專利名稱：新化合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及藥學上有用的吡唑并[3，4-d]嘧啶二酮化合物、它們的制備方法、含有它們的藥用組合物以及它們在治療多種疾病中的用途。
T-細胞在免疫反應中具有重要作用，然而在自身免疫性疾病中針對特殊組織的T-細胞被激活，例如，引起與類風濕性關節(jié)炎相關的炎癥。白細胞介素-2(IL-2)是T-細胞的基本自分泌生長因子，因此，抑制IL-2的轉錄有利于調(diào)節(jié)自身免疫性疾病。作用于IL-2啟動子的激活T-細胞-1的核因子(NFAT-1)的蛋白轉錄復合體的形成為IL-2轉錄所必需。此前NFAT-1調(diào)節(jié)的轉錄已被認為是合適的免疫調(diào)節(jié)的分子靶體，Y.Baine等在J.Immunol.1995，154，3667-3677中，W.F.Michne等在J.Med.Chem.1995，38，2557-2569中公開了一些喹唑啉-2，4-二酮和吡咯并[3，4-d]嘧啶-2，4-二酮，它們抑制與DFAT-1蛋白結合的NNA片斷調(diào)節(jié)的轉錄。
根據(jù)本發(fā)明此處提供式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽，
其中R1是C1-6烷基、C3-6鏈烯基或C3-6環(huán)烷基；R2是C1-4烷基或C3-6鏈烯基；
R3是1-或2-茚滿基、1-或2-(1，2，3，4-四氫萘基)、9-芴基、苊基或CHR4(CH2)nAr其中n是0或1，R4是氫或C1-6烷基而Ar是喹啉基、萘基、任選一個或多個鹵原子取代的benzodioxolinyl、或任選被一個或多個選自氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基和苯基磺酰甲基的取代基取代的苯基；W是H、CH2OH、CO2H、CO2C1-6烷基、CH2NR5R6、CONR5R6，其中R5和R6獨立是氫或C1-6烷基，或連同它們所結合的氮原子形成一個3-8元雜環(huán)并進一步任選含有氧原子或NR7基團而R7是氫或C1-6烷基，或W是吡啶基或苯基，它們均可任選被一個或多個選自鹵素、羥基、C1-6烷基和C1-6烷氧基的基團取代；X是化學鍵或C1-5亞烷基；Y是S(O)p、C≡C、CH＝CH、CH2CH2或CH2CH＝CH；和P是0、1或2；條件是·當W是H、CH2OH、CO2H、CO2C1-6烷基、CH2NR5R6或CONR5R6而Y是硫時，X不是鍵。
單獨的或作為其它基團一部分的烷基和鏈烯基基團，可以是直鏈的或分支的。本說明書定義的鏈烯基是那些雙鍵與雜原子不相鄰的基團。
合適的R1是C1-6烷基，C3-6鏈烯基或C3-6環(huán)烷基。優(yōu)選的R1是C1-4烷基或C3-4鏈烯基例如甲基、乙基、丙基、丁基、2-甲基-1-丙基、丙烯基、丁烯基或2-甲基-2-丙烯基。
合適的R2是C1-4烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基或2-甲基-1-丙基)或C3-6鏈烯基(例如丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基或2-甲基-2-丙烯基)。優(yōu)選R2是C1-4烷基，最優(yōu)選甲基。
合適的R3是1或2-茚滿基、1-或2-(1，2，3，4-四氫萘基)、9-芴基、苊基或CHR4(CH2)nAr，其中n是0或1，R4是氫或C1-6烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基)且Ar是喹啉基、萘基、任選被一個或多個(例如1、2或3個)鹵原子(如氟、氯或溴)取代的benzodioxolinyl、或任選一個或多個(例如1-4個，優(yōu)選1或2個)選自鹵原子(如氟、氯或溴)、C1-6烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基)、C1-6烷氧基(例如甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基)和苯基磺酰甲基的取代基取代的苯基。
優(yōu)選的R3是CHR4(CH2)nAr其中n是0，R4是氫和Ar是喹啉基、萘基、任選被一個或多個鹵原子取代的benzodioxolinyl、或任選被一個或多個選自鹵原子和苯基磺酰甲基的取代基取代的苯基。
合適的W是H、CH2OH、CO2H、CO2C1-6烷基，優(yōu)選CO2C1-4烷基(例如CO2CH3、CO2C2H5、CO2C3H7或CO2C4H9)、CH2NR5R6、CONR5R6，其中R5和R6獨立是氫原子或C1-6烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基)、或連同它們所結合的氮原子一起形成3-8元雜環(huán)，該雜環(huán)進一步任選含有氧原子或NR7基團，其中R7是氫或C1-6烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基)，或W是吡啶基或苯基，它們中的每一個均任選被一個或多個(如1、2或3個)選自鹵原子(如氟、氯或溴)、羥基、C1-6烷基(如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基)和C1-6烷氧基(如甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基)的取代基取代。
R5和R6形成3-8元雜環(huán)的基團實例包括哌啶、嗎啉和哌嗪環(huán)。
優(yōu)選的W是H、CH2OH、CO2H、CO2C1-6烷基或吡啶基。
合適的X是鍵或C1-5亞烷基，優(yōu)選C1-3亞烷基。
合適的Y是S(O)p(其中P是0，1或2)、C≡C、CH＝CH、CH2CH2或CH2CH＝CH。
優(yōu)選的Y是硫或CH2CH2。
優(yōu)選的式(I)化合物的亞類是其中R1是C1-4烷基或C3-4鏈烯基，R2是C1-4烷基，R3是CHR4(CH2)nAr其中n是0或1，R4是氫或C1-6烷基和Ar是喹啉基、萘基、任選由一個或多個鹵原子取代的benzodioxolinyl、或任選由一個或多個選自鹵原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基和苯基磺酰甲基的取代基取代的苯基，W是H、CH2OH、CO2H、CO2C1-6烷基或吡啶基，X是鍵或C1-3亞烷基，Y是硫或CH2CH2的式(I)化合物，條件是·當W是H、CH2OH、CO2H或CO2C1-6烷基而Y是硫時，X不是鍵。
特別優(yōu)選的式(I)化合物的亞類是其中R1是C4烷基或C4鏈烯基，R2是甲基，R3是CHR4(CH2)nAr其中n是0，R4是氫而Ar是喹啉基、萘基、任選由一個或多個氯原子取代的benzodioxolinyl、或任選由一個或多個選自鹵原子和苯基磺酰甲基的取代基取代的苯基，W是H、CH2OH、CO2H、CO2CH3或2-吡啶基，X是鍵或C1-3亞烷基；Y是硫或CH2CH2的式(I)化合物，條件是·當W是H、CH2OH、CO2H或CO2CH3及Y是硫時，X不是化學鍵。
本發(fā)明的特別優(yōu)選的化合物包括3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-3-[(2-吡啶基)硫代]-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，3-[(2-羥基乙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，3-[(4-羥基丁基)-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-3-丙基硫代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，3-[(3-羥基丙基)硫代-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，4-[(4，5，6，7-四氫-5-甲基-7-{2-甲基丙基}-2-{1-萘基甲基}-4，6-二氧代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)硫代]丁酸甲酯，
4-[(4，5，6，7-四氫-5-甲基-7-{2-甲基丙基}-2-{1-萘基甲基}-4，6-二氧代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)硫代]丁酸，3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(2-{苯磺酰甲基}苯基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，2-({5-氯苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-6-基}甲基)-3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，2-(3-氯-2-氟苯基甲基)-3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，和3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(2-喹啉基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，及其藥學上可接受的鹽。
本發(fā)明化合物可形成藥學上可接受的鹽。式(I)化合物可與酸形成酸式鹽，諸如常規(guī)的藥學上可接受的酸，例如馬來酸、鹽酸、氫氯酸、磷酸、乙酸、富馬酸、水楊酸、檸檬酸、乳酸、草酸、杏仁酸、酒石酸和甲磺酸。
某些式(I)化合物可以存在立體異構體形式包括對映體，本發(fā)明延及這些立體異構體的單體以及它們的混合物包括外消旋體。不同的立體異構體可由常規(guī)方法與另一異構體分離，或由立體特異性或不對稱合成法獲得給定的異構體。本發(fā)明還延及任何互變異構體及他們的混合物。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，此處給出式(I)化合物的制備方法，該方法包括(a)使式(II)化合物
其中R1，R2和R3與式(I)定義相同，與式(III)化合物反應L-Y-X-W (III)式(III)中L是離去基團，Y是硫，而X和W與式(I)定義相同，或(b)當Y是CH2CH2或CH2CH＝CH和R3是CHR4(CH2)nAr時，使式(IV)化合物
其中R3’是R3基團CHR4(CH2)nAr的前體而R1和R2與式(I)定義相同，與式(V)化合物反應OHC-Y-X-W (V)式(V)中，Y是CH2CH2或CH2CH＝CH而W和X與式(I)定義相同，或(c)當Y是C≡C、CH＝CH或CH2CH＝CH時，使式(VI)化合物
其中L1代表離去基團而R1、R2和R3與式(I)定義相同，與式(VII)或(VIII)化合物反應H2C＝CH-XaW HC≡C-XW(VII) (VIII)其中，式(VII)中的Xa是鍵或C1-6亞烷基而W與式(I)定義相同，而在式(VIII)中，W和X與式(I)定義相同，其后任選下列方法·將式(I)化合物轉變?yōu)榱硪环N式(I)化合物，和/或·形成藥學上可接受的鹽。
在低溫下以在惰性溶劑中的適當?shù)膲A處理式(II)化合物是進行式(II)與(III)化合物的反應的典型方法。適當?shù)膲A包括在-40℃或-40℃以下溶于四氫呋喃(THF)的二異丙基氨基化鋰(LDA)。優(yōu)選的離去基團L包括亞磺酸酯、甲苯磺?；蚣妆絹喕酋；?。此外當Y是硫時，離去基團自身可能是結構式為Y-X-W的基團，由此式(III)化合物是結構式為W-X-S-S-X-W的二聚體。
式(IV)與(V)化合物適宜在升高溫度(例如回流條件下)的惰性溶劑例如二甲基甲酰胺(DMF)中反應?；鶊FR3’是式(I)化合物中R3的適當前體例如R3’是R3的次烷基前體。
采用氧化劑，例如3-氯過氧苯甲酸或過一硫酸鉀(商標為“OXONE”的固體商品)，通過氧化反應使Y代表硫的式(I)化合物轉變?yōu)閅代表SO或SO2的其它式(I)化合物。
式(II)化合物可通過使(IX)化合物
其中R1和R2與式(I)定義相同，與式(X)化合物反應而制備L2-R3(X)式(X)中L2是離去基團而R3與式(I)定義相同。
式(IX)與式(X)化合物的反應適宜在堿(例如碳酸鈉或碳酸鉀)存在下在適當溶劑(例如丙酮)中進行。合適的離去基團L2包括鹵原子。
式(IX)化合物可由式(XI)化合物
其中R1和R2與式(I)定義相同，在高溫下(例如約90℃)與二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛或約0℃下與在二甲基甲酰胺(DMF)中的三氯氧化磷(POCl3)反應制備。
式(XI)化合物可采用本領域中已知的標準方法制備，例如以水合肼處理相應的鹵化物。
式(IV)化合物可通過上述定義的式(XI)化合物與式(XII)化合物反應制備。
Ar(CH2)n-CR4＝O (XII)式(XII)中Ar、n和R4與式(I)定義相同。
式(VI)和式(VII)化合物的反應可在Pd(OAc)2/P(0-Tol)3和堿(如三乙胺)的存在下在適當?shù)娜軇?如乙腈)中進行?？色@得式(I)化合物的混合物其中X’比式(I)定義的X少一個碳原子
式(VI)和式(VIII)化合物可在鈀催化劑與碘化酮存在下，在堿(例如三乙胺)的存在下，在適當?shù)娜軇?如乙腈)中反應。優(yōu)選的催化劑包括Pd(Ph3P)2Cl2。
式(VI)化合物的制備可以使式(VIII)化合物與堿再與鹵素(例如碘)反應以形成L1基團來進行
其中R1，R2和R3與式(I)定義相同?？稍诘蜏?例如約-70℃)下在惰性溶劑(如四氫呋喃)中用有機堿如二異丙基氨基化鋰(LDA)處理式(VIII)化合物。然后加入碘并任由反應混合物升至環(huán)境溫度。
采用本領域中已知步驟可使式(I)化合物轉變?yōu)榱硗獾氖?I)化合物。例如可使步驟(c)的反應產(chǎn)物氫化得到X/Y形成亞烷基鏈的式(I)化合物。此外，采用lindler催化劑可使Y是C≡C的式(I)化合物氫化為相應的Y是C＝C的式(I)化合物。
W基團也可相互轉換，例如當W是CO2H時，式(I)化合物可以轉換為W是CO2C1-6烷基、CONR5R6或CH2NR5R6的式(I)化合物。當W是CH2OH時，式(I)化合物可以轉換為W是CH2NR5R6的式(I)化合物。這些轉換的合適步驟可以用下列圖解表示
式(III)、(V)、(VII)、(VIII)、(X)和(XII)或者可由商業(yè)途徑獲得，或常見于文獻或可采用已知技術容易地制備。
新的中間體化合物形成本發(fā)明的又一方面。
本領域技術人員可鑒別上述步驟中的需要被保護基團保護的中間體化合物的功能基團。功能基團的保護可在前述任何步驟之前進行?？稍诜磻襟E之后或反應過程終了時采用本領域技術人員熟知的技術去除保護基團。采用的保護基團在J.W.F.McOmie主編的“ProtectiveGroups in Organic Chemistry(有機化學中的保護基團)”(Plenum出版社，1973)和T.W.Greene和P.G.M.Wuts主編的“Protective Groupsin Organic Synthesis(有機合成中的保護基團)”第二版(Wiley-Interscience，1991)中有詳細描述。
通過游離酸或它們的鹽、游離堿或它們的鹽與一當量或一個以上當量的適當?shù)膲A或酸反應可形成式(I)化合物的鹽。反應在鹽可溶或不溶的溶劑或溶媒中進行，例如乙醇、四氫呋喃或二乙醚，可通過真空或冷凍干燥除去溶劑或溶媒。反應可以是復分解過程或在離子交換樹酯上進行。盡管其它的鹽可能有效，但在分離或純化產(chǎn)物時優(yōu)選無毒的生理學上可接受的鹽。
本發(fā)明中的化合物的優(yōu)勢在于它們具有藥理學活性。它們因此被預示可作為藥物應用于(預防)治療自身免疫性、炎性、增生性和過度增生性疾病以及免疫-介導的疾病包括組織或器官的移植排斥反應和獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)。這些疾病的實例有(1)(呼吸道)可逆性呼吸道阻塞性疾病包括哮喘，諸如支氣管性哮喘、變應性哮喘、內(nèi)因性哮喘和塵埃性哮喘，尤其是慢性或頑固性哮喘(例如遲發(fā)性哮喘和氣道過度反應)；支氣管炎；急性、應變性、萎縮性鼻炎和慢性鼻炎包括干酪性鼻炎、肥厚性鼻炎、膿性鼻炎、干性鼻炎和藥物性鼻炎；膜性鼻炎包括纖維蛋白性鼻炎、格魯布性鼻炎和假膜性鼻炎和結核性鼻炎；季節(jié)性鼻炎包括神經(jīng)性鼻炎(枯草熱)和血管舒縮性鼻炎；肉樣瘤病、農(nóng)民肺和相關疾病、纖維化肺、自發(fā)性間質(zhì)性肺炎；(2)(骨和關節(jié))類風濕性關節(jié)炎、血清反應陰性脊髓原性關節(jié)病(包括強直性脊椎炎、牛皮癬性關節(jié)炎和萊特爾氏病)、白塞氏病、斯耶格倫氏綜合征和全身性硬化癥；(3)(皮膚)牛皮癬、局部性皮炎、接觸性皮炎和其它濕疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔癬、天皰瘡、大皰性天皰瘡、大皰性皮膚松解、蕁麻疹、血管皮炎、脈管炎、紅斑、皮膚嗜酸性細胞增多、葡萄膜炎、局限性脫發(fā)和春季結膜炎；(4)(胃腸道)腹腔病、直腸炎、嗜酸性胃腸炎、肥大細胞增多癥、克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎、與食物相關的影響腸外器官的變態(tài)反應如偏頭痛、鼻炎和濕疹；(5)(其他組織和全身性疾病)多發(fā)性硬化癥、動脈粥樣硬化、獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)、紅斑狼瘡、全身性狼瘡、紅斑、橋本氏甲狀腺炎、重癥肌無力、I型糖尿病、腎病綜合征、嗜酸性細胞增多性筋膜炎、超IgE綜合征、瘤型麻風、西澤里綜合征和自發(fā)性血小板減少性紫癜；(6)(同種移植排斥反應)繼發(fā)于諸如腎、心、肝、肺、骨髓、皮膚和角膜移植的急性或慢性排斥反應；慢性移植物對宿主反應。
本發(fā)明化合物還適應于用作抗生素，并因此可以用于治療致病微生物所致的疾病。
相應地，本發(fā)明給出前文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽用于治療。
另一方面，本發(fā)明提供了前文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽在用于治療的藥物制備中的用途。
特別地，本發(fā)明給出將前文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽用于制備抑制免疫的藥用組合物。本發(fā)明化合物也可與本領域中已知的其它免疫抑制劑(例如FK506和環(huán)胞菌素)聯(lián)合用藥。
根據(jù)本發(fā)明的再一個方面，此處給出將前文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽用于制備治療可逆性呼吸道阻塞性疾病的藥物。
對于前述治療應用，用藥劑量將自然地隨著使用的化合物、給藥方式、治療預后和適應癥而變化。
根據(jù)本發(fā)明，這里進一步給出藥用組合物，其中含有前文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽的量，優(yōu)選從0.05-99％w(重量百分比)，例如少于80％w，更優(yōu)選從0.1-70％w，例如少于50％w，并含有藥學上可接受的稀釋劑或載體。
本發(fā)明進一步給出本發(fā)明的藥用組合物的制備方法，其包括將前述定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽與藥學上可接受的稀釋劑或載體混合。
本發(fā)明的藥用組合物可以溶液、混懸液、七氟烷烴氣霧劑和干粉制劑的形式作局部用藥(如肺和/或氣管或皮膚)；或全身用藥，例如以片劑、膠囊劑、糖漿劑、粉劑或顆粒劑的形式口服，或以溶液或混懸液的形式作胃腸外給藥，或以栓劑或透皮劑作皮下或直腸給藥。
根據(jù)本發(fā)明的再一個方面，這里給出免疫抑制作用的方法，其包括使患者服用治療有效量的前文定義的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽。
本發(fā)明以下列實施例說明。實施例13-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基-2-丙稀基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮
(a)1-甲基巴比妥酸于65℃下將乙酸酐(23ml)加入丙二酸(10g)和甲基脲(6.25g)的乙酸溶液(23ml)中。混合物加熱至90-95℃保持3小時再冷卻至室溫。所得溶液減壓濃縮并將殘留物重新溶解于乙醇(50ml)中。加入乙醚(5ml)并將混合物于室溫下靜置16小時再于4℃下冷藏4小時。過濾沉淀的固體并以乙醚洗滌。將固體重新溶解于熱水(50ml)中并減壓濃縮該溶液直至固體開始沉淀。使混合物冷卻至室溫并收集形成的固體再真空干燥得到固體小標題化合物(3.34g)。
熔點130-131℃MS(EI)142(M+)1H NMR(DMSO-d6)δ3.05(3H，s)；3.58(2H，s)；11.33(1H，s，br)。(b)6-氯-3-甲基嘧啶-2，4[1H，3H]-二酮將1-甲基巴比妥酸(10g)懸浮于三氯氧化磷(70ml)中。加入水(2ml)并將混合物加熱回流40分鐘。反應物任其冷卻再減壓濃縮。將殘留物倒入冰水混合物(200ml)中。當冰熔化后，收集沉淀固體，水洗并于50℃下真空干燥得到小標題化合物(6.86g)，為黃色固體。
MS(EI)160/162(M+)1H NMR(CDCl3/DMSO-d6)δ3.24(3H，s)；5.74(1H，s)；12.18(1H，s，br)。(c)6-肼基-3-甲基-1-(2-甲基-2-丙烯基)嘧啶-2，4[1H，3H]-二酮將3-溴-2-甲基丙烯(1.65ml)和碳酸鉀(4.00g)加入6-氯-3-甲基嘧啶-2，4[1H，3H]-二酮(2.00g)的丙酮(50ml)溶液中。將該混合物加熱回流24小時然后冷卻至室溫。過濾溶液并以丙酮(2×25ml)洗滌固體。合并濾液并減壓濃縮得到黃色固體(1.25g)。將該固體重新溶解于乙醇(15ml)中并加入水合肼(5ml)。將該混合物加熱回流15分鐘，任其冷卻至室溫，再減壓蒸發(fā)。殘留物與乙醇(2×20ml)在減壓條件下共同蒸發(fā)，再在乙醇中重結晶得到小標題化合物(0.75g)。
熔點186-188℃MS(EI)210(M+)1H NMR(DMSO-d6)δ1.70(3H，s)；3.10(3H，s)；4.36(4H，s，br)；4.44(1H，s)；4.74(1H，s)；5.12(1H，s)；7.88(1H，s，br)。(d)5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮6-肼基-3-甲基-1-(2-甲基-2-丙烯基)嘧啶-2，4[1H，3H]-二酮(0.575g)和二甲基甲酰胺二甲基乙縮醛(0.73ml)的混合物加熱至90℃并保持20分鐘。該混合物任其冷卻并以乙酸乙酯∶己烷(2∶1)為洗脫液經(jīng)硅膠柱層析直接純化，然后在乙酸乙酯/己烷中重結晶得到小標題化合物(0.063g)。
熔點232-233℃MS(EI)220(M+)1H NMR(CDCl3/DMSO-d6)δ1.80(3H，s)；3.39(3H，s)；4.60(2H，s)；4.75(1H，s)；4.89(1H，s)；8.04(1H，s)；13.04(1H，s，br)。(e)5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮將1-(氯甲基)萘(0.214ml)和碳酸鉀(0.60g)加入5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮(0.215g)的丙酮(10ml)溶液中。將該混合物于室溫下攪拌16小時再加熱回流2小時。過濾混合物并將濾液減壓蒸發(fā)。殘留物以乙酸乙酯∶己烷(2∶1)為洗脫液經(jīng)硅膠柱層析純化，然后在乙酸乙酯/己烷中重結晶得到小標題化合物(0.062g)。
熔點187-189℃MS(EI)360(M+)1H NMR(CDCl3)δ1.85(3H，s)；3.35(3H，s)；4.62(2H，s)；4.81(1H，s)；4.95(1H，s)；5.73(2H，d)；7.55-7.43(4H，m)；7.59(1H，s)；7.85(1H，d)；7.94-7.92(2H，m)。(f)3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮于-70℃將二異丙基氨基化鋰(1.12mmol)的四氫呋喃(6ml)溶液滴加入攪拌的5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮(0.20g)和3-{[二甲基(1，1-二甲基乙基)甲硅烷基]氧基}丙基4-甲基苯基硫代磺酸酯(J.Med.Chem.1995，38，2557)(0.262g)的無水四氫呋喃(20ml)溶液中。該溶液于-70℃再攪拌1小時然后任其升溫至室溫。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)后以乙酸乙酯抽提混合物。有機提取物以無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。殘留的油以丙酮∶己烷(1∶5)為洗脫液通過硅膠柱層析純化。產(chǎn)物溶解于乙腈(5ml)中并以40％的氫氟酸水溶液(1ml)處理。5分鐘后以碳酸氫鈉水溶液中和并以乙酸乙酯抽提。有機抽提物以飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。殘留物以丙酮∶己烷(1∶5而后1∶3)為洗脫液通過硅膠柱層析純化再于乙醚/己烷中重結晶得到標題化合物(0.11g)。
熔點138-139℃
MS(FAB)451(M+H)+1H NMR(CDCl3)δ1.60(3H，s)；1.75-1.80(2H，m)；2.66(1H，s，br)；3.29(2H，t)；3.42(3H，s)；3.72-3.78(2H，m)；4.58(2H，s)；4.83(1H，s)；4.93(1H，s)；5.98(2H，s)；7.05(1H，d)；7.42(1H，t)；7.52-7.60(2H，m)；7.85(1H，d)；7.90(1H，dd)；8.24(1H，d)。實施例25-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-3-[(2-吡啶基)硫代]-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮
-78℃下將二異丙基氨基化鋰(2.24mmol)的無水四氫呋喃(10ml)溶液滴加到攪拌的5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮(實施例1(e)，0.20g)和2，2’-二吡啶基二硫化物(0.246g)的無水四氫呋喃(15ml)溶液中。該溶液于-78℃再攪拌0.5小時然后任其升溫至室溫。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)后以乙酸乙酯抽提混合物。有機提取物以無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。殘留物以乙醚∶己烷(1∶1而后2∶1)為洗脫液通過硅膠柱層析純化，再于乙醚/己烷中重結晶得到標題化合物(0.08g)。
熔點118-120℃MS(FAB)470(M+H)+1H NMR(CDCl3)δ1.77(3H，s)；3.34(3H，s)；4.58(2H，s)；4.82(1H，s)；4.90(1H，s)；5.96(2H，s)；7.00-7.04(2H，m)；7.15(1H，d)；7.31(1H，t)；7.38-7.55(3H，m)；7.75(1H，d)；7.81-7.84(1H，m)；8.16-8.21(1H，m)；8.28-8.32(1H，m)。實施例33-[(2-羥基乙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮
(a)雙-2-{[二甲基(1，1-二甲基乙基)甲硅烷基]氧基}乙烷二硫化物向攪拌的2-羥基乙烷二硫化物(2g)和咪唑(5.3g)的二氯甲烷(100ml)溶液中加入二甲基(1，1-二甲基乙基)甲硅烷基氯(5.86g)。將該溶液攪拌過夜然后以二乙醚稀釋，接著以稀鹽酸和碳酸氫鈉水溶液順序洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。殘留物以己烷∶乙醚(20∶1)為洗脫液通過硅膠柱層析純化得到清澈油狀的小標題化合物(3.75g)。
MS(EI)382(M-CH3+)(b)3-[(2-羥基乙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮于-70℃下將二異丙基氨基化鋰(3.36mmol)的無水四氫呋喃(25ml)溶液滴加入攪拌的5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮(實施例1(e)，0.30g)和雙-2-{[二甲基(1，1-二甲基乙基)甲硅烷基]氧基}乙烷二硫化物(0.642g)的無水四氫呋喃(30ml)溶液中。該溶液于-78℃再攪拌0.5小時，然后任其升溫至室溫。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)后以乙酸乙酯抽提該溶液。有機提取物以無水硫酸鎂干燥并減壓蒸發(fā)。殘留物以己烷∶乙醚(2∶1)為洗脫液通過硅膠柱層析純化。將產(chǎn)物溶解于乙腈(10ml)中并以40％的氫氟酸液體(1ml)處理。該溶液于室溫下攪拌過夜然后以碳酸氫鈉水溶液中和并以乙酸乙酯抽提。有機抽提物以無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。殘留物以乙酸乙酯為洗脫液通過硅膠柱層析純化得到標題化合物(0.29g)的白色固體。
熔點135-137℃MS(FAB)437(M+H)+1H NMR(CDCl3)δ1.78(3H，s)；2.82(2H，t)；3.42(3H，s)；3.50-3.59(2H，m)；3.79(1H，t)；4.58(2H，s)；4.81(1H，s)；4.92(1H，t)；6.02(2H，s)；7.07(1H，d)；7.40(1H，t)；7.52-7.60(2H，m)；7.83(1H，d)；7.90(1H，d)；8.24(1H，d)。實施例43-(4-羥基丁基)-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮
(a)6-氯-3-甲基-1-(2-甲基丙基)嘧啶-2，4[1H，3H]-二酮將3-碘-2-甲基丙烷(3.0ml)和碳酸鉀(3.5g)加入6-氯-3-甲基嘧啶-2，4[1H，3H]-二酮(實施例1(b)，4.02g)的二甲基甲酰胺(50ml)溶液中?；旌衔锛訜嶂?0℃并保持24小時然后任其冷卻至室溫。該溶液以鹽酸(2.5M)稀釋并以乙醚抽提兩次。合并的抽提液以無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。殘留物以異己烷∶乙酸乙酯(1∶1)為洗脫液通過硅膠柱層析純化得到固體小標題化合物(3.75g)。
MS(ESI)217/219((M+H)+)1H NMR(CDCl3)δ0.96(6H，d)；2.10-2.22(1H，m)；3.34(3H，s)；3.90(2H，d)；5.90(1H，s)。(b)6-肼基-3-甲基-1-(2-甲基丙基)嘧啶-2，4[1H，3H]-二酮將水合肼(6.5ml)加入6-氯-3-甲基-1-(2-甲基丙基)嘧啶-2，4[1H，3H]-二酮(10.0g)的乙醇溶液(40ml)中。將該混合物加熱回流5小時，冷卻至室溫后減壓蒸發(fā)。殘留物在乙醇中重結晶得到小標題化合物(8.8g)。
MS(APCI)213((M+H)+)1H NMR(DMSO-d6)δ0.80(6H，d)；1.92-2.07(1H，m)；3.10(3H，s)；3.70(2H，d)；4.37(2H，s，br)；5.11(1H，s)；8.04(1H，s，br)。(c)1-萘醛3-甲基-1-(2-甲基丙基)-2，4[1H，3H]-二氧代嘧啶-6-腙將6-肼基-3-甲基-1-(2-甲基丙基)嘧啶-2，4[1H，3H]-二酮(2.5g)溶解于熱甲醇(100ml)并以1-萘醛(1.7ml)處理。1小時后過濾沉淀的固體并在甲苯中重結晶得到小標題化合物(1.34g)。
MS(APCI)351((M+H)+)1H NMR(DMSO-d6)δ0.90(6H，d)；2.03-2.19(1H，m)；3.17(3H，s)；3.92(2H，d)；5.78(1H，s)；7.61(2H，t)；7.70(1H，t)；8.00(1H，d)；8.04(2H，d)；8.67(1H，d)；9.07(1H，s)；10.44(1H，br s)。(d)3-(4-羥基丁基)-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮將5-羥基戊醛(0.65ml)加入1-萘醛3-甲基-1-(2-甲基丙基)-2，4[1H，3H]-二氧代嘧啶-6-腙(250mg)的二甲基甲酰胺(5ml)溶液中。該溶液加熱回流14小時，冷卻至室溫并減壓蒸發(fā)。殘留物溶解于乙酸乙酯并以稀鹽酸洗滌兩次，飽和碳酸氫鈉洗滌兩次，再以鹽水洗滌。有機相以無水硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。殘留物以異己烷∶乙酸乙酯(1∶1)再以乙酸乙酯為洗脫液通過硅膠柱層析純化得到泡狀標題化合物(116mg)。
MS(APCI)435((M+H)+)
1H NMR(DMSO-d6)δ0.85(6H，d)；1.32-1.48(4H，m)；2.12-2.26(1H，m)；2.93(2H，t)；3.20-3.30(5H，m)；3.73(2H，d)；4.31(1H，t)；5.91(2H，s)；6.90(1H，d)；7.43(1H，t)；7.58-7.62(2H，m)；7.89(1H，d)；7.97-8.00(1H，m)；8.22-8.30(1H，m)。實施例55-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-3-丙基硫代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮
(a)5-甲基-7-(2-甲基丙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮按照德國專利No.63,381的技術，將三氯氧化磷(4ml)滴加到冰冷的6-肼基-3-甲基-1-(2-甲基丙基)嘧啶-2，4[1H，3H]-二酮(4.7g)的二甲基甲酰胺(15ml)中。1小時后反應混合物倒入水中淬火。過濾收集沉淀固體，真空干燥得到小標題化合物(3.4g)。
熔點200℃MS(-ve APCI)((M-H)-)2211H NMR(DMSO-d6)δ0.87(6H，d)，2.22(1H，m)，3.22(3H，s)，3.77(2H，d)，8.47(1H，brs)，13.46(1H，brs)。(b)5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮按照德國專利No.63,381的技術，將1-(氯甲基)-萘(2.2g)、碳酸鉀(1.6g)和5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮(2.5g)在丙酮(40ml)中合并，加熱回流3小時后冷卻至室溫。加水(200ml)并過濾收集沉淀固體。該固體在異己烷中研磨并真空干燥得到小標題化合物(3.64g)。
熔點178℃MS(+ve APCI)((M+H+)3631H NMR(DMSO-d6)δ0.83(6H，d)，2.14(1H，m)，3.19(3H，s)，3.72(2H，d)，5.88(2H，s)，7.28(1H，d)，7.48(1H，t)，7.55-7.65(2H，m)，7.93(1H，d)，8.00(1H，d)，8.22(1H，d)，8.55(1H，s)。(c)5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-3-丙基硫代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮-78℃下將N-丁基鋰(1.5M，1.4ml)加入5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮(200mg)和二丙基二硫化物(0.175ml)的四氫呋喃(10ml)中。1小時后反應混合物升至室溫，再1小時后用水使反應驟冷。以乙醚稀釋反應混合物并以2M氫氧化鈉洗滌3次鹽水洗滌1次。有機相以硫酸鎂干燥，減壓濃縮并通過硅膠柱層析(異己烷∶乙酸乙酯9∶1-4∶1)純化，然后從異己烷中重結晶得到標題化合物(24mg)。
熔點105℃MS(+ve APCI)((M+H)+)4371H NMR(DMSO d6)δ0.8-0.9(9H，m)；1.4-1.5(2H，m)；2.17(1H，m)；3.16(2H，t)；3.23(3H，s)； 3.72(2H，d)；5.99(2H，s)；6.89(1H，d)；7.43(1H，t)；7.55-7.65(2H，m)；7.89(1H，d)；7.98(1H，d)；8.30(1H，d)。實施例63-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮
將二異丙基氨基化鋰(3.3mmol)加入冷卻至-78℃的5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮(600mg)和3-{[二甲基(1，1-二甲基乙基)甲硅烷基]氧}丙基4-甲基苯基硫代磺酸酯(J.Med.Chem.1995，382557)(720mg)的無水四氫呋喃(20ml)溶液中。2小時后反應混合物升溫至室溫，再1小時后以水使之驟冷。反應混合物以乙酸乙酯稀釋后以稀鹽酸洗滌兩次，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌兩次，鹽水洗滌一次，再以無水硫酸鎂干燥，減壓濃縮。殘留物溶解于四氫呋喃(20ml)并加入氟化四丁基銨(1M的四氫呋喃液，2ml)。18小時后以飽和碳酸氫鈉溶液驟冷并以乙醚抽提。該乙醚抽提液以水和鹽水各洗滌一次，然后以硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。殘留物通過硅膠(異己烷∶乙酸乙酯1∶1-1∶2)層析接著以制備性反相HPLC純化并在異己烷∶乙酸乙酯中重結晶得到標題化合物(156mg)。
熔點135℃MS(+ve APCI)((M+H)+)4531H NMR(DMSO d6)δ0.83(6H，d)；1.5-1.6(2H，m)；2.19(1H，m)；3.23(3H，s；2H，t)；3.32(2H，q)；3.73(2H，d)； 4.48(1H，t)；5.99(2H，s)；6.89(1H，d)；7.43(1H，t)；7.55-7.65(2H，m)；7.89(1H，d)；7.98(1H，dd)；8.30(1H，dd)。實施例74-[(4，5，6，7-四氫-5-甲基-7-{2-甲基丙基}-2-{1-萘基-甲基}-4，6-二氧代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)硫代]丁酸甲酯
(a)4，4，4-三甲氧基丁基對甲苯硫代磺酸酯對甲苯硫代磺酸鉀鹽(24mmol)、三甲基4-溴原丁酸酯(bromoorthobutyrate)(22mmol)和六甲基磷酰胺(30ml)的混合液在室溫下攪拌48小時后倒入10∶1的己烷/乙醚(500ml)中。劇烈振搖混合液，然后以水(2×200ml)再以鹽水洗滌。有機相以硫酸鎂干燥并真空蒸干得到小標題的油狀酯(5.3g)。
1H NMR(CDCl3)δ1.95(2H，m)；2.37(2H，t)；2.44(3H，s)；3.02(2H，t)；3.16(9H，s)；7.33(2H，d)；7.80(2H，d)。(b)4-[(4，5，6，7-四氫-5-甲基-7-{2-甲基丙基}-2-{1-萘基甲基}-4，6-二氧代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)硫代]丁酸甲酯將二異丙基氨基化鋰(2.8mmol)加入冷卻至-78℃的5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮(500mg)的四氫呋喃(20ml)溶液中。10分鐘后加入4，4，4-三甲氧基丁基對甲苯硫代磺酸酯(1.2g)。2小時后反應混合物升溫至室溫，再1小時后以稀鹽酸使之驟冷。反應混合物以乙酸乙酯稀釋后以稀鹽酸洗滌兩次，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌兩次，鹽水洗滌一次，再以無水硫酸鎂干燥。真空濃縮有機相，殘留物通過硅膠(異己烷∶乙酸乙酯3∶1-2∶1)層析，然后在異己烷中研磨得到標題化合物(340mg)。
熔點100℃MS(+ve APCI)495((M+H)+)1H NMR(DMSO d6)δ0.84(6H，d)；1.65(2H，五重峰)；2.19(1H，m)；2.28(2H，t)；3.20-3.25(5H，m)；3.52(3H，s)；3.74(2H，d)；5.99(2H，s)；6.89(1H，d)；7.43(1H，t)；7.55-7.65(2H，m)；7.89(1H，d)；8.00(1H，dd)；8.30(1H，dd)。實施例84-[(4，5，6，7-四氫-5-甲基-7-{2-甲基丙基}-2-{1-萘基-甲基}-4，6-二氧代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)硫代]丁酸
將一水氫氧化鋰(80mg)加入4-[(4，5，6，7-四氫-5-甲基-7-{2-甲基丙基}-2-{1-萘基-甲基}-4，6-二氧代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)硫代]丁酸甲酯(250mg)的四氫呋喃(20ml)溶液中，然后加水形成均質(zhì)溶液。18小時后使反應混合物在乙醚和2M氫氧化鈉中分配。水相以濃鹽酸酸化并以乙酸乙酯抽提，后者以硫酸鎂干燥。有機相真空濃縮并于環(huán)己烷∶乙酸乙酯中重結晶得到標題化合物(130mg)。
熔點149℃MS(+ve APCI)481((M+H)+)1H NMR(DMSO d6)δ0.84(6H，d)；1.65(2H，五重峰)；2.10-2.25(3H，m)；3.20-3.25(5H，m)；3.74(2H，d)；5.99(2H，s)；6.90(1H，d)；7.45(1H，t)；7.55-7.65(2H，m)；7.89(1H，d)；7.98(1H，dd)；8.29(1H，dd)。實施例93-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(2-{苯基磺酰甲基}苯基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮
(a)3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮-78℃下將二異丙基氨基化鋰(10.7mmol)加入2-(4-甲氧基苯基甲基)-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮(1.83g)和3-{[二甲基(1，1-二甲基乙基)甲硅烷基]氧基}丙基4-甲基戊基硫代磺酸酯(J.Med.Chem.1995，382557)(3.0g)的四氫呋喃(30ml)溶液中。1.5小時后反應混合物升溫至室溫，再2小時后加水。反應混合物以乙酸乙酯稀釋后以稀鹽酸洗滌兩次，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌兩次，鹽水洗滌一次，再以硫酸鎂干燥并真空濃縮。殘留物溶解于三氟乙酸(10ml)并于100℃加熱4小時?；旌衔锶纹淅鋮s后減壓蒸發(fā)。殘留物溶解于甲醇(30ml)，加入飽和碳酸氫鈉(1.1g)，混合物于室溫下攪拌1小時后減壓蒸發(fā)。殘留物溶解于乙酸乙酯并以飽和碳酸氫鈉溶液洗滌一次，鹽水洗滌兩次后以硫酸鎂干燥并真空濃縮。硅膠(異己烷∶乙酸乙酯1∶2)層析得到標題化合物(1.0g)。
熔點103-9℃MS(+ve APCI)313((M+H)+)1H NMR(DMSO d6)δ0.87(6H，d)；1.70(2H，vbrs)；2.20(1H，vbrs)；3.18(5H，s)；3.47(2H，t)；3.70(2H，d)。(b)3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(2-{苯基磺酰甲基}苯基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮將3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮(94mg)、碳酸鉀(90mg)和2-(苯基磺酰甲基)芐基溴(105mg)在二甲亞砜(11ml)中混合。5小時后室溫下以稀乙酸乙酯稀釋反應混合物并水洗兩次，稀鹽酸洗滌兩次，鹽水洗滌一次，硫酸鎂干燥后真空濃縮。硅膠(異己烷∶異丙醇4∶1)層析得到標題化合物(70mg)。
熔點50℃(起泡)MS(+ve APCI)557((M+H)+)1H NMR(DMSO d6)δ0.81(6H，d)；1.54(2H，五重峰)；2.12(1H，m)；3.19(2H，t)；3.22(3H，s)；3.37(2H，q)；3.68(2H，d)；4.48(1H，t)；5.00(2H，s)；5.61(2H，s)；6.70(1H，d)；7.13(1H，d)；7.2-7.3(2H，m)；7.65(2H，t)；7.78(1H，t)；7.82(2H，d)。
下列化合物根據(jù)實施例9(b)采用3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮和適當?shù)柠u化物制備。
藥理學資料實施例13抑制人混合的淋巴細胞反應(MLR)用96孔平底微量滴定板進行MLR檢測。以二甲亞砜配制10mM的化合物原液。以RPMI配制其50倍稀釋液。以該溶液配制系列稀釋液。10μl的50倍稀釋原液，或其稀釋液，加入到檢測孔中使分析濃度自9.5μm開始并逐漸降低。每孔加入含有來自兩供體的1.5×105個細胞的終體積為0.2ml的RPMI 1640培養(yǎng)基(補充10％人血清，2mM L-谷氨酰胺和青霉素/鏈霉素)。細胞于37℃下在增濕環(huán)境和5％二氧化碳中培養(yǎng)120小時。培養(yǎng)結束前6小時加入3H-胸腺嘧啶核苷(0.5μCi)。通過檢測細胞結合放射活性水平而確定T-細胞增殖反應。
在上述檢測中發(fā)現(xiàn)實施例1-12的標題化合物呈現(xiàn)的IA50值低于1×10-6M。
權利要求
1.式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽
其中R1是C1-6烷基、C3-6鏈烯基或C3-6環(huán)烷基；R2是C1-4烷基或C3-6鏈烯基；R3是1-或2-茚滿基、1-或2-(1，2，3，4-四氫萘基)、9-芴基、苊基或CHR4(CH2)nAr其中n是0或1，R4是氫或C1-6烷基且Ar是喹啉基、萘基、任選一個或多個鹵原子取代的benzodioxolinyl、或任選由一個或多個選自鹵原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基和苯基磺酰甲基的取代基取代的苯基；W是H、CH2OH、CO2H、CO2C1-6烷基、CH2NR5R6、CONR5R6，其中R5和R6是相互獨立的氫或C1-6烷基，或連同它們所結合的氮原子形成一個3-8元雜環(huán)并進一步任選含有氧原子或NR7基團，其中R7是氫或C1-6烷基，或W是吡啶基或苯基，它們均可任選被一個或多個選自鹵原子、羥基、C1-6烷基和C1-6烷氧基的取代基取代；X是化學鍵或C1-5亞烷基；Y是S(O)p、C≡C、CH＝CH、CH2CH2或CH2CH＝CH；和P是0、1或2；條件是·當W是H、CH2OH、CO2H、CO2C1-6烷基、CH2NR5R6或CONR5R6而Y是硫時，X不是鍵。
2.權利要求1的化合物，其中R1是C1-4烷基或C3-4鏈烯基。
3.權利要求1和2的化合物，其中R2是C1-4烷基。
4.權利要求1-3中任一項的化合物，其中R3是CHR4(CH2)nAr其中n是0，R4是氫而Ar是喹啉基、萘基、任選由一個或多個鹵原子取代的benzodioxolinyl、或任選由一個或多個選自鹵原子和苯基磺酰甲基的取代基取代的苯基。
5.上述權利要求中任何一項的化合物，其中Y是硫或CH2CH2。
6.上述權利要求中任何一項的化合物，其中X是C1-3亞烷基。
7.上述權利要求中任何一項的化合物，其中W是H、CH2OH、CO2H、CO2C1-6烷基或吡啶基。
8.權利要求1的化合物是3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，或5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-3-[(2-吡啶基)硫代]-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，或3-[(2-羥基乙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基-2-丙烯基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，或3-[(4-羥基丁基)-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，或5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-3-丙基硫代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，或3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(1-萘基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，或4-[(4，5，6，7-四氫-5-甲基-7-{2-甲基丙基}-2-{1-萘基甲基}-4，6-二氧代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)硫代]丁酸甲酯，或4-[(4，5，6，7-四氫-5-甲基-7-{2-甲基丙基}-2-{1-萘基甲基}-4，6-二氧代-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)硫代]丁酸，或3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(2-{苯磺酰甲基}苯基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，或2-({5-氯苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-6-基}甲基)-3-[(3-羥基丙基)硫代-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，或2-(3-氯-2-氟苯基甲基)-3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，或3-[(3-羥基丙基)硫代]-5-甲基-7-(2-甲基丙基)-2-(喹啉基甲基)-2H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4，6[5H，7H]-二酮，或其藥學上可接受的鹽。
9.權利要求1定義的式(I)化合物的制備方法，其包括(a)使式(II)化合物
其中R1，R2和R3與式(I)定義相同，與式(III)化合物反應L-Y-X-W (III)式(III)中L是離去基團，Y是硫，而X和W與式(I)定義相同，或(b)當Y是CH2CH2或CH2CH＝CH和R3是CHR4(CH2)nAr時，使式(IV)化合物
其中R3’是R3基團CHR4(CH2)nAr的前體且R1和R2與式(I)定義相同，與式(V)化合物反應OHC-Y-X-W (V)式(V)中，Y是CH2CH2或CH2CH＝CH而W和X與式(I)定義相同，或(c)當Y是C≡C、CH＝CH或CH2CH＝CH時，使式(VI)化合物
其中L1代表離去基團而R1、R2和R3與式(I)定義相同，與式(VII)或(VIII)化合物反應H2C＝CH-XaW HC≡C-XW(VII) (VIII)其中，式(VII)中的Xa是鍵或C1-6亞烷基而W與式(I)定義相同，而式(VIII)中的W和X與式(I)定義相同，其后任選下列方法·將式(I)化合物轉變?yōu)榱硪环N式(I)化合物，和/或·形成藥學上可接受的鹽。
10.含有權利要求1-8中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽與藥學上可接受的稀釋劑或載體的藥用組合物。
11.權利要求10的藥用組合物的制備方法，其包含權利要求1-8中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽及藥學上可接受的稀釋劑或載體。
12.權利要求I-8中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽用于治療。
13.權利要求1-8中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽在用于治療的藥物制備中的用途。
14.影響免疫抑制的方法，其包括給予患者治療有效量的權利要求1-8中任一項的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥學上有用的式(Ⅰ)所示的吡唑并[3,4－d]嘧啶二酮化合物、它們的制備方法、含有它們的藥用組合物以及它們在治療多種疾病中的用途。
文檔編號A61P19/02GK1259951SQ9880607
公開日2000年7月12日 申請日期1998年4月7日 優(yōu)先權日1997年4月15日
發(fā)明者D·切希爾, M·庫珀, D·唐納德, P·索恩 申請人:英國阿斯特拉藥品有限公司