專利名稱：1,3－丙二醇衍生物的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一組包括2-氨基-1,3-丙二醇衍生物在內(nèi)的化合物的新用途。
適用于本發(fā)明的化合物是式Ⅰ所示化合物
其中，R1是任選被取代的含有12至22個(gè)碳原子的直鏈或支鏈碳鏈，它可以任選被一個(gè)任選取代的亞苯基間斷；和各R2、R3、R4和R5獨(dú)立地為H或低級(jí)烷基，所述化合物為游離形式或可藥用鹽的形式。
當(dāng)作為R1的碳鏈被取代時(shí)，優(yōu)選它被鹵素、硝基、氨基、羥基或羧基取代。當(dāng)該碳鏈被一個(gè)任選取代的亞苯基間斷時(shí)，優(yōu)選該碳鏈?zhǔn)俏慈〈兼?。?dāng)亞苯基部分被取代時(shí)，優(yōu)選它被鹵素、硝基、氨基、甲氧基、羥基或羧基取代。
這些化合物公開在EP-A1-627,406中，該文獻(xiàn)的相關(guān)內(nèi)容，尤其是與此類化合物有關(guān)的部分均在此引入作為參考。
優(yōu)選的式Ⅰ化合物是那些其中R1為含有13至20個(gè)碳原子的直鏈或支鏈，優(yōu)選直鏈的烷基并且該烷基可任選被硝基、鹵素、氨基、羥基或羧基取代的化合物，更優(yōu)選的化合物是那些其中R1為苯基烷基且該苯基烷基被任選由鹵素取代的直鏈或支鏈C6-14烷基鏈所取代并且所述烷基部分是任選被羥基取代的C1-6烷基的化合物。更可取的是，R1是苯基-C1-6烷基并且該苯基上取代有直鏈或支鏈，優(yōu)選直鏈的C6-14烷基鏈。所述C6-14烷基鏈可處于該苯基的鄰位、間位或?qū)ξ?，?yōu)選位于對(duì)位。
各R2至R5優(yōu)選是H。
式(Ⅰ)化合物的可藥用鹽的例子包括與無機(jī)酸形成的鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽和硫酸鹽；與有機(jī)酸形成的鹽，例如乙酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、蘋果酸鹽、甲磺酸鹽和苯磺酸鹽；當(dāng)有羧基存在時(shí)，其與金屬，例如鈉、鉀、鈣和鋁所形成的鹽，與胺，例如三乙胺所成的鹽，與二價(jià)氨基酸，例如賴氨酸所成的鹽。本發(fā)明所述化合物及鹽包括水合物和溶劑化物形式。
當(dāng)式Ⅰ化合物的分子內(nèi)含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心時(shí)，應(yīng)將本發(fā)明理解為包括各種旋光異構(gòu)體，也包括外消旋體、非對(duì)映異構(gòu)體及其混合物。
更優(yōu)選的式Ⅰ化合物是2-氨基-2-十四烷基-1,3-丙二醇和特別優(yōu)選的是2-氨基-2-[2-(4-辛基苯基)乙基]-1,3-丙二醇(此后稱作化合物A)，它們可以是鹽酸鹽形式。
基于在例如EP-A1-627,406中所觀測(cè)到的活性，發(fā)現(xiàn)式Ⅰ化合物在例如急性同種移植物排斥反應(yīng)的治療中用作例如免疫抑制劑。
肝臟、腎臟、肺和心臟的器官移植現(xiàn)已正式成為晚期器官疾病的治療方法。同種移植和異種移植均已被實(shí)現(xiàn)。然而，因?yàn)榇嬖陂L(zhǎng)期慢性排斥反應(yīng)的問題，器官移植術(shù)仍未能成為不可逆性器官疾病的永久解決方案。在手術(shù)后第一年的一些病案中，慢性排斥反應(yīng)是器官移植失敗的主要原因，它表現(xiàn)為進(jìn)行性和不可逆性的移植物機(jī)能障礙。慢性排斥反應(yīng)的臨床問題可以從移植存活時(shí)間明顯看出；約半數(shù)的腎臟同種移植在移植術(shù)后5年內(nèi)失敗，在心臟同種移植的患者中可觀察到類似結(jié)果。
慢性排斥反應(yīng)被認(rèn)為是一種多因性過程，其中不但對(duì)移植物的免疫反應(yīng)，而且移植器官內(nèi)的血管壁對(duì)損傷的反應(yīng)(“損傷應(yīng)答”(response-to-injury)反應(yīng))也發(fā)揮著作用。最壞預(yù)后時(shí)的慢性排斥反應(yīng)是一種動(dòng)脈硬化樣變化，也稱作移植血管病、移植物血管疾病、移植物動(dòng)脈粥樣硬化、移植物冠狀疾病等。這種血管損害的特征是平滑肌細(xì)胞在生長(zhǎng)因子的影響下發(fā)生遷移和增殖，其中這些因子由內(nèi)皮合成。也可能通過其中的宿主抗體或抗原-抗體復(fù)合物所誘發(fā)的內(nèi)皮反復(fù)損傷，通過內(nèi)膜增殖和加厚，平滑肌細(xì)胞的肥大修復(fù)而發(fā)生，并且最終使腔體逐漸閉塞。所謂的非免疫因素如高血壓、高脂血、血膽甾醇過多等也起作用。
因?yàn)闆]有已知有效的治療或預(yù)防方法，慢性排斥反應(yīng)看來既無情亦失控。因此，始終存在對(duì)有效預(yù)防、控制或逆轉(zhuǎn)慢性移植物血管疾病指征的處理方法的需求。
根據(jù)本發(fā)明，現(xiàn)已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物可以抑制移植物血管疾病，尤其是預(yù)防或治療移植器官中的慢性排斥反應(yīng)。
此外還發(fā)現(xiàn)，游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物抑制異種移植排斥反應(yīng)。
根據(jù)本發(fā)明的特殊發(fā)現(xiàn)，提供了1.1．一種預(yù)防或治療器官或組織同種移植或異種移植接受者中的慢性排斥癥狀的方法，所述預(yù)防或治療例如是避免、減輕或限制慢性排斥反應(yīng)，所述同種-或異種-移植例如是心臟、肺、心肺聯(lián)合、肝臟、腎臟或胰腺的移植，該方法包括給所述接受者施用治療有效量的游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物的步驟；1.2．一種預(yù)防或治療器官或組織同種-或異種-移植接受者中的移植物血管疾病的方法，所述移植物血管疾病例如是移植血管病、動(dòng)脈硬化或動(dòng)脈粥樣硬化，所述同種-或異種-移植例如是心臟、肺、心肺聯(lián)合、肝臟、腎臟或胰腺的移植，該方法包括給所述接受者施用治療有效量的游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物的步驟。
在其它一系列特定或變化的實(shí)施例中，本發(fā)明也提供了2．一種預(yù)防或控制異種移植接受者的急性排斥反應(yīng)的方法，所述異種移植接受者例如是接受心臟、肺、合并性心肺、腎臟、肝臟、骨髓、胰腺腸(pancreatic bowel)、皮膚或角膜異種移植的患者，該方法包括給所述接受者施用治療有效量的游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物。
作為另外的變化，本發(fā)明還提供了3．游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物在上述1或2所定義任一方法中的應(yīng)用；或4．游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物在制備用于上述1或2所定義任一方法的藥物組合物中的應(yīng)用；或5．一種用于上述1或2所定義任一方法的藥物組合物，該藥物組合物包含游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物以及一種或多種可藥用稀釋劑或載體。
游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物在慢性排斥反應(yīng)中的有效性以及在治療前面具體指出的疾病和癥狀中的有效性可在動(dòng)物試驗(yàn)(例如按照下列方法)中以及在臨床科學(xué)(例如對(duì)移植的器官或組織進(jìn)行定時(shí)活組織檢查對(duì)照以及在心臟移植術(shù)的情況中進(jìn)行超聲掃描)中得到證實(shí)。
A．移植物血管疾病的預(yù)防試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)采用重量在200至350g之間的近交大鼠品系DA(RT1a，供給體)和Lewis(RT11，同種移植物的接受者)。動(dòng)物在手術(shù)前后均可自由地獲取食物和水。頸動(dòng)脈移植術(shù)大鼠用異氟烷(Abbott)麻醉(4-5％誘導(dǎo)麻醉，1.5-2％維持麻醉)，并且在誘導(dǎo)后將300μg硫酸阿托品皮下注射。分割出左頸動(dòng)脈。將該動(dòng)脈在近側(cè)和遠(yuǎn)側(cè)夾住并且取出約7至10毫米的節(jié)段。開口用一個(gè)同種移植物橋接，并且該同種移植物接受了45分鐘的冷缺血處理。采用Ethilon10/o縫合線。最后用4/o縫合線將皮膚縫合。若需要，隨后可將Alzet滲透微泵(Alza Corp.Palo Alto,Calif.)皮下植入背部?jī)?nèi)(或者動(dòng)物被口服處理)。
使大鼠接受下列處理中的一種式Ⅰ化合物以0.1至10mg/kg的劑量單獨(dú)或與劑量為0.03、0.3或1mg/kg/天的環(huán)孢菌素A合并給藥8周，這些給藥既可利用皮下植入的Alzet滲透微泵也可口服給藥。在8周時(shí)將大鼠處死，用0.1M的磷酸鹽緩沖鹽水溶液(PBS,pH7.4)將頸動(dòng)脈灌注1分鐘，隨后用含2.5％戊二醛的磷酸鹽緩沖液(pH7.4)灌注15分鐘。隨后切除頸動(dòng)脈并用吉姆薩溶液染色以進(jìn)行組織學(xué)評(píng)估。
形態(tài)測(cè)定分析法包括測(cè)定血管中層及內(nèi)膜的厚度。形態(tài)學(xué)變化的定性分析包括以0-3的等級(jí)對(duì)單核細(xì)胞的外膜浸潤(rùn)和壞死(空泡變性、細(xì)胞肥大)、平滑肌細(xì)胞(SMC)核在血管中層中的數(shù)目(0-10、＜100、＞100和＞＞100個(gè)核分別是0、1、2和3的評(píng)分值)、SMC壞死(空泡變形和SMC肥大)和單核細(xì)胞的內(nèi)膜浸潤(rùn)(13)進(jìn)行評(píng)分。
在兩個(gè)試驗(yàn)中，式Ⅰ化合物，尤其是鹽酸鹽形式的化合物A極其顯著地抑制了移植物浸潤(rùn)和新內(nèi)膜形成。
B．體內(nèi)心臟異種移植術(shù)(倉鼠-至-大鼠)將倉鼠器官移植到大鼠體內(nèi)的異種移植物結(jié)合是所謂的難于一致的結(jié)合。大鼠不具有足夠量的先天性抗倉鼠抗體用于產(chǎn)生在一致性結(jié)合中所觀察到的即發(fā)型超急性排斥反應(yīng)。然而，未處理的接受者在3至4天內(nèi)出現(xiàn)排斥反應(yīng)，這是因?yàn)榭贵w與補(bǔ)體相結(jié)合。其在組織學(xué)方面表現(xiàn)為血管破壞、紅細(xì)胞的滲出和外滲以及多形核粒細(xì)胞的流入；也經(jīng)常出現(xiàn)出血和血栓形成的指征。一旦這種排斥反應(yīng)通過有效抑制抗體合成或補(bǔ)體失活加以克服，細(xì)胞排斥的出現(xiàn)可被推遲。這在組織學(xué)方面表現(xiàn)為單核細(xì)胞(淋巴細(xì)胞、類淋巴母細(xì)胞和巨噬細(xì)胞)流入和肌細(xì)胞實(shí)質(zhì)的破壞。對(duì)細(xì)胞排斥反應(yīng)的抑制需要比抑制同種移植更強(qiáng)的免疫抑制作用。先天無胸腺(rnu/rnu)大鼠缺乏一種有效的(胸腺依賴型)細(xì)胞免疫系統(tǒng)，而且一般不能對(duì)同種移植物產(chǎn)生排斥。此類動(dòng)物卻在3至4天內(nèi)對(duì)倉鼠異種移植產(chǎn)生與胸腺機(jī)能正常大鼠相似方式的排斥反應(yīng)，這表明大鼠中(至少一部分)抗倉鼠抗體的合成在非胸腺依賴型B-細(xì)胞反應(yīng)后出現(xiàn)。這些接受者可用于倉鼠異種移植，以由非胸腺依賴型抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)來評(píng)價(jià)排斥反應(yīng)。
在供給者和接受者的主動(dòng)脈之間以及供給者右肺動(dòng)脈與接受者下腔靜脈之間進(jìn)行吻合術(shù)，從而將Syrian倉鼠的心臟異位移植到雄性Lewis(RT1’)大鼠的腹腔內(nèi)。每天通過腹腔觸診對(duì)移植物進(jìn)行監(jiān)測(cè)。由心搏停止推斷出發(fā)生的排斥反應(yīng)。每周稱量動(dòng)物的體重。在本發(fā)明的一系列試驗(yàn)中，將試驗(yàn)終點(diǎn)設(shè)定為28天。將試驗(yàn)動(dòng)物作尸體解剖；取出移植物，對(duì)胸腺、脾、肝、精囊和睪丸的重量和組織學(xué)進(jìn)行評(píng)估。取血并處理血清，測(cè)定其溶細(xì)胞性抗倉鼠紅細(xì)胞抗體和溶血補(bǔ)體活性。
將化合物溶解在水中并以2ml/kg體重的體積每日口服給藥。式Ⅰ化合物，例如鹽酸鹽形式的化合物A以5至30mg/kg/天的方式給藥，結(jié)果是使移植物在無胸腺大鼠和胸腺機(jī)能正常大鼠中的存活期均被延長(zhǎng)。
實(shí)施本發(fā)明方法所需的日劑量將取決于所用的式Ⅰ化合物、宿主、給藥方式、被治療癥狀的嚴(yán)重程度以及任選聯(lián)合施用的免疫抑制藥物(例如CysA)。優(yōu)選的日劑量范圍是約0.03至2.5mg/kg/天，更優(yōu)選0.1至2.5mg/kg/天，例如以0.5至2.5mg/kg/天作為單劑量或分用劑量。適合患者的日劑量例如口服約1至100mg。口服給藥的適當(dāng)單位劑型含有約1至50mg，通常是5至30mg的活性組分(例如化合物A，如其鹽酸鹽形式)以及一種或多種可藥用稀釋劑或載體。此外，游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物也可以例如上述劑量一周給藥兩次或三次。
式Ⅰ化合物可通過常規(guī)途徑給藥，優(yōu)選腸內(nèi)給藥，例如口服，如以飲用溶液、片劑或膠囊的形式；或非腸道給藥，例如以可注射溶液或懸浮液的形式。含有式Ⅰ化合物的藥物組合物可以以常規(guī)方式制備，例如EP-A1-627,406所述。
式Ⅰ化合物既可作為單獨(dú)的活性組分給藥，也可與其他免疫調(diào)制方案所用藥物或其他抗炎劑合用。例如，可與式Ⅰ化合物合用的是環(huán)孢菌素類、雷怕霉素類或子囊霉素類或其免疫抑制類似物(例如環(huán)孢菌素A、環(huán)孢菌素G、FK-506、雷怕霉素、40-O-(2-羥基)乙基-雷怕霉素)等；皮質(zhì)類甾醇；環(huán)磷酰胺；硫唑嘌呤；甲氨蝶呤；布喹那(brequinar)；來氟米物；咪唑立賓；麥考酚酸；麥考酚酸莫非替克(mycophenolate mofetil)；15-脫氧精胍菌素；免疫抑制單克隆抗體，例如白細(xì)胞受體的單克隆抗體，例如對(duì)MHC、CD2、CD3、CD4、CD7、CD25、CD28、B7、CD40、CD45或CD58或其配體的單克隆抗體；或其他免疫調(diào)制化合物，例如CTLA4-Ig。
當(dāng)式Ⅰ化合物的給藥與其他免疫抑制/免疫調(diào)制治療相結(jié)合以用于預(yù)防或治療上述慢性排斥反應(yīng)時(shí)，合并給藥的免疫抑制劑或免疫調(diào)制化合物的劑量當(dāng)然應(yīng)取決于合用藥物的類型(例如是甾類還是環(huán)孢菌素)、所用的具體藥物、被治療的癥狀等。本發(fā)明還提供了下列方面的內(nèi)容6．一種如上所述的方法，該方法包括將治療有效量的式Ⅰ化合物與一種第二藥用物質(zhì)聯(lián)合給藥，例如同時(shí)或順序給藥，所述第二藥用物質(zhì)是免疫抑制劑或免疫調(diào)制藥物，例如上述藥物。
7．一種在上述1或2所定義任一方法中所使用的試劑盒或藥包，它包括游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物以及至少一種藥物組合物，該藥物組合物含有免疫抑制劑或免疫調(diào)制藥物。該試劑盒或藥包可以含有用藥說明書。制劑實(shí)施例軟膠囊式Ⅰ化合物 30mg例如化合物A聚乙二醇300 300mg多乙氧基醚8020mg總量350mg根據(jù)本發(fā)明應(yīng)用所需要的游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物劑量可被很好地耐受。例如，在大鼠和猴子中的急性LD50＞10mg/kg口服。
權(quán)利要求
1．式Ⅰ化合物在制備用于預(yù)防或治療器官或組織同種移植或異種移植接受者的慢性排斥反應(yīng)癥狀的藥物組合物中的應(yīng)用
其中，R1是任選被取代的含有12至22個(gè)碳原子的直鏈或支鏈碳鏈，它可以任選被一個(gè)任選取代的亞苯基間斷；和各R2、R3、R4和R5獨(dú)立地為H或低級(jí)烷基，所述化合物為游離形式或可藥用鹽的形式。
2．式Ⅰ化合物在制備用于預(yù)防或治療器官或組織同種移植或異種移植接受者的移植物血管疾病的藥物組合物中的用途
其中，R1是任選被取代的含有12至22個(gè)碳原子的直鏈或支鏈碳鏈，它可以任選被一個(gè)任選取代的亞苯基間斷；和各R2、R3、R4和R5獨(dú)立地為H或低級(jí)烷基，所述化合物為游離形式或可藥用鹽的形式。
3．式Ⅰ化合物在制備用于預(yù)防或控制異種移植接受者的急性排斥反應(yīng)的藥物組合物中的應(yīng)用
其中，R1是任選被取代的含有12至22個(gè)碳原子的直鏈或支鏈碳鏈，它可以任選被一個(gè)任選取代的亞苯基間斷；和各R2、R3、R4和R5獨(dú)立地為H或低級(jí)烷基，所述化合物為游離形式或可藥用鹽的形式。
4．如權(quán)利要求1所定義的游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物在預(yù)防或治療器官或組織同種移植或異種移植接受者的慢性排斥反應(yīng)癥狀中的應(yīng)用。
5．如權(quán)利要求1所定義的游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物在預(yù)防或控制異種移植接受者的急性排斥反應(yīng)中的應(yīng)用。
6．根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的用途，其中式Ⅰ化合物為游離形式或可藥用鹽形式的2-氨基-2-[2-(4-辛基苯基)乙基]-1,3-丙二醇。
7．一種用于預(yù)防或治療器官或組織的同種移植或異種移植接受者的慢性排斥反應(yīng)癥狀，或用于預(yù)防或控制異種移植接受者的急性排斥反應(yīng)的藥物組合物，該藥物組合物含有如權(quán)利要求1所定義的游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物以及一種或多種可藥用稀釋劑或載體。
8．一種用于預(yù)防或治療器官或組織的同種移植或異種移植接受者的慢性排斥反應(yīng)癥狀，或用于預(yù)防或控制異種移植接受者的急性排斥反應(yīng)的試劑盒或藥包，它含有如權(quán)利要求1所定義的游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物和含有免疫抑制劑或免疫調(diào)制藥物的藥物組合物。
9．根據(jù)權(quán)利要求7所述的組合物或根據(jù)權(quán)利要求8所述的試劑盒或藥包，其中式Ⅰ化合物為游離形式或可藥用鹽形式的2-氨基-2-[2-(4-辛基苯基)乙基]-1,3-丙二醇。
10．一種用于預(yù)防或治療器官或組織的同種移植或異種移植接受者的慢性排斥反應(yīng)癥狀，或用于預(yù)防或控制異種移植接受者的急性排斥反應(yīng)的方法，該方法包括給該接受者施用治療有效量的權(quán)利要求1所定義的游離形式或可藥用鹽形式的式Ⅰ化合物的步驟。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(Ⅰ)化合物在預(yù)防或治療器官或組織同種移植或異種移植接受者的慢性排斥反應(yīng)，或異種移植接受者的急性排斥反應(yīng)中的應(yīng)用，其中R
文檔編號(hào)A61K39/395GK1237906SQ97199858
公開日1999年12月8日 申請(qǐng)日期1997年11月17日 優(yōu)先權(quán)日1996年11月19日
發(fā)明者S·科藤斯, R·P·霍夫, R·溫格 申請(qǐng)人:諾瓦提斯公司