服組合物均是有效的。這類化合物以制藥領(lǐng)域熟知的方式制備，并包含至少一種活性化合物。
本發(fā)明也包括藥用組合物，所述藥用組合物含有作為活性組分的一種或多種與藥學(xué)上可接受的載體結(jié)合的上述式Ⅰ化合物。在制備本發(fā)明的組合物中，通常將所述活性組分與一種賦形劑混合，用一種賦形劑稀釋或用膠囊、小藥囊、紙或其它容器形式的載體包裹。當(dāng)該賦形劑用作稀釋劑時(shí)，它可以是固體、半固體或液體材料，它可以用作該活性組分的溶媒、載體或介質(zhì)。因此，所述組合物可以為片劑、丸劑、粉劑、錠劑、小藥囊、扁囊劑、酏劑、懸浮劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑、氣溶膠(作為固體或在液體介質(zhì)中)、含有例如多至10％(重量)的活性化合物軟膏劑、軟和硬明膠膠囊劑、栓劑、無菌注射液和無菌包裝的粉劑。
在制劑制備中，在與其它組分混合之前可能需要研磨該活性化合物，以提供合適的顆粒大小。如果該活性化合物是基本上不溶的，則通常將其研磨成小于200目的顆粒大小。如果該活性化合物基本上是水溶性的，則通常通過研磨調(diào)節(jié)顆粒大小，以在制劑中提供基本均一的分布，例如大約40目。
合適賦形劑的某些實(shí)例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鈉、西黃蓍膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、無菌水、糖漿和甲基纖維素。所述制劑還可以包含潤(rùn)滑劑，諸如滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油；潤(rùn)濕劑；乳化劑和懸浮劑；防腐劑，諸如苯甲酸甲酯和羥基苯甲酸丙酯；甜味劑和添味劑。可以配制本發(fā)明化合物，以便在采用本領(lǐng)域已知的方法給予該患者后，提供該活性組分的速釋、緩釋或延釋。
所述組合物最好以單位劑型配制，每個(gè)劑量含有約5-約100mg、更常見為約10-約30mg的活性組分。術(shù)語“單位劑型”是指適合作為單一劑量用于人類受治療者和其它哺乳動(dòng)物的物理上分離的單位。每個(gè)單位含有計(jì)算產(chǎn)生所需治療效果的預(yù)定量的活性物質(zhì)和合適的藥用賦形劑。最好是，以不高于藥用組合物的大約20％(重量)使用以上式Ⅰ化合物，更優(yōu)選不高于大約15％(重量)，余量為藥用惰性載體。
該活性化合物在很寬的劑量范圍內(nèi)有效，通常以藥用有效量給予。然而，應(yīng)該理解，該化合物的實(shí)際給予量將由醫(yī)師根據(jù)包括以下的相關(guān)因素決定待治療的疾病、選擇的給藥途徑、實(shí)際給予的化合物、個(gè)體患者的年齡、體重和反應(yīng)、該患者癥狀的嚴(yán)重性等。
在制備諸如片劑的固體組合物時(shí)，將主要的活性組分與藥用賦形劑混合，形成含有本發(fā)明化合物的均一混合物的固體預(yù)配制組合物。當(dāng)稱這些預(yù)配制組合物是均一的時(shí)，意味著該活性組分均勻分散在該組合物中，使得該組合物可以容易地亞分為同等有效單位劑型，諸如片劑、丸劑和膠囊。該固體預(yù)配制物然后亞分為上述類型的單位劑型，含有例如0.1至大約500mg的本發(fā)明活性組分。
可以對(duì)本發(fā)明片劑或丸劑包衣，或者進(jìn)行混合，以提供獲得延長(zhǎng)作用優(yōu)點(diǎn)的劑型。例如，該片劑或丸劑可以包含一個(gè)內(nèi)部劑量和外部劑量組分，后者為前者上的包膜形式。這兩個(gè)組分可以由用作在胃中抗崩解的腸衣層分離，并使得內(nèi)部組分完整通過進(jìn)入十二指腸，或延緩釋放?？梢允褂枚喾N材料用于這類腸衣層或包衣，這類材料包括多種聚合酸和聚合酸的混合物，諸如蟲膠、鯨蠟醇和乙酸纖維素。
可以加入本發(fā)明的新組合物中用于口服或注射給藥的液體形式，包括水溶液、適當(dāng)矯味糖漿、水性或油性懸浮液和用諸如玉米油、棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油之類的食用油矯味的乳劑、以及酏劑和相似的藥用載體。
用于吸入或吹入的組合物包括在藥學(xué)上可接受的水性或無機(jī)溶劑、或其混合物中的溶液和懸浮液以及粉劑。液體或固體組合物可以含有上文所述的合適的藥學(xué)上可接受的賦形劑。最好是通過口服或鼻呼吸途徑給予所述組合物，以用于局部或全身性作用。在優(yōu)選的藥學(xué)上可接受的溶劑中的組合物可以利用惰性氣體進(jìn)行霧化。霧化溶液可以直接從霧化裝置中吸入，或可以將該霧化裝置連接至面罩(face masks tent)或間歇式正壓呼吸機(jī)。最好以適當(dāng)方式從釋放該制劑的裝置經(jīng)口或經(jīng)鼻給予溶液、懸浮液或散劑組合物。
以下制劑實(shí)施例說明本發(fā)明的藥用組合物。
制劑實(shí)施例1制備含有以下組分的硬明膠膠囊組分 量(mg/膠囊)活性組分 30.0淀粉 305.0硬脂酸鎂 5.0將以上組分混合，并以340mg的量填充到硬明膠膠囊中。
制劑實(shí)施例2采用以下組分制備片劑組分 量(mg/片)活性組分 25.0微晶纖維素200.0膠體二氧化硅 10.0硬脂酸5.0將以上組分混合，并壓制形成片劑，每片重240mg。
制劑實(shí)施例3制備含有以下組分的干粉吸入制劑組分重量％活性組分 5乳糖 95
將該活性組分與乳糖混合，并將混合物加入干粉吸入用具中。
制劑實(shí)施例4如下制備片劑，每片含有30mg活性組分組分量(mg/片)活性組分 30.0mg淀粉 45.0mg微晶纖維素35.0mg聚乙烯吡咯烷酮 4.0mg(作為無菌水中的10％溶液)羧甲基淀粉鈉 4.5mg硬脂酸鎂 0.5mg滑石粉1.0mg總計(jì) 120mg使活性組分、淀粉和纖維素通過第20目美國(guó)篩并充分混合。將聚乙烯吡咯烷酮溶液與產(chǎn)生粉劑混合，然后將其通過第16目美國(guó)篩。如此產(chǎn)生的顆粒于50℃-60℃干燥，并通過第16目美國(guó)篩。然后，將預(yù)先通過第30目美國(guó)篩的羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石粉加至顆粒中，混合后在壓片機(jī)壓制，產(chǎn)生每片重120 mg的片劑。
制劑實(shí)施例5如下制備每片含有40 mg藥物的膠囊組分量(mg/膠囊)活性組分 40.0mg
淀粉 109.0mg硬脂酸鎂 1.0mg總計(jì) 150.0mg將活性組分、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過第20目美國(guó)篩，并以150mg的量填充到硬明膠膠囊中。
制劑實(shí)施例6如下制備每個(gè)含有25mg活性組分的栓劑組分 量活性組分 25mg飽和脂肪酸甘油酯至 2,000mg使活性組分通過第60目美國(guó)篩，懸浮于預(yù)先用最小的所需熱量熔化的飽和脂肪酸甘油酯中。然后將混合物注入2.0g標(biāo)示量的栓劑模中，讓其冷卻。
制劑實(shí)施例7如下制備每5.0ml含有50mg藥物的懸浮劑組分 量活性組分 50.0mg黃原膠 4.0mg羧甲基纖維素鈉(11％)微晶纖維素(89％) 50.0mg蔗糖 1.75g苯甲酸鈉 10.0mg矯味劑和著色劑 適量純凈水至 5.0ml
將活性組分、蔗糖和黃原膠混合，通過第10目美國(guó)篩，然后與預(yù)先制備的水中的微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉溶液混合。苯甲酸鈉、矯味劑和著色劑用一些水稀釋，邊攪拌邊加入。然后加入足夠的水，產(chǎn)生所需體積。
制劑實(shí)施例8組分 量(mg/膠囊)活性組分 15.0mg淀粉 407.0mg硬脂酸鎂 3.0mg總計(jì) 425.0mg將活性組分、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過第20目美國(guó)篩，并以425.0mg的量填充到硬明膠膠囊中。
制劑實(shí)施例9如下制備皮下用制劑組分 量活性組分 5.0mg玉米油 1ml制劑實(shí)施例10如下制備局部用制劑組分 量活性組分 1-10g乳化蠟 30g液體石蠟 20g
白軟石蠟 至100g將白軟石蠟加熱直至熔化。加入液體石蠟和乳化蠟并攪拌直至溶解。加入活性組分并繼續(xù)攪拌，直至分散。然后冷卻混合物直至成為固體。
用于本發(fā)明方法中的另一優(yōu)選的制劑采用經(jīng)皮傳遞裝置(“貼劑”)。可以用這類透皮貼劑來以控制量連續(xù)或不連續(xù)輸注提供本發(fā)明化合物。傳遞藥物的透皮貼劑的構(gòu)建和使用是本領(lǐng)域眾所周知的。參見例如1991年6月11日頒發(fā)的美國(guó)專利5,023,252，該專利通過引用結(jié)合到本文中?？梢詷?gòu)建這類貼劑用于連續(xù)、脈沖或按要求釋放藥物。
通常需要或必需直接或者間接地將該藥用組合物引入大腦。直接技術(shù)通常涉及將藥物傳遞插管置于宿主腦室，以繞過血腦屏障。在美國(guó)專利5,011,472中描述了用來將生物學(xué)因子輸送到個(gè)體特定解剖區(qū)域的一個(gè)這種可植入傳遞系統(tǒng)，該專利通過引用結(jié)合到本文中。
一般優(yōu)選使用的間接技術(shù)涉及配制所述組合物，即通過將親水性藥物轉(zhuǎn)化為脂溶性藥物，以提供藥物潛伏化。一般通過保護(hù)該藥物上存在的羥基、羰基、硫酸酯和伯胺基團(tuán)，以賦予該藥物更強(qiáng)的脂溶性，并更易通過血腦屏障轉(zhuǎn)運(yùn)，而達(dá)到潛伏化?；蛘?，可以通過動(dòng)脈內(nèi)輸注可以瞬時(shí)打開血腦屏障的高滲溶液，以增強(qiáng)親水藥物的釋放。
可以在Remington’s pharmaceutical Sciences,Mace PublishingCompany,Philadelphia,PA，第17版(1985)中發(fā)現(xiàn)其它適用于本發(fā)明的制劑。用途本發(fā)明的化合物和藥用組合物可用來抑制β-淀粉樣多肽的釋放和/或其合成，并因此在治療包括人類的哺乳動(dòng)物阿爾茨海默氏病中具有實(shí)用性。
如上所述，本文所述的化合物適用于種種上述藥物傳遞系統(tǒng)。另外，為了增加所給予化合物體內(nèi)的半衰期，可以將所述化合物制為膠囊、引入脂質(zhì)體腔中、制備為膠體，或可以采用其它常規(guī)技術(shù)以延長(zhǎng)所述化合物的血漿半衰期?？衫梅N種方法，制備脂質(zhì)體，如在例如Szoka等的美國(guó)專利4,235,871、4,501,728和4,837,028中描述的，這些專利均通過引用結(jié)合到本文中。
給予患者的化合物的量隨以下因素而變化待給予的化合物、諸如預(yù)防或治療的給藥目的、患者的狀態(tài)、給藥方式等。在治療應(yīng)用中，將組合物給予已經(jīng)患有AD的患者，給予量足以至少部分抑制該疾病及其并發(fā)癥癥狀的進(jìn)一步發(fā)作。適于完成這一目的的量定義為“治療有效劑量”。對(duì)于該用途有效的量將取決于主治醫(yī)師根據(jù)一些因素的判斷，所述因素包括諸如該患者AD的程度或嚴(yán)重性、該患者的年齡、體重和一般狀況等。當(dāng)作為治療劑時(shí)，最好以大約0.1-約500mg/kg/天的劑量范圍給予本文所述化合物。
在預(yù)防性應(yīng)用中，將化合物給予有發(fā)展為AD(例如由遺傳篩選或家族特性確定)風(fēng)險(xiǎn)的患者，其給予量足以抑制該疾病癥狀的發(fā)作。適于完成該目的的量定義為“預(yù)防有效劑量”。對(duì)于該用途的有效量將取決于主治醫(yī)師根據(jù)一些因素的判斷，所述因素諸如該患者年齡、體重和一般狀況等。作為預(yù)防藥物使用時(shí)，最好以大約0.1-約500mg/kg/天的劑量范圍給予本文所述化合物。
如上所述，給予患者的化合物為上述藥用組合物形式。這些組合物可以通過常規(guī)滅菌技術(shù)滅菌，或可以過濾除菌。當(dāng)使用水溶液時(shí)，可以包裝使用，也可以凍干使用，凍干制劑在給藥前與無菌水性溶媒混合。所述化合物制劑的pH通常為3-11，更優(yōu)選為5-9，最優(yōu)選為7-8。應(yīng)該理解，使用某些上述賦形劑、載體或穩(wěn)定劑將導(dǎo)致形成藥用鹽。
提供以下合成實(shí)施例和生物學(xué)實(shí)施例以說明本發(fā)明，這些實(shí)施例不應(yīng)解釋為以任何方式限制本發(fā)明的范圍。除非另外陳述，否則所有溫度均為攝氏度。
實(shí)施例在以下實(shí)施例中，以下縮寫具有以下含義。如果一個(gè)縮寫沒有定義，則它具有普遍接受的含義。
BOC =叔丁氧基羰基bd=寬雙峰bs=寬單峰Cbz =羰基芐氧基cc=立方厘米CDI =1,1’-羰基二咪唑d =雙峰dd=雙雙峰DMF =二甲基甲酰胺DMSO =二甲基亞砜EDC =1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽EDTA =乙二胺四乙酸eq. =當(dāng)量ether =乙醚g =克L =升m =多峰M =摩爾濃度max =最大mg=毫克min =分鐘
mL =毫升mM =毫摩爾濃度mmol =毫摩爾N=正常ng =納克nm =納米OD =光密度pg =皮克pM =皮摩爾濃度psi =磅/平方英寸q=四峰quint=五重峰rpm =轉(zhuǎn)/分鐘rt =室溫s=單峰sept =七峰t=三峰THF =四氫呋喃tlc =薄層層析μg =微克μL =微升UV =紫外w/v =重量∶體積另外，術(shù)語“Aldrich”是指用于以下方法中的化合物或試劑購(gòu)自Aldrich Chemical Company,Inc.,1001 West Saint Paul Avenue,Milwaukee,WI 53233 USA；術(shù)語“Bachem”是指該化合物或試劑購(gòu)自Bachem Biosciences Inc.,3700 Horizon Drive,Renaissance atGulph Mills,King of Prussia,PA 19406 USA；術(shù)語“Fluka”是指所述化合物或試劑購(gòu)自Fluka Chemical Corp.,980 South 2nd Street,Ronkonkoma NY 11779 USA；術(shù)語“Lancaster”是指該化合物或試劑購(gòu)自Lancaster Synmesis Inc.,P.O.Box 100 Windham,NH 03087USA；術(shù)語“Sigma”是指該化合物或試劑購(gòu)自Sigma,P.O.Box14508,St Louis MO 63178 USA；術(shù)語“Sennchem”是指該化合物或試劑購(gòu)自Senn Chemicals AG,P.O.Box 267,CH-9157 Dielsdorf,Switzerland。
在以上實(shí)施例中，所有的溫度均為攝氏度(除非另外陳述)，通過以下通用方法制備指定的混合物。
通用方法A還原胺化向在氫化燒瓶中的芳胺的乙醇溶液中加入1當(dāng)量的2-氧代羧酸酯(如丙酮酸酯)，接著加入10％鈀炭(芳胺重量的25％)。于20psi氫氣壓力下，將該反應(yīng)物在Parr震動(dòng)器上氫化至tlc檢測(cè)反應(yīng)完成(30分鐘至16小時(shí))。然后將該反應(yīng)混合物通過硅藻土545(購(gòu)自AldrichChemical Company,Inc.)墊過濾，并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸發(fā)溶劑。將粗品產(chǎn)物通過層析進(jìn)一步純化。
通用方法B丙氨酸的H-雜芳基化于室溫下，將1.1當(dāng)量的L-丙氨酸和2當(dāng)量的氫氧化鈉的DMSO溶液攪拌1小時(shí)，然后加入1當(dāng)量的2-氯代苯并三唑。將該混合物加熱至100℃4小時(shí)，然后冷卻至室溫并傾至冰中。將產(chǎn)生的水溶液的pH調(diào)至約2，過濾取出沉淀的固體。將該固體溶于1N氫氧化鈉中，通過硅藻土545墊過濾。將濾液的pH調(diào)至約2，過濾取出白色沉淀，用水洗滌得到產(chǎn)物。
通用方法C酯水解為游離酸通過常規(guī)方法進(jìn)行酯水解為游離酸的反應(yīng)。下面為兩個(gè)常規(guī)脫酯化方法的實(shí)施例。
向羧酸酯化合物(通過如通用方法A的還原胺化制備得到的N-芳基氨基酸酯)的1∶1甲醇/水的混合液中加入2-5當(dāng)量的碳酸鉀。將該混合物加熱至50℃0.5-1.5小時(shí)至tlc顯示反應(yīng)完成。將該反應(yīng)物冷卻至室溫，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除甲醇。將剩余的水溶液的pH調(diào)至約2，加入乙酸乙酯以萃取產(chǎn)物。然后用飽和的氯化鈉洗滌有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除該溶液的溶劑得到產(chǎn)物。
將上述氨基酸酯溶于二氧六環(huán)/水(4∶1)中，向其中加入溶于水中的氫氧化鋰(約2當(dāng)量)，使加入后總?cè)軇榧s2∶1的二氧六環(huán)∶水。攪拌該反應(yīng)混合物至反應(yīng)完成，減壓去除二氧六環(huán)。用乙酸乙酯稀釋殘留物，分離各層，將水層堿化至pH為2。用乙酸乙酯回萃取水層，經(jīng)硫酸鈉干燥合并的有機(jī)物，過濾后減壓去除溶劑。殘留物經(jīng)常規(guī)方法純化(如重結(jié)晶)。
下面說明后一個(gè)實(shí)施例。將3-硝基苯基乙?；彼岬募柞?.27g(0.0348mol)溶于60ml二氧六環(huán)和15ml水中，加入溶于15ml水中的氫氧化鋰(3.06g,0.0731mol)。攪拌4小時(shí)后，減壓去除二氧六環(huán)，用乙酸乙酯稀釋殘留物，分離各層，酸化水層至pH為2。用乙酸乙酯(4×100ml)回萃取水層，經(jīng)硫酸鈉干燥合并的有機(jī)物，過濾后減壓去除溶劑。使殘留物從乙酸乙酯/異辛烷中重結(jié)晶，得到7.5g(85％)。C11H12N2O5計(jì)算值C=52.38,H=4.80,N=11.11。分析實(shí)測(cè)值，C=52.54,H=4.85,N=11.08。[α]23=-29.9,589nm。
通用方法D
第一種EDC偶合方法于0℃，向所需酸和氨基酯/酰胺的二氯甲烷的1∶1的混合液中加入1.5當(dāng)量的三乙胺，接著加入2.0當(dāng)量的羥基苯并三唑一水合物，然后加入1.25當(dāng)量的乙基-3-(3-二甲基氨基)-丙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)。于室溫下將該反應(yīng)物攪拌過夜，然后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用水、飽和的碳酸氫鈉水溶液、1N鹽酸和飽和的氯化鈉水溶液洗滌，然后經(jīng)硫酸鎂干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸發(fā)去除該溶液的溶劑得到粗品產(chǎn)物。
通用方法E第二種EDC偶合方法將所述羧酸衍生物溶于二氯甲烷中。順序加入氨基酸酯/酰胺(1eq.)、N-甲基嗎啉(5eq.)和羥基苯并三唑一水合物(1.2eq.)。在圓底燒瓶底部放置冷卻浴使該溶液至約0℃。此時(shí)，加入1.2eq.的1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)。將該溶液攪拌過夜，在N2下達(dá)到室溫。通過用飽和Na2CO3水溶液、0.1M檸檬酸和鹽水洗滌有機(jī)相來處理反應(yīng)混合物，然后經(jīng)Na2SO4干燥。然后除去溶劑得到粗品產(chǎn)物。通過在合適溶劑中的快速層析獲得純品產(chǎn)物。
通用方法FBOC和叔丁酯的去除方法將BOC或叔丁酯化合物加至二氯甲烷和三氟乙酸的1∶1的混合液中，并攪拌至tlc顯示轉(zhuǎn)化完成，一般為2小時(shí)。然后將該溶液蒸發(fā)至干，將殘留物溶于乙酸乙酯中。若為BOC保護(hù)的化合物，則用稀鹽酸洗滌該溶液。將水相的pH調(diào)至堿性，然后用乙酸乙酯萃取。若為叔丁酯化合物，則用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌該溶液。然后將水相的pH調(diào)至2，然后用乙酸乙酯萃取。然后不論在何種情況下均用飽和的氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除該溶液的溶劑得到產(chǎn)物。
通用方法GN-烷基化向3-氨基喹啉的二氯甲烷溶液中加入1.1當(dāng)量的三乙胺，接著加入對(duì)硝基苯磺酰氯(nosyl)的二氯甲烷溶液。于室溫下將該反應(yīng)物攪拌5小時(shí)，然后通過過濾分離二磺?；陌被?，用乙酸乙酯洗滌。接著將該物質(zhì)加至二氧六環(huán)和1N氫氧化鈉的1∶1的混合液中，將該溶液加熱至60℃，此時(shí)所有的固體均已溶解。將該反應(yīng)物冷卻至室溫，然后將pH調(diào)至約4。通過過濾分離沉淀的一磺?；陌被?，用水洗滌。然后將該化合物的THF溶液加至-78℃的氫化鈉的THF懸浮液中，然后加入2-溴代丙酸乙酯。將該反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝兀缓蠡亓?天。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除該溶液中的溶劑，層析獲得烷基化磺?；陌被?。然后將該產(chǎn)物溶于DMF中，加入3當(dāng)量的碳酸鉀，隨后加入1.2當(dāng)量的苯硫酚。于室溫下將該反應(yīng)物攪拌過夜。然后用水和乙醚驟冷該反應(yīng)物，用飽和的碳酸氫鈉水溶液和飽和的氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)相，然后經(jīng)硫酸鎂干燥。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸發(fā)去除該溶液的溶劑得到粗品產(chǎn)物，通過層析將其進(jìn)一步純化。
通用方法H酯/酰胺交換向3當(dāng)量的所需胺的1,2-二氯乙烷的溶液中加入5.2當(dāng)量的三甲基鋁，其中所述加入通過注射器在溶液表面之下進(jìn)行。于室溫下攪拌30分鐘后，加入溶于1,2-二氯乙烷的所需的酯溶液?；亓髟摲磻?yīng)物至tlc顯示轉(zhuǎn)化完成，一般為3小時(shí)。然后將該反應(yīng)物冷卻至0℃，用10％鹽酸(注由于在加入過程中會(huì)產(chǎn)生泡沫，所以該酸應(yīng)緩慢加入)驟冷。對(duì)于不溶于含水酸的產(chǎn)物，則將所述混合物轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，分離各層。用乙酸乙酯洗滌水相，用飽和的氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥，減壓濃縮得到粗品產(chǎn)物。
對(duì)于可以溶于酸的水溶液的產(chǎn)物，則在反應(yīng)物驟冷后，在減壓下將反應(yīng)物的體積減小至約為原體積的1/3。向產(chǎn)生的溶液中加入20％酒石酸鉀鈉(Rochelle氏鹽)水溶液和乙酸乙酯。將該溶液的pH調(diào)至約13，將鋁鹽溶于水溶液中。分離有機(jī)相，用乙酸乙酯萃取水相。用飽和的氯化鈉水溶液洗滌合并的有機(jī)溶液，經(jīng)硫酸鎂干燥，減壓濃縮得到粗品產(chǎn)物。
通用方法I酯還原為醇向0℃的原料酯的無水THF溶液中加入1.0當(dāng)量的硼氫化鋰的THF溶液。于室溫下將該反應(yīng)物攪拌過夜，然后用水驟冷。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除THF，加入乙酸乙酯。分離各相。用飽和的氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥，減壓濃縮得到產(chǎn)物。
通用方法J三氟甲磺酸酯的置換向0℃的R-(+)-乳酸異丁酯的二氯甲烷溶液中加入1.1當(dāng)量的三氟甲磺酸酐。于室溫下攪拌20分鐘后，加入1.1當(dāng)量2,6-二甲基吡啶，繼續(xù)攪拌10分鐘。然后于0℃將該溶液中轉(zhuǎn)移至含有1當(dāng)量芳胺和1當(dāng)量二異丙基乙胺的二氯甲烷或硝基甲烷的燒瓶中。將該反應(yīng)物保持于室溫過夜，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除溶劑。將殘留物溶于乙酸乙酯中，用5％檸檬酸和飽和的氯化鈉水溶液依次洗滌，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除該溶液的溶劑得到粗品產(chǎn)物，然后經(jīng)層析將其進(jìn)一步純化。
通用方法K
由氨基酸形成甲酯將氨基酸(氨基酸或氨基酸鹽酸鹽)懸浮于甲醇中，并冷至0℃。向該溶液中通入HCl氣體5分鐘。使反應(yīng)物溫至室溫，然后攪拌4小時(shí)。隨后減壓除去溶劑，得到所需的氨基酸甲酯鹽酸鹽。通常不用進(jìn)一步純化而使用該產(chǎn)物。
實(shí)施例AN-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸的合成根據(jù)美國(guó)專利號(hào)3,598,859(在此引入其全部公開作參考)所述的方法，制備N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸。具體地講，向3,4-二氯苯胺(1當(dāng)量，Aldrich)的異丙醇(每摩爾3,4-二氯苯胺約500ml)溶液中加入水(每ml異丙醇約0.06ml)和2-氯丙酸(2當(dāng)量，Aldrich)。將該混合物溫?zé)嶂?0℃，然后連續(xù)分次加入碳酸氫鈉(0.25當(dāng)量)，隨后回流4-5天。冷卻后，將該混合物傾至水中，過濾去除未反應(yīng)的3,4-二氯苯胺。用濃鹽酸將濾液酸化至pH為3-4，過濾產(chǎn)生的沉淀，洗滌并干燥得到目標(biāo)化合物，m.p.=148-149℃。
或者，根據(jù)上述通用方法，用3,4-二氯苯胺(Aldrich)和丙酮酸乙酯(Aldrich)，制備為油狀物的N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸乙酯。用硅膠(Rf=0.4，用25％乙酸乙酯/己烷展開)監(jiān)測(cè)該反應(yīng)，經(jīng)制備性板層析純化(硅膠，用25％乙酸乙酯/己烷作為展開劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.2(d,1 H)；6.7(d,1H)；6.4(dd,1H)；4.30(bs,1H)；4.2(q,2H)；4.1(q,1H)；1.5(d,3H)；1.3(t,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175；146.7；133；131；121；114.9；112.6；72.0；52.4；28.3；19.5。
C11H13Cl2NO2(MW=262.14；質(zhì)譜儀(MH+)263。
通過如通用方法C水解該酯得到目標(biāo)化合物。
實(shí)施例BN-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸的合成根據(jù)美國(guó)專利號(hào)3,598,859(或上述實(shí)施例A)的方法，用3,5-二氯苯胺(Aldrich)和2-氯丙酸(Aldrich)制備N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸。
實(shí)施例CN-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨酸的合成根據(jù)美國(guó)專利號(hào)3,598,859(或上述實(shí)施例A)的方法，用3,5-二氟苯胺(Aldrich)和2-氯丙酸(Aldrich)制備N-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨酸。
實(shí)施例DL-纈氨酸N,N-二甲基酰胺的合成向2.51g(10mmol)的Cbz-L-纈氨酸(Bachem)的20ml DMF攪拌溶液中加入1.46g(9mmol)CDI，將該混合物攪拌50分鐘。向該混合物中加入6ml(12mmol)二甲基胺(Aldrich)的5ml THF溶液，將該反應(yīng)混合物攪拌18小時(shí)。將混合物溶于100ml乙酸乙酯中，用10％鹽酸(3×40ml)、10ml鹽水和20％碳酸鉀(2×50ml)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。過濾該混合物并濃縮，得到Cbz-L-纈氨酸N,N-二甲基酰胺，在標(biāo)準(zhǔn)條件下，用10％Pd/C作為催化劑將其氫化，以去除Cbz基團(tuán)并得到為油狀物的目標(biāo)化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=3.47(d,J=5.4Hz,1H),3.03(s,3H),2.96(s,3H),1.83(m,1H),1.60(s,2H),0.95(d,J=6.8Hz,3H),0.89(d,J=6.8Hz,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175.1,56.2,37.0,35.7,32.0,19.9,16.8。
實(shí)施例EL-纈氨酸N-甲基酰胺的合成按照上述實(shí)施例D所述的方法，但是用甲胺代替二甲基胺制備目標(biāo)化合物。該目標(biāo)化合物為油狀物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.27(bs,1H),3.20(d,J=3.8Hz,1H),2.79(d,J=5.0Hz,3H),2.27(m,1H),1.40(bs,2H),0.96(d,J=7.1Hz,3H),0.79(d,J=6.8Hz,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175.0,60.1,30.7,25.6,19.7,15.9。
實(shí)施例FBOC-正亮氨酰胺的合成于0℃，向3.47g(15mmol)BOC-正亮氨酸(Bachem)、3.44g(22.5mmol)1-羥基苯并三唑一水合物和50ml二氯甲烷的攪拌混合物中加入3.45g(1.2mmol)EDC。于0℃將產(chǎn)生的混合物攪拌1小時(shí)，然后向該混合物中通入氨氣10分鐘。使冷卻浴溫?zé)嶂潦覝兀瑢⒃摶旌衔飻嚢?8小時(shí)。將混合物蒸發(fā)至干，用20％碳酸鈉研磨。過濾收集產(chǎn)生的固體，用水洗滌得到2.69g(11.7mmol,78％)目標(biāo)化合物。
實(shí)施例GN-[3,5-二(三氟甲基)苯基]-L-丙氨酸的合成步驟A根據(jù)以上通用方法J，采用3,5-二(三氟甲基)苯胺(Aldrich)和R-(+)-乳酸異丁酯(Aldrich)、N-[3,5-二(三氟甲基)苯基]-L-丙氨酸異丁酯制備目標(biāo)化合物，為油狀物。通過tlc在硅膠(Rf=0.38,10％乙酸乙酯/己烷展開)上監(jiān)測(cè)反應(yīng)。經(jīng)制備性板薄層層析純化，用10％乙酸乙酯/己烷作為展開劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.13(s,1H),6.91(s,2H),4.97(d,J=8.24Hz,1H),4.18(m,1H),3.93(d,J=6.59Hz,2H),1.93(七峰，J=6.71Hz,1H),1.49(d,J=7.02Hz,3H),0.89(d,J=6.59Hz,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.4,147.9,133.6,133.2,132.7,132.3,129.4,125.8,122.2,1 1 8.6,112.81,112.76,111.42,111.37,111.32,111.27,111.22,72.2,52.0,32.1,28.24,28.17,23.2,19.5,19.3,19.2,18.9,14.6。
C15H17F6NO2(MW=357.30)；質(zhì)譜MH+358。
步驟B然后根據(jù)通用方法C，在THF中用氫氧化鋰水解N-[3,5-二(三氟甲基)苯基-L-丙氨酸異丁酯。
實(shí)施例HN-(3,5-二甲氧基苯基)-D,L-丙氨酸的合成根據(jù)美國(guó)專利號(hào)3,598,859(或上述實(shí)施例A)的方法，用3,5-二甲氧基苯胺(Aldrich)和2-氯丙酸(Aldrich)制備目標(biāo)化合物。
實(shí)施例IN-(3,4-二氯苯基)甘氨酸的合成根據(jù)美國(guó)專利號(hào)3,598,859的方法，用3,4-二氯苯胺(Aldrich)和2-氯乙酸(Aldrich)制備N-(3,4-二氯苯基)甘氨酸。
實(shí)施例JN-(3,5-二氯苯基)-D,L-苯基甘氨酸的合成將3,5-二氯苯胺(leq,Aldrich)和α-溴代苯基乙酸甲酯(leq,Aldrich)在乙醇中與N-甲基嗎啉(Aldrich)回流3天。經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)處理后，使殘留物從乙酸乙酯/己烷/乙醚/水中重結(jié)晶，得到N-(3,5-二氯苯基)-D,L-苯基甘氨酸甲酯。然后在甲醇中用1M氫氧化鈉/水水解該甲酯得到目標(biāo)化合物。
實(shí)施例1N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；?L-纈氨酸甲酯的合成按照以上通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，采用L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備目標(biāo)化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.20(m,1H),6.92-7.03(m,1H),6.69(m,1H),6.44(m,1H),4.50(m,1H),4.19(m,1H),3.78(m,1H),3.71(s,1.5H),3.65(s,1.5H),2.12(m,1H),1.50(d,J=7.0Hz,3H),0.80-0.92(m,4.5H),0.71(d,J=6.8Hz,1.5H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.4,173.0,172.2,171.8,146.0,145.8,132.9,132.8,130.7,130.6,121.7,115.1,114.8,113.5,113.1,56.9,56.6,55.1,54.8,52.2,31.1,31.0,30.9,19.6,19.4,17.7,17.4。
實(shí)施例2N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-纈氨酸N-異丁酰胺的合成按照以上通用方法H，采用N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-L-纈氨酸甲酯(得自上述實(shí)施例1)和異丁胺(Aldrich)，制備為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.3,10％甲醇/二氯甲烷作為展開劑)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.2(d,1H),7.0(m,1H),6.7(m,1H),6.4(m,1H),4.6(m,1H),4.1(m,1H),3.8(m,3H),3.6(s,3H),1.9(m,2H),1.4(d,3H),1.1(m,6H),0.9(m,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.8,173.4,172.9,146.6,133.6,133.4,131.3,122.5,122.4,115.8,113.8,56.9,55.7,38.2,25.6,20,16,12.1。
C18H27N3O2Cl2(MW=388.3)，質(zhì)譜(MH+)389。
實(shí)施例3N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-蘇氨酸甲酯的合成按照以上通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，采用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)和L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，制備為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)硅膠層析純化反應(yīng)產(chǎn)物，用50％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=1.06(d,J=6.4)和1.17(d,J=6.3；2∶1比例的3H總)，1.53(d,J=7,3H),2.31(d,J=5.6)和2.58(d,J=4.7；1H,2∶1的比例)，3.68(s)和3.75(s)(3H總，1∶2的比例)，3.8-3.9(m,1H),4.15-4.25(m,1H),4.3-4.25(m,1H),4.3-4.45(m,1H),4.5-4.6(m,1H),6.4-6.5(m,1H),6.65-6.7(m,1H),7.4-7.55(m,2H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=19.96,20.23,20.39,20.49,53.23,53.28,55.35,55.59,57.5,68.13,68.21,113.72,114.20,115.42,115.60,122.26,122.35,1 31.22,131.33,133.41,133.55,146.47,146.6,171.63,171.80,174.69,174.86。
C14H18N2OXCl2(MW=349.22)；質(zhì)譜(MH+)349。
實(shí)施例4N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；?L-纈氨酸乙酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)和L-纈氨酸乙酯鹽酸鹽，制備為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)硅膠層析純化反應(yīng)產(chǎn)物，用35％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.7-1.0(d的重疊基團(tuán)，J=7,6H),1.19和1.27(成對(duì)的t,J=7,3H),1.5(d,J=7,3H),2.05-2.2(m,1H),3.7-3.9(m,1H),4.0-4.3(m,3H),4.5-4.6(m,1H),6.4-6.5(m,1H),6.5-6.6(m,1H),6.9-7.1(M,1H),7.2-7.3(M,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=14.65,14.77,17.96,18.25,19.56,20.06,20.31,31.77,31.81,55.50,55.73,57.22,57.46,61.88,61.94,113.76,114.01,115.48,115.76,122.40,122.46,131.30,131.33,133.48,133.61,146.41,146.60,171.86,172.36,173.54,173.84。
C16H22N2O3Cl2(MW=361.27)；質(zhì)譜(MH+)361。
實(shí)施例5N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基-L-纈氨酸叔丁酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)和L-纈氨酸叔丁酯鹽酸鹽(Sigma)，制備為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)硅膠層析純化反應(yīng)產(chǎn)物，用25％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.7-1.0(d的重疊基團(tuán)，J=7,6H),1.36(s)和1.45(s)(9H),1.5-1.54(2 d,J=7,3H),2.0-2.2(m,1H),3.7-3.85(m,1H),4.1-4.2(m,1H),4.3-4.5(m,1H),6.4-6.5(m,1H),6.7(s,1H),6.9-7.1(m,1H),7.15-7.3(m,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=17.84,18.25,19.50,20.06,20.29,28.42,28.62,31.96,32.16,55.45,55.65,57.53,57.92,82.72,113.75,114.00,115.43,115.63,122.26,122.32,131.29,131.50,146.46,146.65,170.88,171.48,173.39,173.65。
C18H26N2O3Cl2(MW=389.33)；質(zhì)譜(MH+)389。
實(shí)施例6N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；?L-纈氨酰胺的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)和L-纈氨酰胺鹽酸鹽(Sigma)，制備為固體的目標(biāo)化合物，熔點(diǎn)為156-158℃。經(jīng)硅膠層析純化反應(yīng)產(chǎn)物，用90∶10∶1的二氯甲烷∶甲醇∶氫氧化銨洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=0.6-0.9(m,6H),1.2-1.4(重疊的d,3H),1.8-2.0(m,1H),3.9-4.2(m,2H),6.3-6.4(m,1H),6.35-6.4(m,1H),6.7-6.8(m,1H),7.0-7.1 5(m,1H),7.2-7.3(m,1H),7.4(bs,1H),7.8(d,J=10)和8.0(d,J=10)(總1H的比例為3∶2)。
13C-nmr(DMSO-d6):δ=17.8,18.2,19.00,19.25,19.6,19.7,31.36,31.20,51.9,52.7,57.11,57.4,113.46,113.58,113.67,113.85,117.20,117.45,130.64,130.76,131.53,131.56,148.25,148.45,173.06,173.11,173.38,173.51。
C14H19N3O2Cl2(MW=331)；質(zhì)譜(MH+)332。
實(shí)施例7N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨酸N-(1-羥基-3-甲基-2-丁基)酰胺的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)和纈氨醇(Sigma)，制備為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)硅膠層析純化反應(yīng)產(chǎn)物，用45∶55的乙酸乙酯/己烷和90∶10∶1的二氯甲烷∶甲醇∶氫氧化銨洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=0.86(d,J=7,3H),0.91(d,J=7,3H),1.50(d,J=7,3H),1,8-2.0(m,1H),2.6(bs,1H),3.5-3.8(m,4H),4.1(bs,1H),6.45(dd,J=2.8,8.7,1H),6.7(d,J=2.8,1H),6.8(bd,1H),7.2(d,J=5,1H)。
13C-nmr(DMSO-d6):δ=19.3,20.1,20.2,29.5,55.8,57.4,64.1,113.7,115.7,122.4,131.4,133.5,146.6,174.6。
C14H20N2O2Cl2(MW=319.23)；質(zhì)譜(MH+)319。
實(shí)施例8N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-L-纈氨酸N,N-二甲基酰胺的合成根據(jù)通用方法D，用纈氨酸N,N-二甲基酰胺(得自上述實(shí)施例D)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=145-160℃)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.38(m,1H),7.14(m,1H),6.66(m,1H),6.41(m,1H),4.78(m,1H),3.88(m,1H),3.10和3.09(s,s,3H),2.94和2.90(s,s,3H),1.96(m,1H),1.43(m,3H),0.88和0.67(m,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.6,173.1,171.4,171.3,146.3,146.0,132.7,132.6,130.52,130.46,120.9,120.8,114.5,113.4,113.0,54.25,54.15,53.4,53.2,37.4,35.6,31.4,31.3,19.50,19.46,19.2,17.5,17.0。
C16H23N3O2Cl2(MW=360.29)；質(zhì)譜(MH+)360。
實(shí)施例9N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-纈氨酸N-甲基酰胺的合成根據(jù)通用方法D，用L-纈氨酸N-甲基酰胺(得自上述實(shí)施例E)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=145-160℃)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=8.10和7.90(m,2H),7.23(m,1H),6.76和6.69(m,1H),6.57(m,1H),6.34(m,1H),3.90-4.14(m,2H),2.57和2.56(s,s,3H),1.88(m,1H),1.27(m,3H),0.65-0.86(m,6H)。
13C-nmr(DMSO-d6):δ=173.1,171.2,171.1,148.1,147.9,131.19,131.16,130.4,130.2,116.8,113.5,113.2,113.1,57.5,57.3,52.2,51.5,30.9,30.8,25.4,19.2,19.1,18.8,18.6,18.2,17.9。
C15H21N3O2Cl2(MW=346.26)；質(zhì)譜(MH+)346。
實(shí)施例10N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-L-丙氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.24，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用1∶1乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.1 5(m,2H),6.63(dd,1H),6.40(m,1H),4.50(m,2H),3.75(m,1H),3.67(s,1.5H),3.61(s,1.5H),1.45(d,3H),1.31(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.5,173.2,173.0,172.8,146.3,146.2,132.6,130.6,130.5,121.2,114.9,114.7,113.3,113.0,54.6,54.5,52.43,52.39,47.9,47.8,19.3,19.1,17.9,17.8。
C13H16N2O3Cl2(MW=319.19)；質(zhì)譜(MH+)319。
實(shí)施例11N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨酰基]-L-亮氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=120-132℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.49，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.18(d,1H),6.95(bd,1H),6.69(d,1H),6.43(dd,1H),4.58(m,1H),4.32(d,1H),3.75(m,1H),3.61(s,3H),1.54(m,6H),0.90(m,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.1,173.4,146.8,133.3,131.2,122.2,115.7,114.1,55.5,52.9,51.1,41.6,25.5,23.4,22.2,20.0。
C16H22N2O3Cl2(MW=361.27)；質(zhì)譜(MH+)361.1。
實(shí)施例12N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨酰基]-L-苯丙氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=122-124.5℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.47，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(m,4H),7.05(m,2H),6.91(d,1H),6.64(d,1H),6.38(dd,1H),4.84(q,1H),4.05(bs,1H),3.71(m,4H),3.20(m,1H),3.04(m,1H),1.37(d,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.6,172.1,146.5,136.2,133.4,131.2,129.7,129.1,127.7,122.3,115.6,113.9,55.4,53.3,53.0,38.1,19.9。
C19H20N2O3Cl2(MW=395.29)；質(zhì)譜(MH+)395。
實(shí)施例13N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-異亮氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=95.5-101.5℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.62,用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(d,1H),6.98(m,1H),6.70(m,1H),6.45(m,1H),4.55(m,1H),4.11(m,1H),3.79(m,1H),3.72(s,1.5H),3.67(s,1.5H),1.87(m,1H),1.51(d,3H),1.10(m,8H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=1 73.8,173.4,172.9,172.4,146.6,146.4,133.6,133.4,131.30,131.28,122.5,122.4,115.8,115.4,114.1,113.8,56.9,56.8,55.7,55.5,52.8,52.7,38.3,38.2,25.6,25.5,20.2,20.0,16.05,16.03,12.1,12.0。
C16H22N2O3Cl2(MW=361.27)；質(zhì)譜(MH+)361.1。
實(shí)施例14N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基戊酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-正纈氨酸甲酯鹽酸鹽(Sennchem)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=150-153℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.57，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(d,1H),6.95(bd,1H),6.70(d,1H),6.47(dd,1H),4.57(m,1H),4.13(bd,1H),3.78(m,1H),3.67(s,3H),1.81(m,1H),1.62(m,1H),1.51(d,3H),1.30(m,2H),0.9(t,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.8,173.0,146.6,133.4,131.3,122.4,115.7,114.1,55.6,52.9,52.4,34.8,20.2,19.2,14.2。
C15H20N2O3Cl2(MW=347.24)；質(zhì)譜(MH+)347。
實(shí)施例15
N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=163-165℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.55,用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.18(d,1H,J=8.7Hz),6.99(bd,1H,J=8.2Hz),6.69(d,1H,J=2.7Hz),6.45(dd,1H,J=8.7Hz,J=2.7Hz),4.53(m,1H),4.23(d,1H,J=4.2Hz),3.77(m,1H),3.66(s,3H),1.83(m,1H),1.62(m,1H),1.48(d,3H,J=7.0Hz),1.27(m,4H),0.85(t,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.9,173.1,146.7,133.4,131.2,122.3,11 5.7,114.1,55.5,52.9,52.6,32.4,28.0,22.8,20.1,14.4。
C16H22N2O3Cl2(MW=361.27)；質(zhì)譜(MH+)361。
實(shí)施例16N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-L-色氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-色氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=54-66℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.43，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.1 5(bs,0.5H),7.98(bs,0.5H),7.51(d,0.5H),7.12(m,6H),6.60(d,0.5H),6.53(dd,1H),6.24(m,1H),4.88(m,1H),3.90(d,0.5H),3.70(m,4.5H),3.32(m,1H),3.22(m,1H),1.40(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.8,173.6,172.8,172.4,146.4,146.3,136.6,133.3,133.2,131.2,131.1,128.2,,127.7,123.3,122.8,122.05,122.02,120.3,120.2,119.0,118.7,115.5,115.4,113.8,113.3,112.1,111.9,110.2,109.9,55.3,55.1,53.5,53.1,53.0,52.9,27.9,27.7,19.8,19.6。
C21H21N3O3Cl2(MW=434.33)；質(zhì)譜(MH+)434。
實(shí)施例17N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯鹽酸鹽(Bachem)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.56，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.52(d,0.5H),7.42(d,0.5H),7.1 3(m,1H),6.66(d,0.5H),6.60(d,0.5H),6.40(m,1H),4.76(m,1H),4.40(d,0.5H),4.31(d,0.5H),3.75(m,1H),3.69(s,1.5H),3.62(s,1.5H),2.88(m,1H),2.62(m,1H),1.47(m,3H),1.32(s,4.5H),1.21(s,4.5H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.0,173.7,171.7,171.4,170.30,170.27,146.7,146.6,133.4,133.3,131.2,131.1,122.0,115.6,115.1,114.0,113.4,82.4,55.4,55.2,53.24,53.19,49.0,48.7,37.9,37.8,28.4,28.2,19.9,19.8。
C18H24N2O5Cl2(MW=419.31)；質(zhì)譜(MH+)418。
實(shí)施例18
N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-天冬氨酸α-甲酯的合成根據(jù)通用方法F，去除N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯(得自上述實(shí)施例17)的叔丁酯基團(tuán)，得到為固體目標(biāo)化合物(mp=53.5-56℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.54，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.59(d,1H),7.18(m,1H),6.79(d,0.5H),6.69(d,0.5H),6.58(m,0.5H),6.47(m,0.5H),4.84(m,1H),3.82(m,1H),3.73(s,1.5H),3.68(s,1.5H),3.04(m,1H),2.79(m,0.5H),2.73(m,0.5H),1.49(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175.7,175.6,175.14,175.07,171.1,171.0,145.0,144.6,133.6,133.5,131.44,131.40,124.2,123.4,55.9,55.4,53.8,53.7,49.05,49.00,36.1,19.2,19.1。
C14H16N2O5Cl2(MW=363.20)；質(zhì)譜(MH+)363。
實(shí)施例19N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-Nε-BOC-L-賴氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)和Nε-BOC-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)，制備為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.23，用45％的乙酸乙酯∶己烷展開)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.22(m,4H),6.63(q,1H),6.43(m,1H),4.72(t,0.5H),4.63(t,0.5H),4.53(m,1H),4.42(q,1H),3.78(m,1H),3.68(s,1.5H),3.62(d,1.5H),3.00(m,2H),1.90-1.05(m,4H),1.48(d,3H),1.42(s,9H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.2,173.9,173.1,172.8,156.7,156.6,146.8,146.7,133.4,133.3,131.2,131.1,121.9,121.8,115.5,115.1,114.0,113.8,79.7,79.6,60.9,55.2,55.1,53.0,52.9,52.4,52.1,40.6,40.5,32.3,32.2,30.1,28.9,22.8,21.6,19.9,14.7。
實(shí)施例20N-[N-苯并噻唑-6-基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成步驟A:N-[N-苯并噻唑-6-基)-D,L-丙氨酸的合成于室溫下，用0.63g吡啶處理1 g 6-氨基苯并噻唑(Lancaster)的60ml二氯甲烷溶液，然后用2.1g三氟乙酸酐處理。將反應(yīng)物攪拌3小時(shí)，在此過程中最初溫?zé)岬姆磻?yīng)混合物冷卻至室溫。用5％檸檬酸水溶液洗滌該混合物，用硫酸鎂干燥，去除溶劑，得到定量產(chǎn)率的6-氨基苯并三唑三氟乙酰胺，為奶油色固體，將其立即用于下一步反應(yīng)。
將300mg 6-氨基苯并三唑三氟乙酰胺溶于35ml THF中，于室溫下加入1.2當(dāng)量的氫化鉀。將該溶液回流5小時(shí)，冷卻，加入18-冠-6的晶體(Aldrich)和331mg 2-溴代丙酸乙酯(Aldrich)，將產(chǎn)生的混合物回流36小時(shí)。冷卻該反應(yīng)混合物，減壓去除溶劑，將殘留物溶于乙酸乙酯中。用水洗滌有機(jī)物。將水層的pH調(diào)至5，用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)層，用硫酸鎂干燥并除去溶劑。粗品物質(zhì)經(jīng)tlc純化，用二氯甲烷/甲醇(94∶4)展開得到N-(苯并噻唑-6-基)-D,L-丙氨酸乙酯(Rf=0.5)。于回流下，用甲醇和5當(dāng)量的碳酸鉀處理該物質(zhì)，然后冷卻并去除溶劑。將殘留物溶于水和乙酸乙酯中。將水層的pH調(diào)至2，用乙酸乙酯萃取。干燥乙酸乙酯萃取物，去除溶劑得到N-(苯并噻唑-6-基)-D,L-丙氨酸。步驟B:N-[N-苯并噻唑-6-基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D(用DMF作為反應(yīng)溶劑，用乙酸乙酯萃取且不用1N鹽酸洗滌)，用L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(苯并噻唑-6-基)-D，L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.28，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.74(s,1H),7.91(s,1H,J=8.8Hz),7.15(m,1H),7.06(d,0.5H,J=2.3Hz),7.00(d,0.5H,J=2.3Hz),6.87(m,1H),4.58(m,1H),4.20(bs,2H),3.87(m,1H),3.70(s,1.5H),3.59(s,1.5H),1.30(m,10H),0.84(t,1.5H,J=6.9Hz),0.60(t,1.5H,J=6.9H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.3,174.0,173.4,173.0,151.1,151.0,147.2,145.5,145.3,136.2,136.1,124.4,124.2,116.1,115.9,104.6,103.9,56.2,55.69,53.0,52.9,52.5,52.2,32.42,32.36,28.0,27.7,22.8,22.6,20.3,20.1,14.4,14.2。
C17H23N3O3S2(MW=349.46)；質(zhì)譜(MH+)350。
實(shí)施例21N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-賴氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法F，用N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-Nε-BOC-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽(得自上述實(shí)施例19)，制備為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)硅膠快速層析純化反應(yīng)產(chǎn)物，用89∶10∶1的二氯甲烷∶甲醇∶氫氧化銨洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3,-2非對(duì)映體)δ=7.21(d,1H),7.09(bd,1H),6.68(q,1H),6.46(m,1H),4.56(m,1H),4.22(bs,1H),3.78(m,1H),3.70(s,1.5H),3.67(s,1.5H),2.66(t,1H),2.54(t,1H),1.80(m,1H),1.62(m,1H),1.51(d,1.5H),1.50(d,1.5H),1.32(m,2H),1.11(m,1H)。
13C-nmr(CDCl3,-2非對(duì)映體)δ=174.8,174.3,173.1,172.8,171.8,146.9,146.7,133.3,133.1,131.2,131.1,121.7,121.5,115.2,115.1,113.9,113.8,60.9,55.0,54.9,53.1,53.0,52.5,52.3,32.1,32.09,32.05,31.8,23.1,22.9,21.6,19.9,19.8和14.7。
C13H23N3O3Cl2(MW=376.28)。
實(shí)施例22N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-L-酪氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用L-酪氨酸甲酯(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為丙氨酸的立體異構(gòu)體混合物的目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.29,10％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)快速層析純化，用甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.22-7.50(m,7H),6.36(dd,0.5H),6.28(dd,0.5H),4.83(m,1H),4.04(dd,1H),3.73(s,1.5H),3.70(m,1H),3.68(s,1.5H),3.14(dd,0.5H),2.97(m,1.5H),1.43(d,1.5H),1.35(d,1.5H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.20,174.08,172.75,172.26,156.10,155.99,146.45,146.32,133.50,133.38,131.39,131.26,130.81,130.67,127.43,127.00,122.41,122.22,116.15,116.12,115.68,115.39,113.94,1 13.46,55.47,55.08,53.54,53.18,37.62,37.44,19.91,19.87。
C19H20N2O4Cl2(MW=411.28)。
實(shí)施例23N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-丙氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例B)和L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，制備為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)硅膠快速層析純化反應(yīng)產(chǎn)物，用50％的乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=1.3-1.55(在1.34、1.39和1.48處有三組雙峰，均為J=7，共6H),3.7-3.9(在3.67和3.72處具有m和單峰，4H),4.3-4.4(m,1H),4.5-4.65(m,1H),6.4-6.6(m,2H),6.73(s,1H),6.95-7.1(m,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=15.52,15.59,16.75,16.87,45.29,45.39,50.02,51.89,51.99,108.9,109.2,109.5,1 16.14,1 16.19,132.96,133.96,133.05,145.67,145.76,170.13,170.32,170.40,170.63。
C13H16N2O3Cl2(MW=319.19)；質(zhì)譜(MH+)319。
實(shí)施例24N-[N-(3,5-二氧苯基)-L-丙氨酰基]-(S)-2-氨基戊酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例B)和L-正纈氨酸甲酯鹽酸鹽(Sennchem)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)硅膠層析純化反應(yīng)產(chǎn)物，用50％的乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.92(t,J=7,3H),1.2-1.4(m,2H),1.50(d,J=7,3H),1.5-1.7(m,1H),1.75-1.9(m,1H),3.69(s,3H),3.75-3.9(m,1H),4.2(bs,1H),4.5-4.65(m,1H),6.5(bs,2H),6.73(s,1H),6.85(bs,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=14.2,19.25,20.13,34.8,52.4,53.0,55.2,112.7,119.5,136.1,148.7,173.0,173.5。
C15H20N2O3Cl2(MW=347.24)；質(zhì)譜(MH+)346。
實(shí)施例25N-[N-(3,5-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-L-苯丙氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸和L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)硅膠層析純化反應(yīng)產(chǎn)物，用50％的乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下
1H-nmr(CDCl3):δ=1.40(d,J=7,3H),3.10(dd,J=7,14,1H),3.23(dd,J=5,14,1H),3.74(s,3H),3.75-3.9(m,1H),4.0(bs,1H),4.8-4.95(m,1H),6.45(bs,2H),6.73(s,2H),7.0-7.2(m,2H),7.2-7.3(m,5H)。
13C-nrmr(CDCl3):δ=19.4,37.5,52.4,52.7,54.5,112.0,118.9,127.1,128.5,129.1,135.5,135.6,148.0,171.4,172.6。
C19H20N2O3Cl2(MW=395.29)；質(zhì)譜(MH+)394。
實(shí)施例26N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-L-天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備目標(biāo)化合物(mp=113.5-118℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.29，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.47(bd,1H),7.20(m,1H),6.69(d,0.5H),6.60(d,0.5H),6.44(m,1H),4.83(m,1H),4.25(bs,0.5H),4.18(bs,0.5H),3.79(m,1H),3.72(s,1.5H),3.67(s,1.5H),3.65(s,1.5H),3.48(s,1.5H),3.00(m,1H),2.79(m,1H),1.50(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.0,173.6,172.0,171.7,171.4,170.3,146.6,146.4,133.43,133.37,131.22,131.20,122.2,122.0,115.5,115.0,114.1,113.6,55.4,55.2,53.46,53.44,52.7,52.5,48.8,48.7,36.4,36.3,19.9,19.7。
C15H18N2O5Cl2(MW=377.23)；質(zhì)譜(MH+)377。
實(shí)施例27N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-(N’-1-芐基)-L-組氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用1-芐基-L-組氨酸甲酯鹽酸鹽為固體(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備目標(biāo)化合物(mp=49-51℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.21，用5％的甲醇/二氯甲烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用5％的甲醇∶二氯甲烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.22(d,0.5H),7.88(d,0.5H),7.29(m,3H),7.08(m,4H),6.65(d,0.5H),6.44(m,2.5H),4.90(s,1H),4.86(s,1H),4.62(m,1H),4.47(m,1H),3.72(m,1H),3.61(s,1.5H),3.47(s,1.5H),2.95(m,2H),1.42(d,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.0,173.9,172.4,172.0,146.9,138.1,137.9,137.6,136.7,136.5,133.1,133.0,131.0,130.9,129.6,129.5,128.84,128.79,127.74,127.71,121.1,121.0,117.3,115.3,115.1,113.9,113.6,54.9,54.8,53.2,52.9,52.8,52.7,51.3,51.2,30.2,29.8,19.8。
C23H24N4O3Cl2(MW=475.38)；質(zhì)譜(MH+)475。
實(shí)施例28N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-谷氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-谷氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯鹽酸鹽(Bachem)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.52和0.59，用1∶1乙酸乙酯∶己烷展開)，并將產(chǎn)物經(jīng)快速層析純化，用1∶1乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.25(m,2H),6.69(m,1H),6.45(m,1H),4.54(m,1H),3.78(m,1H),3.70(s,1.5H),3.65(s,1.5H),2.10(m,4H),1.49(d,3H),1.40(s,9H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.2,173.9,172.8,172.7,172.5,172.3,146.6,146.5,133.5,133.3,131.3,131.2,122.16,122.14,115.7,115.4,114.0,113.6,81.6,81.5,55.4,55.2,53.1,53.0,52.3,51.9,32.0,31.7,28.6,27.6,27.3,20.0,19.8。
C19H26N2O5Cl2(MW=433.34)；質(zhì)譜(MH+)432。
實(shí)施例29N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-谷氨酸α-甲酯的合成根據(jù)通用方法F(省略碳酸氫鈉洗滌并從乙酸乙酯相回收產(chǎn)物)，去除N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]谷氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯(得自上述實(shí)施例28)的叔丁酯基，提供為固體的目標(biāo)化合物(mp=42-45℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)反應(yīng)(Rf=0.42和0.50，用10％甲醇/二氯甲烷展開)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.57(bs,1H),7.25(d,1H),6.75(d,1H),6.51(m,1H),4.67(m,1H),3.91(m,1H),3.76(s,1.5H),3.69(s,1.5H),2.50-2.15(m,3H),2.10-1.85(m,1H),1.51(bs,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=177.98,177.73,175.17,174.94,172.64,172.26,146.60,146.45,133.52,133.33,131.41,131.27,122.32,122.28,115.68,155.47,113.98,113.59,55.37,55.17,53.35,53.29,52.20,51.85,30.68,30.26,227.29,27.18,19.86,19.77。
C15H18N2O5Cl2(MW=377.23)。
實(shí)施例30N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-L-亮氨酰胺的合成根據(jù)通用方法D，用L-亮氨酰胺鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)柱層析純化該化合物，首先用1∶1乙酸乙酯/己烷洗脫，然后用5％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.32(d,8.6,1H),7.1 7(d,8.7,1H),6.66(d,2.7,1H),6.54(s,1H),6.41(dd,2.7,8.7,1H),6.13(s,1H),4.48(m,1H),4.33(d,5.3,1H),3.83(五峰，6.9,1H),1.58(m,3H),1.44(d,7.0,3H),0.89(d,6.0,3H),0.85(d,5.9,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.5,173.9,146.0,132.8,130.7,121.5,114.7,113.3,54.3,51.1,40.8,24.8,22.9,21.7,19.2。
C15H21N3O2Cl2(MW=346.26)；質(zhì)譜(MH+)346。
實(shí)施例31N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(3,5-二碘代)-L-酪氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用3,5-二碘代-L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為丙氨酸立體異構(gòu)體混合物的目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.29，用10％甲醇/二氯甲烷展開)并經(jīng)快速層析純化，用10％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3，-部分純的非對(duì)映體)δ=7.37(s,2H),7.19(d,1H),6.99(bd,1H),6.65(d,1H),6.40(m,1H),5.78(s,1H),4.73(q,1H),3.72(m,1H),0.70(s,3H)。
13C-nmr(CDCl3，-兩個(gè)非對(duì)映體)δ=173.86,171.87,171.41,171.37,170.90,153.48,150.74,146.37,146.30,141.01,140.09,138.39,133.50,133.45,132.14,131.62,131.34,131.28,122.80,122.62,121.82,115.89,115.78,115.72,115.47,114.54,113.79,113.21,82.97,77.08,61.01,55.69,53.32,53.28,53.18,53.14,52.97,52.90,52.76,36.37,36.15,21.67,20.20,20.11,19.76,14.79。
C19H18N2O4Cl2I2(MW=663.08)；質(zhì)譜(MH+)=663。
實(shí)施例32N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(3-碘代)-L-酪氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用3-碘代-L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽(根據(jù)通用方法K并用3-碘代-L-酪氨酸(Aldrich)制備)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為丙氨酸立體異構(gòu)體混合物的目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.29，用10％甲醇/二氯甲烷展開)并經(jīng)快速層析純化，用10％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.37-7.20(m,3H),6.97-6.60(m,3H),6.42(dd,1.5H),6.32(dd,1.5H),5.52(bs,0.5H),5.43(bs,0.5H),4.80(m,1H),3.94(dd,1H),3.73(s,1.5H),3.70(s,1.5H),3.12(dd,0.5H),2.94(m,1.5H),1.48(d,1.5H),1.43(d,1.5H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.56,171.80,171033,154.52,154.47,145.69,139.15,138.74,132.88,132.71,130.83,130.61,130.40,130.26,129.14,128.81,121.76,121.73,115.04,114.97,114.86,113.20,112.71,84.96,84.68,54.85,54.65,52.78,52.60,52.57,52.51,36.29,36.08,19.40,19.27。
C19H19N2O4Cl2I(MW=537.1 8)；質(zhì)譜(MH+)=538。
實(shí)施例33根據(jù)在此所述的通用方法和實(shí)施例，制備下列化合物N-[N-(4-氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-苯丙氨酸甲酯實(shí)施例34N-[N-(3,4-二氯苯基)甘氨酰基]-(S)-2-氨基戊酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用N-(3,4-二氯苯基)甘氨酸(得自上述實(shí)施例Ⅰ)和L-正纈氨酸甲酯鹽酸鹽(Sennchem)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.32，用50％乙酸乙酯/己烷展開)并經(jīng)快速層析純化，用乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(d,J=8.7,1H),6.94(d,J=7.8,1H),6.68(d,J=2.6,1H),6.4(m,1H),4.6(m,2H),3.79(d,J=2.6,2H),3.71(s,3H),1.7(m,2H),1.2(m,2H),0.88(t,J=7.3,7.3,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.3,170.2,147.2,133.6,131.2,122.2,115.0,113.6,53.0,52.3,48.8,34.8,19.2,14.1。
C14H18N2O3Cl2(MW=333.22)；質(zhì)譜(MH+)=334。
實(shí)施例35N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-Nε-(己?；?-L-賴氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-賴氨酸甲酯(得自上述實(shí)施例21)和己酸(Aldrich)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.38，用60％二氯甲烷/10％己烷/27％乙酸乙酯/3％甲醇展開)并經(jīng)快速層析純化，用60％二氯甲烷/10％己烷/27％乙酸乙酯/3％甲醇作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.70(d),7.25(m),7.15(m),6.68(m),6.42(m),5.95(bs),5.79(bs),4.70(bs),4.50(m),3.80(m),3.78(s),3.72(s),3.45(m),3.20(m),3.05(m),2.12(m),1.98(m),1.80(m),1.60(m),1.45(m),1.30(m),1.10(m)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175.6,174.4,174.0,173.9,173.7,173.1,156.6,146.9,146.8,133.5,133.2,131.2,131.1,121.7,115.4,115.23,115.1,114.0,113.9,79.6,55.1,54.9,54.8,53.0,52.9,52.4,52.0,42.6,40.9,39.4,37.1,32.1,31.7,30.3,29.4,28.9,28.5,26.9,25.9,23.0,19.9,19.7。
C22H33N3O4Cl2(MW=474.43)；質(zhì)譜(MH+)=NA。
實(shí)施例36N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-苯丙氨酰胺的合成根據(jù)通用方法D，用苯丙氨酰胺(Bachem)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備目標(biāo)化合物(mp=177-179℃)。將該化合物用氯仿研磨純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=8.0-8.2(d,1H),7.45(m,1H),7.05-7.30(m,7H),7.65-7.72(m,1H),6.24-6.51(m,2H),4.45(m,1H),3.82(m,1H),2.95(m,1H),2.78(m,1H),1.05-1.25(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.0,172.9,172.8,172.7,147.9,137.7,131.1,130.3,129.21,129.15,128.0,127.9,126.21,126.19,116.8,113.5,113.0,112.6,53.4,53.3,52.0,51.8,37.92,37.86,18.9,18.6。
C18H19N3O2Cl2(MW=380.23)；質(zhì)譜(MH+)=380。
實(shí)施例37N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己-(N-甲基)-酰胺的合成根據(jù)通用方法D，用L-正亮氨酸N-甲基酰胺(根據(jù)通用方法F使BOC-L-正亮氨酸(Bachem)與甲胺(Aldrich)偶合、接著根據(jù)通用方法F去除BOC基團(tuán)制備)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸，制備目標(biāo)化合物。然后用碳酸鉀洗滌將該化合物純化。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CD3OD):δ=6.99(t,1H),6.48(d,10.8,1H),6.32(d,8.7,1H),4.09(m,1H),3.68(q,7.0,0.5H),3.59(q,7.1,0.5H),2.50(s,1.5H),2.47(s,1.5H),1.28-1.60(m,2H),1.23(t,6.5,3H),0.80-1.20(m,4H),0.68(t,6.7,1.5H),0.59(t,7.1,1.5H)。
13C-nmr(CD3OD):δ=176.6(重疊)，174.54,174.51,148.8,148.5,133.6,133.5,131.7,131.6,121.0,120.8,115.2,115.1,114.5,114.2,55.3,54.7,54.3,54.1,33.3(重疊)，29.0,28.8,26.3,26.2,23.4,23.3,19.0(重疊)，14.3,14.2。
C16H23N3O2Cl2(MW=360.29)；質(zhì)譜(MH+)=360。
實(shí)施例38和39N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-β-環(huán)己基丙氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用β-環(huán)己基丙氨酸甲酯(根據(jù)通用方法K由β-環(huán)己基丙氨酸制備)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸，制備為丙氨酸非對(duì)映體的目標(biāo)化合物，為油狀物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.27(第二種個(gè)異構(gòu)體)和0.30(第一種異構(gòu)體)，用35％乙酸乙酯/己烷展開)，并經(jīng)快速層析純化，用35％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下(第一種異構(gòu)體-實(shí)施例38)1H-nmr(CD3OD):δ=7.21(d,1H),6.81(bd,1H),6.70(d,1H),6.46(dd,1H),4.62(m,1H),4.19(d,1H),3.77(m,1H),3.65(s,3H),1.65-0.90(m,10H),1.50(d,3H)。
13C-nmr(CD3OD):δ=173.78,173.48,146.62,133.45,131.26,122.51,115.84,114.17,55.64,52.91,50.47,40.18,34.81,34.04,32.88,26.86,26.71,26.55,20.13。
NMR數(shù)據(jù)如下(第二種異構(gòu)體-實(shí)施例39)1H-nmr(CD3OD):δ=7.23(d,1H),6.83(bd,1H),6.67(d,1H),6.45(dd,1H),4.63(m,1H),4.10(d,1H),3.69(m,1H),3.72(s,3H),1.65-0.90(m,10H),1.51(d,3H)。
13C-nmr(CD3OD):δ=173.98,173.56,146.38,133.65,131.34,122.49,115.35,113.78,55.39,52.95,50.21,40.26,34.61,34.10,32.68,26.82,26.64,26.41,19.98。
C19H26N2O3Cl2(MW=401.34)；質(zhì)譜(MH+)=401。
實(shí)施例40N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己酰胺的合成根據(jù)通用方法D，用L-正亮氨酰胺(根據(jù)通用方法F，由BOC-L-正亮氨酰胺(得自上述實(shí)施例F)制備)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=156-161℃)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CD3OD):δ=6.49(m,1H),6.32(m,1H),1.14(m,1H),3.54-3.71(m,1H),0.80-1.62(m,9H),0.68(m,1.5H),0.58(m,1.5H)。
13C-nmr(CD3OD):δ=176.63,176.56,148.8,148.5,133.6,133.5,131.7,131.6,120.8,115.2,115.1,114.4,114.2,55.3,54.7,53.9,53.7,33.4,33.3,29.0,28.6,23.4,23.3,19.03,18.99,14.3,14.2。
C16H21N3O2Cl2(MW=346.26)；質(zhì)譜(MH+)346。
實(shí)施例41N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己-(N,N-二甲基)-酰胺的合成根據(jù)通用方法D，用L-正亮氨酸N,N-二甲基酰胺(根據(jù)通用方法E使BOC-L-正亮氨酸(Bachem)與二甲胺(Aldrich)偶合，接著根據(jù)通用方法F去除BOC基團(tuán)制備)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=137-160℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(0.20和0.24，用5％甲醇的二氯甲烷溶液展開)，并從水中沉淀純化該化合物。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.77(m,3H),1.11(m,1H),1.24(m,3H),1.47(m,3H),1.40-1.80(m,2H),2.92和2.94(兩個(gè)s,3H),3.07(s,3H),3.84(m,1H),4.32(d,J=5.3Hz,1H),4.90(m,1H),6.44(m,1H),6.65(s,1H),7.17(m,1H),7.35(m,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=13.8,13.9,19.3,19.4,22.38,22.45,27.06,27.14,32.3,32.5,35.7(可能重疊)，37.0,37.1,48.6,48.8,54.3,54.5,113.1,113.5,114.4,114.7,121.1,121.3,130.6(重疊)，132.7,132.9,146.0,146.2,171.4,171.5,172.6,172.9。
C17H25N3O2Cl2(MW=374.31)；質(zhì)譜(MH+)374。
實(shí)施例42N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-1-甲硫氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D，用L-甲硫氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)，制備為非對(duì)映體化合物的目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.35，用43％乙酸乙酯/己烷展開)，并經(jīng)快速層析純化該化合物，用43％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(d,2H),6.68(m,1H),6.43(m,1H),4.68(m,1H),4.21(dd,1H),3.79(m,1H),3.73(s,1.5H),3.68(s,1.5H),2.46(m,1H),2.31(t,1H),2.23-1.88(m,2H),2.06(s,1.5H),1.93(s,1.5H),1.50(d,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.09,173.81,172.73,172.38,146.60,146.47,133.43,131.37,131.27,122.36,122.33,115.65,115.31,114.05,113.65,55.48,55.32,53.19,53.16,51.99,51.68,31.74,31.64,30.62,30.42,20.10,19.92,16.08,15.91。
C15H20N2O2Cl2(MW=379.31)；質(zhì)譜(MH+)379。
實(shí)施例43N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己-(N,N-二甲基)-酰胺的合成根據(jù)通用方法E，用L-正亮氨酸N,N-二甲基酰胺(根據(jù)通用方法E使BOC-L-正亮氨酸(Bachem)與二甲胺(Aldrich)偶合，接著根據(jù)通用方法F去除BOC基團(tuán)制備)和N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例B)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.25-0.30，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)層析純化該化合物，用3％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.8-0.95(重疊t,3H),1.2-1.8(m，在1.45和1.48處含有重疊的d,9H,2.95(s,3H),3.10(s,3H),3.8-3.9(m,1H),4.3-4.4(m,1H),4.8-4.95(m,1H),6.45(s,2H),6.6-6.7(m,1H)。
C17H25N3O2Cl2(MW=374.31)。
實(shí)施例44N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己酰胺的合成根據(jù)通用方法D，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例B)和L-正亮氨酰胺(得自上述實(shí)施例F)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.15，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)快速層析純化該化合物，用3％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CD3OD):δ=0.9(t,J=7,3H),1.2-1.4(m,2H),1.45(d,J=7,3H),1.5-1.7(m,1H),1.75-1.9(m,1H),3.9-4.0(m,1H),4.1-4.3(m,1H),4.3-4.4(m,1H),6.5(bs,2H),6.6(bs,1H)。
C15H21N3O2Cl2(MW=346.26)。
實(shí)施例45N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-(S)-2-氨基己-(N-甲基)-酰胺的合成根據(jù)通用方法D，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸和L-正亮氨酸N-甲基酰胺(根據(jù)通用方法E使BOC-L-正亮氨酸(Bachem)與甲胺(Aldrich)偶合，接著根據(jù)通用方法F去除BOC基團(tuán)制備)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.25，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)薄層層析純化該化合物，用3％甲醇/二氯甲烷展開。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CD3OD):δ=0.9(t,J=7,3H),1.2-1.4(m,2H),1.45(d,J=7,3H),1.5-1.7(m,1H),1.75-1.9(m,1H),2.6-2.7(在2.7處具有s的m,4H),3.8-4.0(m,1H),4.1-4.3(m,2H),6.5(bs,2H),6.6(bs,1H)。
C16H23N3O2Cl2(MW=360.29)。
實(shí)施例46N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-組氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-組氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=55-60℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.52，用10％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)快速層析純化該化合物，用50％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CD3Cl3):δ=8.14(bd,J=7.02 Hz,0.5H),7.79(bd,7.57Hz,0.5H),7.33(s,1H),7.14(m,1H),6.73(s,0.5H),6.69(s,0.5H),6.59(m,1H),6.47(m,0.5H),6.37(m,0.5H),4.74(m,1H),4.33(m,1H),3.79(m,1H),3.69(s,1.5H),3.62(s,1.5H),3.05(m,2H),1.47(d,J=7.02Hz,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.35,174.15,172.45,172.08,146.80,146.67,135.48,135.07,134.65,133.24,133.12,131.13,131.04,121.54,121.49,115.96,115.78,115.38,115.05,113.90,113.72,61.04,54.98,53.11,52.97,52.71,29.71,19.43,21.68,19.86,19.84,14.77。
C16H18N4O3Cl2(MW=385.25)；質(zhì)譜(MH+)385。
實(shí)施例47N-[N-(喹啉-3-基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成根據(jù)通用方法G，接著根據(jù)通用方法C進(jìn)行水解制備N-(喹啉-3-基)-D,L-丙氨酸。然后根據(jù)通用方法D使該化合物與L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)偶合，得到為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.76，用10％甲醇/二氯甲烷展開；0.07，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并經(jīng)快速層析純化該化合物，用10％甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.53(t,J=2.8 Hz,1H),7.95(m,1H),7.63(m,1H),7.46(m,2H),7.20(m,1H),7.10(d,J=2.75 Hz,0.5H),7.01(d,J=2.75 Hz,0.5H),4.60(m,2H),3.94(m,1H),3.71(s,1.5H),3.54(s,1.5H),1.90-0.80(m,12H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.82,173.50,173.40,172.96,143.65,143.60,143.39,143.32,140.34,140.26,129.57,129.49,127.86,127.78,126.94,126.78,126.54,113.39,112.65,55.69,55.46,53.00,52.86,52.62,52.28,34.42,32.35,28.03,27.79,22.78,22.62,20.22,20.01,14.41,14.12。
C19H25N3O3(MW=343.43)。
實(shí)施例48N-[N-(苯并噻唑-2-基)-L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成根據(jù)通用方法B，用2-氯代苯并噻唑(Aldrich)和L-丙氨酸(Aldrich)，制備N-(苯并噻唑-2-基)-L-丙氨酸。然后根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)使該化合物與L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)偶合，得到為固體的目標(biāo)化合物(mp=99-120℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)后一反應(yīng)(Rf=0.42，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，并經(jīng)制備性板層析純化該產(chǎn)物，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷和5∶95的甲醇∶二氯甲烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.66-7.03(m,6H),4.69(m,1H),4.58(m,1H),3.72(s,1.9H),3.61(s,1.1H),1.91-1.50(m,5H),1.32-1.08(m,4H),0.87-0.65(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175.8,170.3,166.8,160.2,152.3,148.4,132.1,131.1,126.8,126.5,122.6,122.0,121.4,120.9,119.4,54.3,54.2,53.0,52.9,3.5,28.1,28.0,23.9,22.9,19.0,18.8,14.2。
C17H23N3O3S(MW=349.46)；質(zhì)譜(MH+)350。
實(shí)施例49N-[N-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨?；鵠-L-丙氨酸甲酯的合成根據(jù)通用方法E，用L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例C)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=93-95℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.4，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)快速層析純化該化合物，用3％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.9(q),6.25(t),6.10(q),5.3(s),4.6(m),4.25(m),33.7-3.8(m),1.8(s),1.5(d),1.4(q),1.25(s)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.78,173.51,173.44,173.27,166.24,166.09,163.04,162.83,149.41,149.37,97.47,97.34,97.20,97.09,96.82,95.08,95.03,94.73,94.69,94.39,94.34,55.27,55.22,53.10,53.02,48.46,48.35,19.99,19.87,18.72,18.66。
C13H16N2O3F2(MW=286.3)；質(zhì)譜(MH+)287。
實(shí)施例50N-[N-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成根據(jù)通用方法E，用L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨酸，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=93-95℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.6，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)快速層析純化該化合物，用3％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.95(q),6.85(d),6.25(t),6.15(t),4.6(m),4.3(m),3.8(m),3.75(s),3.70(s),1.8(m),1.65(m),1.55(d),1.3(m),1.1(m),0.85(t),0.80(t)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.64,173.42,173.35,173.04,149.38,149.23,97.52,97.21,97.14,96.83,95.10,95.05,94.75,94.70,94.41,77.61,77.19,55.34,55.25,52.97,52.87,52.58,52.25,32.41,27.96,27.74,22.79,22.68,20.05,19.87,14.39,14.25。
C16H22N2O3F2(MW=328.3)；質(zhì)譜(MH+)329。
實(shí)施例51N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己酰胺的合成根據(jù)通用方法D(用DMF作為溶劑，用乙酸乙酯萃取，不用1N鹽酸洗滌)，用L-正亮氨酰胺(根據(jù)通用方法F，由BOC-L-正亮氨酰胺(得自上述實(shí)施例F)制備)和N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨酸(根據(jù)通用方法J使3,4-二氯苯胺(Aldrich)和R-(+)-乳酸異丁酯(Aldrich)反應(yīng)，接著根據(jù)通用方法C進(jìn)行水解)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=184-186℃)。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.48，用12％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)制備性板層析純化該化合物，用12％甲醇/二氯甲烷作為展開劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CD3OD):δ=6.97(d,J=8.79Hz,1H),6.51(d,J=2.68Hz,1H),6.32(dd,J=8.73Hz,J=2.68Hz,1H),4.14(m,1H),3.67(q,J=6.96 Hz,1H),1.40(m,10H),0.70(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=177.19,177.11,149.41,134.05,132.13,121.38,115.82,114.96,55.26,54.48,33.92,29.54,23.95,19.58,14.83。
C15H21N3O2Cl2(MW=346.26)；質(zhì)譜(MH+)346。
實(shí)施例52N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己(N-芐基)-酰胺的合成根據(jù)上述通用方法H，用N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己酸甲酯(得自上述實(shí)施例15)和芐胺(Aldrich)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=141-146℃)。經(jīng)硅膠tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.32，用5％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)制備性板層析純化該化合物，硅膠，用5％甲醇/二氯甲烷作為展開劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CD3OD):δ=7.6(m,2H),7.2(m,6H),6.6(m,1H),6.3(m,1H),4.47(m,4H),3.75(m,1H),1.28(m,12H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.56,174.50,172.39,172.32,146.78,146.65,138.38,133.43,133.38,131.22,129.21,128.06,121.98,121.72,121.66,115.21,115.08,113.73,113.55,54.94,54.36,53.60,53.22,43.95,33.10,32.98,28.24,27.95,22.96,22.90,19.78,19.70,14.49,14.41。
C22H27Cl2N3O2(MW=436.39)；質(zhì)譜(MH+)436。
實(shí)施例53N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基-2-苯基乙醇的合成根據(jù)上述通用方法E，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例A)和(S)-(+)-2-苯基甘氨醇(Aldrich)，制備為固體的目標(biāo)化合物(mp=66-70℃)。經(jīng)硅膠tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.25，用5％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)快速柱層析純化該化合物，硅膠，用5％甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.4-7.1(m,6H),6.75(d,J=3Hz,1H),6.5-6.4(m,1H),5(m,1H),4.2-4.0(m,J=4Hz,1H),3.8(2H),1.7(s,1H),1.55(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174,146,139,134,131.8,129.5,128.5,127,123,116,114,112,67,56.5,55.5,20。
C16H18Cl2N2O2(MW=341)；質(zhì)譜(MH+)342。
實(shí)施例54和55N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-苯基甘氨?；鵋-丙氨酸甲酯的合成根據(jù)上述通用方法E，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-苯基甘氨酸(得自上述實(shí)施例J)和L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.95，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)從乙酸乙酯、己烷和乙醚中重結(jié)晶純化該化合物。得到兩個(gè)部分分離的非對(duì)映體的混合物NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3-75％異構(gòu)體A/25％異構(gòu)體B):δ=7.45-7.35(m,5H),6.7(m,2H),6.47(m,2H),5.1-5.0(dd,J=3Hz,1H),4.75(d,J=3.5Hz,1H),4.65-4.5(m,7.2Hz,1H),3.75-3.68(2s,3∶1的比例,3H),1.43-1.3(2d,3∶1的比例，J=7.2Hz,3H)。
13C-nmr(CDCl3-75％異構(gòu)體A/25％異構(gòu)體B):δ=173.27,170.24,148.61,138.23,136.07,136.00,130.11,129.60,129.58,127.83,127.69,119.10,112.68,112.56,78.03,63.27,53.20,48.94,18.85。
1H-nmr(CDCl3-25％異構(gòu)體A/75％異構(gòu)體B):δ=7.45-7.35(m,5H),6.7(m,2H),6.47(m,2H),5.1-5.0(2×d,J=3Hz,1H),4.75(d,J=3.5Hz,1H),4.65-4.5(m,J=7.2 Hz,1H),3.75-3.68(2s,3∶1的比例，3H),1.43-1.3(2d,1∶3的比例，J=7.2Hz,3H)。
13C-nmr(CDCl3-25％異構(gòu)體A/75％異構(gòu)體B):δ=173.27,170.24,148.61,138.23,136.07,136.00,130.11,129.60,129.58,127.83,127.69,119.10,112.68,112.56,78.03,63.27,53.20,48.94,18.85。
C18H18N2O3Cl2(MW=381.26)；質(zhì)譜(MH+)381。
實(shí)施例56N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己醇的合成根據(jù)上述通用方法Ⅰ，用N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-(S)-2-氨基己酸甲酯(得自上述實(shí)施例15)，制備為油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)硅膠tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.16和0.17，用5％甲醇/二氯甲烷展開)，并經(jīng)制備性板層析純化該化合物，用5％甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CD3OD):δ=7.20(d,1H),6.79(m,1H),6.68(dd,1H),6.43(d,1H),4.42(bd,0.6H),4.30(bd,0.4H),3.89(m,1H),3.75(m,1H),3.70-3.40(m,2H),1.60-0.95(m,9H),0.90-0.70(m,3H)。
13C-nmr(CD3OD):δ=174.42,174.17,146.06,145.96,132.89,132.85,130.74,130.69,121.64,121.49,114.98,114.70,113.14,113.08,65.42,65.11,55.00,54.76,51.69,51.48,30.67,30.59,28.16,28.00,22.48,22.36,19.44,13.92,13.82。
C15H22C12N2O2(MW=333.26)；質(zhì)譜(MH+)333。
實(shí)施例57N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-(S)-2-氨基-2-苯基乙醇的合成根據(jù)上述通用方法E，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例B)和(S)-(+)-2-苯基甘氨醇(Aldrich)，制備目標(biāo)化合物。
實(shí)施例58N-[N-(3,5-二氨苯基)-L-丙氨酰基]-L-苯基甘氨酸叔丁酯的合成根據(jù)通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用N-(3,5-二氯苯基)-L-丙氨酸(根據(jù)通用方法J使3,5-二氯苯胺(Aldrich)和R-(+)-乳酸叔丁酯(Aldrich)反應(yīng)，接著根據(jù)通用方法C進(jìn)行水解制備)和L-苯基甘氨酸叔丁酯鹽酸鹽(Bachem)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.39，用25％乙酸乙酯/己烷展開)，并經(jīng)制備性板層析純化該化合物，用25％乙酸乙酯/己烷展開。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.55(bd,J=7.39Hz,1H),7.30(s,5H),6.73(t,J=1.68Hz,1H),6.46(d,J=1.71Hz,2H),5.45(d,J=7.45Hz,1H),4.47(d,J=5.19Hz,1H),3.82(m,1H),1.40(d,J=6.96Hz,3H),1.34(s,9H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.23,169.92,148.93,137.43,136.07,129.40,128.85,127.40,119.04,112.48,83.42,57.37,54.70,28.29,19.79。
C21H24N2O3Cl2(MW=423.34)；質(zhì)譜(MH+)423。
實(shí)施例59N-[N-(3,5-二(三氟甲基)苯基)-L-丙氨?；鵠-L-苯基甘氨酸叔丁酯的合成根據(jù)通用方法D，用N-[3,5-二(三氟甲基)苯基]-L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例G)和L-苯基甘氨酸叔丁酯鹽酸鹽(Bachem)，制備目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.46，用25％乙酸乙酯/己烷展開)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.39(d,J=7.39Hz,1H),7.29(s,5H),6.96(s,2H),5.45(d,J=7.51Hz,1H),4.69(d,J=5.31Hz,1H),3.95(m,1H),1.48(d,J=6.96Hz,3H),1.33(s,9H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=172.7,169.9,147.9,137.3,132.8,132.4,129.42,139.34,129.31,128.9,127.4,127.2,127,122.1,113.50,113.47,112.34,112.29,112.24,83.5,57.3,54.6,28.34,28.30,28.2,19.8。
C23H24N2O3F6(MW=490.45)。
實(shí)施例60N-[N-(3,5-二甲氧基苯基)-D,L-丙氨?；鵠-(S)-2-氨基己酸甲酯-的合成根據(jù)通用方法E(用稀鹽酸洗滌，用乙酸乙酯萃取)，用N-(3,5-二甲氧基苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實(shí)施例H)和L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，制備為淡黃色油狀物的目標(biāo)化合物。經(jīng)tlc監(jiān)測(cè)該反應(yīng)(Rf=0.3，用30％乙酸乙酯/己烷展開)。
NMR數(shù)據(jù)如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.6-0.9(在0.72和0.82處有兩個(gè)三峰，J=7Hz,3H),1.0-1.9(m,9H),3.6-3.7(在3.60、3.65、3.66和3.67處有四個(gè)單峰，10H),3.7-3.8(m,1H),4.6-4.7(m,1H),5.7-5.95(m,3H),7.1-7.3(m,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=14.21,14.35,19.8,20.0,22.69,22.74,27.8,28.0,32.20,32.45,52.18,52.57,52.65,52.78,55.31,55.52,55.59,55.63,91.6,91.8,92.86,93.24,149.02,149.27,162.11,162.18,173.02,173.44,174.47,174.82。
C18H28N2O5(MW=352.43)。
實(shí)施例61β-淀粉狀蛋白產(chǎn)生的抑制劑的檢測(cè)的細(xì)胞篩選在具有Swedish突變的細(xì)胞系中測(cè)定上述多種式Ⅰ化合物，以評(píng)價(jià)它們抑制β-淀粉狀蛋白產(chǎn)生的能力。該篩選測(cè)定使用細(xì)胞(K293=人腎細(xì)胞系)，可以根據(jù)國(guó)際專利公布號(hào)94/105698和Citron等11所述的方法，用淀粉狀蛋白前體蛋白751(APP751)基因?qū)υ摷?xì)胞系進(jìn)行穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，所述前體蛋白具有雙突變，即由Lys651Met652突變?yōu)锳sn651Leu652(APP751編號(hào))。該突變通常被稱為Swedish突變，將稱為“293 751 SWE”的細(xì)胞以每孔1.5-2.5×104細(xì)胞的濃度加至Coming 96-孔培養(yǎng)板的各孔(含有購(gòu)自Sigma,St.Louis,MO的Dulbecco氏極限必需培養(yǎng)基+10％胎牛血清)中。為了在測(cè)定的線性范圍內(nèi)(約0.2-2.5ng/ml)獲得β-淀粉狀蛋白的ELISA結(jié)果，細(xì)胞的數(shù)目是很重要的。
于37℃、在用10％二氧化碳平衡的孵箱內(nèi)孵育過夜后，去除培養(yǎng)基，每孔加入200μl含有式Ⅰ化合物(藥物)的培養(yǎng)基替代進(jìn)行兩個(gè)小時(shí)的預(yù)處理，并如前孵育細(xì)胞。在100％的DMSO中制備藥物儲(chǔ)備液，使在處理時(shí)所用的藥物終濃度中，二甲基亞砜的濃度不超過0.5％，事實(shí)上通常為0.1％。
在預(yù)處理結(jié)束后，再次去除培養(yǎng)基，用含有藥物的新鮮培養(yǎng)基代替，將細(xì)胞再孵育兩個(gè)小時(shí)。處理后，于室溫、1200rpm，將培養(yǎng)板在Beckman GPR上離心5分鐘，以從條件培養(yǎng)基中沉淀細(xì)胞碎片。根據(jù)國(guó)際專利公布號(hào)94/105698所述方法，從各孔中取100μl條件培養(yǎng)基或其適當(dāng)?shù)南♂屢?，轉(zhuǎn)移至用抗體266[P.Seubert,Nature(1992)359:325-327]預(yù)包被的ELISA培養(yǎng)板上，該抗體為β-淀粉樣肽的氨基酸13-28的抗體，將上述培養(yǎng)板于4℃儲(chǔ)存過夜。在第二天，用標(biāo)記抗體6C6[P.Seubert,Nature(1992)359:325-327]進(jìn)行ELISA測(cè)定，以檢測(cè)β-淀粉樣肽產(chǎn)生的量，該抗體為抗β-淀粉樣肽氨基酸1-16的抗體。
根據(jù)Hansen等12方法的改良方法，測(cè)定化合物的細(xì)胞毒效應(yīng)。向組織培養(yǎng)板中的殘留細(xì)胞中加入25μl的3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑鎓溴化物(MTT)(購(gòu)自Sigma,St.Louis,MO)儲(chǔ)備液(5mg/ml)，至終濃度為1mg/ml。于37℃，將細(xì)胞孵育1小時(shí)，加入等體積的MTT裂解緩沖液(20％w/v十二烷基硫酸鈉的50％二甲基甲酰胺溶液，pH4.7)終止細(xì)胞活性。于室溫振搖過夜以獲得完全萃取。在Molecular Device’s UVmax微量滴定板讀板儀上測(cè)定OD562nm和OD650nm的差異，作為細(xì)胞生存率的指標(biāo)。
將β-淀粉樣肽ELISA的結(jié)果擬合為標(biāo)準(zhǔn)曲線，并以ng/ml的β-淀粉樣肽表示。為進(jìn)行細(xì)胞毒性的歸一化，將這些結(jié)果除以MTT的結(jié)果，并以不含藥物的對(duì)照結(jié)果的百分比表示。所有的結(jié)果為至少六個(gè)重復(fù)測(cè)定的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差。
用該測(cè)定檢測(cè)受試化合物在細(xì)胞中對(duì)β-淀粉樣肽產(chǎn)生的抑制活性。該測(cè)定的結(jié)果證明與對(duì)照相比，實(shí)施例1-60中的每個(gè)化合物均對(duì)β-淀粉樣肽產(chǎn)生至少有30％的抑制。
實(shí)施例62β-淀粉狀蛋白釋放和/或合成的體內(nèi)抑制該實(shí)施例說明如何檢測(cè)本發(fā)明的化合物對(duì)β-淀粉狀蛋白釋放和/或合成的體內(nèi)抑制。在這些實(shí)驗(yàn)中，使用3-5月齡的PDAPP小鼠[Games等(1995)Nature 373:523-527]。根據(jù)待實(shí)驗(yàn)的化合物的不同，通常將化合物配制為5或10mg/ml的濃度。由于這些化合物的低的溶解性的因素，所以可以在各種溶媒中進(jìn)行配制，如玉米油(Safeway,South San Francisco,CA)；10％乙醇玉米油；2-羥丙基-β-環(huán)糊精(Research Biochemicals Intemational,Natick MA)以及羧甲基纖維素(Sigma Chemical Co.,St.Louis MO)。
用26號(hào)針皮下給小鼠藥物，3小時(shí)后，經(jīng)二氧化碳窒息使所述動(dòng)物安樂死，用1 cc 25G 5/8”結(jié)核菌素注射器/針(涂有0.5M EDTA溶液，pH8.0)進(jìn)行心臟穿剌取血。將血液置于含有EDTA的Becton-Dickinson真空(vacutainer)管中，于5℃、以1500×g旋轉(zhuǎn)15分鐘。然后取出小鼠腦，解剖出皮層和海馬，置于冰上。
1．腦測(cè)定用Kontes電動(dòng)研棒(Fisher,Pittsburgh PA)，將每個(gè)腦區(qū)域在10倍體積的冰冷的胍緩沖液(5.0M鹽酸胍，50mM Tris-HCl,pH8.0)中勻化，以制備用于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISAs)的海馬和皮層組織。于室溫下，將勻漿在旋轉(zhuǎn)臺(tái)上輕輕搖動(dòng)3-4小時(shí)，于-20℃儲(chǔ)存待進(jìn)行β-淀粉狀蛋白的定量。
用冰冷的酪蛋白緩沖液
以1∶10稀釋腦勻漿，因此胍的終濃度降低為0.5M，然后于4℃、16,000×g離心20分鐘。制備β-淀粉狀蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(1-40或1-42氨基酸)，使終組成含有0.5M胍和0.1％牛血清白蛋白(BSA)。
總的β-淀粉狀蛋白夾層ELISA含有β-淀粉狀蛋白的兩個(gè)單克隆抗體(mAb)，該夾層ELISA可定量β-淀粉狀蛋白(aa1-40)和β-淀粉狀蛋白(aa1-42)。捕捉抗體266[P.Seubert,Nature(1992)359:325-327]為β-淀粉狀蛋白的氨基酸13-28的特異抗體。生物素化的抗體3D6[Johnson-Wood等，PNAS USA(1997)94:1550-1555]為β-淀粉狀蛋白的氨基酸1-5的特異抗體，該抗體在測(cè)定中用作報(bào)告抗體。3D6生物素化的方法根據(jù)生產(chǎn)商[pierce,Rockford IL]關(guān)于免疫球蛋白的NHS-生物素標(biāo)記的方法，但是用100mM碳酸氫鈉的pH為8.5的緩沖液。3D6抗體不能識(shí)別分泌的淀粉狀蛋白的前體蛋白(APP)或全長(zhǎng)的APP，但是可以檢測(cè)具有氨基末端天冬氨酸的β-淀粉狀蛋白類。該測(cè)定的敏感度下限約為50pg/ml(11pM)，在濃度高至1ng/ml時(shí)對(duì)內(nèi)源性β-淀粉樣肽不顯示交叉反應(yīng)性。
定量β-淀粉狀蛋白水平的夾層ELISA構(gòu)型使用作為捕捉抗體的mAb 21F12[Johnson-Wood等，PNAS USA(1997)94:1550-1555](可以識(shí)別β-淀粉狀蛋白的氨基酸33-42)。在該測(cè)定中使用的生物素化的3D6也是報(bào)告抗體，其敏感度下限約為125pg/ml(28pM)。
于室溫下，將266和21F12捕捉mABs在96孔免疫培養(yǎng)板(Costar,Cambidge MA)中以10μg/mL包被過夜。然后吸出培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基，于室溫下，用0.25％人血清白蛋白的PBS緩沖液封閉至少1小時(shí)，然后于4℃、干燥下儲(chǔ)存待用。將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加至培養(yǎng)板中，于4℃孵育過夜。在測(cè)定的每個(gè)步驟之間均用洗滌緩沖液將所述培養(yǎng)板洗滌至少3次。于室溫下，將生物素化的3D6(用酪蛋白孵育緩沖液(0.25％酪蛋白，PBS,0.05％Tween 20,pH7.4)稀釋至0.5μg/ml)在各孔中孵育1小時(shí)。于室溫下，將用酪蛋白孵育緩沖液以1∶4000稀釋的抗生物素蛋白-HRP(載體，Burlingame CA)加至各孔中1小時(shí)。加入生色底物SloW TMB-ELISA(Pierce,CambridgeMA)，使其反應(yīng)15分鐘，然后加入2N硫酸終止酶反應(yīng)。用MolecularDevices Vmax(Molecular Devices,Menlo Park CA)，于450nm和650nm處測(cè)定吸收度的差異，以對(duì)反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行定量。
2．血液測(cè)定將EDTA血漿在樣品稀釋液(0.2g/L磷酸鈉一水合物(一元堿)、2.1 6g/L磷酸鈉七水合物(二元堿)、0.5g/L硫柳汞，8.5g/L氯化鈉，0.5ml Triton X-405,6.0g/L不含球蛋白的牛血清白蛋白和水)中進(jìn)行1∶1稀釋。根據(jù)上述腦測(cè)定中所述方法，用總β-淀粉狀蛋白測(cè)定(266捕捉/3D6報(bào)告抗體)測(cè)定樣品稀釋液中的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，但是用樣品稀釋液代替所述的酪蛋白稀釋液。
從上述的描述中可以看出，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對(duì)組合物和方法進(jìn)行各種修改和改變。所有此類修改均在所附的權(quán)利要求包括的范圍內(nèi)。
序列表(1)一般資料(ⅰ)申請(qǐng)人ATHENA NEUROSCIENCES,INC.
ELILILLY&COMPANYJAMES E.AUDIABEVERLY K.FOLMERVARCHESE JOHNLEE H.LATIMERJEFFREY S.NISSENWARREN J.PORTEREUGENE D.PHORSETTJING WU(ⅱ)發(fā)明名稱N-(芳基/雜芳基)氨基酸衍生物、包括這些衍生物的藥用組合物以及用這些化合物抑制β-淀粉樣肽釋放和/或其合成的方法(ⅲ)序列數(shù)1(ⅳ)通信地址
(A)收信人Burns,Doane,Swecker&Mathis,LLP(B)街道P.O.Box 1404(C)城市Alexandria(D)州Virginia(E)國(guó)家美國(guó)(F)郵政編碼22313-1404(ⅴ)計(jì)算機(jī)可讀形式(A)媒體類型軟盤(B)計(jì)算機(jī)IBM兼容機(jī)(C)操作系統(tǒng)PC-DOS/MS-DOS(D)軟件PatentIn Release#1.0，版本1.30(ⅵ)當(dāng)前申請(qǐng)數(shù)據(jù)(A)申請(qǐng)?zhí)栁搭C發(fā)(B)提交日期Unassigned(C)分類(ⅶ)在先申請(qǐng)數(shù)據(jù)(A)申請(qǐng)?zhí)朥S 08/755,334(B)提交日期1996年11月22日(ⅷ)代理律師/代理人資料(A)姓名Swiss,Gerald F.
(B)注冊(cè)號(hào)30,113(C)參考/檔案號(hào)002010-057(ⅸ)電訊資料
(A)電話650-854-7400(B)傳真650-854-8275(2)SEQ ID NO:1的信息(ⅰ)序列特征(A)長(zhǎng)度43個(gè)氨基酸(B)類型肽(D)拓?fù)鋵W(xué)線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述SEQ ID NO 1Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr Glu Val His His1 5 10Gln Lys Leu Val Phe Phe Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys15 20 25Gly Ala Ile Ile Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val Ile Ala30 35 40Thr
權(quán)利要求
1．在細(xì)胞中抑制β-淀粉樣多肽釋放和/或其合成的方法，該方法包括給予此類細(xì)胞抑制細(xì)胞內(nèi)β-淀粉樣多肽釋放和/或其合成有效量的化合物或化合物的混合物，其中所述化合物由式Ⅰ代表
Ⅰ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自?；⑼榛?、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、鹵代、氫、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環(huán)稠合形成雜芳基或雜環(huán)，Rb和Rb’獨(dú)立選自氫、鹵代、硝基、氰基、三鹵代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當(dāng)Rc為氫時(shí)，那么Rb和Rb’或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個(gè)選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、鹵代、氰基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個(gè)選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、鹵代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團(tuán)連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個(gè)碳原子的烷基、1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基、1-4個(gè)碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環(huán)；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-鹵代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環(huán)，(i)-NR’R”，其中R’和R”獨(dú)立選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)，以及R’和R”結(jié)合形成具有2-8個(gè)碳原子、任選還含有1-2個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子的環(huán)基團(tuán)，并任選被一個(gè)或多個(gè)烷基或烷氧基取代，和當(dāng)R3含有至少3個(gè)碳原子時(shí)，X也可以為-CR4R4Y’，其中每個(gè)R4獨(dú)立選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，Y’選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，前提為當(dāng)R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的芐基時(shí)，那么X不為-C(O)OCH3。
2．在有AD發(fā)病危險(xiǎn)的病人中預(yù)防AD起病的方法，該方法包括給予所述病人包括藥用惰性載體以及有效量的式Ⅰ化合物或化合物的混合物的藥用組合物
Ⅰ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自?；⑼榛?、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、鹵代、氫、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環(huán)稠合形成雜芳基或雜環(huán)，Rb和Rb’獨(dú)立選自氫、鹵代、硝基、氰基、三鹵代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當(dāng)Rc為氫時(shí)，那么Rb和Rb’或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個(gè)選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、鹵代、氰基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個(gè)選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、鹵代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團(tuán)連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個(gè)碳原子的烷基、1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基、1-4個(gè)碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環(huán)；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-鹵代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環(huán)，(i)-NR’R”，其中R’和R”獨(dú)立選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)，以及R’和R”結(jié)合形成具有2-8個(gè)碳原子、任選還含有1-2個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子的環(huán)基團(tuán)，并任選被一個(gè)或多個(gè)烷基或烷氧基取代，和當(dāng)R3含有至少3個(gè)碳原子時(shí)，X也可以為-CR4R4Y’，其中每個(gè)R4獨(dú)立選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，Y’選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，前提為當(dāng)R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的芐基時(shí)，那么X不為-C(O)OCH3。
3．治療患有AD的病人以抑制該病人病情進(jìn)一步惡化的方法，該方法包括給予所述病人包括藥用惰性載體以及有效量的式Ⅰ化合物或化合物的混合物的藥用組合物
Ⅰ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自?；?、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、鹵代、氫、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環(huán)稠合形成雜芳基或雜環(huán)，Rb和Rb’獨(dú)立選自氫、鹵代、硝基、氰基、三鹵代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當(dāng)Rc為氫時(shí)，那么Rb和Rb’或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個(gè)選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、鹵代、氰基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個(gè)選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、鹵代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與連接-NH基團(tuán)的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個(gè)碳原子的烷基、1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基、1-4個(gè)碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環(huán)；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-鹵代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環(huán)，(i)-NR’R”，其中R’和R”獨(dú)立選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)，以及R’和R”結(jié)合形成具有2-8個(gè)碳原子、任選還含有1-2個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子的環(huán)基團(tuán)，并任選被一個(gè)或多個(gè)烷基或烷氧基取代，和當(dāng)R3含有至少3個(gè)碳原子時(shí)，X也可以為-CR4R4Y’，其中每個(gè)R4獨(dú)立選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，Y’選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，前提為當(dāng)R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的芐基時(shí)，那么X不為-C(O)OCH3。
4．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中R1為苯基、2-萘基、喹啉-3-基、苯并噻唑-6-基和5-吲哚基。
5．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中R1為下式的取代的苯基
其中Rc選自酰基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、鹵代、氫、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環(huán)稠合形成雜芳基或雜環(huán)，Rb和Rb’獨(dú)立選自氫、鹵代、硝基、氰基、三鹵代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當(dāng)Rc為氫時(shí)，那么Rb和Rb’或者都為氫或者都為不是氫的取代基。
6．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中R1為在4、5、6、7和/或8位被1-5個(gè)選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、鹵代、氰基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基。
7．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中R1為含有1-3個(gè)選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、鹵代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與連接-NH基團(tuán)的雜芳基不是鄰位。
8．權(quán)利要求7的方法，其中R1為4-取代的、3,5-二取代的或3,4-二取代的苯基。
9．權(quán)利要求8的方法，其中R1為3,5-二取代的苯基。
10．權(quán)利要求9的方法，其中所述3,5-二取代的苯基選自3,5-二氯苯基、3,5-二氟苯基、3,5-二(三氟甲基)苯基和3,5-二甲氧基苯基。
11．權(quán)利要求8的方法，其中R1為3,4-二取代的苯基。
12．權(quán)利要求11的方法，其中所述3,4-二取代的苯基選自3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、3-(三氟甲基)-4-氯苯基、3-氯-4-氰基苯基、3-氯-4-碘苯基和3,4-亞甲基二氧基苯基。
13．權(quán)利要求8的方法，其中R1為4-取代的苯基。
14．權(quán)利要求13的方法，其中所述4-取代的苯基選自4-疊氮基苯基、4-溴代苯基、4-氯代苯基、4-氰基苯基、4-乙基苯基、4-氟代苯基、4-碘代苯基、4-(苯基羰基)苯基和4-(1-乙氧基)乙基苯基。
15．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中R1為2-甲基喹啉-6-基。
16．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中R2選自1-4個(gè)碳原子的烷基、1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基、1-4個(gè)碳原子的烷基硫代烷氧基和芳基。
17．權(quán)利要求16的方法，其中R2選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、-CH2CH2SCH3和苯基。
18．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中R3為烷基。
19．權(quán)利要求18的方法，其中所述烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和仲丁基。
20．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中R3為取代的烷基。
21．權(quán)利要求20的方法，其中所述取代的烷基選自α-羥基乙基、-CH2-環(huán)己基、芐基、對(duì)-羥基芐基、3-碘代-4-羥基芐基、3,5-二碘代-4-羥基芐基、-CH2-吲哚-3-基、-(CH2)4-NH-BOC、-(CH2)4-NH2、-CH2-(1-N-芐基-咪唑-4-基)、-CH2-咪唑-4-基、-CH2CH2SCH3、-(CH2)4NHC(O)(CH2)3CH3和-(CH2)yC(O)OR5，其中y為1或2,R5氫、甲基或叔丁基。
22．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中X為-C(O)Y，其中Y選自烷氧基和硫代烷氧基。
23．權(quán)利要求22的方法，其中Y為選自下列的烷氧基甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基和叔丁氧基。
24．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中X為-C(O)Y,Y為-NR’R”，其中R’和R”獨(dú)立選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)，以及R’和R”結(jié)合形成具有2-8個(gè)碳原子、任選還含有1-2個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子的環(huán)基團(tuán)，并任選被一個(gè)或多個(gè)烷基或烷氧基取代。
25．權(quán)利要求24的方法，其中Y選自氨基(-NH2)、N-(異丁基)氨基、N-甲氨基、N,N-二甲氨基和N-芐氨基。
26．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中X為-CH2OH。
27．權(quán)利要求1、2或3的方法，其中所述式Ⅰ化合物選自下列化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸N-異丁酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]蘇氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸乙酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]纈氨酸叔丁酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酰胺N-(3,4-二氯苯基)丙氨酸N-(1-羥基-3-甲基-2-丁基)酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]纈氨酸N,N-二甲基酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸N-甲基酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠異亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠色氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠天冬氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-N-BOC-賴氨酸甲酯N-[N-苯并噻唑-6-基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-1-芐基組氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠谷氨酸γ-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠亮氨酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠谷氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-(3,5-二碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-(3-碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)甘氨?；鵠-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-Nε-(己?；?賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠苯丙氨酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N-甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-β-環(huán)己基丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基己酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N,N-二甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]甲硫氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N,N-二甲基)-酰胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酰胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N-甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠組氨酸甲酯N-[N-(喹啉-3-基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-苯并噻唑-2-基)-L-丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-S-2-氨基己酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N-芐基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酰基]-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)苯基甘氨酰基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己醇N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二-(三氟甲基)苯基)-L-丙氨?；鵠-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二甲氧基苯基)-L-丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯。
28．含有藥用惰性載體和藥學(xué)上有效量的式Ⅰ化合物的藥用組合物
Ⅰ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自?；⑼榛?、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、鹵代、氫、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環(huán)稠合形成雜芳基或雜環(huán)，Rb和Rb’獨(dú)立選自氫、鹵代、硝基、氰基、三鹵代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當(dāng)Rc為氫時(shí)，那么Rb和Rb’或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個(gè)選自下列取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、鹵代、氰基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個(gè)選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、鹵代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團(tuán)連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個(gè)碳原子的烷基、1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基、1-4個(gè)碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環(huán)；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-鹵代烷基、α-重氮烷基α-OC(O)或烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環(huán)，(i)-NR’R”，其中R’和R”獨(dú)立選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)，以及R’和R”結(jié)合形成具有2-8個(gè)碳原子、任選還含有1-2個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子的環(huán)基團(tuán)，并任選被一個(gè)或多個(gè)烷基或烷氧基取代，和當(dāng)R3含有至少3個(gè)碳原子時(shí)，X也可以為-CR4R4Y’，其中每個(gè)R4獨(dú)立選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，Y’選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，前提為當(dāng)R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的芐基時(shí)，那么X不為-C(O)OCH3。
29．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中R1為苯基、2-萘基、喹啉-3-基、苯并噻唑-6-基和5-吲哚基。
30．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中R1為下式的取代的苯基
其中Rc選自?；⑼榛?、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、鹵代、氫、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環(huán)稠合形成雜芳基或雜環(huán)，Rb和Rb’獨(dú)立選自氫、鹵代、硝基、氰基、三鹵代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當(dāng)Rc為氫時(shí)，那么Rb和Rb’或者都為氫或者都為不是氫的取代基。
31．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中R1為在4、5、6、7和/或8位被1-5個(gè)選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、鹵代、氰基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基。
32．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中R1為含有1-3個(gè)選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、鹵代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與連接-NH基團(tuán)的雜芳基不是鄰位。
33．權(quán)利要求30的藥用組合物，其中R1為4-取代的、3,5-二取代的或3,4-二取代的苯基。
34．權(quán)利要求31的藥用組合物，其中R1為3,5-二取代的苯基。
35．權(quán)利要求32的藥用組合物，其中所述3,5-二取代的苯基選自3,5-二氯苯基、3,5-二氟苯基、3,5-二(三氟甲基)苯基和3,5-二甲氧基苯基。
36．權(quán)利要求31的藥用組合物，其中R1為3,4-二取代的苯基。
37．權(quán)利要求34的藥用組合物，其中所述3,4-二取代的苯基選自3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、3-(三氟甲基)-4-氯代苯基、3-氯-4-氰基苯基、3-氯-4-碘代苯基和3,4-亞甲基二氧基苯基。
38．權(quán)利要求31的藥用組合物，其中R1為4-取代的苯基。
39．權(quán)利要求36的藥用組合物，其中所述4-取代的苯基選自4-疊氮基苯基、4-溴代苯基、4-氯代苯基、4-氰基苯基、4-乙基苯基、4-氟代苯基、4-碘代苯基、4-(苯基羰基)苯基和4-(1-乙氧基)乙基苯基。
40．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中R1為2-甲基喹啉-6-基。
41．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中R2選自1-4個(gè)碳原子的烷基、1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基、1-4個(gè)碳原子的烷基硫代烷氧基和芳基。
42．權(quán)利要求39的藥用組合物，其中R2選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、-CH2CH2SCH3和苯基。
43．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中R3為烷基。
44．權(quán)利要求41的藥用組合物，其中所述烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和仲丁基。
45．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中R3為取代的烷基。
46．權(quán)利要求43的藥用組合物，其中所述取代的烷基選自α-羥基乙基、-CH2-環(huán)己基、芐基、對(duì)-羥基芐基、3-碘代-4-羥基芐基、3,5-二碘代-4-羥基芐基、-CH2-吲哚-3-基、-(CH2)4-NH-BOC、-(CH2)4-NH2、-CH2-(1-N-芐基-咪唑-4-基)、-CH2-咪唑-4-基、-CH2CH2SCH3、-(CH2)4NHC(O)(CH2)3CH3和-(CH2)yC(O)OR5，其中y為1或2,R5為氫、甲基或叔丁基。
47．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中X為-C(O)Y，其中Y選自烷氧基和硫代烷氧基。
48．權(quán)利要求45的藥用組合物，其中Y為選自下列的烷氧基甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基和叔丁氧基。
49．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中X為-C(O)Y,Y為-NR’R”，其中R’和R”獨(dú)立選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)，以及R’和R”結(jié)合形成具有2-8個(gè)碳原子、任選還含有1-2個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子的環(huán)基團(tuán)，并任選被一個(gè)或多個(gè)烷基或烷氧基取代。
50．權(quán)利要求47的藥用組合物，其中Y選自氨基(-NH2)、N-(異丁基)氨基、N-甲氨基、N,N-二甲氨基和N-芐氨基。
51．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中X為-CH2OH。
52．權(quán)利要求26的藥用組合物，其中所述式Ⅰ化合物選自下列化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸N-異丁酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]蘇氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸乙酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸叔丁酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]纈氨酰胺N-(3,4-二氯苯基)丙氨酸N-(1-羥基-3-甲基-2-丁基)酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸N,N-二甲基酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]纈氨酸N-甲基酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠異亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]色氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠天冬氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-N-BOC-賴氨酸甲酯N-[N-苯并噻唑-6-基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-1-芐基組氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠谷氨酸γ-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠亮氨酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠谷氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-(3,5-二碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-(3-碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)甘氨酰基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-Nε-(己酰基)賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠苯丙氨酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基己-(N-甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-β-環(huán)己基丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基己-(N,N-二甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠甲硫氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N,N-二甲基)-酰胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基己酰胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N-甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠組氨酸甲酯N-[N-(喹啉-3-基)丙氨酰基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-苯并噻唑-2-基)-L-丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨酰基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-S-2-氨基己酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基己-(N-芐基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)苯基甘氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基己醇N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二-(三氟甲基)苯基)-L-丙氨?；鵠-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二甲氧基苯基)-L-丙氨酰基]-2-氨基己酸甲酯。
53．式Ⅲ化合物
Ⅲ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自?；?、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、鹵代、氫、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環(huán)稠合形成雜芳基或雜環(huán)，Rb和Rb’獨(dú)立選自氫、鹵代、硝基、氰基、三鹵代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當(dāng)Rc為氫時(shí)，那么Rb和Rb’或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個(gè)選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、鹵代、氰基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個(gè)選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、鹵代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團(tuán)連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個(gè)碳原子的烷基、1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基、1-4個(gè)碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環(huán)；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-鹵代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環(huán)，(i)-NR’R”，其中R’和R”獨(dú)立選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)，以及R’和R”結(jié)合形成具有2-8個(gè)碳原子、任選還含有1-2個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子的環(huán)基團(tuán)，并任選被一個(gè)或多個(gè)烷基或烷氧基取代，和當(dāng)R3含有至少3個(gè)碳原子時(shí)，X也可以為-CR4R4Y’，其中每個(gè)R4獨(dú)立選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，Y’選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)，前提為當(dāng)R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的芐基時(shí)，那么X不為-C(O)OCH3，另外的前提為不包括下列已知的化合物當(dāng)R1為苯基，R2為甲基，X為-C(O)NHΦ時(shí)，那么R3不是甲基、異丙基、異丁基；和當(dāng)R1為苯基，R2為甲基，X為-C(O)NH2時(shí)，那么R3不是芐基。
54．權(quán)利要求51的化合物，其中R1為苯基、2-萘基、喹啉-3-基、苯并噻唑-6-基和5-吲哚基。
55．權(quán)利要求51的化合物，其中R1為下式的取代的苯基
其中Rc選自?；⑼榛?、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、鹵代、氫、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環(huán)稠合形成雜芳基或雜環(huán)，Rb和Rb’獨(dú)立選自氫、鹵代、硝基、氰基、三鹵代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當(dāng)Rc為氫時(shí)，那么Rb和Rb’或者都為氫或者都為不是氫的取代基。
56．權(quán)利要求51的化合物，其中R1為在4、5、6、7和/或8位被1-5個(gè)選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、鹵代、氰基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基。
57．權(quán)利要求51的化合物，其中R1為含有1-3個(gè)選自下列的取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、鹵代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與連接-NH基團(tuán)的雜芳基不是鄰位。
58．權(quán)利要求55的化合物，其中R1為4-取代的、3,5-二取代的或3,4-二取代的苯基。
59．權(quán)利要求56的化合物，其中R1為3,5-二取代的苯基。
60．權(quán)利要求57的化合物，其中所述3,5-二取代的苯基選自3,5-二氯苯基、3,5-二氟苯基、3,5-二(三氟甲基)苯基和3,5-二甲氧基苯基。
61．權(quán)利要求56的化合物，其中R1為3,4-二取代的苯基。
62．權(quán)利要求59的化合物，其中所述3,4-二取代的苯基選自3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、3-(三氟甲基)-4-氯代苯基、3-氯-4-氰基苯基、3-氯-4-碘代苯基和3,4-亞甲基二氧基苯基。
63．權(quán)利要求56的化合物，其中R1為4-取代的苯基。
64．權(quán)利要求61的化合物，其中所述4-取代的苯基選自4-疊氮基苯基、4-溴代苯基、4-氯代苯基、4-氰基苯基、4-乙基苯基、4-氟代苯基、4-碘代苯基、4-(苯基羰基)苯基和4-(1-乙氧基)乙基苯基。
65．權(quán)利要求51的化合物，其中R1為2-甲基喹啉-6-基。
66．權(quán)利要求51的化合物，其中R2選自1-4個(gè)碳原子的烷基、1-4個(gè)碳原子的烷基烷氧基、1-4個(gè)碳原子的烷基硫代烷氧基和芳基。
67．權(quán)利要求64的化合物，其中R2選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、-CH2CH2SCH3和苯基。
68．權(quán)利要求51的化合物，其中R3為烷基。
69．權(quán)利要求66的化合物，其中所述烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和仲丁基。
70．權(quán)利要求51的化合物，其中R3為取代的烷基。
71．權(quán)利要求68的化合物，其中所述取代的烷基選自α-羥基乙基、-CH2-環(huán)己基、芐基、對(duì)-羥基芐基、3-碘代-4-羥基芐基、3,5-二碘代-4-羥基芐基、-CH2-吲哚-3-基、-(CH2)4-NH-BOC、-(CH2)4-NH2、-CH2-(1-N-芐基-咪唑-4-基)、-CH2-咪唑-4-基、-CH2CH2SCH3、-(CH2)4NHC(O)(CH2)3CH3和-(CH2)yC(O)OR5，其中y為1或2,R5為氫、甲基或叔丁基。
72．權(quán)利要求51的化合物，其中X為-C(O)Y，其中Y選自烷氧基和硫代烷氧基。
73．權(quán)利要求70的化合物，其中Y為選自下列的烷氧基甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基和叔丁氧基。
74．權(quán)利要求51的化合物，其中X為-C(O)Y,Y為-NR’R”，其中R’和R”獨(dú)立選自氫、烷基、取代的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)，以及R’和R”結(jié)合形成具有2-8個(gè)碳原子、任選還含有1-2個(gè)選自氧、硫和氮的雜原子的環(huán)基團(tuán)，并任選被一個(gè)或多個(gè)烷基或烷氧基取代。
75．權(quán)利要求72的化合物，其中Y選自氨基(-NH2)、N-(異丁基)氨基、N-甲氨基、N,N-二甲氨基和N-芐氨基。
76．權(quán)利要求51的化合物，其中X為-CH2OH。
77．權(quán)利要求51的化合物，其中所述式Ⅰ化合物選自下列化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]纈氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸N-異丁酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠蘇氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸乙酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸叔丁酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]纈氨酰胺N-(3,4-二氯苯基)丙氨酸N-(1-羥基-3-甲基-2-丁基)酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠纈氨酸N,N-二甲基酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]纈氨酸N-甲基酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠異亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠色氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠天冬氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-N-BOC-賴氨酸甲酯N-[N-苯并噻唑-6-基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-1-芐基組氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]谷氨酸γ-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠亮氨酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠谷氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-(3,5-二碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-(3-碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)甘氨酰基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-Nε-(己?；?賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]苯丙氨酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N-甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]-β-環(huán)己基丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N,N-二甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨酰基]甲硫氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N,N-二甲基)-酰胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨酰基]-2-氨基己酰胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N-甲基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠組氨酸甲酯N-[N-(喹啉-3-基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-苯并噻唑-2-基)-L-丙氨酰基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-S-2-氨基己酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己-(N-芐基)-酰胺N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨?；鵠-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)苯基甘氨?；鵠丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基己醇N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨?；鵠-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)-L-丙氨?；鵠-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二-(三氟甲基)苯基)-L-丙氨?；鵠-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二甲氧基苯基)-L-丙氨酰基]-2-氨基己酸甲酯。
全文摘要
公開可以抑制β－淀粉樣肽釋放和/或其合成并因此可以治療阿爾茨海默氏病的化合物。也公開含有可以抑制β－淀粉樣肽釋放和/或其合成的化合物的藥用組合物，以及用此藥用組合物預(yù)防和治療阿爾茨海默氏病的方法。
文檔編號(hào)A61P25/28GK1237978SQ97199776
公開日1999年12月8日 申請(qǐng)日期1997年11月20日 優(yōu)先權(quán)日1996年11月22日
發(fā)明者J·E·奧迪爾, B·K·福爾默, V·約翰, L·H·拉蒂默, J·S·尼森, W·J·波特, E·D·托爾瑟特, J·吳 申請(qǐng)人:伊蘭藥品公司, 伊萊利利公司