專利名稱：細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生促進(jìn)劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明系有關(guān)皮膚外用劑等藥劑的技術(shù)領(lǐng)域。更具體言之，本發(fā)明系有關(guān)促進(jìn)由透明質(zhì)酸等酸性粘多糖及膠原蛋白等纖維性蛋白質(zhì)等所成的形成真皮的細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生的皮膚外用劑等藥劑的發(fā)明。
背景技術(shù)：
真皮為于表皮之下，由結(jié)締組織所成組織。真皮，不像表皮細(xì)胞那么緊密塞滿，而是有許多細(xì)胞外空間，其部分由所謂“細(xì)胞外基質(zhì)”的巨大分子的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)所充滿。
上述細(xì)胞外基質(zhì)是由真皮內(nèi)的纖維母細(xì)胞等產(chǎn)生的，由透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素等稱為酸性粘多糖的多糖和膠原蛋白、彈性蛋白等纖維性蛋白質(zhì)構(gòu)成。
細(xì)胞外基質(zhì)與皮膚的彈性、張力、嬌嫩度、新陳代謝等直接有關(guān)，于纖維母細(xì)胞等細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生遲鈍則皮膚失去彈性及嬌嫩、變得易發(fā)生皺紋、小皺紋、皮膚變粗糙、造成皮膚老化的一個(gè)原因。
因此，現(xiàn)在，通過促進(jìn)此細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生，嘗試著找出保持具張力的嬌嫩皮膚、提供年輕的肌膚的方法。
本發(fā)明欲解決的課題，如上述地，發(fā)現(xiàn)促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生的成分在保持年輕的皮膚之中有極重要作用，通過以此成分為有效成分，提供可防止象征皮膚老化的皺紋、小皺紋、皮膚粗糙等，而且于安全性上無問題的皮膚外用劑等藥劑。
發(fā)明的公開本發(fā)明者針對(duì)此課題的解決進(jìn)行刻意檢討的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)柴胡等屬于柴胡屬的植物的提取物及含于其中的柴胡皂甙等成分通過作用于皮膚內(nèi)的表皮細(xì)胞及纖維母細(xì)胞，具有促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生，使細(xì)胞外基質(zhì)活化，使皮膚組織正?；淖饔枚瓿闪吮景l(fā)明。
亦即，本發(fā)明，提供以自屬于柴胡屬植物的提取物為有效成分的細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)劑(以下，亦稱為本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑)，尤其是以屬于柴胡屬的植物為柴胡的本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑。
附圖的簡單說明第1圖為表示于人類表皮細(xì)胞的透明質(zhì)酸產(chǎn)生試驗(yàn)的結(jié)果的圖；第2圖為表示于來自人類皮膚的纖維母細(xì)胞的透明質(zhì)酸產(chǎn)生試驗(yàn)的結(jié)果的圖；第3A圖～第3C圖為表示于人類表皮細(xì)胞的VII型膠原蛋白產(chǎn)生試驗(yàn)的結(jié)果的生物形態(tài)的照片；第4A圖～第4C圖為表示于來自人類皮膚的纖維母細(xì)胞的VII型膠原蛋白產(chǎn)生試驗(yàn)的結(jié)果的生物形態(tài)的照片。
供實(shí)施發(fā)明的最佳形態(tài)以下，就本發(fā)明的實(shí)施形態(tài)加以說明。
本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，可將自屬于柴胡屬的植物的提取物作為其有效成分使用。
提供可作為本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的有效成分的提取物的屬于柴胡屬的植物的植物體，只要含有柴胡皂甙或柴胡皂甙原，并無特別限定。例如可舉得屬于柴胡屬(Bupleurum)的植物如柴胡(日本藥局方第13改正記載名稱Bupleurum falcatum Linne)，別名以滿州柴胡稱呼的北柴胡(Bupleurum chinese DC.)、別名以奧柴胡稱呼的狹葉柴胡(Bupleurumscorzonerifolium Willd.)、膜緣柴胡(Bupleurum marginatum Wall.exDC.)、長白柴胡(Bupleurum komarovianum Lincz.)、重葉柴胡(Bupleurumlongiradiatum Turcz.)、興安柴胡(Bupleurum sibiricum Vest)、空心柴胡(Bupleurum longicaule Wall.ex DC.)、小柴胡(Bupleurum tenueBuch.-Ham ex D.Don)、別名稱為穿葉柴胡的金黃柴胡(Bupleurum aureumFisch.)或多脈柴胡(Bupleurum mulutinerve DC.)等作為本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的有效成分，作為提取物的原材料。
于上記植物體可選擇的部位亦只要是含有柴胡皂甙或柴胡皂甙原的部位，并無特別限定。例如，上記柴胡的情形，選擇已知含有柴胡皂甙及柴胡皂甙原的根部為優(yōu)選。
又，作為此等植物體，當(dāng)然可選擇天然的植物體，人工培養(yǎng)的植物體，例如為提高柴胡皂甙乃至柴胡皂甙原的生成效率培養(yǎng)上記植物體的特定部位衍生的愈傷組織及再將此愈傷組織分化，進(jìn)行特定部位的器官培養(yǎng)的植物體亦可使用。
另外，基因工程的手法，例如以使大量生成柴胡皂甙或柴胡皂甙原為目的，作出的基因?qū)胫昊蚣?xì)胞融合株亦可使用。
又，對(duì)于作為生成柴胡皂甙及/或柴胡皂甙原的植物，優(yōu)選選擇的柴胡，供植物培養(yǎng)的原生質(zhì)體優(yōu)選于含煙酸、鹽酸吡哆醇、D-泛酸鈣、對(duì)氨基苯甲酸、氯化膽堿、抗壞血酸、維生素A、維生素D3、維生素B12、丙酮酸鈉、檸檬酸、蘋果酸鈉、富馬酸或酪蛋白氨基酸中至少一種的維生素或有機(jī)酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。(參照特開平2-245180號(hào)公報(bào))。
又，對(duì)柴胡的根進(jìn)行器官培養(yǎng)時(shí)，進(jìn)行立即使繼續(xù)此器官培養(yǎng)實(shí)質(zhì)上已經(jīng)至側(cè)根的數(shù)目不增加的狀態(tài)為止，將此器官培養(yǎng)培養(yǎng)基的糖類成分(蔗糖、葡糖或果糖等)的濃度限制于對(duì)于全部培養(yǎng)基不足2.0重量％加以培養(yǎng)，于此器官培養(yǎng)得以提高柴胡皂甙的生產(chǎn)效率的點(diǎn)而言為優(yōu)選(參照特開平5-23069號(hào)公報(bào))。另外，于培養(yǎng)基中添加香豆素、間羥基苯甲酸、鄰羥基苯乙酸、對(duì)羥基苯乙酸、鄰香豆酸、綠原酸、均苯三酚或傘形酮等酚衍生物亦于此器官培養(yǎng)上得以提高柴胡皂甙的生產(chǎn)效率的方面為佳(參照特開平5-18379號(hào)公報(bào))。
而且，于對(duì)于柴胡等屬于柴胡屬的植物，導(dǎo)入例如得以提高柴胡皂甙的生成的柴胡皂甙合成基因等時(shí)，優(yōu)選將含有關(guān)的遺傳密碼的DNA與基因?qū)雽?duì)象的屬于柴胡屬的植物的原生質(zhì)體共存，賦予電脈沖或添加細(xì)胞融合劑于有效率地得以實(shí)現(xiàn)基因?qū)?參照特開平6-90771號(hào)公報(bào))。
如此所提供的屬于柴胡屬的植物的植物體提取物的制備，可通過為得此提取物的習(xí)知方法，例如溶劑提取等而進(jìn)行。又，于此所謂提取物，顯然可以來自植物體的破碎物的情形，當(dāng)然亦包含來自進(jìn)行器官培養(yǎng)等植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基的情形。
作為有關(guān)的溶劑萃取所用的溶劑，可舉例如純化水等水；甲醇、乙醇等1元低級(jí)醇類；油醇、硬脂醇、辛基十二烷醇等1元高級(jí)醇類；乙二醇、丙二醇、甘油、1，3-丁二醇等多元醇類；丙酮等酮類；乙酸乙酯等酯類；己烷、氯仿、苯等烴系溶劑等，將此等單獨(dú)或混合2種以上使用。于此等中，自可廣泛地適用于生體的觀點(diǎn)，以水、乙醇、甘油、1，3-丁二醇的單品或2種以上的混合物為適當(dāng)。
如此，可得所希望的屬于柴胡屬的植物的植物體的提取物(以下亦稱為提取物)。
于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的此提取物的配合量，可按照其具體的提取材料及本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的劑型、尤其是按照意欲促進(jìn)產(chǎn)生的細(xì)胞外基質(zhì)的成分而適宜地選擇，并無特別限定。
例如，將柴胡的根的提取物作為本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的有效成分的情形，對(duì)于劑全體以提取物的固形分換算，大致優(yōu)選于0.00001～10.0重量％的廣范圍加以適宜選擇。
又，本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑中，可將已知含于上記提取物中的柴胡皂甙及/或柴胡皂甙原為有效成分配合。
柴胡皂甙已知為將上記的柴胡的根干燥而得的，自古以來為作為解熱、解毒、鎮(zhèn)痛、強(qiáng)壯、抗炎癥的主要藥物使用的重要的漢方原料的一的“柴胡”的主要藥理成分。
此柴胡皂甙為齊墩果烷型三萜系皂甙，迄今，已分離鑒定出a，c，d，b1，b2等13種的結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑中，可配合以此等習(xí)知的方法分離的柴胡皂甙。
又，本發(fā)明產(chǎn)生進(jìn)劑中，亦可配合實(shí)施過大量取得的手段的柴胡皂甙(柴胡皂甙，于上記的柴胡的天然根中只含有0.5～1.5重量％程度)。
作為此大量取得的手段的一例，可舉將含柴胡皂甙之上記提取物使吸附于吸附劑之后，對(duì)于此采取種種手段，得以大量取得所希望的種類的柴胡皂甙。
更具體言的，將上記提取物與吸附劑接觸，使柴胡皂甙吸附于吸附劑，將柴胡皂甙以外之上記提取物中的成分自此吸附劑除去后(吸附過程)，使吸附于此吸附劑的柴胡皂甙洗脫，可得純化的天然型柴胡皂甙(由只于13位有雙鍵者所代表的如此存在于天然物中的柴胡皂甙柴胡皂甙a，柴胡皂甙c及柴胡皂甙d)。
又，此上記提取物吸附于吸附劑的吸附過程終了后，將鐵(III)離子與柴胡皂甙接觸[例如，可將氯化鐵(FeCl3)等鐵(III)鹽溶等鐵(III)離子溶液直接與天然型柴胡皂甙接觸。]、可得具二烯構(gòu)造的柴胡皂甙(例如，于13位及14a位有雙鍵型的柴胡皂甙的柴胡皂甙b1、柴胡皂甙h及柴胡皂甙b2等)。
其中，柴胡皂甙b1為將天然型的柴胡皂甙a轉(zhuǎn)換所得的具二烯構(gòu)造的柴胡皂甙，同樣地對(duì)于柴胡皂甙c對(duì)應(yīng)的為柴胡皂甙h，對(duì)于柴胡皂甙d，對(duì)應(yīng)地為柴胡皂甙b2。
作為于此等過程所用的吸附劑，可舉例如活性炭、苯乙烯-二乙烯基苯系的合成吸附劑、丙烯酸系的合成吸附劑等。又，亦可舉硅膠與疏水基組合的素材的合成吸附劑，聚酰胺膠、經(jīng)修飾的葡聚糖膠等。
使用適當(dāng)?shù)南疵搫⑽接诖说任絼┑乃柙磉暗姆N類的柴胡皂甙洗脫，將此按須要需使用高效液相色譜法等純化，可取得所要的柴胡皂甙。
除上述例子中的柴胡皂甙的外的其它柴胡皂甙，如柴胡皂甙e，柴胡皂甙f，柴胡皂甙g等也可按照習(xí)知的制備方法進(jìn)行制備。
本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑亦可配合此等柴胡皂甙a、柴胡皂甙b1、柴胡皂甙b2、柴胡皂甙c、柴胡皂甙d、柴胡皂甙e、柴胡皂甙f、柴胡皂甙g或柴胡皂甙h的任何柴胡皂甙。
而此等柴胡皂甙中，柴胡皂甙a、柴胡皂甙b1、柴胡皂甙b2、柴胡皂甙c或柴胡皂甙d，尤其有強(qiáng)的透明質(zhì)酸產(chǎn)生促進(jìn)作用，優(yōu)選作為本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的有效成分。
上記柴胡皂甙于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的配合量，可按照選擇的柴胡皂甙的種類及本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的具體劑型、更外，尤其是意欲促進(jìn)產(chǎn)生的細(xì)胞外基質(zhì)的成分加以適宜選擇，并無特別限定，大體上，相對(duì)于制劑全體，優(yōu)選為0.000001～10.0重量％的廣大范圍。
本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑中，亦可配合為上記柴胡皂甙的甙原成分的柴胡皂甙原。
柴胡皂甙原為上記的柴胡皂甙成分的甙原成分，亦即柴胡皂甙的非糖質(zhì)部分。
具體言的，為柴胡皂甙b1的甙原部分的柴胡皂甙原A，為柴胡皂甙h的甙原部分的柴胡皂甙原C，為柴胡皂甙h的甙原部分的柴胡皂甙原D，為柴胡皂甙c的甙原部分的柴胡皂甙原E，為柴胡皂甙a的甙原部分的柴胡皂甙原F，為柴胡皂甙d的甙原部分的柴胡皂甙原G等，亦可配合于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑之中。
此等柴胡皂甙原，通過上記柴胡皂甙水解即可獲得。
具體言的，藉于鹽酸及硫酸等酸性條件下的脫糖反應(yīng)，可得上記的柴胡皂甙原。
于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑中之上記的柴胡皂甙原的配合量，可按照選擇的柴胡皂甙原的種類及本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的具體劑型，以及，尤其是意欲促進(jìn)產(chǎn)生的細(xì)胞外基質(zhì)成分加以適宜選擇，并無特別限定，大致對(duì)于制劑的全體，優(yōu)選為0.000001～10.0重量％的廣范圍。
為如此所制造之上述有效成分的屬于柴胡屬植物的提取物、柴胡皂甙或柴胡皂甙原，藉將其1種或2種以上組合，配合于劑中，而提供促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生，以及基于此細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)，亦可通過使皮膚組織正?；?，可發(fā)揮抑制皺紋、小皺紋、防止皮膚變得不嬌嫩、皮膚老化的優(yōu)良效果的本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑。
通過本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的作用，促進(jìn)產(chǎn)生的細(xì)胞外基質(zhì)，如上述主要由纖維母細(xì)胞產(chǎn)生，具體言的，以透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素等酸性粘多糖及膠原蛋白、彈性蛋白、纖維蛋白原、層粘連蛋白(ラミリン)的纖維性蛋白質(zhì)構(gòu)成。
酸性粘多糖將大量水保持于其分子內(nèi)，呈膠狀，此膠內(nèi)的水擔(dān)任將營養(yǎng)成分、代謝產(chǎn)物、激素等自血管浸透至組織中的細(xì)胞的工作。因而，促進(jìn)酸性粘多糖于細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生，則不只使肌膚變得嬌嫩，而且可促進(jìn)皮膚的新陳代謝，防止皮膚老化。
又，纖維性蛋白質(zhì)，保持組織的形態(tài)、擔(dān)任賦予皮膚彈性等機(jī)能。因而，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的纖維性蛋白質(zhì)的產(chǎn)生，則帶給皮膚彈力，抑制皺紋及小皺紋。
本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，可促進(jìn)此兩類細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成成分的產(chǎn)生。
以此意義，本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑為有作為“酸性粘多糖產(chǎn)生促進(jìn)劑”的側(cè)面及作為“纖維性蛋白質(zhì)產(chǎn)生促進(jìn)劑”的側(cè)面的兩側(cè)面的細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生促進(jìn)劑。
尤其，本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，于酸性粘多糖之中，強(qiáng)力促進(jìn)透明質(zhì)酸的產(chǎn)生，于纖維性蛋白質(zhì)之中，強(qiáng)力促進(jìn)膠原蛋白的產(chǎn)生。
以此意義，有關(guān)上記的本發(fā)明的酸性粘多糖產(chǎn)生促進(jìn)劑，特別地，1.具有作為“透明質(zhì)酸產(chǎn)生促進(jìn)劑”的側(cè)面，有關(guān)本發(fā)明的纖維性蛋白質(zhì)產(chǎn)生促進(jìn)劑，特別地，2.具有作為“膠原蛋白產(chǎn)生促進(jìn)劑”的側(cè)面。
1.對(duì)于透明質(zhì)酸等酸性粘多糖產(chǎn)生促進(jìn)劑透明質(zhì)酸具有基于保持細(xì)胞間隙的水分、形成組織內(nèi)膠凍狀的基質(zhì)而保持細(xì)胞，保持組織的潤滑性與柔軟性、抵抗機(jī)械性障礙等外力及防止細(xì)菌感染等許多機(jī)能(《生物產(chǎn)業(yè)》BIO INDUSTRY，第8卷，346頁，1991年)。例如，皮膚的透明質(zhì)酸量，隨著年齡的增長而減少，伴隨著出現(xiàn)所謂小皺紋及老年斑等皮膚老化。作為如此的老化皮膚的改善劑，提議出許多配合膠原蛋白及透明質(zhì)酸的化妝品，但這些只發(fā)揮皮膚表面的保溫效果，并非得以本質(zhì)上改善老化肌膚。
本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，通過促進(jìn)為酸性粘多糖的透明質(zhì)酸的纖維母細(xì)胞及表皮細(xì)胞等產(chǎn)生，將皮膚從內(nèi)部活化，可解決此從來的技術(shù)所遭遇的問題。
將本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，尤其是促進(jìn)透明質(zhì)酸等酸性粘多糖的產(chǎn)生作為目的使用，而且于以前述的提取物為有效成分的情形，提取物于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的配合量，可依其提取材料及本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的劑型加以適宜選擇，并無特別限定。
例如，將柴胡的根的提取物作為有效成分使用的情形，對(duì)于全體的劑，以提取物的固形部分換算，優(yōu)選為0.00001～10.0重量％，特優(yōu)選為0.00005～5.0重量％。
又，將本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，尤其是促進(jìn)透明質(zhì)酸等酸性粘多糖的產(chǎn)生作用為目的使用，而且，于以前述的柴胡皂甙為有效成分的情形，柴胡皂甙于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑中的配合量，可按照所選的柴胡皂甙的種類及本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的具體劑型等加以適宜選擇，并非得無異議地確定，對(duì)于全體的劑大致于0.000001～10.0重量％為優(yōu)選，更優(yōu)選地，于0.00001～1.0重量％的范圍。
又，將本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，尤其是促進(jìn)透明質(zhì)酸等酸性粘多糖的產(chǎn)生為目的使用，而且，于以前述的柴胡皂甙原為有效成分的情形，柴胡皂甙原于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的配合量，可依所選的柴胡皂甙原的種類及本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的具體劑型等加以選擇，并非一定無商議余地，對(duì)于全體的劑大致為0.000001～10.0重量％為優(yōu)選，特優(yōu)選地為0.00001～1.0重量％的范圍。
又，上記的柴胡皂甙具皮膚賦活效果，從以前即已知(參照特公平4-36137號(hào)公報(bào))，其皮膚賦活效果，只限于人類皮膚纖維母細(xì)胞的增殖促進(jìn)效果及自此效果所衍生的大鼠創(chuàng)傷治療促進(jìn)效果及于人類實(shí)際使用試驗(yàn)的肌膚變粗的改善效果，對(duì)于纖維母細(xì)胞增殖促進(jìn)作用以外的具體性作用機(jī)制完全不知道。
當(dāng)然，柴胡皂甙的促進(jìn)透明質(zhì)酸等酸性粘多糖的產(chǎn)生的作用，對(duì)于細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)作用當(dāng)然完全不知道。
2.對(duì)于膠原蛋白等纖維性蛋白質(zhì)產(chǎn)生促進(jìn)劑皮膚大體上具有角質(zhì)層、表皮、基底膜及真皮的結(jié)構(gòu)。而，由電子顯微鏡觀察的于基底膜與真皮的間的纖維性構(gòu)造體為錨定纖維。一組錨定纖維的一端進(jìn)入基底膜的致密層(ラミナデンサ)，另一端進(jìn)入由含IV型膠原蛋白及層粘連蛋白等物質(zhì)所成的“錨定斑(アンカリンゲプラ-ク”。又，別組的錨定纖維更深地伸入真皮內(nèi)，與其他的錨定斑凝集，得以形成巨大的網(wǎng)狀構(gòu)造。如此的網(wǎng)狀構(gòu)造被認(rèn)為于表皮與真皮間的結(jié)合中擔(dān)任重要的任務(wù)(Keene，《細(xì)胞生物學(xué)雜志》J.Cell Biol.，104611-621，1987)。
錨定纖維的主要構(gòu)成成分已知為VII型膠原蛋白。據(jù)認(rèn)為此VII型膠原蛋白分子由分子量約300KDa的α1鏈的3條鏈所成，分子間藉二硫鍵形成二聚體，此再締合形成纖維。因而明白，此VII型膠原蛋白于表皮與真空間的結(jié)合占有非常重要的位置。于培養(yǎng)系，表皮細(xì)胞與纖維細(xì)胞皆為微量時(shí)仍會(huì)形成VII型膠原蛋白。然而，對(duì)于生體內(nèi)的VII型膠原蛋白的代謝如何受控制亦有許多不明白的點(diǎn)。
作為解明錨定纖維于皮膚的任務(wù)的線索，可舉已明白VII型膠原蛋白的變異為其原因的一的“先天性表皮水皰癥”。于此疾患，由于VII型膠原蛋白基因上的變異，不能形成錨定纖維，表皮層與真皮層變成無法結(jié)合，其結(jié)果，維持本來的皮膚構(gòu)造變?yōu)槔щy(Christiano，《自然遺傳學(xué)》Nature Genet.462-66，1993)。
于正常的皮膚，有伴隨生理上老化及光老化，錨定纖維的數(shù)目減少的報(bào)告(辻卓夫，日皮會(huì)志，105963-975，1995，Tidman和Eady，《皮膚病學(xué)研究雜志》J.Invest.Dermatol.，83448-453，1984)。于活體外培養(yǎng)系，亦報(bào)告來自排水高的皮膚的纖維母細(xì)胞的情形為錨定纖維的主成分的VII型膠原蛋白的產(chǎn)生蛋白質(zhì)含量及mRNA含量皆下降(Chen.《皮膚病學(xué)研究雜志》J.Invest.Dermatol.，102205-209，1994)。
借涂布維生素A酸可改善皺紋等象征老化的現(xiàn)象為所熟知，亦有報(bào)告將維生素A酸連續(xù)涂布于為紫外線所傷的皮膚，錨定纖維的數(shù)目顯著地增加。此暗示錨定纖維數(shù)的恢復(fù)與皺紋的改善有關(guān)(Woodley，JAMA，2633057-3059，1990)。
如此，通過明白錨定纖維與皮膚老化等相關(guān)性，于保持年輕肌膚的目的，再認(rèn)識(shí)保持此錨定纖維數(shù)及質(zhì)的重要性。
本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，可通過促進(jìn)為纖維性蛋白質(zhì)的膠原蛋白于纖維母細(xì)胞及表皮細(xì)胞等產(chǎn)生，使提高錨定纖維的數(shù)與質(zhì)，使細(xì)胞外基質(zhì)活化及皮膚組織正?；?，進(jìn)一步充實(shí)表皮與真皮的間的結(jié)合，防止皺紋及小皺紋，恢復(fù)幼齡時(shí)的皮膚構(gòu)造，又可防止皮膚的老化。
將本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，特別是促進(jìn)膠原蛋白等纖維性蛋白質(zhì)的產(chǎn)生非為目的使用，且于以前述提取物為有效成分的情形，提取物于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑中的配合量，依其提取材料及本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的劑型，可適宜選擇，并無特別限定。
例如，以柴胡的根的提取物作為有效成分使用的情形，對(duì)于全體的劑，以提取物的固形部分換算，優(yōu)選為0.00001～10.0重量％，特優(yōu)選為0.00005～5.0重量％。
又，將本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，特別是促進(jìn)膠原蛋白等纖維性蛋白質(zhì)的產(chǎn)生為目的使用，且以前述的柴胡皂甙為有效成分的情形，柴胡皂甙于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的配合量，可依所選的柴胡皂甙的種類及本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的具體劑型，加以適宜選擇，并非得無異議地確定，對(duì)于全體的劑大致以0.000001～10.0重量％為優(yōu)選，特優(yōu)選地為0.00001～1.0重量％的范圍。
又，將本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，尤其是促進(jìn)膠原蛋白等纖維性蛋白質(zhì)的產(chǎn)生為目的使用，且于以前述的柴胡皂甙原為有效成分的情形，柴胡皂甙原于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑中的配合量，可依所選的柴胡皂甙原的種類及本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑的具體劑型等，加以適宜選擇，并非得無異議地確定，對(duì)于全體的劑大致以0.000001～10.0重量％為優(yōu)選，特優(yōu)選地為0.00001～1.0重量％的范圍。
又，如前述，柴胡皂甙具皮膚賦活效果，從以前即為已知(參照特公平4-36137號(hào)公報(bào))，其皮膚賦活效果，只限于人類皮膚纖維母細(xì)胞的增殖促進(jìn)效果及自此效果所衍生的大鼠創(chuàng)傷治愈促進(jìn)效果及人類實(shí)際使用時(shí)的改善肌膚變粗的效果，對(duì)于纖維母細(xì)胞增殖促進(jìn)作用以外的具體的作用機(jī)制完全不知道。
當(dāng)然，對(duì)于柴胡皂甙于促進(jìn)膠原蛋白質(zhì)等纖維性蛋白質(zhì)產(chǎn)生的作用完全不知道。
本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑得采用例如水溶液、油液、其他溶液、乳液、霜、凝膠、懸浮液、微膠囊、粉末、顆粒、膠囊、固形劑等形式。以從來已習(xí)知的方法制備成此等形式后，作為洗劑(化妝水)、乳液劑、霜?jiǎng)?、軟膏劑、硬膏劑、泥罨劑、氣溶膠劑、水-油2層系、水、油-粉末3層系、注射劑、內(nèi)服劑(片劑、散劑、顆粒劑、丸劑、糖漿劑、糖錠劑等)、栓劑等，可涂布、貼附、噴霧、注射、飲用、插入于身體。此等劑型中，洗劑、乳液劑、霜?jiǎng)?、軟膏劑、硬膏劑、泥罨劑、氣溶膠劑等皮膚外用劑，為適宜本發(fā)明的目的的劑型。又，于此所記的皮外用劑包括醫(yī)藥品、醫(yī)藥外用品(軟膏劑等)、化妝品[洗面料、乳液、面霜、凝膠、香精(美容液)、面膜等基礎(chǔ)化妝品；粉底、口紅等上妝用化妝品；口腔化妝品、芳香化妝品、毛發(fā)化妝品、身體化妝品等)，以下以同樣的意義使用。
于得采用此等形式及劑型的本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，按照所希望的劑型，可以適當(dāng)添加通常習(xí)知的賦形劑及香料等為代表的油脂類、高級(jí)脂肪酸、高級(jí)醇、合成酯油、表面活性劑、防腐劑、金屬離子阻斷劑、水溶性高分子、增粘劑、顏料等粉末成分、紫外線防止劑、保濕劑、抗氧化劑、pH調(diào)整劑、洗凈劑、干燥劑、乳化劑。另外，將其他的藥效成分等成分配合于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，只要其配合不會(huì)損害所期望的效果的范圍內(nèi)即可。
作為油脂類，可舉鱷梨油、山茶油、月見草油、甲魚油、麥克第米亞核油(マカデミアナッツ油)、玉米油、貂油、橄欖油、菜籽油、卵黃油、麻油、杏仁油(パ-ミック油)、小麥胚芽油、山茶花油、蓖麻油、亞麻仁油、葵花籽油、棉籽油、蘇子油、大豆油、花生油、茶籽油、榧子油、米糠油、中國桐油(シナギリ油)、日本桐油、西蒙得木油、胚芽油、三甘油、三辛酸甘油酯、三異棕櫚酸甘油酯等液體油脂；可可脂、椰子油、馬脂、硬化椰子油、棕櫚油、牛脂、羊脂、硬化牛脂、棕櫚核油、豚脂、牛骨脂、日本蠟核油、硬化油、牛腳油、日本蠟、硬化蓖麻油等固體油脂；蜂臘、小燭樹蠟、棉蠟、巴西棕櫚蠟、月桂子蠟、水蠟樹蠟、鯨蠟、褐煤蠟、糠蠟、羊毛脂、木棉花蠟、乙酸羊毛脂、液狀羊毛脂、甘蔗蠟、羊毛脂脂肪酸異丙酯、十二酸己酯、還原羊毛脂、西蒙得木蠟、硬質(zhì)羊毛脂、蟲膠蠟、聚氧乙烯(以下略為POE)羊毛脂醇醚、POE羊毛脂醇乙酸酯、POE膽固醇醚、羊毛脂脂肪酸聚乙二醇酯、POE氫化羊毛脂醇醚等等蠟類；液體石蠟、天然地蠟、角鯊烯、鯊肝油烷、石蠟、純地蠟、凡士林、微晶性蠟等油分。
作為高級(jí)脂肪酸可舉月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、山萮酸、油酸、12-羥基硬脂酸、十一烯酸、妥魯酸(ト一ル酸)、異硬脂酸、亞油酸、亞麻酸、廿碳五烯酸(EPA)、廿二碳六烯酸(DHA)等。
作為高級(jí)醇，可舉例如月桂醇、鯨蠟醇、硬脂醇、山愈醇、肉豆蔻醇、油醇、鯨脂蠟醇等直鏈醇；一硬脂基甘油醚(鯊肝醇)、2-癸基十四醇、羊毛脂醇、膽固醇、植物固醇、己基十二醇、異硬脂醇、辛基十二醇等支鏈醇等。
作為合成酯油可舉例如肉豆蔻酸異丙酯、辛酸鯨蠟酯、肉豆蔻酸辛基十二酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸丁酯、月桂酸己酯、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、油酸癸酯、二甲基辛酸己基癸酯、乳酸鯨蠟酯、乳酸肉豆蔻酯、乙酸羊毛脂酯、硬脂酸異鯨蠟酯、異硬脂酸異鯨蠟酯、12-羥基硬脂酸膽固醇酯、二-2-乙基己酸乙二醇酯、二季戊四醇脂肪酸酯、一異硬脂酸N-烷基二醇酯、二癸酸新戊二醇酯、蘋果酸二異硬脂酸酯、二-2-庚基十一酸甘油酯、三-2-乙基己酸三羥甲基丙烷、三異硬脂酸三羥甲基丙烷、四-2-乙基己酸季戊四醇酯、三-2-乙基己酸甘油酯，三異硬脂酸三羥甲基丙烷、鯨蠟基-2-乙基己酸酯、2-乙基己基棕櫚酸酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三-2-庚基十一酸甘油酯、蓖麻油脂肪酸甲酯、油酸油酯、乙酸鯨蠟醇酯(セトステァリルアルコ-ル)、乙醇甘油酯、棕櫚酸2-庚基十一酯、己二酸二異丁酯、N-月桂酰-L-谷氨酸-2-辛基十二酯、己二酸二-2-庚基十一酯、乙基月桂酸酯、癸二酸二-2-乙基己酯、肉豆蔻酸2-己基癸酯、棕櫚酸2-己基癸酯、己二酸2-己基癸酯、癸二酸二異丙酯、琥珀酸2-乙基己酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯、檸檬酸三乙酯等。
作為硅酮類舉例如二甲基聚硅氧烷、甲基苯基聚硅氧烷、甲基氫聚硅氧烷等鏈狀聚硅氧烷；十甲基聚硅氧烷、十二甲基聚硅氧烷等、四甲基四氫聚硅氧烷等環(huán)狀聚硅氧烷；形成3維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的硅氧烷樹脂、硅橡膠等。
作為表面活性劑，可將陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、兩性表面活性劑、非陰離子界面活性劑的任一者配合于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑。
作為陰離子表面活性劑可舉例如肥皂用基劑、十二酸鈉、棕櫚酸鈉等脂肪酸肥皂、十二基硫酸鈉、十二基硫酸鉀等高級(jí)烷基硫酸酯鹽、POE十二基硫酸三乙醇胺、POE十二基硫酸鈉等烷基醚硫酸酯鹽、十二酰肌氨酸鈉等N-?；“彼幔籒-肉豆蔻?；?N-甲基?；撬徕c、椰子油脂肪酸甲基?；撬徕c、十二基甲基?；撬徕c等高級(jí)脂肪酸酰胺磺酸鹽；POE油基醚磷酸鈉、POE硬脂基醚磷酸等磷酸酯鹽；二-2-乙基己基磺基琥珀酸鈉、單十二?；鶈我掖减０肪垩跻蚁┗腔晁徕c、十二基聚丙二醇磺基琥珀酸鈉等磺基琥珀酸鹽；線性十二基苯磺酸鈉、線性十二基苯磺酸三乙醇胺、線性十二基苯磺酸等烷基苯磺酸或其鹽；N-十二?；劝彼嵋烩c，N-硬脂酰谷氨酸二鈉、N-肉豆蔻?；?L-谷氨酸一鈉等N-?；劝彼猁}、硬化椰子油脂肪酸甘油硫酸鈉等高級(jí)脂肪酸酯硫酸酯鹽；土耳其紅油等硫酸化油；POE烷基醚碳酸、POE烷基芳基醚碳酸鹽、α-烯磺酸鹽、高級(jí)脂肪酸酯磺酸鹽、二級(jí)醇硫酸酯鹽、高級(jí)脂肪酸烷基醇酰胺硫酸酯鹽、十二?；灰掖减０风晁徕c、N-棕櫚酰基天冬氨酸二三乙醇胺、酪蛋白鈉等。
作為陽離子表面活性劑可舉例如氯化硬脂基三甲銨、氯化十二基三甲銨等烷基三甲銨鹽；氯化二硬脂基二甲銨等二烷基二甲銨鹽；氯化聚(N，N’-二甲基-3，5-亞甲基哌啶鎓鹽)，氯化十六基吡啶鎓鹽等烷基吡啶鎓鹽；烷基季銨鹽，烷基二甲基芐銨鹽，烷基異喹啉鹽，二烷基嗎啉鹽，POE烷胺，烷胺鹽，聚氨基脂肪酸衍生物，戊醇脂肪酸衍生物，氯芐烷銨、氯化芐乙氧銨等。
作為兩性表面活性劑，可舉例如2-十一基-N，N，N-(羥乙羧甲基)-2-咪唑啉鈉、2-椰脂基-2-咪唑啉氫氧化物-1-羧羥乙氧基2鈉鹽等咪唑啉系兩性表面活性劑；2-十七基-N-羧甲基-N-羥乙基咪唑啉甜菜堿、十二基二甲氨基乙酸甜菜堿、烷基甜菜堿、酰胺甜菜堿、磺基甜菜堿等甜菜堿系兩性表面活性劑。
非離子表面活性劑可舉例如脫水山梨醇單油酸酯、脫水山梨醇-異硬脂酸酯、脫水山梨醇一月桂酸酯、脫水山梨醇一棕櫚脂酸酯、脫水山梨醇一硬脂酸酯、脫水山梨醇倍半油酸酯、脫水山梨醇三油酸酯、五-2-乙基己酸二甘油脫水山梨醇酯、四-2-乙基己酸二甘油脫水山梨醇酯等脫水山梨醇脂肪酸酯類；一棉籽油脂肪酸甘油酯、一芥酸甘油酯、倍半油酸甘油、一硬脂酸甘油、α，α’-油酸焦谷氨酸甘油、一硬脂酸甘油蘋果酸酯等甘油聚甘油脂肪酸類；一硬脂酸丙二醇酯等丙二醇脂肪酸酯類；硬化蓖麻油衍生物，甘油烷基醚，聚氧乙烯一甲基聚硅氧烷基共聚物等親油性非離子表面活性劑。
另外，可例示POE脫水山梨醇一油酸酯、POE脫水山梨醇一硬脂酸酯、POE脫水山梨醇一油酸酯、POE脫水山梨醇四油酸酯等POE脫水山梨醇脂肪酸酯類；POE山糖醇一月桂酸酯、POE山梨糖醇一油酸酯、POE山梨糖醇五油酸酯、POE山梨糖醇一硬脂酸酯等POE山梨糖醇脂肪酸酯類；POE甘油一硬脂酸酯，POE甘油一異硬脂酸酯，POE甘油三-異硬脂酸酯等POE甘油脂肪酸酯類；POE一油酸酯，POE二硬脂酸酯，POE一二油酸酯、硬脂酸乙二醇酯等POE脂肪酸酯類；POE十二基醚，POE油基醚，POE硬脂基醚，POE山萮基醚，POE 2-辛基十二基醚、POE膽甾烷醇醚等POE烷基醚類；POE辛苯基醚，POE壬苯基醚，POE二壬基苯醚等POE烷苯基醚類；普魯洛尼克(プルロ二ツク)等普魯洛尼克型類，POE·聚氧丙烯(以下略為POP)十六基醚，POE·POP 2-癸基十四基醚，POE·POP一丁基醚，POE·POP氫化羊毛脂，POE·POP甘油醚等POE·POP烷基醚類；四尼克(ラトロ二ツク)等四POE·四POP乙二胺縮合物類；POE蓖麻油，POE硬化蓖麻油，POE硬化蓖麻油一異硬脂酸酯，POE硬化蓖麻油三異硬脂酸酯；POE硬化蓖麻油一焦谷氨酸一異硬脂酸二酯、POE硬化蓖麻油馬來酸等POE蓖麻油或硬化蓖麻油衍生物；POE山梨糖醇酯蜂蠟等POE蜂蠟·羊毛脂衍生物；椰子油脂肪酸二乙醇酰胺、十二酸一乙醇酰胺、脂肪酸異丙醇酰胺等烷醇酰胺；POE丙二醇脂肪酸酯、POE烷基胺，POE脂肪酸酰胺，蔗糖脂肪酸酯、POE壬苯基甲醛縮合物，烷乙氧基二甲胺氧化物、三油基磷酸等親水性非離子表面活性劑等。
作為防腐劑可舉例如對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丁酯等。
作為金屬離子阻斷劑可舉例如乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸鈉鹽等乙二胺四乙酸堿金屬鹽、乙二胺四乙酸鈣鹽等乙二胺四乙酸堿土金屬鹽等。
作為水溶性高分子，亦可將天然的高分子、半合成的高分子、合成的高分子、無機(jī)的高分子的任一者配合于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑中。
天然的水溶性高分子，可舉例如阿拉伯膠、黃蓍膠、半乳聚糖、奇露布(キヤロブ)膠、愈創(chuàng)木膠(ゲァ-ガム)、刺梧桐樹膠、角叉膠、果膠、瓊脂、女王子(ケインスシ-ド)(木瓜)(マホメロ)、藻膠(アルゲコロイド)(褐藻萃取物)、淀粉(米，玉蜀黍、馬鈴薯、小麥)等植物系高分子；葡聚糖、琥珀酰葡聚糖、果聚糖等微生物系高分子；羧甲基淀粉、羥丙甲基淀粉等淀粉系高分子；膠原蛋白、酪蛋白、白蛋白、明膠等動(dòng)物系高分子等。
半合成的水溶性高分子可舉例如甲基纖維素、硝基纖維素、乙基纖維素、羥丙甲基纖維素、羥乙基纖維素、纖維素硫酸鈉、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉(CMC)，結(jié)晶纖維素、纖維素粉末等纖維素系高分子，藻酸鈉、藻酸丙二醇酯等藻酸系高分子等。
合成的水溶性高分子，可舉例如聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯甲基醚(PVM)、聚乙烯甲基醚、羧乙烯基聚合物(CARBOPOL等)的乙烯系高分子，聚氧乙烯系高分子；聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物系高分子；聚丙烯酸鈉、聚丙烯酸乙酯、聚丙烯酰胺等丙烯酸系高分子；聚乙烯亞胺、陽離子聚合物；皂土、硅酸鋁鎂，礬輝石(ラポライト)、鋰蒙脫石、硅酸酐等無機(jī)系水溶性高分子等。
作為增粘劑，可積極地使用上記的水溶性高分子，可舉例如角叉膠、刺梧桐樹膠、黃蓍膠、奇露布膠、女王子(木瓜)、酪蛋白、葡聚糖、明膠、果膠酸鈉、藻酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素、CMC、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、PVA、PVM、聚乙烯吡咯啶酮(PVP)、聚丙烯酸鈉、羥乙烯基聚合物、刺槐豆膠(ロ一カスビ一ソガム)、愈創(chuàng)木膠、羅望子膠、二烷基二甲基銨硫酸纖維素、呫噸膠、硅酸鋁鎂、皂土、鋰蒙脫石等。
粉末成分可舉例如滑石、高嶺土、云母、絹云母、白云母、金云母、紅云母、黑云母、氧化鋰云母、蛭石、碳酸鎂、硅酸鍶、硅酸鋇、硅酸鈣、硅酸鎂、鎢酸金屬鹽、鎂、二氧化硅、沸石、硫酸鋇、燒結(jié)硫酸鈣(燒石膏)、磷酸鈣、氟磷灰石、羥基磷灰石、陶瓷粉、金屬皂(肉豆蔻酸鋅、棕櫚酸鈣、硬脂酸鋁等)，氮化硼等無機(jī)粉末；聚酰胺樹脂粉末(尼龍粉末等)、聚乙烯粉末、聚甲基丙烯酸甲酯粉末、聚苯乙烯粉末、苯乙烯與丙烯酸的共聚物樹脂粉末；苯并胍胺樹脂粉末、聚四氟化乙烯粉末、纖維素粉末等有機(jī)粉末；二氧化鈦，氧化鋅等無機(jī)白色顏料；氧化鐵(氧化鐵紅)、鈦鐵等無機(jī)紅色系顏料；γ-氧化鐵等無機(jī)褐色系顏料；黃氧化鐵、黃土等無機(jī)黃色顏料；里氧化鐵、炭黑，次氧化鈦等無機(jī)黑色系顏料；錳紫、鈷紫等無機(jī)紫色系顏料；氧化鉻、氫氧化鉻；鈦酸鈷等無機(jī)綠色系顏料；群青、紺青等無機(jī)藍(lán)色系顏料；氧化鈦涂膜的云母，氧化鈦涂膜的氧化鉍、氧化鈦涂膜的滑石，著色氧化鈦涂膜的云母，三氯氧化鉍、魚鱗箔等珍珠色顏料；鋁粉、銅粉等金屬粉末顏料；可舉紅色201號(hào)、紅色202號(hào)、紅色204號(hào)、紅色205號(hào)、紅色220號(hào)、紅色226號(hào)、色228號(hào)、紅色405號(hào)、橙色203號(hào)、橙色204號(hào)、黃色205號(hào)、黃色401號(hào)、藍(lán)色404號(hào)、等有機(jī)顏愈；紅色3號(hào)、紅色106、紅色227號(hào)、紅色230號(hào)、紅色401號(hào)、紅色505號(hào)、橙色205號(hào)、黃色4號(hào)、黃色5號(hào)、黃色202號(hào)、黃色203號(hào)、綠色3號(hào)、藍(lán)色1號(hào)等鋯、鋇或鋁色淀等有機(jī)顏料；葉綠素，β-胡蘿卜素等天然色素；鈦黃，卡沙明(カ-サミン)、紅花赤等色劑等。
抗紫外線劑(包括為化學(xué)性吸收紫外線的物質(zhì)的“紫外線吸收劑”及藉物理作用將紫外線散射或反射的物質(zhì)的“紫外線阻斷劑”的兩者)，可舉例如對(duì)氨基苯甲酸等對(duì)氨基苯甲酸系紫外線吸收劑；氨茴酸甲酯等氨胺茴酸系紫外線吸收劑；水楊酸辛酯、水楊酸苯酯、水楊酸高酯等水楊酸系紫外線吸收劑；對(duì)甲氧基肉桂酸異丙酯、對(duì)甲氧基肉桂酸辛酯、對(duì)甲氧基肉桂酸-2-乙基己酯、二對(duì)甲氧基肉桂酸一-2-乙基己酸甘油酯、[4-雙(三甲硅氧基)甲基甲硅烷基-3-甲基丁基]-3，4，5-三甲氧基肉桂酸酯等肉桂酸系紫外線吸收劑；2，4-二羥基二苯甲酮、2-羥基-4-甲氧基二苯甲酮、2-羥基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸、2-羥基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸鈉等二苯甲酮系紫外級(jí)吸收劑；尿刊寧酸、尿刊寧酸乙酯、2-苯基-5-甲基苯并噁唑、2-(2’-羥基-5’-甲苯基)苯并三唑、4-叔丁基-4’-甲氧基二苯酰甲烷等紫外線吸收劑。
又，亦可舉與上記粉末成分重復(fù)者，例如氧化鈦、滑石、洋紅、皂土、陶土、氧化鋅等紫外線阻斷劑。
保溫劑可舉例如聚乙二醇、丙二醇、二丙二醇、1，3-丁二醇、己二醇、甘油、二甘油、木糖醇、多醇(マルチト一ル)、麥芽糖、D-甘露糖醇、水飴、葡萄糖、果糖、乳糖、軟骨素硫酸鈉、透明質(zhì)酸鈉、腺苷磷酸鈉、乳酸鈉、膽汁酸鹽、吡咯烷酮碳酸、葡糖胺、環(huán)糊精等。
作為藥效成分，首先可舉維生素類，維生素A油、視黃醇、乙酸視黃醇、棕櫚酸視黃醇等維生素A類；核黃素、丁酸核黃素，黃素腺嘌呤核苷酸等維生素B2類；維生素B6鹽酸鹽、維生素B6二辛酸鹽等維生素B6類；L-抗壞血酸、L-抗壞血酸一棕櫚酸酯、L-抗壞血酸二棕櫚酸酯、L-抗壞血酸-2-硫酸鈉、L-抗壞血酸磷酸酯、DL-α-生育酚-L-抗壞血酸磷酸二酯二鉀、L-抗壞血酸硬脂酸酯、L-抗壞血酸-2-葡糖苷等維生素C類；泛酸鈣、D-泛醇、泛醇基乙基醚、乙?；捍家一训确核犷?；維生素D2(麥角骨鈣化固醇)、膽鈣化固醇等維生素D類；α-生育酚、乙酸生育酚、煙酸DL-α-生育酚、琥珀酸DL-α-生育酚等維生素E類；維生素P，生物素等。
又，亦可舉胎盤提取物，谷胱甘肽、虎耳草提取物、熊果甙等美白劑；蜂王膠，感光素401號(hào)，幼牛血液提取物等皮膚賦活劑；壬酸戊酰胺、煙酸芐酯、煙酸β-丁氧基乙酯，辣椒素，姜酮，斑蝥酊，魚石脂，咖啡因，鞣酸，α-冰片，肌醇六煙酸酯，環(huán)扁桃酯，肉桂三甲基甘氨酸，芐唑啉，乙?；憠A，維拉帕米，頂花防己堿，γ-谷維醇等血行促進(jìn)劑；硫，2，7-二甲基噻蒽等抗脂漏劑；甘草酸衍生物，甘草次酸衍生物，愈、水楊酸衍生物，日扁柏醇、氧化鋅、脲基海因等消炎劑；雌二醇，乙炔基雌二醇等雌激素劑；精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、絲氨酸、酪氨酸、色氨酸等氨基酸類等抗炎劑；鞣酸、檸檬酸等收斂劑；L-薄荷醇，冰片等清涼劑；氯化溶菌酶等。
另外，可將具多樣藥效的各種提取物配合于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑。例如，葡萄提取物、蕺菜提取物、錦葵、枇杷提取物、黃柏提取物、薏苡仁提取物、獐牙菜提取物、番紅花提取物、川芎提取物、鳶尾花提取物、黃連提取物、黃香草木犀提取物、樺樹提取物、百合花提取物、野芝麻提取物、甘草提取物、芍藥提取物、肥皂草提取物、芒柄花根提取物、絲瓜提取物、辣椒提取物、金雞納提取物、當(dāng)歸提取物、陳皮提取物、虎耳草提取物、苦參提取物、萍蓬草提取物、茴香提取物、櫻草提取物、玫瑰提取物、地黃提取物、檸檬提取物、大蒜提取物、射干提取物、紫草提取物、蘆薈提取物、菖蒲根提取物、桉提取物、迷迭香提取物、問荊提取物、鼠尾草提取物、百里香提取物、茶提取物、海草提取物、黃瓜提取物、丁香提取物、懸鉤子提取物、蜜蜂花提取物、胡蘿卜提取物、七葉樹提取物、桃提取物、桃葉提取物、桑提取物、矢車菊提取物、金縷梅提取物、生姜提取物、十六液玫瑰提取物、胎盤提取物、胸腺提取物、蠶絲提取液等。
又，此等藥效成分之中，將雌二醇、乙炔基雌二醇等雌激素劑或射干提取物配合于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑中，則可確認(rèn)協(xié)同的透明質(zhì)酸產(chǎn)生促進(jìn)效果。
又，此等藥效成分之中，將L-抗壞血酸、L-抗壞血酸一棕櫚酸酯、L-抗壞血酸二棕櫚酸酯、L-抗壞血酸-2-硫酸鈉、L-抗壞血酸磷酸酯、DL-α-生育酚-L-抗壞血酸磷酸二酯二鉀，L-抗壞血酸硬脂酸酯，L-抗壞血酸-2-葡糖苷等維生素C類配合于本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，則可確認(rèn)協(xié)同的膠原蛋白產(chǎn)生促進(jìn)效果。
實(shí)施例以下用實(shí)施例等，就本發(fā)明加以說明。但本發(fā)明的技術(shù)范圍并非由此等實(shí)施例所限定。
樣品的制備(1)試驗(yàn)樣品的制備將柴胡的干燥根500克，浸漬于10倍量的50％1，3-丁二醇水溶液，于70℃提取1天。將此靜置于冷暗所，使成熟后，過濾，得上記干燥根的提取物(以下，稱為柴胡提取物)4700克。
于制備此柴胡提取物的過程所得的濾液通過合成吸附劑[Diaion HP-2(三菱化學(xué)公司制)]的柱后，以40％氯化鐵溶液，分別將柴胡皂甙a及柴胡皂甙d轉(zhuǎn)變?yōu)椴窈磉癰1及柴胡皂甙b2。
以乙醇洗脫柴胡皂甙后，將其洗脫液減壓濃縮，使干。此干物溶于甲醇后，進(jìn)行硅膠柱分級(jí)處理及高效液相層析法處理，得柴胡皂甙b1(以下亦稱為SSb1)。
柴胡皂甙原，任一者皆經(jīng)由將如上所得的柴胡皂甙以前述的習(xí)知方法做脫糖反應(yīng)而得。
透明質(zhì)酸產(chǎn)生試驗(yàn)及實(shí)際使用試驗(yàn)(1)對(duì)于人類表皮細(xì)胞的透明質(zhì)酸產(chǎn)生能力的作用的評(píng)估使用來自人類包皮的表皮細(xì)胞(克拉波(クラボウ)公司制品以下，稱為表皮細(xì)胞。)評(píng)估柴胡提取物及SSb1對(duì)表皮細(xì)胞的透明質(zhì)酸產(chǎn)生能力的作用。亦即，將懸浮于KGM培養(yǎng)基(以下稱為表皮細(xì)胞用培養(yǎng)基倉敷紡績公司制)的表皮細(xì)胞(5×104細(xì)胞/孔)播種于24孔培養(yǎng)用培養(yǎng)板(Falcon公司制品)，培養(yǎng)至成會(huì)合培養(yǎng)(培養(yǎng)條件37℃·5％ CO2)。接著，換成含10.0微克/毫升的柴胡提取物或0.1微克/毫升的SSb1之上記表皮細(xì)胞用培養(yǎng)基(于對(duì)照組，換成無添加此等樣品之上記表皮細(xì)胞用培養(yǎng)基)，于同樣條件下培養(yǎng)48小時(shí)。48小時(shí)后，取培養(yǎng)上清液，測定培養(yǎng)上清液液中的透明質(zhì)酸量。此透明質(zhì)酸量，使用測定用試劑盒“透明質(zhì)酸板‘中外’”(中外制藥制)測定。
此結(jié)果示于
圖1。于圖1，于含柴胡抽取物的體系及含SSb1的體系的任一者，與對(duì)照組相比，表皮細(xì)胞皆增加產(chǎn)生的透明質(zhì)酸量。
因而，對(duì)柴胡提取物及SSb1的任一者，確認(rèn)皆具促進(jìn)人類表皮細(xì)胞的透明質(zhì)酸產(chǎn)生的作用。
(2)對(duì)于人類皮膚纖維母細(xì)胞的透明質(zhì)酸產(chǎn)生能力的作用的評(píng)估使用來自人類皮膚纖維母細(xì)胞的[自外科手術(shù)所得的皮膚，以explant法所得者以下稱為纖維母細(xì)胞]，評(píng)估柴胡提取物及SSb1對(duì)于此纖維母細(xì)胞的透明質(zhì)酸產(chǎn)生能力的作用。亦即，將懸浮于1％FBS/DMEM培養(yǎng)基[FBS培養(yǎng)基使用GIBCO公司制，DMEM培養(yǎng)基使用日水制藥公司制]的纖維母細(xì)胞(1×104細(xì)胞/孔)播種于24孔培養(yǎng)用培養(yǎng)板(Falcon制品)，培養(yǎng)至成會(huì)合培養(yǎng)(培養(yǎng)條件37℃·5％ CO2)。接著，換成含有各樣品的含樣品線纖母細(xì)胞用培養(yǎng)基。柴胡提取物的濃度為10.0微克/毫升，SSb1的濃度為0.1微克/毫升(于對(duì)照組，換成無添加此等樣品之上記表皮細(xì)胞用培養(yǎng)基)，于同樣條件下培養(yǎng)48小時(shí)。
48小時(shí)后，取培養(yǎng)上清液，測定培養(yǎng)上清液中的透明質(zhì)酸量。此透明質(zhì)酸量，使用測定試劑盒“透明質(zhì)酸板‘中外’”(中外制藥制)測定。
結(jié)果示于圖2。于第2圖，于含柴胡提取物的系及含SSb1的系的任一系，與對(duì)照組的情形比，纖維母細(xì)胞產(chǎn)生的透明質(zhì)酸量皆增加。
因而，于柴胡提取物及SSb1的任一者，皆確認(rèn)促進(jìn)人類纖維母細(xì)胞的透明質(zhì)酸產(chǎn)生。
(3)實(shí)際使用試驗(yàn)對(duì)于示于第1A表的處方的實(shí)施例1A，實(shí)施例2A及比較例1A所得的劑，分別實(shí)施示于下面的使用試驗(yàn)。又，配合量為重量％。
第1A表實(shí)施例1A 實(shí)施例2A 比較例1A(1) 鯨蠟醇(セトステァリルアルコ-ル)3.5 3.5 3.5(2) 角鯊?fù)?0.0 40.040.0(3) 蜂蠟 3.0 3.0 3.0(4) 還原羊毛脂 4.0 4.0 4.0(5) 對(duì)羥基苯甲酸乙酯 0.3 0.3 0.3(6) 聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單棕櫚酸酯 2.0 2.0 2.0(7) 硬脂酸一甘油酯 3.0 3.0 3.0(8) 柴胡提取物 3.0--(9) 柴胡皂甙b1 -0.05 -(10) N-硬脂酰谷氨酸鈉 0.5 0.5 0.5(11) 香料 0.03 0.03 0.03(12) 1，3-丁二醇5.0 5.0 5.0(13) 聚乙二醇1500 5.0 5.0 5.0(14) 純水 殘余 殘余 殘余<制法>將(1)～(11)的原料加熱溶解，制備油相。一方面，將(12)及(13)溶于純水，保持于70℃制備水相。而，將前記油相一面加至此水相中，一面攪拌。接著，進(jìn)行勻漿機(jī)處理，使乳化粒子碎裂后，一面攪拌一面急速冷卻，得所希望的霜?jiǎng)?br>
此實(shí)際使用的試驗(yàn)，將隨機(jī)提取的年齡30至71歲的健康成年女性作為受試者，一組為30名，令連續(xù)使用各實(shí)施例或比較例的劑歷4周后，對(duì)于(甲)皮膚的嬌嫩度的改善效果，(乙)皮膚的緊繃、松弛的改善效果，及(丙)對(duì)皺紋、小皺紋的改善效果，以以下的計(jì)點(diǎn)判斷，評(píng)估30名的平均點(diǎn)數(shù)。
(甲)對(duì)皮膚的嬌嫩度的改善效果的計(jì)點(diǎn)非常改變 3點(diǎn)改善 2點(diǎn)稍微改善1點(diǎn)無改善效果 0點(diǎn)惡化 -1點(diǎn)(乙)對(duì)皮膚的緊繃·松弛的改善效果的計(jì)點(diǎn)非常改善 3點(diǎn)改善 2點(diǎn)稍微改善 1點(diǎn)無改善效果 0點(diǎn)惡化 -1點(diǎn)(丙)對(duì)皺紋·小皺紋的改善效果的計(jì)點(diǎn)非常改變 3點(diǎn)改善 2點(diǎn)稍微改善 1點(diǎn)無改善效果 0點(diǎn)惡化 -1點(diǎn)此實(shí)際使用試驗(yàn)的結(jié)果示于第2A表第2A表嬌嫩度緊繃·松弛 雀斑·小皺紋實(shí)施例1A2.8 2.7 2.3實(shí)施例2A2.5 2.4 2.0比較例1A0.7 0.6 0.5此結(jié)果，于使用實(shí)施例1A或?qū)嵤├?A的劑的組，對(duì)于任一評(píng)估項(xiàng)目，與使用比較例1A的劑的組比較，可認(rèn)定優(yōu)越的改善效果。
由以上3種試驗(yàn)，明白通過本發(fā)明的產(chǎn)生促進(jìn)劑，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)成分的一的透明質(zhì)酸的產(chǎn)生，另外通過此透明質(zhì)酸的產(chǎn)生促進(jìn)，將細(xì)胞外基質(zhì)活化，皮膚組織亦正?；?，本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑確認(rèn)有防止皮膚老化的效果。
VII型膠原蛋白產(chǎn)生試驗(yàn)及實(shí)際使用試驗(yàn)(1)對(duì)人類表皮細(xì)胞的VII型膠原蛋白產(chǎn)生能力的作用的評(píng)估使用來自人類包皮的表皮細(xì)胞(克拉波公司制品；以下稱為表皮細(xì)胞)，評(píng)估柴胡提取物及SSb1對(duì)表皮細(xì)胞的VII型膠原蛋白產(chǎn)生能力的作用。亦即將懸浮于KGM培養(yǎng)基(以下稱為表皮細(xì)胞用培養(yǎng)基倉敷紡績公司制)的表皮細(xì)胞(5×103細(xì)胞/孔)種于滑動(dòng)室(Nunc公司制)，接著，換成含有10.0微克/毫升的柴胡提取物或0.1微克/毫升的SSb1之上記表皮細(xì)胞用培養(yǎng)基(于對(duì)照組，換成無添加此等樣品之上記表皮細(xì)胞用培養(yǎng)基)，于37℃、5％ CO2下培養(yǎng)48小時(shí)。
而，自體系除去表皮細(xì)胞培養(yǎng)用培養(yǎng)基后，表皮細(xì)胞以多聚甲醛固定，將此與對(duì)VII型膠原蛋白的單克隆抗體(Sakai，L.Y.，等，《細(xì)胞生物學(xué)雜志》J.Cell.Biol.，103，1577-1586，1986)及FITC標(biāo)記二次抗體(Sigma公司制)反應(yīng)，以熒光顯微鏡觀察后，進(jìn)行照片攝影。
結(jié)果示于第3A圖(對(duì)照組)，第3B圖(含SSb1的體系)及第3C圖(含柴胡提取物的體系)[第3A圖～第3C圖任一者皆為生物的形態(tài)照片)。由此等照片可明白，于含柴胡提取物的系及含SSb1的體系的任一體系，與對(duì)照組的情形比較，被熒光標(biāo)記的表皮細(xì)胞數(shù)多，顯然地VII型膠原蛋白的產(chǎn)生增加。
(2)對(duì)人類皮膚纖維母細(xì)胞的VII型膠原蛋白產(chǎn)生能力的作用的評(píng)估使用來自人類皮膚的纖維母細(xì)胞[自外科手術(shù)所得的皮膚，以explant法所得者)以下稱為纖維母細(xì)胞]，評(píng)估柴胡提取物及SSb1對(duì)于此纖維母細(xì)胞的VII型膠原蛋白產(chǎn)生能力的作用。亦即，將懸浮于1％FBS/DMEM培養(yǎng)基[FBS培養(yǎng)基GIBCO公司制，DMEM培養(yǎng)基日水制藥公司制以下，稱為纖維母細(xì)胞用培養(yǎng)基。]的纖維母細(xì)胞(5×103細(xì)胞/孔)種于前述的滑動(dòng)室，接著換成含有各樣品的含樣品的纖維母細(xì)胞用培養(yǎng)基。使柴胡提取物的濃度為231.5微克/毫升，SSb1的濃度為0.1微克/毫升(于對(duì)照組，換成無添加此等樣品之上記表皮細(xì)胞用培養(yǎng)基)，于37℃、5％ CO2下培養(yǎng)48小時(shí)。
而自系除去表皮細(xì)胞培養(yǎng)用培養(yǎng)基后，纖維母細(xì)胞以多聚甲醛固定，將其與對(duì)VII型膠原蛋白的單克隆抗體(Sakai，L.Y.，等，《細(xì)胞生物學(xué)雜志》J.Cell.Biol.，103，1577-1586，1986)及FITC標(biāo)記二次抗體(Sigma公司制)反應(yīng)，以熒光顯微鏡觀察后，進(jìn)行照片攝影。
結(jié)果示于第4A圖(對(duì)照組)，第4B圖(含SSb1的系)及第4C圖(含柴胡提取物的系)[第4A圖～第4C圖任一者皆為生物的形態(tài)照片]。自此等照片可明白，于含柴胡提取物及含SSb1的系的任一系，與對(duì)照組的情形比較，顯然被熒光標(biāo)記的表皮細(xì)胞數(shù)多，VII型膠原蛋白的產(chǎn)生增加。
(3)于活體外于皮膚三維模型休系的對(duì)于VII型膠原蛋白產(chǎn)生能力的作用的評(píng)估于由來自人類皮膚的纖維母細(xì)胞與表皮細(xì)胞所成的三維皮膚模式，進(jìn)行柴胡提取物及SSb1對(duì)VII型膠原蛋白產(chǎn)生能力的作用的評(píng)估。
亦即，將纖維母細(xì)胞(1×105細(xì)胞/毫升)懸浮膠原蛋白溶液(膠原蛋白使用高研公司的I-PA)于冰上制備后，于37℃使膠原蛋白膠凝。其后，自培養(yǎng)皿壁面剝離，以后于纖維母細(xì)胞用培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使膠原蛋白凝膠收縮，制備真皮模型。
于此真皮模型上種2×105細(xì)胞/平方厘米的表皮細(xì)胞，于5％FBS/DMEM-KGM培養(yǎng)基(FBS培養(yǎng)基GIBCO公司制，DMEM培養(yǎng)基日水制藥公司制，KGM培養(yǎng)基倉敷紡績公司制)培養(yǎng)，制備皮膚模型。制備皮膚模型后，第1周換成添加樣品的此培養(yǎng)基。又，使柴胡提取物的濃度為231.5微克/毫升，SSb1的濃度為0.1微克/毫升(于對(duì)照組，換成無添加此等樣品之上記表皮細(xì)胞用培養(yǎng)基)，于37℃、5％ CO2下培養(yǎng)2周。
皮膚模型于液氮中固定包埋，制備切片后，將此與對(duì)VII型膠原蛋白的單克隆抗體(Sakai，L.Y.，等，《細(xì)胞生物學(xué)雜志》J.Cell.Biol.，103，1577-1586，1986)及FITC標(biāo)記二次抗體(Sigma公司制)反應(yīng)，于熒光顯微鏡觀察后，進(jìn)行照片攝影(無圖示)。
此結(jié)果，于柴胡提取物及SSb1的任一體系，與對(duì)照組的情形比較，明白被熒光標(biāo)記的表皮細(xì)胞數(shù)多，VII型膠原蛋白的產(chǎn)生增加。
(4)實(shí)際使用試驗(yàn)對(duì)于于示于第1B表所示的處方的實(shí)施例1B，實(shí)施例2B及比較例1B所得的劑，分別實(shí)施以下所示的實(shí)際使用試驗(yàn)。又，配合量為重量％。
第1B表實(shí)施例1A實(shí)施例2A 比較例1A(1) 鯨蠟醇 3.5 3.5 3.5(2) 角鯊?fù)? 40.040.0 40.0(3) 蜂蠟3.0 3.0 3.0(4) 還原羊毛脂 4.0 4.0 4.0(5) 對(duì)羥基苯甲酸乙酯0.3 0.3 0.3(6) 聚氧乙烯(20)脫水山梨醇單棕櫚酸 2.0 2.0 2.0(7) 硬脂酸一甘油酯 3.0 3.0 3.0(8) 柴胡提取物 0.5 - -(9) 柴胡皂甙b1 - 0.1-(10) N-硬脂酰谷氨酸鈉0.5 0.5 0.5(11) 香料0.030.03 0.03(12) 1，3-丁二醇 5.0 5.0 5.0(13) 聚乙二醇15005.0 5.0 5.0(14) 純水 殘余 殘余 殘余<制法>將(1)～(11)的原料加熱溶解制備油相。一方面，將(12)及(13)溶于純水，保持于70℃，制備水相。然后將前記油相一面攪拌一面添加至此水相中。接著，進(jìn)行勻漿機(jī)處理，將乳化粒子碎裂后，一面攪拌一面急速冷卻，得所希望的霜?jiǎng)?br>
此實(shí)際使用試驗(yàn)，以隨機(jī)提取的年齡36歲至69歲的健康成年女性為受試者，1組為30名，令連續(xù)使用各實(shí)施例或比較例的劑歷4周后，對(duì)于(甲)皮膚的緊繃、松弛的改善效果及(乙)皺紋、小皺紋的改善效果以以下的計(jì)點(diǎn)判斷，以30名的平均點(diǎn)評(píng)估。
(甲)對(duì)皮膚的緊繃·松弛的改善效果的計(jì)點(diǎn)非常改變 3點(diǎn)改善 2點(diǎn)稍微改善 1點(diǎn)無改善效果 0點(diǎn)惡化-1點(diǎn)(乙)對(duì)皺紋·小皺紋的改善效果的計(jì)點(diǎn)非常改變 3點(diǎn)改善 2點(diǎn)稍微改善 1點(diǎn)無改善效果 0點(diǎn)惡化 -1點(diǎn)此實(shí)際使用試驗(yàn)的結(jié)果示于第2B表。
第2B表緊繃·松弛 雀斑·小皺紋實(shí)施例1B 2.6 2.3實(shí)施例2B 2.7 2.2實(shí)施例1B 0.5 0.6此結(jié)果，于使用實(shí)施例1B或?qū)嵤├?B的劑的組，對(duì)于任一評(píng)估項(xiàng)目，可確認(rèn)與使用比較例1B的劑的組比較，有優(yōu)越的改善效果。
以上，從4種試驗(yàn)，通過本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)成分的一的VII型膠原蛋白的產(chǎn)生，而且通過此VII型膠原蛋白的產(chǎn)生促進(jìn)，活化細(xì)胞外基質(zhì)，又使皮膚組織正?；硗鈴?qiáng)化皮膚與真皮間的結(jié)合力，其結(jié)果，本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑以防止皮膚老化上有優(yōu)越的效果。
以下，公開將種種處方的本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑作為處方例此等任一者的產(chǎn)生促進(jìn)劑于上記的實(shí)際使用試驗(yàn)，可得與上記實(shí)施例同等“保持皮膚嬌嫩度”、“防止皮膚緊繃、松弛”，另外“防止皮膚的雀斑”等結(jié)果。
乳液(1)配合量(重量％)硬脂酸 6.0脫水山梨醇一硬脂酸酯 2.0聚氧乙烯(20摩爾)脫水山梨醇一硬脂酸酯 1.52-(2’-羥基-5’-甲苯基)苯并三唑8.0丙二醇 10.0柴胡提取物 10.0防腐劑、抗氧化劑 適量香料 適量純水 余額<制法>
于純水中加丙二醇，加熱保持于70℃(水相)。一方面，混合其他成分、加熱溶融，保持于70℃(油相)。于前記水相中，一面攪拌，一面添加此油相，進(jìn)行預(yù)先乳化。接著，以勻漿機(jī)將體系的乳化粒子碎裂，且使成均勻后，一面徹底攪拌一面急速冷卻，得乳液。
乳液(2)配合量(重量％)硬脂酸 6.0一硬脂酸脫水山梨醇酯2.0一硬脂酸聚氧乙烯(20摩爾)脫水山梨醇酯1.52-(2’-羥基-5’-甲苯基)苯并三唑 8.0丙二醇 10.0柴胡皂甙b21.0防腐劑、抗氧化劑適量香料 適量純水 余額<制法>
與處方例1-1同樣制備。
霜?jiǎng)?1)配合量(重量％)聚氧乙烯(20摩爾)鯨蠟醇酯 1.0甲苯基聚硅氧烷(20cs) 2.0液體石蠟 3.02-羥基-4-甲氧基二苯甲酮 5.0柴胡皂甙d 0.3丙二醇5.0甘油 2.0乙醇 15.0羧乙烯基聚合物0.3羥丙基纖維素 0.12-氨甲基丙醇 0.1防腐劑 適量香料 適量純水 適量<制法>
于純水中加丙二醇，加熱、保持于70℃(水相)。一方面，混合其他成分，加熱溶融，保持于70℃(油相)。于前記水相中，將此油相一面攪拌，一面添加進(jìn)行預(yù)先乳化。接著，以勻漿機(jī)將體系的乳化粒子碎裂，且使均一后，一面徹底攪拌、一面急速冷卻，得霜?jiǎng)?br>
霜?jiǎng)?2)配合量(重量％)聚氧乙烯(20摩爾)鯨蠟醇酯1.0甲苯基聚硅氧烷(20cs)2.0液體石蠟3.02-羥基-4-甲氧基二苯甲酮 5.0柴胡皂甙d 0.5丙二醇 5.0甘油2.0乙醇15.0羧乙烯基聚合物 0.3羥丙基纖維素0.12-氨甲基丙醇0.1防腐劑 適量香料適量純水適量<制法>
與處方例2-1同樣制備。
防曬用美容液(1)配合量(重量％)硬脂酸 3.0鯨蠟醇 1.0羊毛脂衍生物 2.0流動(dòng)石蠟 2.0硬脂酸2-乙基己酯 2.01，3-丁二醇 6.0聚氧乙烯(10摩爾)一油酸酯 2.0一硬脂酸甘油酯 2.0三乙醇胺 1.02-羥基-4-甲氧基二苯甲酮 3.0對(duì)甲氧基肉桂酸辛酯 2.0柴胡皂甙a 0.05香料適量純水余額<制法>
于純水中加1，3-丁二醇及三乙醇胺，加熱、保持于70℃(水相)。一方面，混合其他成分，加熱溶融，保持于70℃(油相)。于前記水相中，將此油相一面攪拌，一面添加進(jìn)行預(yù)先乳化。接著，以勻漿機(jī)將體系的乳化粒子碎裂，且使均一后，一面徹底攪拌、一面急速冷卻，得防曬用美容液。
防曬用美容液(2)配合量(重量％)硬脂酸 3.0鯨蠟醇 1.0羊毛脂衍生物2.0液體石蠟2.0硬脂酸2-乙基己酯2.01，3-丁二醇 6.0聚氧乙烯(10摩爾)一油酸酯2.0一硬脂酸甘油酯 2.0三乙醇胺1.02-羥基-4-甲氧基二苯甲酮 3.0對(duì)甲氧基肉桂酸辛酯 2.0柴胡皂甙a 0.001香料適量純水余額
<制法>
與處方例3-1同樣制備。
乳化型化妝粉底(W/O乳化型)(1)配合量(重量％)有機(jī)改性蒙脫石 0.5異辛酸鯨蠟酯2.0八甲基環(huán)四硅氧烷2.0十甲基環(huán)五硅氧烷5.0二甲基聚硅氧烷(6cs) 5.0液體石蠟3.0氯化二(十八基)二甲基銨 0.2聚氧烯基改性有機(jī)聚硅氧烷5.04-叔丁基-4’-甲氧基二苯甲酰甲烷 0.3一-2-乙基己?；?duì)甲氧基肉桂酸甘油酯 1.0微粒子氧化鈦5.0油醇0.5硬脂酸 0.5二異硬脂酸脫水山梨醇酯 4.0抗氧化劑適量香料適量滑石1.5尼龍粉 1.0純水余額檸檬酸鈉0.51，3-丁二醇 5.0柴胡皂甙b20.5<制法>
于純水中加檸檬酸鈉、1，3-丁二醇、柴胡皂甙b2及抗氧化劑，于70℃加熱攪拌(水相)。將微粒子氧化鈦、滑石及尼龍粉充分混合粉碎(粉末部分)。將其他成分混合，加熱融解，保存于70℃(油相)。前記水相中加粉末部分，于70℃，以勻漿機(jī)處理。再加油相，以勻漿機(jī)將乳化粒子碎裂均一化后一面徹底攪拌一面急速冷卻，得乳化型化妝粉底。
乳化型化妝粉底(W/O乳化型)(2)配合量(重量％)有機(jī)改性蒙脫石 0.5異辛酸鯨蠟酯 2.0八甲基環(huán)四硅氧烷 2.0十甲基環(huán)戊硅氧烷 5.0二甲基聚硅氧烷(6cs)5.0液體石蠟 3.0氯化二(十八基)二甲基銨 0.2聚氧烯基改性有機(jī)聚硅氧烷 5.04-叔丁基-4’-甲氧基二苯甲酰甲烷0.3一-2-乙基己?；?duì)甲氧基肉桂酸甘油酯 1.0微粒子氧化鈦 5.0油醇 0.5硬脂酸 0.5二異硬脂酸脫水山梨醇酯 4.0抗氧化劑 適量香料 適量滑石 1.5尼龍粉 1.0純水 余額檸檬酸鈉 0.51，3-丁二醇 5.0柴胡提取物 5.0<制法>
與處方例4-1同樣制備。
粉狀粉底(1)配合量(重量％)微粒子氧化鈦 7.0滑石 40.0云母 余額尼龍粉 10.0紅氧化鐵 1.0黃氧化鐵 2.0黑氧化鐵 0.2二甲基聚硅氧烷 1.0棕櫚酸-2-乙基己酯9.0倍半油酸脫水山梨醇酯 1.0N，N-二甲基PABA辛酯 0.3柴胡皂甙原A 0.2防腐劑 適量抗氧化劑 適量香料 適量<制法>
將微粒子氧化鈦、滑石、云母、尼龍粉、紅氧化鐵、黃氧化鈦、黑氧化鐵及柴胡皂甙原A以配合機(jī)充分粉碎混合(粉末部分)。于此粉末部分加二甲基聚硅氧烷、棕櫚酸-2-乙基己酯、倍半油酸脫水山梨醇酯、N，N-二甲基PABA辛酯，防腐劑抗氧化劑后，將香料噴霧均一混合。以粉碎機(jī)將此粉碎后，充填于容器、成型，得粉底。
粉狀粉底(2)配合量(重量％)微粒子氧化鈦 7.0滑石40.0云母 余額尼龍粉 10.0紅氧化鐵 1.0黃氧化鐵 2.0黑氧化鐵 0.2二甲基聚硅氧烷 1.0棕櫚酸-2-乙基己酯9.0倍半油酸脫水山梨醇酯 1.0N，N-二甲基PABA辛酯 0.3柴胡皂甙原A 5.0防腐劑 適量抗氧化劑 適量香料 適量<制法>
與處方例5-1同樣制備[處方例6-1]油性粉底(1)配合量(重量％)微粒子氧化鈦 10.0云母 22.4高嶺土 10.0尼龍粉末 5.0紅氧化鐵 0.5黃氧化鐵 0.5黑氧化鐵 0.1液體石蠟余額二甲基聚硅氧烷 10.0倍半油酸脫水山梨醇酯 2.0甲氧基肉桂酸辛酯 5.0柴胡皂甙原D 0.01香料適量微晶粒蠟 6.0巴西棕櫚蠟 3.0<制法>
將微粒子氧化鈦、云母、陶土、尼龍粉、紅氧化鐵、黃氧化鈦、黑氧化鐵以配合機(jī)充分粉碎混合(粉末部分)。另將香料以外的其他成份混合于其中，以85℃予以加熱熔解(油相)。在此油相中將上述粉末在攪拌下添加的。而后添加香料，予以充份磨碎分散后，將其充填于容器中成型，獲得油性粉底。
油性粉底(2)配合量(重量％)微粒子氧化鈦 10.0云母 22.4陶土 10.0尼龍粉末 5.0紅氧化鐵 0.5黃氧化鐵 2.0黑氧化鐵 0.1液體石蠟 余額二甲基聚硅氧烷 10.0倍半油酸脫水山梨醇酯 2.0甲氧基肉桂酸辛酯 5.0柴胡皂甙原D 0.005香料 適量微晶粒蠟 6.0巴西棕櫚蠟 3.0與處方例6-1同樣制備。
產(chǎn)業(yè)上的利用可能性本發(fā)明產(chǎn)生促進(jìn)劑促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)，更具體言的，透明質(zhì)酸等酸性粘多糖與膠原蛋白等纖維性蛋白質(zhì)的產(chǎn)生，細(xì)胞外基質(zhì)的活化與皮膚組織的正?；?，另外通過強(qiáng)化表皮與真皮間的結(jié)合力得以發(fā)揮發(fā)止皮膚老化的效果。
權(quán)利要求
1.一種細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)劑，其系以得自屬于柴胡屬植物的提取物為有效成分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)劑，其中得自屬于柴胡屬植物的提取物的原料為該植物的根部。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)劑，其中該屬于柴胡屬的植物為柴胡。
4.一種細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)劑，其系以柴胡皂甙及/或柴胡皂甙原為有效成分。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)的細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)劑，其為皮膚外用劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)劑，其系促進(jìn)酸性粘多糖及纖維性蛋白質(zhì)的產(chǎn)生。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)劑，其系促進(jìn)酸性粘多糖的產(chǎn)生。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)劑，其系促進(jìn)纖維性蛋白質(zhì)的產(chǎn)生。
9.根據(jù)權(quán)利要求6或7的細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)劑，其中該酸性粘多糖為透明質(zhì)酸。
10.根據(jù)權(quán)利要求6或8的細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生促進(jìn)劑，其中該纖維性蛋白質(zhì)為膠原蛋白。
全文摘要
本發(fā)明系有關(guān)一種可促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì),更具體言的,可促進(jìn)透明質(zhì)酸等酸性粘多糖與膠原蛋白等纖維性蛋白質(zhì)的產(chǎn)生,通過細(xì)胞外基質(zhì)的活化與皮膚組織的正常化,及表皮與真皮間的結(jié)合力的強(qiáng)化而得以發(fā)揮防止皮膚老化效果的產(chǎn)品。此產(chǎn)品以得自屬于柴胡等柴胡屬的植物的提取物,或進(jìn)一步以存在于此提取物的柴胡皂甙及柴胡皂甙原為有效成分。藉將此劑為皮膚外用劑使用,可促進(jìn)上記的酸性粘多糖及纖維性蛋白質(zhì)等對(duì)纖維母細(xì)胞等產(chǎn)生。
文檔編號(hào)A61K8/97GK1241133SQ9880148
公開日2000年1月12日 申請(qǐng)日期1998年10月5日 優(yōu)先權(quán)日1997年10月7日
發(fā)明者中山泰一, 圷信子, 西山敏夫, 堀井和泉 申請(qǐng)人:株式會(huì)社資生堂