專利名稱：含有鹵素過氧化物酶、過氧化氫源、鹵化物源和銨源的抗微生物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種非常有效的、能殺死或抑制微生物細胞或微生物體的酶促組合物，更具體地說是能殺死待洗衣物中、硬表面上、水系統(tǒng)中、皮膚、牙齒或粘膜上存在的微生物細胞或微生物體的酶促組合物；以及在食品、化妝品、油漆、涂料等的防腐中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
本領(lǐng)域中已知有多種酶促抗微生物組合物。例如，WO 94/04127公開了穩(wěn)定的牙用組合物，它能產(chǎn)生抗微生物有效濃度的次硫代藍晶石(hypothiocyanite)離子。該組合物含有能產(chǎn)生過氧化氫的氧化還原酶，和能將一般存在于唾液中的硫氰酸根離子氧化為抗微生物的次硫代藍晶石離子的過氧化物酶。合適的過氧化物酶包括乳過氧化物酶、髓過氧化物酶、唾液過氧化物酶和氯過氧化物酶。
EP-A-0 500 387中公開了酶促抗微生物組合物，它包含鹵素過氧化物酶(haloperoxidase)，例如髓過氧化物酶、嗜曙紅氧化酶、乳過氧化物酶和氯過氧化物酶，它們在過氧化物和鹵化物的存在下選擇性地結(jié)合并抑制靶微生物的生長。
WO 95/27046公開了一種抗微生物組合物，它包含釩氯過氧化物酶、鹵離子和過氧化氫或過氧化氫生成劑。
WO 96/38548公開了一種抗微生物組合物，它包含鹵素過氧化物酶、鹵離子、過氧化物生成劑和氨基酸型。
本發(fā)明的目的是提供一種用于殺死或抑制微生物細胞、即用于消毒或防腐的組合物，它易于使用，并且是已知消毒和防腐組合物及方法的有效替代選擇對象。
發(fā)明概述令人驚奇的是，我們已發(fā)現(xiàn)了鹵素過氧化物酶、過氧化氫源、鹵化物源和銨源的聯(lián)合作用會產(chǎn)生迄今尚不知的協(xié)同抗微生物效果。
因此，基于這些發(fā)現(xiàn)，在第一個方面，本發(fā)明提供了一種酶促抗微生物組合物，它包含鹵素過氧化物酶、過氧化氫源、鹵化物源和銨源，其中所述組合物能產(chǎn)生迄今尚不知的協(xié)同抗微生物效果。
無論哪里需要時，本發(fā)明組合物就可用作其中的抗微生物成分，例如，用于食品、飲料、化妝品、除臭劑、隱形眼鏡產(chǎn)品、食品成分或酶組合物的防腐；作為消毒劑用于例如人或動物皮膚、頭發(fā)、口腔、粘膜、傷口、擦傷處或眼睛；用于殺死待洗衣物中的微生物細胞；以及用于摻入硬表面清潔、水處理或消毒用的清潔組合物或消毒劑中。
因此，在另一方面，本發(fā)明提供了抑制待洗衣物中存在的微生物的方法，其中該待洗衣物用包含該組合物的浸泡、洗滌或漂洗液進行處理；提供了抑制硬表面上微生物生長的方法，其中將該表面與該組合物接觸；提供了抑制工業(yè)水線中存在的微生物細胞的方法；和殺死人或動物皮膚、粘膜、牙齒、傷口、擦傷部位或眼中存在的微生物細胞或者抑制其生長的方法，其中將皮膚、粘膜、牙齒、傷口或擦傷處上欲殺死或抑制的這些細胞與該組合物接觸。
附圖的簡要描述本發(fā)明參照附圖作進一步說明，其中

圖1顯示銅綠假單胞菌ATCC 10146在25℃下在TSB中的生長校正曲線；參見實施例1。
圖2顯示當將氯化鈉和/或銨加入該反應(yīng)培養(yǎng)基中時對抗表皮葡萄球菌的抗菌活性的應(yīng)答表面圖；參見實施例1。
圖3顯示與碘化物和硫酸銨混合的彎孢屬鹵素過氧化物酶的殺菌活性(＿KI和(NH4)2SO4；---KI)；參見實施例2。
圖4顯示與溴化物和硫酸銨混合的彎孢屬鹵素過氧化物酶的殺菌活性(＿KBr和(NH4)2SO4；---KBr)；參見實施例2。
圖5顯示與氯化物和乙醇胺混合的彎孢屬鹵素過氧化物酶(rCvP)的殺菌活性，參見實施例4。
發(fā)明詳述在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語“抗微生物”的意思是有殺菌和/或抑菌和/或殺真菌和/或抑真菌作用和/或殺病毒作用，其中術(shù)語“殺菌”應(yīng)理解為能殺死細菌細胞。
術(shù)語“抑菌”應(yīng)理解為能抑制細菌生長，即抑制生長的細菌細胞。
術(shù)語“殺真菌”應(yīng)理解為能殺死真菌細胞。
術(shù)語“抑真菌”應(yīng)理解為能抑制真菌生長，即抑制生長的真菌細胞。
術(shù)語“殺病毒”應(yīng)理解為能滅活病毒。
術(shù)語“微生物細胞”表示細菌或真菌細胞，而術(shù)語“微生物體”表示真菌(包括酵母)或細菌。
在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語“抑制微生物細胞生長”的意思是這些細胞處于非生長狀態(tài)，即，它們不能增殖。
本文中所用的術(shù)語“硬表面”是指本質(zhì)上微生物不能透過的任何表面。硬表面的實例是金屬制成的表面，例如不銹鋼、塑料、橡膠、木板、玻璃、木材、紙、紡織品、混凝土、巖石、大理石、石膏和陶瓷材料，它們可選地用例如涂料、瓷釉等涂覆。硬表面還可以是工藝設(shè)備，例如冷卻塔、滲透膜、水處理廠、乳牛場、食品加工廠、化學品或藥品加工廠。因此，本發(fā)明組合物可用于常規(guī)原位清潔(cleaning-in-place)(C-I-P)系統(tǒng)。鹵素過氧化物酶在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語“鹵素過氧化物酶”是指選自下列成員的酶氯化物過氧化物酶(EC 1.11.1.10)、溴化物過氧化物酶和碘化物過氧化物酶(EC 1.11.1.8)。
氯化物過氧化物酶是能消耗H2O2而氧化氯、溴和碘離子的酶。
溴化物過氧化物酶是能消耗H2O2而氧化溴和碘離子的酶。
碘化物過氧化物酶是能消耗H2O2而氧化碘離子的酶。
按照本發(fā)明，優(yōu)選釩鹵素過氧化物酶。釩過氧化物酶與其他鹵素過氧化物酶的不同在于這些酶的輔基中具有與釩酸鹽(釩V)類似的結(jié)構(gòu)特征，而其他鹵素過氧化物酶是血紅素過氧化物酶。WO95/27046中公開的釩鹵素過氧化物酶是優(yōu)選的。
鹵素過氧化物酶形成了一類能按照下式在過氧化氫的存在下將鹵化物(X＝Cl-、Br-或I-)氧化成相應(yīng)的次鹵酸(HOX)的酶。
如果存在適宜的親核化合物，將發(fā)生與HOX的反應(yīng)，HOX具有抗微生物作用。
現(xiàn)已從多種有機體中分離出了鹵素過氧化物酶哺乳動物、海底動物、植物、藻類、苔癬、真菌和細菌(參見生物化學與生物物理學學報1161，1993，249-256頁)。人們普遍承認，鹵素過氧化物酶實際上是負責形成鹵代化合物的酶，盡管也可能涉及其他酶。
現(xiàn)已從許多不同的真菌中分離出了鹵素過氧化物酶，特別是從真菌族暗色絲孢綱，諸如卡爾黑霉屬，例如煙色卡爾黑霉(Caldariomyces fumago)，鏈格孢屬，彎孢屬，例如疣狀彎孢(Curvularia verruculosa)和不等彎孢，德氏霉屬(Drechslera)，單格孢屬(Ulocladium)和葡萄孢屬(參見美國專利第4,937,192號)中分離得到。
根據(jù)本發(fā)明，可從彎孢屬、特別是疣狀彎孢(諸如疣狀彎孢CBS147.63或疣狀彎孢CBS444.70)得到的鹵素過氧化物酶是優(yōu)選的。在WO 97/04102中描述了彎孢屬鹵素過氧化物酶及其重組產(chǎn)物。
鹵素過氧化物酶還可從細菌分離得到，諸如從假單胞菌屬，例如吡咯菌素假單胞菌(參見生物化學雜志263，1988年，13725-13732頁)和鏈霉菌屬，例如金霉素鏈霉菌(參見結(jié)構(gòu)生物學1，1994年，532-537頁)。
已從藻類分離出溴化物過氧化物酶(參見美國專利第4,937,192號)。
使用時，為了在預期的時間范圍內(nèi)達到預期的抗微生物效果，可以改變鹵素過氧化物酶的濃度。不過，按照本發(fā)明，鹵素過氧化物酶通常將以0.01-100mg酶蛋白/升的濃度加入，優(yōu)選以0.05-50mg酶蛋白/升的濃度加入，更優(yōu)選以0.5-10mg酶蛋白/升的濃度加入。過氧化氫源按照本發(fā)明，與鹵素過氧化物酶反應(yīng)所需的過氧化氫可以多種不同方式達到它可以是過氧化氫或一種過氧化氫前體，諸如象過碳酸鹽或過硼酸鹽，或過氧羧酸或其鹽，或者它可以是一種過氧化氫生成酶系統(tǒng)，諸如象氧化酶及其底物。有用的氧化酶可以是，例如葡糖氧化酶、甘油氧化酶或氨基酸氧化酶。WO 94/25574中給出了氨基酸氧化酶的實例。
使用酶促生成的過氧化氫是有益的，因為這種來源在生物學相關(guān)條件下產(chǎn)生的過氧化氫濃度相對較低。低濃度的過氧化氫使得鹵素過氧化物酶催化的反應(yīng)速率增加。
根據(jù)本發(fā)明，與鹵素過氧化物酶反應(yīng)所需的過氧化氫源可以相應(yīng)于過氧化氫濃度為0.01-1000mM、優(yōu)選為0.1-100mM的濃度加入。鹵化物源按照本發(fā)明，與鹵素過氧化物酶反應(yīng)所需的鹵化物源可以多種不同方式達到，例如通過加入鹵鹽該鹵鹽可以是氯化鈉、氯化鉀、溴化鈉、溴化鉀、碘化鈉或碘化鉀。
鹵化物源的濃度一般將相當于0.01-1000mM，優(yōu)選在0.05-500mM范圍內(nèi)。銨源當將銨源加入該抗微生物組合物(鹵素過氧化物酶、過氧化氫、鹵化物)時形成了鹵代胺，這使得該酶系統(tǒng)產(chǎn)生100％殺菌活性。
因此我們已觀測到，該組合物中存在的鹵化物和銨源之間有協(xié)同作用(參見實施例1、2和4)。
所用銨源可以是下式化合物
其中取代基R1和R2可以相同或不同，獨立地代表下列基團中的任何一種氫、鹵素、硫酸基、苯基、具有1-14個碳原子的直鏈或支鏈烷基、或具有1-14個碳原子的取代的直鏈或支鏈烷基，其中取代基位于C3-C18位，并且代表下列基團中的任何一種羥基、鹵素、甲?；Ⅳ然捌漉ズ望}、氨基甲?；?、磺基及其酯和鹽、氨磺?；⑾趸?、氨基、苯基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基、芳基-C1-C5烷基；此外，氨基甲?；被酋；桶被€可以是未取代的，或者被取代基R3取代一次或兩次；苯基可以是未取代的，或者被一個或多個取代基R3取代；C1-C14烷基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5烷基和芳基-C1-C5烷基可以是飽和或不飽和的、分支或不分支的，還可以是未取代的或者被一個或多個取代基R3取代；取代基R3代表下列基團中的任何一種鹵素、羥基、甲?；?、羧基及其酯和鹽、氨基甲?；⒒腔捌漉ズ望}、氨磺酰基、硝基、氨基、苯基、氨基烷基、哌啶子基、哌嗪基、吡咯烷-1-基、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基；此外，氨基甲?；?、氨磺酰基和氨基還可以是未取代的，或者被羥基、C1-C5-烷基、C1-C5-烷氧基取代一次或兩次；苯基還可被一個或多個下列基團取代鹵素、羥基、氨基、甲?；?、羧基及其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基及其酯和鹽、氨磺?；欢鳦1-C5-烷基和C1-C5-烷氧基還可以是飽和或不飽和的、分支或不分支的、且還可以被下列基團中的任何一種取代一次或兩次鹵素、羥基、氨基、甲?；?、羧基及其酯和鹽、氨基甲?；⒒腔捌漉ズ望}、和氨磺?；换蛘咴谕ㄊ街?，取代基R1-R2可以一起形成-B-基，其中B代表下列基團中的任何一種(-CHR3-N＝N-)、(-CH＝CH-)n或(-CH＝N-)n，其中n代表1-3的整數(shù)，R3是如上定義的取代基。(應(yīng)當理解，如果上面所提到的通式包含兩個或以上的R3取代基，這些R3取代基可以是相同或不同的)。
本文中所用的銨化合物可以是它們的陽離子形式。
在優(yōu)選的實施方案中，R1為氫。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，R1為氫，而R2為醇(氨基醇)，例如乙醇胺。
在另一個優(yōu)選的實施方案中，銨源是銨鹽，即本領(lǐng)域中已知的任何銨鹽例如硫酸銨、氯化銨、溴化銨或碘化銨。
按照本發(fā)明，與鹵素過氧化物酶反應(yīng)所需的銨源可以相應(yīng)于銨濃度為0.01-1000mM、優(yōu)選為0.05-500mM的濃度加入。組合物包含鹵素過氧化物酶、過氧化氫源、鹵化物源和銨源的組合物可以配制成固體或液體。
當配制成固體時，可以將所有組分混合在一起，例如，制成粉劑、顆?；蚰z凝產(chǎn)物。
當使用干燥形式以外的組合物時，并且即使是在那種情況下，也優(yōu)選使用兩部分配制系統(tǒng)，其中過氧化氫與其他組分相隔開。
本發(fā)明組合物還可包含助劑，諸如濕潤劑、增稠劑、緩沖液、穩(wěn)定劑、香料、著色劑、填充劑等等。
有用的濕潤劑是表面活性劑，即非離子表面活性劑、陰離子表面活性劑、兩性表面活性劑或兩性離子表面活性劑。
本發(fā)明組合物可以是濃縮產(chǎn)品或即用產(chǎn)品。使用時，濃縮產(chǎn)品一般用水稀釋以提供具有有效抗微生物活性的介質(zhì)，施用于欲消毒或防腐的物體，并與存在的微生物反應(yīng)。
最佳pH一般在所用鹵素過氧化物酶的最佳穩(wěn)定性和最佳活性之間折衷考慮。不過由于考慮到在高pH值下的殺菌活性最佳，因此本發(fā)明可有利地在相對高的pH值下進行。
本發(fā)明組合物也可配制成兩部分系統(tǒng)，其中一部分是鹵素過氧化物酶和銨源；另一部分是過氧化氫源；而鹵化物源可源于自來水或是天然存在的。應(yīng)用本發(fā)明組合物可以摻入包含更多可用于洗滌劑或清潔組合物的酶類型的洗滌劑或清潔組合物中，優(yōu)選有選自下列成員的至少一種另外的酶蛋白酶、糖酶、淀粉酶、角質(zhì)酶(cutinase)、過氧化物酶、氧化酶、漆酶、纖維素酶、木聚糖酶和脂肪酶。
當用于食品、飲料、化妝品諸如洗液、膏霜、凝膠、軟膏、皂類、香波類、調(diào)理劑、止汗劑、除臭劑、漱口劑、隱形眼鏡用品、酶制劑或食品成分的防腐時，本發(fā)明方法中所用的組合物可以殺死或抑制微生物細胞生長的有效量加入到例如未防腐的食品、飲料、化妝品、隱形眼鏡用品、食品成分或抗炎產(chǎn)品中。
因此，用于本發(fā)明方法的組合物可以用作消毒劑，例如在痤瘡、眼睛或口腔感染、皮膚感染的治療中；在止汗劑或除臭劑中；在足用浴鹽中；用于隱形眼鏡、硬表面、牙齒(口腔護理)、傷口、擦傷等的清潔和消毒。
一般考慮將本發(fā)明組合物用于清潔、消毒或抑制任何硬表面上的微生物生長。可以有利地與本發(fā)明組合物接觸的表面的實例是例如乳牛場、化學品或藥品加工廠，水衛(wèi)生處理系統(tǒng)，紙漿加工廠，水處理廠和冷卻塔中所用工藝設(shè)備的表面。本發(fā)明組合物應(yīng)以能有效清潔、消毒或抑制所述表面上微生物生長的量使用。
另外，本發(fā)明組合物可有利地用于原位清潔(C.I.P.)系統(tǒng)，對任何種類的工藝設(shè)備進行清潔。
本發(fā)明方法還可用于清潔食品加工廠和其中要制備或供應(yīng)食品的任何區(qū)域內(nèi)的表面和烹飪器皿，諸如醫(yī)院、療養(yǎng)院、餐館尤其是快餐店、熟食店等等區(qū)域。也可用作食品中的抗微生物劑，尤其是用作乳酪、水果和蔬菜以及色拉條上食品的表面抗微生物劑。
它還可用作水基涂料中的防腐劑或消毒劑。
本發(fā)明組合物還可用于水線中進行微生物控制，以及水的消毒、特別是工業(yè)用水的消毒。
本發(fā)明用下列實施例得以進一步說明，這些實施例不以任何方式限制請求保護的本發(fā)明范圍。實施例1鹵素過氧化物酶對抗銅綠假單胞菌和表皮葡萄球菌的抗菌活性。
如WO 97/04102中所述制備的、可從Novo Nordisk A/S，DK-2880Bagsvaerd，Denmark得到的疣狀彎孢重組過氧化物酶(rCvP)的抗菌活性已用下列加強劑進行了測試氯化鈉和硫酸銨。
在MES-緩沖液(2-[N-嗎啉代]乙磺酸)(pH6.0)中測試鹵素過氧化物酶對銅綠假單胞菌ATCC10146和表皮葡萄球菌DSM 20 042的抗菌活性，以氯化鈉作為電子供體，在NH4+的存在下加入過氧化氫作為電子受體。細胞(約106cfu/ml)與酶一起在40℃下溫育15分鐘。
殺菌活性通過在Malthus中溫育測定。利用Malthus儀器測得的檢測時間通過校正曲線轉(zhuǎn)化為cfu/ml。
當計算總存活細胞時，可以使用直接或間接Malthus測量法(Malthus Flexi M2060，Malthus Instrument Limited)。利用直接測量法，通過在生長底物中的電導測量確定細胞代謝。利用間接測量法，將3ml生長培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到間接Malthus池的外室中，將0.5ml無菌KOH(0.1M)轉(zhuǎn)移到內(nèi)室中。用酶處理后將細胞懸浮液轉(zhuǎn)移到該Malthus池的外室中。隨著細胞在外室中生長，它們產(chǎn)生CO2，CO2將溶于內(nèi)室中的KOH中，由此改變KOH的電導率。用酶處理后幸存的呼吸細胞形成的CO2的量用于估計活細胞的數(shù)量。
當Malthus測量到電導率改變時，檢測時間(dt)將被記錄下來。利用cfu/ml對dt的校正曲線(圖1)將dt轉(zhuǎn)化為菌落數(shù)。
pH6時，在NaCl濃度大于20mM下觀察到鹵素過氧化物酶(1mg/l)與NaCl的抗菌活性，抗菌活性隨著NaCl濃度的升高而升高，但在約100mM時達到穩(wěn)定水平(取決于pH、溫度、測試菌株等)。加入過氧化氫到終濃度為0.5mM。利用200mM NaCl作為電子供體，導致活細胞(兩種菌株)從106cfu/ml減少到約103cfu/ml。
在NaCl和(NH4)2SO4之間觀察到了顯著的協(xié)同作用。NaCl和(NH4)2SO4的混合物在濃度約3mM NH4+下導致了對抗兩種菌株的100％致死活性(圖2)。實施例2使用不同加強劑的疣狀彎孢重組鹵素過氧化物酶的抗菌活性在MES-緩沖液(2-[N-嗎啉代]乙磺酸)(pH6.0)中測試鹵素過氧化物酶(1mg/l)對表皮葡萄球菌DSM 20 042的抗菌活性，以碘化鉀和溴化鉀作為電子供體，在NH4+的存在下加入過氧化氫(使終濃度為0.5mM)作為電子受體。細胞(約106cfu/ml)與酶一起在40℃下溫育15分鐘。殺菌活性通過在Malthus中溫育測定(參見實施例1)。
與碘化物結(jié)合的鹵素過氧化物酶在碘化物濃度為約0.2mM時測得100％抗菌活性。如果加入銨鹽，當?shù)饣餄舛葹榧s0.05-0.1mM時就已測得100％抗菌活性(圖3)。
100％抗菌活性需要高濃度的溴化物(＞10mM)，但溴化物與銨離子的混合物在溴化物濃度高于2.5mM時就產(chǎn)生了100％殺菌活性(圖4)。實施例3使用鹵化銨作為電子供體時疣狀彎孢重組鹵素過氧化物酶的抗菌活性在MES-緩沖液(2-[N-嗎啉]乙磺酸)(pH6.0)中測試鹵素過氧化物酶(1mg/l)對表皮葡萄球菌DSM 20 042的抗菌活性，以碘化銨、氯化銨或溴化銨作為電子供體，加入過氧化氫作為電子受體，其終濃度為0.5mM。細胞(約106cfu/ml)與酶一起在40℃下溫育15分鐘。殺菌活性通過在Malthus中溫育測定(參見實施例1)。
抗菌活性需要的鹵化銨的濃度低于相同活性時所需的鹵化鉀或鹵化鈉的濃度(表1)。
表1對表皮葡萄球菌的殺菌活性。加入鉀或鈉鹽或銨鹽作為電子供體
乙醇胺時，表皮葡萄球菌被100％殺死，而當沒有加入乙醇胺時，觀察到細胞減少了約3個對數(shù)單位。
權(quán)利要求
1.一種酶促抗微生物組合物，它包含鹵素過氧化物酶、過氧化氫源、鹵化物源和下式表示的銨源
其中取代基R1和R2可以相同或不同，獨立地代表下列基團中的任何一種氫、鹵素、硫酸基、苯基、具有1-14個碳原子的直鏈或支鏈烷基、或具有1-14個碳原子的取代的直鏈或支鏈烷基，其中取代基位于C3-C18位，并且代表下列基團中的任何一種羥基、鹵素、甲酰基、羧基及其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基及其酯和鹽、氨磺?；⑾趸?、氨基、苯基、C1-C5烷氧基、羰基-C1-C5-烷基、芳基-C1-C5-烷基；此外，氨基甲?；被酋；桶被€可以是未取代的，或者被取代基R3取代一次或兩次；苯基可以是未取代的，或者被一個或多個取代基R3取代；C1-C14-烷基、C1-C5-烷氧基、羰基-C1-C5-烷基和芳基-C1-C5-烷基可以是飽和或不飽和的、分支或不分支的，還可以是未取代的或者被一個或多個取代基R3取代；取代基R3代表下列基團中的任何一種鹵素、羥基、甲?；?、羧基及其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基及其酯和鹽、氨磺?；?、硝基、氨基、苯基、氨基烷基、哌啶子基、哌嗪基、吡咯烷-1-基、C1-C5-烷基、C1-C5-烷氧基；此外，氨基甲?；被酋；桶被€可以是未取代的，或者被羥基、C1-C5-烷基、C1-C5-烷氧基取代一次或兩次；苯基還可被一個或多個下列基團取代鹵素、羥基、氨基、甲?；?、羧基及其酯和鹽、氨基甲?；?、磺基及其酯和鹽、氨磺酰基；而C1-C5-烷基和C1-C5-烷氧基還可以是飽和或不飽和的、分支或不分支的、且還可以被下列基團中的任何一種取代一次或兩次鹵素、羥基、氨基、甲?；?、羧基及其酯和鹽、氨基甲?；⒒腔捌漉ズ望}、和氨磺?；?；或者在通式中，取代基R1-R2可以一起形成-B-基，其中B代表下列基團中的任何一種(-CHR3-N＝N-)、(-CH＝CH-)n或(-CH＝N-)n，其中n代表1-3的整數(shù)，R3是如上定義的取代基。
2.按照權(quán)利要求1的組合物，其中鹵素過氧化物酶可從真菌、細菌或藻類得到。
3.按照權(quán)利要求2的組合物，其中鹵素過氧化物酶可從選自下列成員的真菌獲得卡爾黑霉屬，鏈格孢屬，彎孢屬，德氏霉屬，單格孢屬和葡萄孢屬。
4.按照權(quán)利要求3的組合物，其中鹵素過氧化物酶可從彎孢屬獲得。
5.按照權(quán)利要求4的組合物，其中鹵素過氧化物酶可從疣狀彎孢獲得。
6.按照權(quán)利要求5的組合物，其中鹵素過氧化物酶可從疣狀彎孢CBS147.63獲得，或者該鹵素過氧化物酶與可從疣狀彎孢CBS147.63獲得的鹵素過氧化物酶有免疫學交叉反應(yīng)性。
7.按照權(quán)利要求2的組合物，其中鹵素過氧化物酶可從選自下列成員的細菌獲得假單胞菌屬和鏈霉菌屬。
8.按照權(quán)利要求1的組合物，其中鹵素過氧化物酶是釩過氧化物酶。
9.按照權(quán)利要求1的組合物，其中鹵素過氧化物酶是氯化物過氧化物酶或溴化物過氧化物酶。
10.按照權(quán)利要求1的組合物，其中過氧化氫的來源是過氧化氫，或者過氧化氫前體，或者過氧化氫生成酶系統(tǒng)，或者過氧羧酸或其鹽。
11.按照權(quán)利要求1的組合物，其中鹵化物源是鹵鹽。
12.按照權(quán)利要求11的組合物，其中鹵化物源是氯化鈉、氯化鉀、溴化鈉、溴化鉀、碘化鈉或碘化鉀。
13.按照權(quán)利要求1的組合物，其中銨源是銨鹽。
14.按照權(quán)利要求13的組合物，其中銨源是硫酸二銨、氯化銨、溴化銨或碘化銨。
15.按照權(quán)利要求1的組合物，其中銨源是氨基醇。
16.按照權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物是含水組合物。
17.按照權(quán)利要求16的組合物，其中鹵素過氧化物酶的濃度在0.01-100mg酶蛋白/升的范圍內(nèi)。
18.按照權(quán)利要求16的組合物，其中過氧化氫源的濃度相當于0.01-1000mM。
19.按照權(quán)利要求16的組合物，其中鹵化物源的濃度相當于0.01-1000mM。
20.按照權(quán)利要求16的組合物，其中銨源的濃度相當于0.01-1000mM。
21.按照權(quán)利要求1的組合物，其中所述組合物是顆粒。
22.一種抑制待洗衣物中存在的微生物的方法，其中該待洗衣物用包含有效量的權(quán)利要求1組合物的浸泡、洗滌或漂洗液進行處理。
23.按照權(quán)利要求22的方法，其中待洗衣物在洗衣機中進行處理。
24.一種化妝品防腐的方法，其中將有效量的權(quán)利要求1組合物摻入該化妝品中。
25.按照權(quán)利要求24的方法，其中化妝品是漱口組合物、化妝液或凝膠或糊劑、眼用洗液、止汗劑、除臭劑、鼻用噴霧劑、眼用軟膏、軟膏或膏霜、足用浴鹽。
26.權(quán)利要求1組合物在隱形眼鏡的清潔或消毒中的應(yīng)用。
27.一種清潔、消毒或抑制硬表面上微生物生長的方法，其中將該表面與權(quán)利要求1組合物接觸。
28.按照權(quán)利要求27的方法，其中硬表面是工藝設(shè)備，諸如冷卻塔、水處理廠、乳牛場、食品加工廠、化學品或藥品加工廠中的器件。
29.按照權(quán)利要求27的方法，其中硬表面是水衛(wèi)生處理設(shè)備的表面。
30.按照權(quán)利要求29的方法，其中硬表面是紙漿加工設(shè)備的表面。
31.權(quán)利要求1組合物在原位清潔系統(tǒng)中的用途。
32.權(quán)利要求1組合物在水系統(tǒng)消毒中的用途。
全文摘要
一種酶促抗微生物組合物,它包含鹵素過氧化物酶、過氧化氫源、鹵化物源和銨源,特別是銨鹽或氨基醇,其中在鹵化物源和銨源之間有迄今尚不知的協(xié)同作用。
文檔編號A61K8/00GK1265561SQ98807957
公開日2000年9月6日 申請日期1998年8月12日 優(yōu)先權(quán)日1997年8月14日
發(fā)明者C·約翰森 申請人:諾沃挪第克公司