專利名稱：含琥珀酸鹽化合物的美容護(hù)膚組合物的制作方法
涉及含有琥珀酸鹽化合物的美容組合物，以及將該組合物用于改善皮膚外觀和皮膚美容調(diào)理的應(yīng)用。
可改進(jìn)皮膚外觀的美容產(chǎn)品日益受到用戶的喜愛。這類產(chǎn)品旨在減輕和緩解皮膚的老化或光致老化現(xiàn)象，如細(xì)紋和皺紋、干燥和皮膚松弛。盡管市場(chǎng)上已存在多種產(chǎn)品，制造商仍在尋求其他活性成分供用戶選用。
某些專利公開了含有琥珀酸鹽衍生物的美容組合物，但所公開的化合物與本發(fā)明所含的琥珀酸鹽化合物的結(jié)構(gòu)不同。例如參見Kalopissis(US 3976781)、Kopolow(US 5169622)、Shapiro等人(US 5705147)、和Weil(US 5047166)諸專利。Gutierrez等人(US5696288)公開了存在于洗滌劑組合物中的氧代二琥珀酸鹽。
含有琥珀酸的美容組合物是已知的?？上х晁嵩谒械娜芙舛扔邢?，因此難于配制成具有足夠高濃度的美容組合物，如油包水型乳劑。為易于配制，含有更易溶于水的活性成分是有利的。
本發(fā)明至少在某種程度上是基于發(fā)現(xiàn)了高水溶性的特定的琥珀酸鹽能增進(jìn)皮膚細(xì)胞中糖胺聚糖和膠原的合成。
本發(fā)明包括一種護(hù)膚組合物，其中含有(a)約0.05-約40％(重量)的琥珀酸化合物，選自磺基琥珀酸或其鹽、2，2＇-氧基二琥珀酸或其鹽、乙二醇二琥珀酸或其鹽，以及它們的混合物；和(b)適于化妝品的媒介物。
優(yōu)選該組合物是油包水型乳劑，其中琥珀酸鹽化合物存在于水相中，以增進(jìn)對(duì)皮膚的滲透性。
本發(fā)明還包括用于改善和預(yù)防皮膚起皺、細(xì)紋、干燥、起皮、老化或光損傷的狀況，以及改進(jìn)皮膚的厚度、彈性、柔韌性、光澤、紅潤(rùn)性和豐滿性的美容方法，該方法包括在皮膚上施用本發(fā)明的組合物。本發(fā)明的美容組合物打算用于局部涂敷于已存在干燥、起皮、細(xì)紋、皺紋、老化、光損傷現(xiàn)象的哺乳動(dòng)物皮膚上，或者本發(fā)明的組合物可以預(yù)防性地涂敷于正常的皮膚上，用以預(yù)防或減少皮膚變劣。
該組合物可用于改進(jìn)成纖細(xì)胞的膠原和/或糖胺聚糖的生成的美容方法中。
以下詳述部分和實(shí)施例具體說明了本發(fā)明組合物的某些作用。但本發(fā)明和權(quán)利要求書所解決的問題更為廣泛，并不僅限于此。
除實(shí)施例和對(duì)照實(shí)施例，或除非特別指出，說明書中所有涉及材料用量、反應(yīng)條件、材料物理特性和/或應(yīng)用的數(shù)字均理解為用“約”修飾。除非特別指出，所有用量均以水包油型乳劑的重量計(jì)。
應(yīng)用于此的術(shù)語“皮膚”包括面部、頸部、胸部、背部、手臂、手部、腿部、足部的皮膚和頭皮。
為避免疑問，術(shù)語“含有”的意思是表示“包括”，而不是“由…組成”。換言之所列步驟或選項(xiàng)是非窮舉的。
本發(fā)明的琥珀酸鹽化合物選自化學(xué)結(jié)構(gòu)如下的磺基琥珀酸、2，2′-氧基二琥珀酸、乙二醇二琥珀酸磺基琥珀酸
氧基二琥珀酸
乙二醇二琥珀酸
取決于組合物的pH值，這些化合物可以呈鹽形式，例如鉀鹽或鈉鹽或銨鹽。
本發(fā)明組合物中琥珀酸鹽化合物的用量為0.05-40％，優(yōu)選為2-20％，最優(yōu)選為4-10％。琥珀酸鹽化合物可購(gòu)自Sigma，或按Gutierrez等人(US 5696288)所述的方法合成。
本發(fā)明的組合物還含有適用于化妝品的媒介物在組合物中用作琥珀酸鹽化合物的稀釋劑、分散劑或載體，以便當(dāng)該組合物涂敷于皮膚時(shí)易于分散。
媒介物可為含水的、無水的或是乳劑。優(yōu)選該組合物是含水的或是乳劑，特別是油包水型乳劑或水包油型乳劑。水的含量可為5-99％(重量)，優(yōu)選為20-70％(重量)，最佳為35-60％(重量)。
除了水之外，本發(fā)明組合物中還可含有具有一定揮發(fā)性的溶劑作為載體。最優(yōu)選單羥基醇C1-C3烷醇。其中包括乙醇、甲醇和異丙醇。單羥基烷醇的用量可為1-70％(重量)，優(yōu)選10-50％(重量)，最優(yōu)選15-40％(重量)。
潤(rùn)膚劑材料也可是適用的化妝品載體。它們可以是硅油和合成酯類。潤(rùn)膚劑的用量總為0.1-50％(重量)，優(yōu)選1-20％(重量)。
硅油可分為揮發(fā)性和非揮發(fā)性兩種。這里使用的術(shù)語“揮發(fā)性”是指在室溫下具有可測(cè)蒸氣壓的那些材料。揮發(fā)性硅油最好選自含3-9個(gè)、優(yōu)選4-5個(gè)硅原子的環(huán)-或直鏈-聚二甲基硅氧烷。直鏈揮發(fā)性聚硅氧烷材料在25℃下的粘度一般小于約5厘沲，而環(huán)聚硅氧烷材料的粘度一般低于約10厘沲。適合用作潤(rùn)膚劑材料的非揮發(fā)性硅油包括聚烷基硅氧烷、聚烷芳基硅氧烷和聚醚硅氧烷共聚物。適用的的基本上不揮發(fā)的聚烷基硅氧烷包括例如在25℃下粘度為約5-約25,000,000的聚二甲基硅氧烷。用于本發(fā)明組合物中優(yōu)選的非揮發(fā)性潤(rùn)膚劑是在25℃下粘度為約10-約400厘沲的聚二甲基硅氧烷。
酯類潤(rùn)膚劑包括(1)含10-20個(gè)碳原子的脂肪酸烯基或烷基酯。其實(shí)例包括新戊酸異二十烷基酯、異壬酸異壬酯、肉豆蔻酸油基酯、硬脂酸油基酯和油酸油基酯。
(2)醚酯如脂肪酸的乙氧基化脂肪醇酯。
(3)多元醇酯。乙二醇單和二脂肪酸酯，二甘醇單和二脂肪酸酯，聚乙二醇(200-6000)單和二脂肪酸酯，丙二醇單和二脂肪酸酯，聚丙二醇2000單油酸酯，聚丙二醇2000單硬脂酸酯，乙氧基化丙二醇單硬脂酸酯，單和二脂肪酸甘油酯，聚甘油聚脂肪酸酯、乙氧基化單硬脂酸甘油酯，1，3-丁二醇單硬脂酸酯，1，3-丁二醇二硬脂酸酯，聚氧乙烯多元醇脂肪酸酯，脫水山梨醇脂肪酸酯和聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯均為適用的多元醇酯。
(4)蠟酯，如蜂蠟、鯨蠟、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、硬脂酸更脂基酯和二十二烷酸二十烷基酯。
(5)甾醇酯，其實(shí)例是脂肪酸膽甾醇酯。
含10-30個(gè)碳原子的脂肪酸也屬于適用于本發(fā)明組合物的化妝品載體。這類的具體實(shí)例有壬酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、異硬脂酸、羥基硬脂酸、油酸、亞油酸、蓖麻酸、花生酸、二十二烷酸和芥酸。
多羥基醇類保濕劑也適于在本發(fā)明組合物中用作化妝品載體。保濕劑旨在增進(jìn)潤(rùn)膚功效，減少脫皮，刺激累積代謝皮層脫除和改進(jìn)皮膚感覺。典型的多元醇包括甘油、聚亞烷基二醇，更優(yōu)選亞烷基多元醇及其衍生物，包括丙二醇、二丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇及其衍生物、山梨醇、羥丙基山梨醇、己二醇、1，3-丁二醇、1，2，6-己三醇，乙氧基化甘油、丙氧基化甘油和它們的混合物。為達(dá)到最佳效果，保濕劑優(yōu)選是丙二醇或透明質(zhì)酸鈉。保濕劑的用量占組合物可以為0.5-30％，優(yōu)選1-15％，以組合物重量計(jì)。
增稠劑也可用作本發(fā)明組合物中化妝品載體的一部分。典型的增稠劑包括交聯(lián)丙烯酸酯類(例如Carbopol 982)，疏水改性丙烯酸酯(例如Carbopol 1382)，纖維素衍生物和天然樹膠。適用的纖維素衍生物有羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、乙基纖維素和羥甲基纖維素。適用于本發(fā)明的天然樹膠包括瓜耳膠、黃原膠、紫膠樹膠(sclerotium)、角叉菜膠(carrageenan)、果膠(pectin)和這些樹膠的混合物。這些增稠劑的用量為0.0001-5％(重量)，一般為0.001-1％(重量)，最優(yōu)選0.01-0.5％(重量)。
水、溶劑、聚硅氧烷、酯、脂肪酸、保濕劑和/或增稠劑所構(gòu)成的化妝品載體的總量為1-99.9％(重量)，優(yōu)選80-99％(重量)。任選的皮膚有效材料和化妝品輔劑含有油或油性材料，可以與乳化劑一同制成油包水型或水包油型乳劑，具體劑型主要視所用乳化劑的親水-親脂平衡(HLB)平均值而定。
本發(fā)明美容組合物中也可以含有表面活性劑。表面活性劑的總濃度占組合物的0.1-40％(重量)，優(yōu)選1-20％(重量)，最優(yōu)選1-5％(重量)。表面活性劑可選自陰離子、非離子、陽離子和兩性表面活性劑。特別優(yōu)選的非離子表面活性劑是帶有C10-C20脂防醇或脂肪酸疏水部分那些非離子表面活性劑，每摩爾疏水部分與2-100摩爾氧化乙烯或氧化丙烯縮合；與2-20mol烯化氧的縮合的C2-C10烷基酚。單-或二-脂肪酸乙二醇酯；脫水山梨醇，單-和二-C8-C20脂防酸；嵌段共聚物(氧化乙烯/氧化丙烯)；和聚氧乙烯脫水山梨醇，和它們的混合物。烷基聚糖苷和糖化脂肪酰胺(例如甲基葡糖酰胺)也是適用的非離子表面活性劑。
優(yōu)選的陰離子表面活性劑包括皂、烷基醚硫酸鹽和磺酸鹽，烷基硫酸鹽和磺酸鹽，烷基苯磺酸鹽，烷基和二烷基磺基琥珀酸鹽、C8-C20酰基羥乙磺酸鹽，谷氨酸鹽、C8-C20烷基醚磷酸鹽和它們的混合物。
本發(fā)明美容組合物中還可含有各種附加的活性成分?；钚猿煞质侵赋凉?rùn)膚劑和其它僅能改善組合物物理特性之外的皮膚有效成分。盡管對(duì)這類成分并無特殊限定，但其一般實(shí)例包括附加的抗氧劑、抗老化劑和防曬劑。
防曬劑含有那些常用于阻擋紫外線的材料。具體的化合物是PABA衍生物、肉桂酸酯和水楊酸酯。例如可以使用偶氮二苯酮(Parsol 1789)、甲氧基肉桂酸辛酯和2-羥基-4-甲氧基二苯酮(也稱為羥二苯酮)。甲氧基肉桂酸辛酯和2-羥基-4-甲氧基二苯酮分別以注冊(cè)商標(biāo)Parsol MCX和二苯酮-3在市場(chǎng)上出售。組合物中防曬劑的確切用量可視對(duì)日光中紫外線的防曬程度而定。
許多美容組合物特別是含水組合物必須防止可能有害的微生物的滋生。因此防腐劑是必須的。適用的防腐劑包括對(duì)-羥基苯甲酸烷基酯、乙內(nèi)酰脲衍生物、丙酸鹽和各種季銨鹽化合物。適用于本發(fā)明的特別優(yōu)選的防腐劑是對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、苯氧基乙醇和苯甲醇。防腐劑的用量一般約占組合物重量的0.1-2％。
本發(fā)明的美容組合物中可加入粉類基質(zhì)。這些粉劑包括白堊、滑石粉、漂白土、高嶺土、淀粉、近晶化粘土、經(jīng)化學(xué)改性的硅酸鎂鋁、經(jīng)有機(jī)改性的蒙脫土、水合硅酸鋁、煙化二氧化硅、淀粉鋁、琥珀酸辛烯基酯，和它們的混合物。
本發(fā)明的組合物打算主要用作人體皮膚局部涂敷用產(chǎn)品，特別是行為改善皮膚彈性和緊致性、光澤、透明感和無瑕度、以及預(yù)防和減少細(xì)紋、皺紋、干燥、老化和光致老化的皮膚外觀的制劑。
應(yīng)用時(shí)，將例如1-100ml組合物從適宜的容器或涂敷器中涂敷到皮膚的暴露部位上，然后，如必要，可用手或手指或適宜的裝置在皮膚上涂布和/或涂擦。劑型和包裝本發(fā)明的皮膚美容組合物可制成各種劑型，例如可制成凝膠、乳液、流動(dòng)性膏霜、膏霜。該組合物可包裝在適于其粘度特性和顧客打算使用的適宜的容器中。例如乳液或流動(dòng)性膏霜可盛裝在瓶或走珠瓶、或含噴射劑的氣溶膠裝置中，或盛裝在加裝有適于手指操作的泵送裝置的容器中。組合物為膏霜時(shí)，其可簡(jiǎn)單盛裝在不變形瓶或擠壓容器(如軟管或帶蓋瓶)中。因此，本發(fā)明還提供一種盛有本發(fā)明美容用組合物的密封容器。
本發(fā)明組合物還可以包容在膠囊中，如US 5063057所述的那些內(nèi)容，本文一并作為參考。
以下特定實(shí)施例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明并非僅限于此。
實(shí)施例1本實(shí)施例測(cè)出相應(yīng)于使用不同被測(cè)化合物進(jìn)行護(hù)理時(shí)成纖細(xì)胞的糖胺聚糖的生成狀況。
糖胺聚糖類(GAGs)是聚糖的一族(透明質(zhì)酸(HA)除外)，可以與蛋白質(zhì)核(Protein core)相連形成蛋白聚糖。真皮中的主要糖胺聚糖是透明質(zhì)酸和硫酸皮質(zhì)素，以及少量4-硫酸軟骨素和6-硫酸軟骨素。角質(zhì)細(xì)胞和真皮成纖細(xì)胞所產(chǎn)生糖胺聚糖是細(xì)胞外液的主要成分，盡管其僅占皮膚干重的0.2％。糖胺聚糖能在皮膚中保水(透明質(zhì)酸可固定1000倍于其重量的水)，并保持肌膜的整體的基本形態(tài)，調(diào)整細(xì)胞的相互作用和營(yíng)養(yǎng)輸送，還與膠原的形成以及可能與彈性纖維的形成有關(guān)。真皮中糖胺聚糖(特別是透明質(zhì)酸)的比例會(huì)隨老化而減少。參見Perlish等人的“糖胺聚糖在皮膚老化中的作用”一文?；镜目估匣钚猿煞忠朁S酸能增進(jìn)活體老化皮膚中表皮中棘狀層和顆粒層中和乳頭真皮中糖胺聚糖的含量。參見Kligman等人的“視黃酸類化合物在老年人皮膚的非日曬型防護(hù)中的局部作用”(Effects of topical tretinoin on non-exposede protected skin of the elderly)，J.Am AcadDermatol 1993；2925-33。測(cè)定糖胺聚糖的方案由Clonetics公司(San Diego，CA)購(gòu)得人體皮膚新生成纖細(xì)胞，采用5～10代繼代移植細(xì)胞。所有細(xì)胞培養(yǎng)基材料均購(gòu)自Life Technologies(NY)。在一個(gè)12孔盤中，用DMEM(經(jīng)Dulbecco改性的Eagle′s培養(yǎng)基)、補(bǔ)充了2mM L-谷氨酸的高濃度葡萄糖、10％胎牛血清和抗生素及抗菌素溶液接種細(xì)胞，接種密度約為50000個(gè)細(xì)胞/孔，然后細(xì)胞經(jīng)2天培養(yǎng)至融合。每孔中的融合細(xì)胞經(jīng)無血清DMEM漂洗，用存在于750μl經(jīng)NaOH滴定至pH為7.4的無血清DMEM中的被測(cè)化合物處理細(xì)胞(一式三份)。被測(cè)化合物使用濃度見下表1a-1c。對(duì)照組不含被測(cè)化合物。24小時(shí)后，吸出這種培養(yǎng)基并重復(fù)處理步驟。經(jīng)第二個(gè)24小時(shí)，收集該含有可溶性糖胺聚糖的培養(yǎng)基，并凍干以備分析。
將陽離子電勢(shì)探測(cè)膜浸入滅菌水中，然后置于Dot-Blot裝置(均購(gòu)自Bio-Rad實(shí)驗(yàn)室，Hercules，CA)中。在每孔中加入100μl水，然后在真空條件下解凍。融化后在探測(cè)膜上涂敷100μl被測(cè)溶液試樣，然后經(jīng)重力過濾(約經(jīng)1.5-2小時(shí))。此時(shí)糖胺聚糖凝結(jié)在膜上。在水中將膜用3％w/v不含牛血清蛋白的脂肪酸(Sigma)固定(was bound)1小時(shí)。制備存在于3％乙酸中、pH約為2.3的0.5％w/v阿爾新藍(lán)8GX染料(ICN生物化學(xué)公司，Cleveland，OH)溶液。探測(cè)膜用蒸餾水洗滌2次，然后在旋轉(zhuǎn)振蕩器的染料溶液中染色15分鐘。將染料倒掉，并經(jīng)15分鐘分別用3％乙酸將控測(cè)膜脫色兩次。探測(cè)膜用水漂洗，過夜干燥。采用Bio-Rad GS700圖象分析光密度計(jì)測(cè)定各點(diǎn)的色密度。
計(jì)算由被測(cè)化合物所處理的細(xì)胞與對(duì)照組細(xì)胞相比的光密度計(jì)的讀數(shù)比來表征的相對(duì)于對(duì)照組的增加倍數(shù)。應(yīng)用學(xué)生t-測(cè)試計(jì)算p值?；腔晁岫刘ベ?gòu)自Sigma。
3組獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的結(jié)果列于表1a-1c中。
表1a
表1b
表1c
表1a-1c所示的結(jié)果表明磺基琥珀酸鹽、乙二醇二琥珀酸酯和氧代琥珀酸鹽能明顯增進(jìn)成纖細(xì)胞中糖胺聚糖的產(chǎn)生?；腔晁岫刘?不屬于本發(fā)明的范圍)具有降低糖胺聚糖產(chǎn)生的作用。
實(shí)施例2本實(shí)施例測(cè)出相應(yīng)于使用不同被測(cè)化合物進(jìn)行護(hù)理時(shí)成纖細(xì)胞的前膠原I的生成狀況。
膠原是主要的皮膚蛋白質(zhì)。其合成作用會(huì)隨老化或光損傷而降低。膠原的降解或破壞會(huì)增加皮膚的拉伸強(qiáng)度，導(dǎo)致皺紋和松弛。許多涉及人體課題的研究都表明I型膠原會(huì)隨光損傷程度的加劇而減少(參見Kligman，A.，JAMA，(1969)，210，2377-2380頁；Lavker，R.，J.Inv Derm.，(1979)，73，79-66；Smith J等人，J.Inv Derm.，(1962)，39，347-350頁；以及Shuster，S等人，Br.J.Dermatol.，(1975)，93，639-643頁)；還報(bào)道了日曬皮膚中皺紋組織學(xué)與膠原含量減少的某些相互關(guān)系(參見Chen，S；Kiss，I.，J.Inv.Derm.，(1992)，98248-254頁)。Voorhees及其同事一直支持這些研究的結(jié)果，指出經(jīng)視黃酸類局部的護(hù)理可復(fù)原光損傷的人體皮膚中的I型膠原(參見Christopher，E等人，The New Eng.Jou.ofMedicine(1993)，329，530-535頁)。前膠原I是一種膠原前體。相應(yīng)于被測(cè)化合物的使用前膠原I生成增加是膠原含量提高的標(biāo)志。用于Slot Blot的前膠原I的染色方案由Clonetics公司(San Diego，CA)購(gòu)得人體皮膚新生成纖細(xì)胞。所有細(xì)胞培養(yǎng)基材料均購(gòu)自Life Technologies(NY)，采用5～10代繼代移植細(xì)胞。在一個(gè)96孔盤的48內(nèi)孔中，用含有DMEM(經(jīng)Dulbecco改性的Eagle′s培養(yǎng)基)、補(bǔ)充了2mML-谷氨酸的高濃度葡萄糖、10％胎牛血清和抗生素及抗菌素溶液中接種細(xì)胞，接種密度約為10000個(gè)細(xì)胞/孔。然后細(xì)胞經(jīng)2天培養(yǎng)至融合。融合后除去培養(yǎng)基并將細(xì)胞用無血清DMEM漂洗，每個(gè)孔用200μl經(jīng)NaOH滴定至pH為7.4的無血清DMEM中的被測(cè)化合物處理。每次處理在6孔中重復(fù)進(jìn)行。被測(cè)化合物的使用濃度見下表2a-2d。對(duì)照組不含被測(cè)化合物。24小時(shí)后除去被測(cè)化合物溶液和對(duì)照溶液，用100μl相同溶液再次處理細(xì)胞。被測(cè)化合物的濃度列于下表1中。24小時(shí)后除去全部溶液，在4℃用濃度0.5％蛋白酶抑制劑(購(gòu)自Sigma的Aprotinin)保存一個(gè)周末。然后將被測(cè)化合物溶液在DMEM中稀釋(200μlDMEM中有大約20μl樣品)。
將硝化纖維膜和3張濾紙浸入經(jīng)TRIS緩沖的生理鹽水(稱為TBS，pH7.3)中。設(shè)置BioRad slot blot裝置(BioRad實(shí)驗(yàn)室，CA)，其中3張濾紙?jiān)诘撞?，纖維膜在頂部，并擰緊。每孔中加入100mlTBS。采用真空條件使纖維膜吸收TBS。漩動(dòng)被測(cè)化合物溶液或?qū)φ战M溶液，然后在每孔中加100μl并重力過濾。該步驟進(jìn)行到此時(shí)，被測(cè)溶液中的前膠原凝結(jié)在硝化纖維膜上。將膜從裝置中移出，除去過量成分，底端右角帶有刻度，用于定向。在4℃、振蕩條件下將膜置于固定溶液(Dulbecco＇s磷酸鹽緩沖生理鹽水中的5％奶粉)中過一夜。然后在室溫下將膜用在密封振蕩袋中含0.1％BSA的TBS中的1.5ml鼠抗人體前膠原氨基Ab(ChemiconMAB1912)(其中抗體與緩沖劑/BSA的比為1∶100)培養(yǎng)1.5小時(shí)。然后除下膜；用TBS/0.1％吐溫(Tween)經(jīng)5分鐘洗滌3次。在室溫下、在密封振蕩袋中的含0.1％BSA的TBS中將膜用2ml生物素化結(jié)合抗鼠過氧化物酶Ab(Vector實(shí)驗(yàn)室)(其中抗體與緩沖劑/BSA的比為1∶1000)培養(yǎng)1.5小時(shí)。
將膜用TBS/0.1％吐溫經(jīng)5分鐘洗滌3次。用購(gòu)自Vectastain Kit的各30μl溶液A和B培養(yǎng)3ml PBS 30分鐘。在振蕩密封袋中，將膜置于所得溶液中30分鐘。然后除下膜，用TBS/0.1％吐溫經(jīng)5分鐘洗滌2次。采用以下溶液對(duì)膜染色12.5mg 3-氨基9-乙基咔唑(Sigma)3.125(大約)ml DMF(N，N-二甲基甲酰胺，購(gòu)自Sigma)21.5ml 0.2M乙酸鈉緩沖劑，pH5.212.5μl過氧化氫將膜染色至顯色，用自來水經(jīng)10分鐘清洗2次停止反應(yīng)。采用Bio-Rad GS700圖象分析光密度計(jì)掃描染色點(diǎn)。計(jì)算由被測(cè)化合物所處理的細(xì)胞與對(duì)照組細(xì)胞相比的光密度計(jì)的讀數(shù)比來表征的相對(duì)于對(duì)照組的增加倍數(shù)。
結(jié)果列于表2a-2d中。
表2a
2b
<p>表2c
表2d
由表2a-2d的數(shù)據(jù)可知磺基琥珀酸鹽、氧基琥珀酸鹽和乙二醇二琥珀酸酯對(duì)成纖細(xì)胞的膠原合成具有顯著作用。相反，磺基琥珀酸二辛酯在誘導(dǎo)膠原蛋白合成方面沒有作用，琥珀酸則得到不同結(jié)果。
從實(shí)施例1和2明顯看出本發(fā)明的化合物具有通過增加膠原和糖胺聚糖而使皮膚獲益的潛力，已知老化皮膚中膠原和糖胺聚糖會(huì)降低。
實(shí)施例3-9所示的是本發(fā)明的局部用組合物。這些組合物可由常規(guī)方法制得。它們適用于美容。具體說，這些組合物適于涂敷到皺紋、粗糙、干燥、起皮、老化和/或經(jīng)紫外線損傷的皮膚上，以改進(jìn)皮膚的外觀和感覺，也適于涂敷到健康皮膚上以預(yù)防和延緩皮膚變劣。
實(shí)施例3本實(shí)施例所示的是加入了本發(fā)明組合物的高含量?jī)?nèi)相的油包水型乳劑
*Brij92是聚氧乙烯(2)油基醚實(shí)施例4本實(shí)施例所示的是加入了本發(fā)明組合物的水包油型膏霜
>*Brij56是鯨蠟醇POE(10)Alfol 16RD是鯨蠟醇實(shí)施例5本實(shí)施例所示的是加入了本發(fā)明組合物的含醇乳液
<p>實(shí)施例6本實(shí)施例所示的是加入了本發(fā)明組合物的另一含醇乳液
實(shí)施例7本實(shí)施例所示的是本發(fā)明組合物中的防曬霜。
實(shí)施例8本實(shí)施例所示的是本發(fā)明組合物中的無水護(hù)膚組合物。
一種二甲基硅氧烷聚合物，分子量至少50000，25℃的黏度至少10000厘施，購(gòu)自GEC2二甲基硅氧烷環(huán)五聚物，購(gòu)自DOW Corning公司3二甲基硅氧烷四聚物，購(gòu)自DOW Corning公司
權(quán)利要求
1.一種護(hù)膚組合物，其中含有(a)0.5～40％(重量)的琥珀酸化合物，選自磺基琥珀酸或其鹽、2，2′-氧基二琥珀酸或其鹽、乙二醇二琥珀酸或其鹽，以及它們的混合物；和(b)適于化妝品的媒介物。
2.一種改善起皺、細(xì)紋、干燥、起皮、老化或光損傷皮膚的外觀、以及改善皮膚的厚度、彈性、柔韌性和豐滿性的美容方法，該方法包括在皮膚上施用權(quán)利要求1的組合物。
3.一種增進(jìn)人體皮膚中成纖細(xì)胞的膠原合成作用的美容方法，該方法包括在皮膚上施用權(quán)利要求1的組合物。
4.一種增進(jìn)人體皮膚中成纖細(xì)胞的糖胺聚糖合成作用的美容方法，該方法包括在皮膚上施用權(quán)利要求1的組合物。
全文摘要
本發(fā)明公開了美容護(hù)膚組合物,其中含有琥珀酸鹽化合物,還公開了改善起皺、細(xì)紋、干燥、起皮、老化或光損傷皮膚的外觀、以及改善皮膚的厚度、彈性、柔韌性、光澤、紅潤(rùn)性和豐滿性的美容方法。
文檔編號(hào)A61K8/46GK1264577SQ99122950
公開日2000年8月30日 申請(qǐng)日期1999年12月17日 優(yōu)先權(quán)日1998年12月17日
發(fā)明者R·L·維恩考夫, U·桑塔納姆, L·R·帕蘭克爾, A·R·布爾格, A·V·羅林斯 申請(qǐng)人:尤尼利弗公司