專利名稱：治療眼部炎癥的含有地塞米松棕櫚酸酯的藥用組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了一種治療眼部炎癥的新劑型及其用途。
近年來，水包油型乳劑在作為運送疏水性藥物的載體如在EP315079中所述的脂肪乳劑的重要性逐漸被認(rèn)識。
US 4,340,594描述了一種含有抗炎活性的類固醇尤其是地塞米松棕櫚酸酯的胃腸外給藥的脂肪乳劑。其中所述的脂肪乳劑是用于治療風(fēng)濕病、免疫溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜、佩志特病或者與腎移植相關(guān)的疾病。
由于地塞米松棕櫚酸酯在體內(nèi)會被酯酶水解成它的生物代謝產(chǎn)物地塞米松，所以它是作為一種藥物前體起作用的。但是，由于地塞米松棕櫚酸酯的脂質(zhì)含量，它具有一些優(yōu)于常規(guī)的水溶性地塞米松組合物的益處。
本發(fā)明是基于這樣一種新發(fā)現(xiàn)，即含有地塞米松棕櫚酸酯作活性成分的脂肪乳劑可用于治療眼部炎癥。
這樣，本發(fā)明涉及一種治療眼部炎癥的水包油型乳劑形式的藥用組合物，該組合物含有有效量的地塞米松親脂性酯如地塞米松棕櫚酸酯作活性成分。
乳劑是一種液體在另一種不相溶的液體中的分散體。由于大多數(shù)乳劑含有水作為一種相體，所以人們習(xí)慣上把乳劑分為兩種類型由分散在水中的膠體顆粒組成的水包油型(O/W)和相反的油包水型(W/O)。把連續(xù)液體稱作分散介質(zhì)，顆粒形式的液體稱作分散相。
為了得到穩(wěn)定的乳劑，必須存在第三種組份-乳化劑。例如在O/W型乳劑中，每個膠體顆粒都具有油性核和含有乳化劑和表面活性物質(zhì)的外層。商業(yè)上可得到的含有10％大豆油的脂肪乳劑為Intralipid(Pharmacia AB，瑞典)。
含有分散在含水介質(zhì)中的以油為主的顆粒的水包油型乳劑，能夠把各種疏水性藥物摻入到它們的油性核或它們的外表面膜中，所以已經(jīng)被建議用作這類藥物的藥用載體。本發(fā)明涉及這類水包油型乳劑，它含有地塞米松親脂性酯作藥用活性成分(即藥物)用于治療眼部炎癥。
除了活性成分外，該乳劑一般含有油性成分和其它成分即乳化劑和/或表面活性劑。另外，含水相(分散介質(zhì))一般含有溶于其中的滲透壓調(diào)節(jié)劑用來把滲透壓升高到生理水平。
在下文中，乳劑組份的濃度將按％給出，指的是在100體積單位的總組合物中組份的重量(w/v)。
本發(fā)明組合物含有有效量的地塞米松親脂性酯。術(shù)語“有效量”應(yīng)當(dāng)理解為是足以起到治療作用的量。顯然，組合物中的有效量取決于劑型、治療方法(即是否是每天一次、每天兩次等把組合物給藥)、患者的年齡組、炎癥的嚴(yán)重程度、以及現(xiàn)在已知的其他因素。本領(lǐng)域技術(shù)人員在按照規(guī)則和線性實驗決定各種情況中藥物的有效量將沒有困難。
一般，地塞米松親脂性酯的例子是地塞米松脂肪酸酯，其中脂肪酸一般具有6到大約22個碳原子的鏈長。這類脂肪酸的具體例為棕櫚酸、油酸、亞油酸、硬脂酸等。特別優(yōu)選的脂肪酸為棕櫚酸(即活性劑優(yōu)選為地塞米松棕櫚酸酯)。地塞米松棕櫚酸酯一般以0.05％，一般為0.1％，優(yōu)選為0.15％到0.5％，一般0.4％，優(yōu)選0.3％的范圍包含在組合物中。
油性組份一般是植物油。植物油的例子有油酸、亞油酸、月桂酸、大豆油、橄欖油、向日葵油等。植物油一般以約5％到30％(w/v)的濃度范圍包含在組合物中。
乳化劑一般是磷脂類。磷脂類的例子有磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸和鞘磷脂類。磷脂類一般以約0.5％-10％(w/v)的濃度范圍，優(yōu)選1-5％的濃度范圍包含在組合物中。
一般表面活性劑的例子為具有平均分子量為1,000到10,000的聚亞烷基二醇類、具有平均分子量為1,000到10,000的聚氧亞烷基共聚物類和聚氧亞烷基脂肪酸酯類。
滲調(diào)壓調(diào)節(jié)劑的例子是蔗糖或甘油。
除了上述組份外，本發(fā)明的組合物還可以含有防腐劑如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯和對羥基苯甲酸丁酯，或者抗氧化劑如α-生育酚和抗壞血酸。
本發(fā)明的藥物組合物一般可以適當(dāng)?shù)膭┬吞峁┤绲窝蹌?，所含活性成分的濃度?yīng)達到給定的滴量，如每次給藥1-2滴。
本發(fā)明也提供了一種治療眼部炎癥的方法，它包括把水包油型乳劑局部用于眼睛，其中的乳劑中含有地塞米松的親脂性酯作活性成分。
本發(fā)明還提供了地塞米松親脂性酯和水包油型乳劑在制備治療眼部炎癥的局部眼用組合物方面的用途。
參考一些但不是限定性的實施例，下文將詳細說明本發(fā)明。附圖的簡要說明

圖1-3是顯示了在各種療法中臨床試驗的總分?jǐn)?shù)(圖1)、眼房水中的蛋白含量(圖2)和眼房水中的細胞數(shù)(圖3)的柱形圖對照組(A，B)，用參照組合物的治療組(C，D)和用本發(fā)明組合物的治療組(E，F(xiàn))。在每種情況中，用LPS給左眼注射(結(jié)果顯示為圖1-3中的柱A，C和E)并且用生理鹽水給右眼注射(結(jié)果顯示在圖1-3中的柱B，D和F)。1.實驗步驟動物的飼養(yǎng)在試驗中使用當(dāng)?shù)仫曫B(yǎng)員(Levinstein，Yokneam，Israel)所提供的15只重量為2.0-2.5kg的NZW兔。
選擇白化體兔用于該實驗，這是因為在科學(xué)文獻所公布的報告中知道這種兔能夠廣泛適應(yīng)水土，可作為評價新開發(fā)的和臨床所用藥劑治療前眼色素層炎最適合的實驗?zāi)Ｐ汀?br> 一旦到達，就檢查每只動物并希望只使用合適的健康的動物。接受動物后5天使動物適應(yīng)水土，期間每天觀察它們的疾病健康癥狀。不能檢查到異常。
在一種控制入口的實驗室動物設(shè)備中，在目標(biāo)溫度為17到23℃目標(biāo)濕度30-70％和12-小時的光/12-小時的黑暗循環(huán)的環(huán)境條件下飼養(yǎng)兔。每天記錄溫度和相對濕度。未觀察到與目標(biāo)值有差異。
讓兔子單獨居住在固定在多層籠中的不銹鋼籠里。該籠測得50×45×48cm并且在底板上配有不銹鋼的帶孔地板。
在耳朵上刺上號碼紋以獨特辨認(rèn)動物。
每只籠上都配有前面可看到的籠卡，上面有籠中所含的研究號、動物號、動物性別和種類以及所有涉及治療的相關(guān)詳細資料。
不加限制性地給動物喂養(yǎng)商業(yè)上的丸狀兔食(AMBAR 19701)并讓動物自由獲得由籠側(cè)水瓶提供的水。2.實驗和對照組合物實驗組合物商業(yè)上可得到的含有4mg/ml地塞米松棕櫚酸酯的水包油型乳劑(LIMETHASONTM，Green Cross Corporation，日本)。
參照組合物一種商業(yè)上可得到的含有1mg/ml地塞米松磷酸二鈉的透明眼用水溶液(STERODEXTM，F(xiàn)ischer制藥實驗室(1975)Ltd.，以色列)。3.實驗的設(shè)計條件把動物放到實驗組中用盲法把動物分配到實驗組中以防止出現(xiàn)進行臨床和實驗室實驗的部分人員的實驗性偏差。一組用實驗組合物治療，另一組用參照組合物治療，第三組是一組不進行治療的對照組。給每個實驗動物進行不同療法的編碼只有在臨床和實驗室實驗結(jié)束后才能打開。實驗性眼色素層炎的誘導(dǎo)向每只實驗動物的左眼玻璃體內(nèi)注射2μg(40μl的50μl LPS/1mlHPCD[羥丙基環(huán)糊精])劑量的內(nèi)毒素脂多糖(LPS-大腸桿菌)，使三組實驗組的所有動物都進行EIU。整個步驟過程中，肌肉內(nèi)注射鹽酸氯胺酮30mg/kg和鹽酸甲苯塞嗪5mg/kg麻醉動物。EIU的對照把對側(cè)(右)眼作為LPS-注射眼的對照，并且以相同的方式使用50μl的生理鹽水作玻璃體內(nèi)注射。4.治療在誘發(fā)實驗性眼色素層炎后迅速用各種制劑中的一滴用于兩眼(LPS和生理鹽水注射的眼)來給實驗和參照組合物組的兔接受6次中的首次重復(fù)的眼部滴注。接著，在間隔大約3到4小時的時間進行另外兩次滴注。第二天和24-小時臨床實驗期間(見下文)，用相同的方式和相等的時間間隔進行剩余三次滴注。5.觀察和檢查臨床檢查按照下列顯示的級別標(biāo)準(zhǔn)，在LPS注射后24和48小時進行兔眼的臨床檢查并對結(jié)膜炎反應(yīng)、虹膜充血和前房潮紅記分I.結(jié)膜的標(biāo)準(zhǔn)0＝正常。眼瞼和眼球結(jié)膜上的血管可以容易地觀察到。會出現(xiàn)變白到變微紅粉紅但緣周(perilimbal)沒有充血。
1＝隆起、變紅，主要確認(rèn)為伴有緣周充血的眼瞼結(jié)膜，初期認(rèn)為是眼睛的較上和較下部分。
2＝鮮紅色的眼瞼結(jié)膜并伴有緣周充血，至少覆蓋了緣周區(qū)域的75％圓周。
3＝暗色、結(jié)實的紅色伴有眼球和眼瞼結(jié)膜充血，同時緣周有顯著充血并且在結(jié)膜上有瘀斑出現(xiàn)。
II.虹膜的標(biāo)準(zhǔn)0＝正常。虹膜為沒有任何虹膜血管充血。偶爾在瞳孔邊緣的附近直徑為大于1-2mm的小區(qū)域，可以看到第二條和第四條血管有輕微的充血。
1＝第二條(但不是第四條)血管有很小的充血。一般是均勻的，但在100或600鐘點可能是較大的強度。如果確認(rèn)那些區(qū)域有可見的強烈的血管充血，第四條血管被看作是實際上充血。
2＝第四條血管有很少充血并且小于第二條血管的中度充血或只是虹膜基質(zhì)腫脹。
3＝第二條和第四條血管有中度充血。此外，虹膜基質(zhì)有輕度腫脹(在300和900鐘點附近是最明顯的)。
4＝第二條和第四條血管有顯著充血并且虹膜基質(zhì)有顯著的腫脹。虹膜似乎皺褶并可能伴有前房充血。
III.前房室潮紅的標(biāo)準(zhǔn)0＝正常。完全沒有潮紅。
1＝幾乎觀察不到，微弱的潮紅。
2＝中度潮紅。虹膜和晶狀體細看為透明的。
3＝明顯潮紅。虹膜和晶狀體細看為模糊的。
4＝嚴(yán)重潮紅。有大量的纖維蛋白固定在凝結(jié)的眼房水中。
分別計算在各觀察期間測定的各動物的每只眼睛的所有三種臨床參數(shù)的分?jǐn)?shù)。加上24和48小時檢查的分?jǐn)?shù)并作為“累積分?jǐn)?shù)”。眼房水中不同細胞的計數(shù)對眼睛48-小時的臨床評估后，把動物麻醉(肌肉內(nèi)注射鹽酸氯胺酮100mg/kg和鹽酸甲苯塞嗪15mg/kg)并且用一只合適的皮下注射的針和注射器從各實驗動物的兩只眼睛中取房水作樣本。用血細胞計數(shù)器測定不同的細胞數(shù)。
把細胞數(shù)值表達為在各動物兩眼中所檢查的不同細胞類型的總數(shù)(單核和分裂的白細胞；紅細胞；上皮細胞)。房水中蛋白數(shù)的測定收集房水樣本后馬上用于細胞計數(shù)的檢查，把所得到的房水用MIKRO 12/24離心機(Hettich Zentrifugen)離心5分鐘。然后使用一種標(biāo)準(zhǔn)商用測定試劑盒(BioRad Standard III)對上清液進行蛋白測定。測定所有實驗動物兩眼房水的蛋白數(shù)。保存眼睛用于病理組織學(xué)檢查抽吸房水后，殺死所有實驗動物摘出它們的眼睛并固定在Davidson溶液中。6.結(jié)果和討論下列圖1-3和表1中顯示了該試驗的結(jié)果；表1對三種治療類型的每種就臨床等級的評估標(biāo)準(zhǔn)、房水蛋白數(shù)和細胞數(shù)方面總結(jié)了所有實驗動物的數(shù)據(jù)。
表1在兔左眼(注射LPS)所測定的EIU參數(shù)的平均值±SD的總結(jié)<
用Student t-試驗(p＜0.05)處理與未治療對照組相比具有統(tǒng)計學(xué)的顯著性差異圖1-3以更詳細的圖的形式顯示了表1中所示的相同結(jié)果圖1-臨床檢查的總標(biāo)準(zhǔn)；圖2-房水中的蛋白數(shù)；圖3-房水中的細胞數(shù)。表示為A，B，C，D，E和F的各柱顯示的是如下的平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤差值A(chǔ)，B-未治療的對照組；A-注射LPS的左眼和B-注射生理鹽水的右眼。
C，D-用參照組合物治療的動物；C-注射LPS的左眼和D-注射生理鹽水的右眼。
E，F(xiàn)-用實驗組合物治療的動物；E-注射LPS的左眼和F-注射生理鹽水的右眼。
與未治療的對照實驗組相關(guān)的數(shù)據(jù)清楚地顯示在實驗參數(shù)上左眼(注射LPS)和右眼(注射生理鹽水)之間有明顯的差異，在EIU模型中對玻璃體內(nèi)注射LPS反映出公知的急性炎癥反應(yīng)。這樣，在玻璃體內(nèi)注射后24小時內(nèi)，該組所有動物的左眼具有明顯結(jié)膜和虹膜充血并且前房室潮紅的臨床癥狀，特別是在48小時的檢查中一直不變。在這些動物中沒有一只玻璃體內(nèi)注射生理鹽水的對照右眼在兩次連續(xù)的檢查中顯示出炎癥的癥狀。
在未治療組中測定房水中的蛋白數(shù)和細胞數(shù)證實上述臨床觀察。特別就前房來說，兩個對側(cè)眼睛之間有突出的差異，表現(xiàn)在與對照的(右)眼中大約2-4mg/ml的正常濃度相比注射LPS的(左)眼中平均濃度大約是130mg/ml。按照總細胞數(shù)的數(shù)據(jù)判斷，至少在實驗條件下，該參數(shù)似乎不是評價急性眼部炎癥程度的蛋白含量的指征并一致的測定。
正如它抑制三種檢查的實驗標(biāo)準(zhǔn)中所顯示的，實驗組合物和參照組合物二者都有效地降低了由EIU所引起的急性炎癥反應(yīng)。這樣，就用于評價臨床癥狀的“累積數(shù)值”而言，相對與未治療對照組中相應(yīng)的眼睛來說兩種組合物在降低左眼(注射LPS)炎癥的相對作用具有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜.05)。通過兩種組合物降低房水中蛋白濃度的水平證實了相似的具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜.05)的治療作用。
就兩種組合物的相對治療作用而言，在檢查的實驗參數(shù)中觀察到了由實驗組合物產(chǎn)生的明顯一致的增強活性。這種相對增加尤其從與兩種臨床級別的“累積分?jǐn)?shù)”和房水中蛋白質(zhì)數(shù)值相關(guān)的參數(shù)中顯示出來。在術(shù)語百分?jǐn)?shù)(％)的差異中，實驗組合物在臨床嚴(yán)重程度和蛋白數(shù)值上分別引起了大約70和50％的下降，這是相對于參照組合物相應(yīng)的大約55和35％的下降而言。這表明地塞米松棕櫚酸酯的理想濃度可以低于實驗組合物的濃度如0.2％或3％。
用于注射生理鹽水的右眼的治療沒有表現(xiàn)出任何明顯的與治療相關(guān)的作用。
權(quán)利要求
1.治療眼部炎癥的水包油型乳劑形式的藥用組合物，它含有有效量的地塞米松親脂性酯作活性成分。
2.按照權(quán)利要求1所述的藥用組合物，其中該活性成分是地塞米松脂肪酸酯。
3.按照權(quán)利要求2所述的藥用組合物，其中地塞米松的酯為地塞米松棕櫚酸酯。
4.按照權(quán)利要求1到3中的任何一個所述的藥用組合物，其中該組合物為眼用滴劑。
5.地塞米松的親脂性酯和水包油型乳劑在制備治療眼部炎癥的局部眼用組合物方面的用途。
6.按照權(quán)利要求5所述的用途，其中地塞米松酯是地塞米松棕櫚酸酯。
7.一種治療眼部炎癥的方法，它包括給眼部局部使用水包油型乳劑，該乳劑含有地塞米松親脂性酯作活性成分。
8.按照權(quán)利要求7的方法，其中地塞米松酯為地塞米松棕櫚酸酯。
全文摘要
本發(fā)明涉及用治療眼部炎癥的含有有效量的地塞米松親脂性酯的水包油型乳劑。
文檔編號A61P27/02GK1271288SQ98809486
公開日2000年10月25日 申請日期1998年8月26日 優(yōu)先權(quán)日1997年8月28日
發(fā)明者Y·伯恩斯坦 申請人:法瑪?shù)倌烽_發(fā)有限公司