專利名稱：芳基磺酰氨基異羥肟酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及芳基磺酰氨基異羥肟酸衍生物，其為基質(zhì)金屬蛋白酶或腫瘤壞死因子(TNF)產(chǎn)生的抑制劑，可以用來治療下列疾病關(guān)節(jié)炎，癌癥，組織潰瘍，斑退化，(心瓣膜)再狹窄，牙周疾病，大皰性表皮松懈，鞏膜炎，以及其他以基質(zhì)金屬蛋白酶活性為特征的疾病，AIDS，膿毒癥，膿毒性休克以及其它涉及TNF生成的疾病。另外本發(fā)明化合物可與其它標準的非甾體抗炎藥物(NSAID’S)以及止痛藥合用進行關(guān)節(jié)炎的治療，還可與細胞毒藥物(例如阿霉素，柔紅霉素，順鉑，鬼臼乙叉甙，紫杉酚，紫杉烷衍生物(taxotere)以及生物堿，長春新堿)合用進行癌癥的治療。
本發(fā)明還涉及使用這類化合物來治療哺乳動物(尤其是人類)體內(nèi)的上述疾病的方法，本發(fā)明還涉及可用于上述方法中的藥物組合物。
有許多酶可以破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，它們在結(jié)構(gòu)上與金屬蛋白酶有關(guān)。基質(zhì)降解金屬蛋白酶(例如明膠酶，溶基質(zhì)素和膠原酶)與組織基質(zhì)降解有關(guān)(例如膠原萎陷)，并且與許多涉及異常連接組織和底膜基質(zhì)代謝的病原狀況有關(guān)，例如關(guān)節(jié)炎(如骨關(guān)節(jié)炎和風濕性關(guān)節(jié)炎)，組織潰瘍形成，(如角膜、表皮和胃潰瘍形成)，異常創(chuàng)傷愈合，牙周疾病，骨病(如Paget’s疾病和骨質(zhì)疏松)，腫瘤轉(zhuǎn)移或侵入，以及HIV-感染(J.Leu k.Biol.，52(2)244-248，1992)。
人們已認識到，腫瘤壞死因子(TNF)與許多感染和自身免疫疾病有關(guān)(W.Fiers，F(xiàn)EBS Letters，1991，285，199)。進一步地，已有顯示，在膿毒病和膿毒性休克的炎癥反應(yīng)中，TNF是主要的遞質(zhì)(C.E.Spooner et al.，Clinical Immunology andImmunopathology，1992，62 S11)。
本發(fā)明涉及下式化合物或其藥用鹽，
其中R1和R2各自獨立為(C1-C6)烷基，三氟甲基，三氟甲基(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷基(二氟亞甲基)，(C1-C3)烷基(二氟亞甲基(C1-C3)烷基，(C6-C10)芳基，(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳基(C1-C6)烷基，或R1和R2一起構(gòu)成(C3-C6)環(huán)烷基或苯并稠合(C3-C6)環(huán)烷基環(huán)或下式基團
其中的n和m各自獨立為1或2且X為CF2，S，O或NR3，其中R3為氫，(C1-C6)烷基，(C6-C10)芳基，(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳基(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷基磺?；?，(C6-C10)芳基磺?；蝓；?；并且Q為(C1-C6)烷基，(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基，(C6-C10)芳基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷基(C2-C9)雜芳基，(C1-C6)烷氧基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳氧基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳氧基(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷基(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷基(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷基(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C1-C6)烷氧基(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷氧基(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基或(C1-C6)烷氧基(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，其中的每一個芳基基團可以任意地被氟，氯，溴，(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基或全氟(C1-C3)烷基取代。
除非另有說明，這里的術(shù)語“烷基”是指具有直鏈、支鏈或環(huán)狀基團或其混合物的飽和單鍵烴類基團。
這里的術(shù)語“烷氧基”包括0-烷基基團，其中“烷基”的定義同上。
除非另有說明，這里的術(shù)語“芳基”包括衍生自移去一個氫原子后的芳烴有機基團，例如苯基或萘基，它們可以任意地被1-3個下列基團取代氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基以及(C1-C6)烷基。
除非另有說明，這里的術(shù)語“雜環(huán)芳基”包括衍生自移去一個氫原子后的芳烴雜環(huán)化合物的有機基團，例如吡啶基，呋喃基，吡咯基，噻吩基，異噻唑基，咪唑基，苯并咪唑基，四唑基，吡嗪基，嘧啶基，喹啉基，異喹啉基，苯并呋喃基，異苯并呋喃基，苯并噻吩基，吡唑基，吲哚基，異吲哚基，嘌呤基，咔唑基，異噁唑基，噻唑基，噁唑基，苯并噻唑基或苯并噁唑基，它們可以任意地被1-2個下列基團取代氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳氧基，三氟甲氧基，二氟甲氧基以及(C1-C6)烷基。
除非另有說明，這里的術(shù)語“?；卑ň哂型ㄊ絉CO的基團，其中的R為烷基，烷氧基，芳基，芳烷基或芳烷氧基，并且術(shù)語“烷基”和“芳基”的定義同上。
這里的術(shù)語“酰氧基”包括O-?；鶊F，其中“酰基”的定義同上。
式I的化合物可以具有手性中心，因此可以不同的的對映體形式存在。本發(fā)明涉及式I化合物所有的光學異構(gòu)體和立體異構(gòu)體以及它們的混合物。
優(yōu)選的式I的化合物包括這些化合物，其中R1和R2一起構(gòu)成(C3-C6)環(huán)烷基或苯并稠合(C3-C6)環(huán)烷基環(huán)或下式基團
其中的n和m各自獨立為1或2且X為CF2，S，O或NR3，其中R3為氫，(C1-C6)烷基，(C6-C10)芳基，(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳基(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷基磺?；?C6-C10)芳基磺?；蝓；?。
其它優(yōu)選的式I化合物包括那些化合物，其中的R1和R2一起構(gòu)成(C3-C6)環(huán)烷基或苯并稠合(C3-C6)環(huán)烷基環(huán)。
其它優(yōu)選的式I化合物包括那些化合物，其中Q為(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C6-C10)芳基或(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基。
其它優(yōu)選的式I的化合物包括那些化合物，其中Q為(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基。
其它優(yōu)選的式I化合物包括那些化合物，其中的R1和R2各自獨立為(C1-C6)烷基。
更優(yōu)選的式I的化合物包括那些化合物，其中的R1和R2一起構(gòu)成(C3-C6)環(huán)烷基或苯并稠合(C3-C6)環(huán)烷基環(huán)或下式基團
其中的n和m各自獨立為1或2且X為CF2，S，O或NR3，其中R3為氫，(C1-C6)烷基，(C6-C10)芳基，(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳基(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷基磺酰基，(C6-C10)芳基磺?；蝓；?；且Q為(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C6-C10)芳基或(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基。
更優(yōu)選的式I的化合物包括那些化合物，其中的R1和R2一起構(gòu)成(C3-C6)環(huán)烷基或苯并稠合(C3-C6)環(huán)烷基環(huán)；并且Q為(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C6-C10)芳基或(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基。
更優(yōu)選的式I的化合物包括那些化合物，其中的R1和R2各自獨立為(C1-C6)烷基，且Q為(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C6-C10)芳基或(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基。
更優(yōu)選的式I的化合物包括那些化合物，其中的R1和R2各自獨立為(C1-C6)烷基；并且Q為(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基。
具體的優(yōu)選化合物包括下列化合物3-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]氮雜環(huán)丁烷-3-甲酸羥基酰胺；4-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]哌啶-4-甲酸羥基酰胺；1-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丙烷-1-甲酸羥基酰胺；1-[4-(4-氯苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丙烷-1-甲酸羥基酰胺；1-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丁烷-1-甲酸羥基酰胺；1-[4-(4-氯苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丁烷-1-甲酸羥基酰胺；
1-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)戊烷-1-甲酸羥基酰胺；1-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)己烷-1-甲酸羥基酰胺；2-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]-N-羥基-2-甲基丙酰胺；2-[4-(4-氯苯氧基)苯磺酰氨基]-N-羥基-2-甲基丙酰胺；N-羥基-2-甲基-2-(5-吡啶-2-基噻吩-2-磺酰氨基)丙酰胺；1-(5-吡啶-2-基-噻吩-2-磺酰氨基)環(huán)戊烷-1-甲酸羥基酰胺；1-(4’-氟代聯(lián)苯基-4-磺酰氨基)環(huán)丙烷-1-甲酸羥基酰胺；1-(4’-氟代聯(lián)苯基-4-磺酰氨基)環(huán)丁烷-1-甲酸羥基酰胺；1-(4’-氟代聯(lián)苯基-4-磺酰氨基)環(huán)戊烷-1-甲酸羥基酰胺；2-(4-甲氧基苯磺酰氨基)1，2-二氫化茚-2-羧酸羥基酰胺；以及2-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]1，2-二氫化茚-2-甲酸羥基酰胺。
本發(fā)明還涉及用于下列目的的藥物組合物(a)與細胞毒抗腫瘤劑協(xié)同作用治療下列疾病關(guān)節(jié)炎，癌癥，組織潰瘍形成，斑退化，(心瓣膜)再狹窄，牙周疾病，大皰性表皮松懈，鞏膜炎，與其它標準的NSAID’S和止痛藥合用以及其它以基質(zhì)金屬蛋白酶活性為特征的疾病，AIDS，膿毒病，膿毒性休克以及其它涉及腫瘤壞死因子(TNF)生成的疾病，或(b)抑制哺乳動物(包括人類)體內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶或腫瘤壞死因子(TNF)的生成，其包括在這類治療中，給予有效劑量的式I的化合物或其藥用鹽以及藥用載體。
本發(fā)明涉及下述抑制方法抑制哺乳動物(包括人類)體內(nèi)(a)基質(zhì)金屬蛋白酶或(b)腫瘤壞死因子(TNF)的生成，其包括給予所述哺乳動物有效劑量的式I化合物或其藥用鹽。
本發(fā)明還涉及治療下列疾病的方法關(guān)節(jié)炎，癌癥，組織潰瘍形成，斑退化，(心瓣膜)再狹窄，牙周疾病，大皰性表皮松懈，鞏膜炎，與NSAID’S和止痛藥合用，并且可與細胞毒抗腫瘤劑合用以及其它以基質(zhì)金屬蛋白酶活性為特征的疾病，AIDS，膿毒病，膿毒性休克以及其它涉及哺乳動物(包括人類)體內(nèi)腫瘤壞死因子(TNF)生成的疾病，該方法包括，在這類治療中給予所述哺乳動物有效劑量的式I的化合物或其藥用鹽。
下列路線將說明本發(fā)明化合物的制備。除非另有說明，反應(yīng)路線和隨后討論中的R1，R2和Q的定義同上。制備A
路線1
在制備A反應(yīng)1中，于惰性溶劑中(例如苯或甲苯，甲苯為優(yōu)選)，用芐醇和具式HX的酸(其中X優(yōu)選為4-甲苯磺酸鹽)處理式III氨基酸，得到相應(yīng)的式V芐酯酸鹽。正常情況下，反應(yīng)在所用溶劑的回流溫度下進行1-24小時。此反應(yīng)過程中形成的水用Dean-Strar捕獲器進行收集。
在制備A反應(yīng)2中，使V與磺酸(QSO2OH)的反應(yīng)活性功能衍生物(如磺酰氯(QSO2Cl))在堿(如氫氧化鈉或三乙胺)和溶劑(如二氯甲烷，四氫呋喃，二噁烷，水或乙腈，優(yōu)選的是二噁烷和水的混合物)的存在下進行反應(yīng)，使式V化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式VI化合物。反應(yīng)混合物在約0-50℃(最好是室溫下)下攪拌10分鐘-2天，優(yōu)選的是約60分鐘。
在制備A反應(yīng)3中，將式VI中間體化合物氫解，得到中間體式II。反應(yīng)于氫氣下(優(yōu)選的是3個大氣壓)，在溶劑中(例如乙醇)使用10％Pd/C催化劑進行。室溫下攪拌反應(yīng)混合物約30分鐘-24小時，優(yōu)選的是1.5小時。
在路線1反應(yīng)1中，使III與具式QSO2OH的磺酸的反應(yīng)活性功能衍生物(其中Q的定義同上)(如磺酰氯(QSO2Cl))在堿(如氫氧化鈉或三乙胺)和極性溶劑(如四氫呋喃，二噁烷，水或乙腈，優(yōu)選的是二噁烷和水的混合物)的存在下進行反應(yīng)，將式III化合物轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的式II化合物。反應(yīng)混合物在約0-50℃(最好是室溫下)下攪拌10分鐘-2天，優(yōu)選的是約60分鐘。
在路線1反應(yīng)2中，使II與1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺和1-羥基苯并三唑在極性溶劑(如N，N-二甲基甲酰胺)進行反應(yīng)，約15分鐘-1小時后(優(yōu)選的是約30分鐘)，向反應(yīng)混合物中加入羥胺，使式II化合物轉(zhuǎn)化為式I異羥肟酸化合物。優(yōu)選地，在堿存在下(如三乙胺)，羥胺從其鹽的形式就地生成，例如從羥胺鹽酸鹽。另外，也可以用羥胺的保護衍生物或其鹽的形式(其中的羥基被叔丁基、芐基，烯丙基或2-三乙基甲硅烷基乙基醚保護)代替羥胺或羥胺鹽酸鹽。羥基保護基團的去除采用與芐基保護基團氫解一樣的條件進行(優(yōu)選的是以5％Pd/硫酸鋇作催化劑)，或采用叔丁基保護基去除的方法，即用強酸(如三氟乙酸)進行處理。在催化的雙(三苯基膦)氯化鈀(II)的存在下，用三丁基錫氫化物和乙酸進行處理，可以去除烯丙基保護基。使2-三甲基甲硅烷基乙基醚與強酸(如三氟乙酸)或與氟供給體(如三氟化硼醚化物)進行反應(yīng)，可以去除2-三甲基甲硅烷基乙基醚。式II與羥胺，羥胺鹽，羥胺保護衍生物或羥胺保護衍生物鹽的反應(yīng)可在(苯并三唑-1-基氧)三(二甲基氨基)-磷鎓六氟化磷酸鹽(酯)和堿(如三乙胺)的存在下，于惰性溶劑(如二氯甲烷)中進行。反應(yīng)混合物在0-50℃下(優(yōu)選的是室溫下)攪拌1小時-3天，優(yōu)選的是1天。優(yōu)選地，轉(zhuǎn)化化合物II至化合物I的過程是使II與O-芐基羥胺鹽酸鹽在(苯并三唑-1-基氧)三(二甲基氨基)-磷鎓六氟磷酸鹽(酯)和三乙胺存在下，于二氯甲烷中進行反應(yīng)。室溫3大氣壓氫氣下，用5％Pd/硫酸鋇作催化劑，進行氫解，去除O-芐基保護基團，得到式I化合物。優(yōu)選的溶劑是甲醇。反應(yīng)時間約為1-5小時(優(yōu)選的是3.5小時)。
在某些情況下，優(yōu)選的是使羥胺，羥胺鹽，羥胺保護衍生物或羥胺保護衍生物鹽與式IV活性酯進行反應(yīng)，得到式I化合物，如路線1反應(yīng)3所示。反應(yīng)在惰性溶劑(如N，N-二甲基甲酰胺)中進行，反應(yīng)溫度約為室溫至80℃，優(yōu)選的是約50℃，反應(yīng)時間約為1小時-2天。如果采用羥胺保護衍生物或羥胺保護衍生物的鹽，則按上述方法去除保護基團。在惰性溶劑(例如二氯甲烷)中，用(苯并三唑-1-基氧)三(二甲基氨基)-磷鎓六氟磷酸(酯)和堿(如三乙胺)處理式II化合物可以得到式IV活性酯衍生物(見路線1反應(yīng)4)。反應(yīng)混合物在約0-50℃(優(yōu)選的是室溫)下攪拌約1小時-3天，優(yōu)選的是1大。
本發(fā)明酸性化合物的藥用鹽是與堿形成的鹽類，稱為陽離子鹽類，如堿和堿土金屬鹽，比如鈉，鋰，鉀，鈣，鎂以及銨鹽，如銨，三甲基銨，二乙基銨以及三(羥基甲基)-甲基銨鹽。
相似地，酸加成鹽(例如無機酸，有機羧酸和有機磺酸，如鹽酸，甲磺酸，馬來酸)也可以與堿性基團(如吡啶基)構(gòu)成結(jié)構(gòu)的一部分。
式I化合物或它們藥用鹽(下文中也稱為本發(fā)明化合物)抑制基質(zhì)金屬蛋白酶或腫瘤壞死因子(TNF)生成的能力，以及它們治療以基質(zhì)金屬蛋白酶或腫瘤壞死因子生成為特征的疾病的有效性的證明，可以參見下面的體外分析結(jié)果。
生物試驗人類膠原酶的抑制(MMP-1)采用下列比例，使用胰蛋白酶可以活化人類重組膠原酶每100μg膠原酶10μg胰蛋白酶。將胰蛋白酶和膠原蛋白在室溫下培養(yǎng)10分鐘。然后加入5倍過量的(50μg/10μg胰蛋白酶)大豆胰蛋白酶抑制劑。
在二甲亞砜中制備10mM的抑制劑貯備液，然后按下面稀釋。
10mM→120μM→12μM→1.2μM→0.12μM取每個濃度25mL溶液加到96孔顯微平皿的合適孔內(nèi)，每個樣品制備三份。加入酶和底物后抑制劑的最終濃度按1∶4稀釋。在D1-D6孔中建立陽性對照(有酶，無抑制劑)，在D7-D12孔中建立空白對照(無酶，無抑制劑)。
將膠原酶稀釋至400ng/mL，向上述顯微平皿的合適孔內(nèi)加入25μL該溶液。試驗中膠原酶的最終濃度為100ng/mL。
制備5mM底物(DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH2)的二甲亞砜貯備溶液，然后用分析緩沖液稀釋至20μM。在顯微平皿的每個孔中加入50μL底物，得到的最終濃度為10μM，開始進行分析。
在0分鐘以及每20分鐘為一間隔時進行熒光讀數(shù)(360nM激發(fā)，460nM發(fā)射)。分析在室溫下進行，典型的分析時間為3小時。
然后就空白及含有樣品的膠原酶的熒光相對于時間的結(jié)果繪圖(取三個樣品的平均數(shù))。選擇提供較好信號的時間點(空白)以及曲線上的直線部分時間點(通常在120分鐘左右)來確定IC50值。零時刻被作為每個化合物在每個濃度下的空白，并且，這些值須從120分鐘得到的數(shù)據(jù)中扣除。就抑制濃度相對于％對照樣品的數(shù)據(jù)進行繪圖(抑制劑熒光值除去單獨膠源酶的熒光值×100)。給出相當于對照樣品50％信號值時對應(yīng)的抑制劑濃度被確定為IC50值。
如果報告的IC50值＜0.03μM，則在0.3μM，0.03μM，0.03μM以及0.003μM濃度下分析抑制劑。
明膠酶抑制(MMP-2)在與人類膠原酶抑制(MMP-1)相同的條件下，采用DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH2底物(10μM)分析明膠酶的活性。
在4℃下，用1mMAPMA(對氨基苯基乙酸汞)使72KD的明膠酶活化，并將其稀釋至最終濃度為100mg/mL。將用于抑制人類膠原酶(MMP-1)的抑制劑進行稀釋，得到最終濃度為30μM，3μM，0.3μM和0.03μM，每個濃度制備3份。
在0分鐘以及每20分鐘為一間隔時進行熒光讀數(shù)(360nM激發(fā)，460nM發(fā)射)，共持續(xù)4小時。
測定每一個人類膠原酶(MMP-1)的抑制。如果報告的IC50值＜0.03μM，則在0.3μM，0.03μM，0.003μM以及0.003μM的最終濃度下檢測抑制劑。
溶基質(zhì)素活性的抑制(MMP-3)溶基質(zhì)素活性抑制是基于Weingarten和Feder(Weingarten，H.和Feder，J.，Spectrophotometric Assay for VertebrateCollagenase，Anal.Biochem.147，437-440(1985))所描述的改進的分光光度分析法進行的。硫代肽酯(peptolide)底物[Ac-Pro-Leu-Gly-SCH[CH2CH(CH3)2]CO-Leu-Gly-OC2H5]的水解產(chǎn)生了硫醇片斷，在Ellman’s試劑的存在下，可對其進行監(jiān)測。
用胰蛋白酶活化人類重組前溶基質(zhì)素，使用比例為每26μg溶基質(zhì)素1μL的10mg/mL胰蛋白酶貯備液。胰蛋白酶和溶基質(zhì)素在37℃下培養(yǎng)15分鐘，接著與10μL 10mg/mL大豆胰蛋白酶抑制劑于37℃下培養(yǎng)10分鐘以終止胰蛋白酶活性。
用96孔顯微平皿并在總體積為250μL的分析緩沖液(200mM氯化鈉，50mM MES以及10mM氯化鈣，pH6.0)中進行分析。用分析緩沖液將活化的溶基質(zhì)素稀釋至25μg/mL。在二甲基甲酰胺中制備1M的Ellman’s試劑(3-羧基-4-硝基苯基二硫化物)儲備溶液，并用緩沖液稀釋至濃度為5mM，以使在每孔50μL加量下可以產(chǎn)生1mM的最終濃度。
在二甲基亞砜中制備10mM抑制劑貯備溶液，并用緩沖液進行系列稀釋，以便將50μL該溶液加到合適的孔中時，可以產(chǎn)生的最終濃度為3μM，0.3μM，0.003μM以及0.0003μM。所有的條件制備3份樣品。
用分析緩沖液將300mM肽底物的二甲基亞砜貯備溶液稀釋到15mM，向每孔中加入50μL該溶液后得到最終濃度為3mM的底物，開始進行分析。背景含有肽底物和Ellman’s試劑，但沒有酶。用Molecular Devices Uvmax平皿讀數(shù)器在405nm處監(jiān)測產(chǎn)品的形成。
用與同膠原酶相同的方法測定IC50值。
MMP-13的抑制37℃下，用2mM APMA(對氨基苯基乙酸汞)使人類重組MMP-13活化1.5小時，并用分析緩沖液(50mM Tris，pH 7.5，200mM氯化鈉，50mM氯化鈣，20μM氯化鋅以及0.02％ brij)將其稀釋至400mg/ml。 96孔顯微平皿的每一個孔中加25μl稀釋液。在分析緩沖液中以1∶4的比例加入抑制劑和底物對酶進行稀釋，使其在分析緩沖液中的最終濃度為100mg/ml。
在二甲基亞砜中制備10mM抑制劑貯備溶液，并按照用于抑制人類膠原酶(MMP-1)的抑制劑稀釋路線用緩沖液對其進行稀釋，向顯微平皿中加入25μl各個濃度的溶液，每個樣品制備3份。分析緩沖液中的最終濃度為30μM，3μM，0.3μM和0.03μM。
制備用于抑制人類膠原酶(MMP-1)的底物(Dnp-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(NNA)-NH2]，并向每孔中加入50μL該溶液，使最終的分析濃度為10μM。在0時刻以及每5分鐘時進行熒光讀數(shù)(360nM激發(fā)，450nM發(fā)射)，持續(xù)1小時。
陽性對照含有酶和底物，但不含抑制劑，空白僅含有底物。
用與同人類膠原酶(MMP-1)相同的方法測定IC50值。如果報告的IC50值＜0.03μM，則在0.3μM，0.03μM，0.003μM以及0.0003μM的最終濃度下進一步分析抑制劑。
TNF生成的抑制下列體外分析顯示了化合物或其藥用鹽抑制TNF生成的能力并隨之證明了它們在治療與TNF生成有關(guān)疾病方面的效力采用一步Ficoll-hypaque(3，5-二乙酰胺基-2，4，6-三碘苯甲酸鈉)分離技術(shù)，從人抗凝血中將人類單核細胞分離出來。(2)在Hanks平衡鹽溶液(HBSS)中，用二價陽離子溶液將單核細胞洗滌三次，并將其再懸浮于含有1％BSA、密度為2×106/ml的HBSS中。用Abbott Cell Dyn 3500分析儀測定得到的分化計數(shù)表明在這些制備物中，單細胞占細胞總數(shù)的17-24％。
將180μL細胞懸浮物等分到96孔平皿的平整底部(Costar)。加入化合物和LPS(最終濃度為100ng/ml)，最終體積達到200μL。所有條件制備3份。在一個加濕二氧化碳培養(yǎng)器中培養(yǎng)4小時后，移去平皿，離心(大約250×g，10分鐘)，除去上清液，用R&D ELISAKit分析TNFa。
就哺乳動物(包括人類)的給藥來說，為了抑制基質(zhì)金屬蛋白酶或腫瘤壞死因子(TNF)的生成，可以采用各種常規(guī)的給藥途徑，包括口服、非腸道以及局部給藥。通常活性成分以口服或非腸道途徑給藥，劑量在約0.1至25mg/Kg接受者體重/每天，優(yōu)選的是0.3至5mg/Kg。然而，根據(jù)接受治療對象的情況，劑量可進行必要的變化。在任何情況下，負責給藥的人將根據(jù)給藥對象的情況來決定合適的給藥劑量。
本發(fā)明化合物可以很多不同的劑型給藥，一般來說，上述劑型的治療有效劑量的本發(fā)明化合物的濃度水平在約5.0％至70％(重量比)。
對于口服給藥而言，可以采用含有各種賦形劑(例如微晶纖維素，檸檬酸鈉，碳酸鈣，磷酸二鈣以及甘油)的片劑，其可帶有各種崩解劑，例如淀粉(優(yōu)選的是玉米、土豆或木薯淀粉)，藻酸以及某些復合硅酸鹽，還可以含有?；澈蟿缇垡蚁┻量┩橥?，蔗糖，明膠以及金合歡素。另外，片劑中還常使用潤滑劑，例如硬脂酸鎂，月桂基硫酸鈉以及滑石。相似類型的固體組合物也被用作明膠膠囊中的填充劑；在這種情況中，優(yōu)選的材料包括乳糖或牛奶糖以及高分子量的聚乙二醇。當需要水合懸浮液和/或酏劑進行口服給藥時，可將活性成分與各種增甜劑或增味劑，增色物質(zhì)以及染料合用，并且如有所需，還可與乳化劑及懸浮劑合用，同時其還可以含有稀釋劑，如水，乙醇，丙二醇，甘油以及各種它們的組合物質(zhì)。在進行動物給藥時，較好的是將這些物質(zhì)含于動物飼料或飲用水中，濃度為5-5000ppm，優(yōu)選的是25-500ppm。
對于非腸道給藥(肌內(nèi)，腹膜內(nèi)，皮下以及靜脈內(nèi))來說，通常是制備活性成分的無菌注射溶液。可以應(yīng)用本發(fā)明治療化合物的芝麻油或花生油溶液，或者是丙二醇的水溶液。水溶液應(yīng)適當調(diào)節(jié)和緩沖，優(yōu)選的是pH大于8，如有所需，須首先使液體稀釋劑等滲。這些水溶液適合于靜脈給藥。油性溶液適合于關(guān)節(jié)內(nèi)，肌內(nèi)和皮下注射給藥。采用本領(lǐng)域內(nèi)專家們熟知的方法，可以方便地在無菌條件下完成所有這些溶液的制備。在進行動物給藥時，可以采用肌內(nèi)和皮下注射給藥，劑量水平在約0.1-50mg/Kg/天，優(yōu)選的是0.2-10mg/Kg/天，可以采取單一劑量或多至3個分開劑量進行給藥。
下列實施例將說明本發(fā)明，但并不限制本發(fā)明的詳細內(nèi)容。
制備A4-(4-氟苯氧基)苯磺?；然镌跈C械攪拌下，將氯代磺酸(26ml，0.392mole)滴加到冰冷的4-氟代苯氧基苯(36.9g，0.196mole)。加入完畢，混合物于室溫下攪拌4小時。將其傾入冰水中。濾集產(chǎn)品4-(4-氟苯氧基)苯磺?；然?18.6g，33％)，并在空氣中干燥。
制備B4-(3-甲基丁氧基)苯磺酸鈉使4-羥基苯磺酸(10.0g，43.1mmole)以及氫氧化鈉(3.3g，83mole)的水溶液(40mL)與1-碘-3-甲基丁烷(11.3mL，86.4mmole)的異丙醇溶液(60mL)進行混合，生成的混合物加熱回流2天。減壓蒸除異丙醇。過濾并用異丙醇洗滌，得到10.0g(87％)標題化合物。
制備C4-(3-甲基丁氧基)苯磺酰氯使4-(3-甲基丁氧基)苯磺酸鈉(2.5g，9.4mmole)，亞硫酰氯(10mL)以及5滴N，N-二甲基甲酰胺的混合物一起回流5小時。冷卻后，蒸除多余的亞硫酰氯，殘渣溶于乙酸乙酯中。溶液在冰浴上冷卻，加水。分出有機相，用水和鹽水洗滌。硫酸鈉干燥后，蒸除溶劑，得到2.4g(95％)標題化合物，其為油狀物。
制備D4-(2-環(huán)戊基乙氧基)苯磺酸鈉將4-羥基苯磺酸(65g，282mmole)以及氫氧化鈉(2.2g，55mole)的水溶液(15mL)與2-(溴乙基)環(huán)戊烷(15.0g，84.7mmole)的異丙醇溶液(40mL)進行混合，生成的混合物加熱回流2天。減壓蒸除異丙醇。過濾并用異丙醇洗滌，得到4.7g(57％)標題化合物。
制備E4-(3-甲基丁氧基)苯磺酰氯使4-(2-環(huán)戊基乙氧基)苯磺酸鈉(2.5g，8.6mmole)，亞硫酰氯(15mL)以及幾滴N，N-二甲基甲酰胺的混合物一起回流5小時。冷卻后，蒸除多余的亞硫酰氯，殘渣溶于乙酸乙酯中。溶液在冰浴上冷卻，加水。分出有機相，用水和鹽水洗滌。硫酸鈉干燥后，蒸除溶劑，得到2.24g(90％)標題化合物，其為油狀物。
制備F4’-氟代聯(lián)苯基磺?；然镌诒嚢柘?，將氯代磺酸(8.7mL，0.13mole)滴加到4-氟代聯(lián)苯(10.2g，59mole)中。冰浴下繼續(xù)攪拌0.5小時，然后將混合物傾入冰中。濾集生成的白色沉淀并將其溶于氯仿中。用水和鹽水洗滌氯仿溶液，硫酸鎂干燥，濃縮，得到一白色固體。通過用乙酸乙酯對其進行重結(jié)晶，將所需產(chǎn)品4’-氟代聯(lián)苯基磺?；然?4.3g，27％)從4’-氟代聯(lián)苯基磺酸(不想要的副產(chǎn)物)中分離出來，剩余的物質(zhì)用己烷進行重結(jié)晶。
制備G4-(4-氟代芐氫基)苯磺酸鈉向4-羥基苯磺酸(513g，221mmole)的1N氫氧化鈉水溶液(23mL)中加入4-氟代溴芐(33mL，265mmole)的乙醇溶液(20mL)。生成的混合物加熱回流2天。冷卻并放置后，出現(xiàn)白色沉淀。濾集沉淀，并用乙酸乙酯和乙醚進行洗滌，得到4.95g(74％)4-(4-氟代芐氧基)苯磺酸鈉。
制備H4-(4-氟代芐氧基)苯磺酰氯向4-(4-氟代芐氧基)苯磺酸鈉(0.5g，1.64mmole)的二氯甲烷(5mL)漿狀物中加入五氯化磷(275mg，1.31mmole)。生成的混合物一起回流7小時。冰浴冷卻后用水(15mL)終止反應(yīng)，用乙酸乙酯提取。有機相用鹽水洗滌。硫酸鈉干燥后，蒸除溶劑，得到4-(4-氟代芐氧基)苯磺酰氯(130mg，26％)，其為白色固體。
制備I
4-(4-氯代芐氧基)苯磺酰氯室溫攪拌下，將氯代苯磺酸(9.7mL，0.147mole)滴加到4-氯代苯氧基苯(12.6mL，73.4mmole)中。加入完畢，生成的混合物于室溫下攪拌1小時，然后將其傾入冰水中。濾集固體，空氣中干燥，用石油迷和乙酸乙酯重結(jié)晶，得到4-(4-氯代芐氧基)苯磺酰氯(7.43g，33％)。
實施例11-(4-甲氧基苯磺?；被?環(huán)戊烷-1-甲酸羥基酰胺(A)向1-氨基環(huán)戊烷-1-甲酸(6.0g，46.5mmole)和三乙胺(14mL，100mmole)的二噁烷(90mL)和水(90mL)溶液中加入4-甲氧基苯磺酰氯(10.6g，51.3mmole)?；旌衔镉谑覝叵聰嚢?小時，用1N鹽酸溶液酸化，乙酸乙酯提取兩次。合并的乙酸乙酯提取液用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，濃縮，得到一個褐色固體，用氯仿研制，5.42g(39％)得到1-(4-甲氧基苯磺?；被?環(huán)戊烷-1-甲酸，其為白色固體。
(B)向1-(4-甲氧基苯磺?；被?環(huán)戊烷-1-甲酸(4.65g，15.2mmole)和三乙胺(2.5mL，17.9mmole)的二氯甲烷(120mL)溶液中加入(苯并三唑-1-基氧)三(二甲基氨基)-磷鎓六氟磷酸鹽(酯)(7.4g，16.3mmole)?；旌衔镉谑覝叵聰嚢?.5天。蒸除溶劑，殘渣用乙酸乙酯提取。溶液依次用0.5N鹽酸溶液，水和鹽水洗滌。硫酸鎂干燥后濃縮溶劑，得到1-(4-甲氧基苯磺酰基氨基)環(huán)戊烷-甲酸苯并三唑-1-基酯，其為黃色固體。將其溶于N，N-二甲基甲酰胺(120mL)中，向生成的溶液中加入二異丙基乙基胺(5.3mL，30mmole)和O-芐基羥胺鹽酸鹽(3.2g，20mmole)。混合物在50℃的油浴上加熱20小時。蒸除溶劑，加入乙酸乙酯。過濾混合物，收集白色固體。濾液依次用0.5N鹽酸溶液，飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌。蒸除溶劑，得到的固體與前述過濾得到的固體合并，用乙酸乙酯研制，得到2.92g(47％)1-(4-甲氧基苯磺酰基氨基)環(huán)戊烷-1-甲酸芐氧基酰胺，其為白色固體。
(C)用5％Pd/硫酸鋇(0.75g)處理1-(4-甲氧基苯磺?；被?環(huán)戊烷-1-甲酸芐氧基酰胺(1.50mL，3.71mmole)的甲醇溶液(200mL)，并在3個大氣壓下，于Parr shaker中進行氫化3.5小時。使混合物通過0.45μm的尼龍過濾器，濾液濃縮，得到1.13g(97％)1-(4-甲氧基苯磺?；被?環(huán)戊烷-1-甲酸羥基酰胺，其為白色固體。MS313(M-1)。
采用與實施例1中相似的方法，使用下列試劑，可以制備實施例2-8中的標題化合物。
實施例21-(4-甲氧基苯磺酰基氨基)環(huán)己烷-1-甲酸羥基酰胺1-氨基環(huán)己烷-1-甲酸；4-甲氧基苯磺酰氯。MS327(M-1)。
實施例31-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)戊烷-1-甲酸羥基酰胺1-氨基環(huán)戊烷-1-甲酸；4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氯。MS393(M-1)。元素分析(C18H19FN2O5S.0.25H2O)理論值C 54.19，H4.93，N 7.02。實測值C 54.20，H 5.13，N 7.08實施例41-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)己烷-1-甲酸羥基酰胺
1-氨基環(huán)己烷-1-甲酸；4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氯。氯仿重結(jié)晶。MP174℃；MS393(M-1)。
實施例51-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丙烷-1-甲酸羥基酰胺1-氨基環(huán)丙烷-1-甲酸；4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氯。MP184℃；MS365(M-1)；元素分析(C16H15FN2O5S)理論值C 52.45，H4.13，N 7.65。實測值C 52.20，H 4.34，N 7.44。
實施例61-(4’-氟代聯(lián)苯基-4-磺酰氨基)環(huán)戊烷-1-甲酸羥基酰胺1-氨基環(huán)戊烷-1-甲酸；4’-氟代聯(lián)苯基磺酰氯。氯仿重結(jié)晶。MP159℃；MS377(M-1)。
實施例71-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丁烷-1-甲酸羥基酰胺1-氨基環(huán)丁烷-1-甲酸；4-(氟苯氧基)苯磺酰氯。MS379(M-1)。
實施例81-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丙烷-1-甲酸羥基酰胺1-氨基環(huán)丙烷-1-甲酸；4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氯。MS379(M-1)。
實施例9N-羥基-2-(4-甲氧基苯磺酰氨基)-2-甲基丙酰胺(A)在冰浴上，將2-氨基-2-甲基丙酸芐酯鹽酸鹽(12.0g，52.2mmole)和4-甲氧基苯磺酰(11.9g，57.6mmole)的二噁烷溶液(100mL)以及水(100mL)進行冷卻。加入三乙胺(18.2mL，0.13mole)。移去冰浴，混合物于室溫下攪拌2天。減壓蒸除溶劑，殘余物溶于乙酸乙酯和水，分出水層，用乙酸乙酯提取兩次，合并的有機層依次用飽和碳酸氫鈉水溶液、1N鹽酸以及鹽水洗滌。硫酸鈉干燥后，蒸發(fā)溶劑，得到黃色油狀物(19.3g)，其中的一部分(10g)用硅膠層析純化，以3∶7的乙酸乙酯/己烷進行洗脫，乙酸乙酯/己烷重結(jié)晶后，得到6.59g(67％)2-(4-甲氧基苯磺酰氨基)-2-甲基丙酸芐酯，其為白色固體。
(B)在Parr振蕩器中，用10％Pd/C(0.17g)和3大氣壓的氫氣對2-(4-甲氧基苯磺酰氨基)-2-甲基丙酸芐酯(1.5g，4.13mmole)的乙醇溶液(80mL)處理1.5小時。使混合物通過0.45μm的尼龍過濾器除去催化劑，濃縮濾液，得到1.09g(96％)2-(4-甲氧基苯磺酰氨基)-2-甲基丙酸，其為白色固體。
(C)將2-(4-甲氧基苯磺酰氨基)-2-甲基丙酸(1.08g，3.95mmole)的二氯甲烷(120mL)溶液在冰浴上進行冷卻。依次加入三乙胺(2.2mL，15.8mmole)，(苯并三唑-1-基氧)三(二甲基氨基)-磷鎓六氟磷酸(酯)鹽(2.6g，5.88mmole)以及O-芐基羥胺鹽酸鹽(0.95g，5.95mmole)。生成的混合物于室溫下攪拌16小時。蒸除溶劑，殘余物溶于用乙酸乙酯和水，溶液依次用1N鹽酸，飽和碳酸氫鈉水溶液，水及鹽水洗滌。硫酸鈉干燥后，蒸發(fā)溶劑，得到油狀物。對其進行硅膠層析純化，以1∶2的乙酸乙酯/己烷進行洗脫，得到1.41g(95％)所需的N-芐氧基-2-(4-甲氧基苯磺酰氨基)-2-甲基丙酰胺，其為白色固體。
(D)在Parr振蕩器中，用5％Pd/硫酸鋇(0.75g)和3大氣壓的氫氣對N-芐氧基-2-(4-甲氧基苯磺酰氨基)-2-甲基丙酰胺，(1.40g，3.70mmole)的甲醇溶液(80mL)處理1.5小時。使混合物通過0.45μm尼龍過濾器，除去催化劑，濃縮濾液，得到1.06g(100％)N-羥基-2-(4-甲氧基苯磺酰氨基)-2-甲基丙酰胺，其為白色固體。MP122-125℃，MS289(M+1)元素分析(C11H16N2O5S)理論值C 45.82，H 5.59，N 9.72；實測值C 45.88，H 5.60，N 9.69。
采用與實施例9中相似的方法，使用下列試劑，可以制備實施例10-12中的標題化合物。
實施例102-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]-N-羥基-2-甲基丙酰胺2-氨基-2-甲基丙酸芐酯鹽酸鹽；4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氯。MP133-134℃，MS369(M+1)元素分析(C16H17FN2O5S)理論值C 52.17，H 4.65，N 7.60；實測值C 52.21，H 4.83，N 7.80。
實施例11N-羥基-2-甲基-2-[4-(3-甲基丁氧基)苯磺酰氨基]-丙酰胺2-氨基-2-甲基丙酸芐酯鹽酸鹽；4-(3-甲基丁氧基)苯磺酰氯。乙酸乙酯/己烷重結(jié)晶。MP126.5-128℃，MS343(M-1)元素分析(C15H24N2O5S)理論值C 52.31，H 7.02，N 8.13；實測值C 52.30，H 7.07，N 8.16。
實施例122-[4-(2-環(huán)戊基乙氧基)苯磺酰氨基]-N-羥基-2-甲基-丙酰胺
2-氨基-2-甲基丙酸芐酯鹽酸鹽；4-(2-環(huán)戊基乙氧基)苯磺酰氯。乙酸乙酯/己烷重結(jié)晶。MP126-127℃，MS369(M-1)元素分析(C17H26N2O5S)理論值C 55.12，H 7.07，N 7.56；實測值C 55.46，H 7.09，N 7.38。
實施例13N-羥基-2-甲基-2-(5-吡啶-2-基噻吩-2-磺酰氨基)-丙酰胺(A)向2-氨基-2-甲基丙酸(2.0g，19.4mmole)的1N氫氧化鈉溶液(45mL)中加入5-吡啶-2-基噻吩-2-磺酰氯(8.41g，32.4mmole)。生成的混合物于室溫下攪拌16小時。再向其中加入1N氫氧化鈉溶液(45mL)，用乙醚提取。棄去有機層，水層用1N鹽酸溶液酸化，乙酸乙酯提取。乙酸乙酯部分用鹽水洗滌。硫酸鈉干燥后，濃縮，得到2.18g(34％)2-甲基-2-(5-吡啶-2-基噻吩-2-磺酰氨基)丙酸，其為白色固體。
(B)向2-甲基-2-(5-吡啶-2-基噻吩-2-磺酰氨基)丙酸(1.60g，4.91mmole)的二氯甲烷(160ml)溶液中加入三乙胺(2.3mL，16.5mmole)，(苯并三唑-1-基氧)三(二甲基氨基)-磷鎓六氟磷酸鹽(酯)(2.4g，5.41mmole)以及O-(2-三甲基甲硅烷基乙基)羥胺鹽酸鹽(0.92g，5.41mmole)。生成的混合物于室溫下攪拌16小時。蒸除溶劑，殘渣用乙酸乙酯和水提取。溶液依次用水，1N鹽酸，飽和碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌。硫酸鈉干燥后，蒸發(fā)溶劑，得到白色泡沫狀物。對其進行硅膠層析純化，以3∶2的乙酸乙酯/己烷進行洗脫，得到220mg(10％)所需的2-甲基-2-(5-吡啶-2-基噻吩-2-磺酰氨基)-N-2-(三甲基硅烷基乙氧基)丙酰胺，其為白色固體。
(C)將2-甲基-2-(5-吡啶-2-基噻吩-2-磺酰氨基)-N-2-(三甲基硅烷基乙氧基)丙酰胺(80mg，0.18mmole)溶于三氟乙酸中，生成的混合物于室溫下攪拌16小時。減壓蒸除三氟乙酸，用甲醇使之溶解，得到N-羥基-2-甲基-2-(5-吡啶-2-基噻吩-2-磺酰氨基)-丙酰胺(60mg，97％)，其為黃色油狀物，再用乙醇重結(jié)晶。MP165-166℃。MS342(M+1)。
采用與實施例13中相似的方法，使用下列試劑，可以制備實施例14-15中的標題化合物。
實施例141-(5-吡啶-2-基-噻吩-2-磺酰氨基)環(huán)戊烷-1-甲酸羥基酰胺1-氨基環(huán)戊烷-1-甲酸；5-吡啶-2-基噻吩-2-磺酰氯。MS368(M+1)。
實施例151-[4-(4-氯苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丙烷-1-甲酸羥基酰胺1-氨基環(huán)丙烷-1-甲酸；4-(4-氯苯氧基)苯磺酰氯。MS381(M-1)。
權(quán)利要求
1.具下式的化合物或其藥用鹽，
其中R1和R2各自獨立為(C1-C6)烷基，三氟甲基，三氟甲基(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷基(二氟亞甲基)，(C1-C3)烷基(二氟亞甲基(C1-C3)烷基，(C6-C10)芳基，(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳基(C1-C6)烷基，或R1和R2一起構(gòu)成(C3-C6)環(huán)烷基或苯并稠合(C3-C6)環(huán)烷基環(huán)或下式基團
其中的n和m各自獨立為1或2且X為CF2，S，O或NR3，其中R3為氫，(C1-C6)烷基，(C6-C10)芳基，(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳基(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷基磺?；?，(C6-C10)芳基磺?；蝓；徊⑶襋為(C1-C6)烷基，(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基，(C6-C10)芳基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷基(C2-C9)雜芳基，(C1-C6)烷氧基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳氧基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳氧基(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷基(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷基(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷基(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C1-C6)烷氧基(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C1-C6)烷氧基(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基或(C1-C6)烷氧基(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，其中的每一個芳基基團可以任意地被氟，氯，溴，(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基或全氟(C1-C3)烷基取代。
2.權(quán)利要求1中的化合物，其中的R1和R2一起構(gòu)成(C3-C6)環(huán)烷基或苯并稠合(C3-C6)環(huán)烷基環(huán)或下式基團
其中的n和m各自獨立為1或2且X為CF2，S，O或NR3，其中R3為氫，(C1-C6)烷基，(C6-C10)芳基，(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳基(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷基磺?；?C6-C10)芳基磺?；蝓；?。
3.權(quán)利要求2中的化合物，其中的R1和R2一起構(gòu)成(C3-C6)環(huán)烷基或苯并稠合(C3-C6)環(huán)烷基環(huán)。
4.權(quán)利要求1中的化合物，其中的Q為(C1-C6)烷基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C6-C10)芳基或(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基。
5.權(quán)利要求4中的化合物，其中的Q為(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基。
6.權(quán)利要求1中的化合物，其中的R1和R2各自獨立地為(C1-C6)烷基。
7.權(quán)利要求1中的化合物，其中的R1和R2一起構(gòu)成(C3-C6)環(huán)烷基或苯并稠合(C3-C6)環(huán)烷基環(huán)或下式基團
其中的n和m各自獨立為1或2且X為CF2，S，O或NR3，其中R3為氫，(C1-C6)烷基，(C6-C10)芳基，(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C1-C6)烷基，(C2-C9)雜芳基(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷基磺?；?C6-C10)芳基磺?；蝓；?；且Q為(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C6-C10)芳基或(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基。
8.權(quán)利要求1中的化合物，其中的R1和R2一起構(gòu)成(C3-C6)環(huán)烷基或苯并稠合(C3-C6)環(huán)烷基環(huán)；并且Q為(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C6-C10)芳基或(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基。
9.權(quán)利要求1中的化合物，其中的R1和R2各自獨立為(C1-C6)烷基，且Q為(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基，(C6-C10)芳氧基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C2-C9)雜芳基，(C6-C10)芳基(C2-C9)雜芳基，(C2-C9)雜芳基(C6-C10)芳基或(C2-C9)雜芳氧基(C6-C10)芳基。
10.權(quán)利要求1中的化合物，其中的R1和R2各自獨立為(C1-C6)烷基；并且Q為(C6-C10)芳氧基(C6-C10)芳基。
11.權(quán)利要求1中的化合物，其中所述的化合物選自下列化合物3-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]氮雜環(huán)丁烷-3-甲酸羥基酰胺；4-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]哌啶-4-甲酸羥基酰胺；1-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丙烷-1-甲酸羥基酰胺；1-[4-(4-氯苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丙烷-1-甲酸羥基酰胺；1-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丁烷-1-甲酸羥基酰胺；1-[4-(4-氯苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)丁烷-1-甲酸羥基酰胺；1-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)戊烷-1-甲酸羥基酰胺；1-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]環(huán)己烷-1-甲酸羥基酰胺；2-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]-N-羥基-2-甲基丙酰胺；2-[4-(4-氯苯氧基)苯磺酰氨基]-N-羥基-2-甲基丙酰胺；N-羥基-2-甲基-2-(5-吡啶-2-基噻吩-2-磺酰氨基)丙酰胺；1-(5-吡啶-2-基-噻吩-2-磺酰氨基)環(huán)戊烷-1-甲酸羥基酰胺；1-(4’-氟代聯(lián)苯基-4-磺酰氨基)環(huán)丙烷-1-甲酸羥基酰胺；1-(4’-氟代聯(lián)苯基-4-磺酰氨基)環(huán)丁烷-1-甲酸羥基酰胺；1-(4’-氟代聯(lián)苯基-4-磺酰氨基)環(huán)戊烷-1-甲酸羥基酰胺；2-(4-甲氧基苯磺酰氨基)1，2-二氫化茚-2-甲酸羥基酰胺；以及2-[4-(4-氟苯氧基)苯磺酰氨基]1，2-二氫化茚-2-甲酸羥基酰胺。
12.藥物組合物，其用于治療下列疾病(a)關(guān)節(jié)炎，癌癥，組織潰瘍形成，斑退化，(心瓣膜)再狹窄，牙周疾病，大皰性表皮松懈，鞏膜炎，NASID和止痛藥聯(lián)用，與細胞毒抗癌藥聯(lián)用，以及其它以基質(zhì)金屬蛋白酶活性為特征的疾病，AIDS，膿毒病，膿毒性休克以及其它涉及腫瘤壞死因子(TNF)生成的疾病，或(b)抑制哺乳動物(包括人類)體內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶或腫瘤壞死因子(TNF)的生成，其包括治療有效劑量的權(quán)利要求1化合物和藥用載體。
13.抑制(a)哺乳動物(包括人類)體內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶或(b)腫瘤壞死因子(TNF)生成的方法，其包括給予所述哺乳動物有效劑量的式I化合物。
14.治療下列疾病的方法關(guān)節(jié)炎，癌癥，組織潰瘍形成，斑退化，(心瓣膜)再狹窄，牙周疾病，表皮松懈bullosa，鞏膜炎，與NSAID和止痛藥合用，與細胞毒抗腫瘤劑合用，以及其它以基質(zhì)金屬蛋白酶活性為特征的疾病，AIDS，膿毒病，膿毒性休克以及其它涉及哺乳動物(包括人類)體內(nèi)腫瘤壞死因子(TNF)生成的疾病，該方法包括，在這類治療中給予所述哺乳動物有效劑量的權(quán)利要求1化合物。
全文摘要
具式(Ⅰ)的化合物(其中R
文檔編號A61K31/18GK1249743SQ98802991
公開日2000年4月5日 申請日期1998年1月12日 優(yōu)先權(quán)日1997年2月3日
發(fā)明者R·P·小羅賓遜, K·F·麥克盧爾 申請人:輝瑞產(chǎn)品公司