專利名稱：由氫氧化鈣、二元醇或多元醇以及植物或動(dòng)物來源的固定油組成的制劑,及其用于膠原再 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種由植物或動(dòng)物來源的固定油、氫氧化鈣、二元醇或多元醇以及可適當(dāng)加入的可藥用賦形劑組成的制劑。還涉及這種混合物的制備，這種混合物用于膠原再生的用途，以及這種混合物在制備用于促進(jìn)體內(nèi)膠原再生的藥物中的用途。
骨由大約60％礦物質(zhì)(羥基磷灰石、磷酸鈣)和大約40％有機(jī)物組成，其中有機(jī)物主要是膠原。骨代謝主要由構(gòu)造骨的細(xì)胞(成骨細(xì)胞)和降解骨的細(xì)胞(破骨細(xì)胞和骨細(xì)胞)的相互作用決定，它們?cè)诮】倒侵械幕钚蕴幱谄胶怅P(guān)系。
骨的形成可以分為兩個(gè)主要階段(a)合成有機(jī)組織(膠原合成)和(b)隨后由所謂的基質(zhì)囊泡介導(dǎo)在先前提供的有機(jī)基質(zhì)中引入礦物質(zhì)。
結(jié)締組織蛋白膠原構(gòu)成了骨中有機(jī)物的絕大部分。該蛋白質(zhì)由三個(gè)螺旋狀盤旋的多肽鏈組成，這些多肽鏈中的氨基酸組成可能不同，這導(dǎo)致了各種類型膠原的多樣性。膠原纖維具有特別大的機(jī)械強(qiáng)度是所有類型的膠原共有的特性。此強(qiáng)度是基于膠原纖維的分子內(nèi)和分子間鍵的多重性，以這種方式，它們形成了結(jié)締組織的緊湊的膠原纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。正如已提到過的那樣，骨組織是通過在該網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中引入礦物質(zhì)(羥基磷灰石和磷酸鈣)而形成的。對(duì)于骨的構(gòu)建來說，生長或再生過程的作用優(yōu)先于膠原生物合成的作用。
迄今為止，如果發(fā)生任何原因的骨損傷，骨的再生過程都只能聽其自然，最多借助抗生素和腎上腺皮質(zhì)激素來防止發(fā)生任何可能危害愈合過程的感染。
現(xiàn)已公開了幾種能影響骨的形成和再生的因子。這主要是物理因子(機(jī)械力和電力)、激素(例如甲狀旁腺激素、降鈣素、胰島素、糖皮質(zhì)激素、1,25-(OH)2D3)和一組沒有嚴(yán)格定義的、具有蛋白質(zhì)特性的生長因子(骨鈣蛋白、骨粘連蛋白、“胰島素樣生長因子”)一參見S.Wallach,L.V.Avioli,J.H.Carstensjun.“骨形成中的因子”，Calcified Tissue International(《國際鈣化組織雜志》)45:4-6(1989)。在骨的再生中，氫離子濃度(pH)對(duì)代謝過程的影響至今仍未得到充分的研究。
Dietz在DE-A-4240713中描述了將氫氧化鈣和牛腳油的混合物用于骨損傷后的膠原再生。但是，這種氫氧化鈣和牛腳油的制劑因皂化作用的結(jié)果使得其穩(wěn)定性非常有限。這可能削弱該混合物的作用。
因此，本發(fā)明是基于這樣一個(gè)目的，即提供一種具有長時(shí)間穩(wěn)定性的改良混合物，它通過刺激或引發(fā)膠原再生而對(duì)骨再生過程產(chǎn)生特定的外部影響。
現(xiàn)在我們已令人驚奇地發(fā)現(xiàn)，有可能通過使用一種由氫氧化鈣、二元醇或多元醇、植物或動(dòng)物來源的固定油以及可適當(dāng)加入的可藥用賦形劑組成的制劑來顯著提高該制劑的穩(wěn)定性，并因此通過在骨損傷中使用此制劑而提高體內(nèi)膠原再生的程度。
因此，本發(fā)明涉及包含氫氧化鈣、二元醇或多元醇和植物或動(dòng)物來源的固定油的制劑，其中還可適當(dāng)?shù)匕伤幱觅x形劑。
本發(fā)明還涉及一種制備該制劑的方法，所述方法是將氫氧化鈣和二元醇或多元醇，適當(dāng)時(shí)還包括可藥用賦形劑，混合到植物或動(dòng)物來源的固定油中。
本發(fā)明還涉及將這種制劑用于膠原再生。
本發(fā)明還涉及這種制劑在制備用于促進(jìn)體內(nèi)膠原再生的藥物中的用途。
現(xiàn)已在牙科學(xué)中將氫氧化鈣和牛腳油的含有硫酸鋇的混合物用作牙根填充糊劑(DE-C2932738)。羧化粘固粉、氫氧化鈣和牛腳油的混合物同樣也已在牙科學(xué)中作為臨時(shí)固定劑用于臨時(shí)頂蓋(DE-C3413864)。在前一種情形下，氫氧化鈣的任務(wù)是將牙根管中的酸性環(huán)境轉(zhuǎn)換為堿性，從而消除炎癥和硬組織屏障的逐漸形成。在后一種情形下，利用的是氫氧化鈣的牙髓炎預(yù)防作用。在這兩種情形下，牛腳油均充當(dāng)糊化輔助劑，首先是為了確保用實(shí)際活性成分氫氧化鈣(和造影劑硫酸鋇)簡單而又完全地填充牙根管，其次是為了減慢用于臨時(shí)頂蓋的臨時(shí)固定劑的凝固，以使氫氧化鈣也能通過細(xì)小的牙本質(zhì)小管滲透到牙髓中并在此處發(fā)揮其作用。這兩篇參考文獻(xiàn)都沒有給出絲毫暗示按照本發(fā)明的混合物能夠誘導(dǎo)廣泛的、作為骨再生先決條件的膠原再生。
術(shù)語“制劑”按照本發(fā)明是新的并在下文中使用，指的是至少含有上面所提到的成分的藥物制劑(下文中有時(shí)也稱作混合物)。它特別適于對(duì)人或動(dòng)物給藥，用于研究作為骨再生先決條件的膠原再生。
下面將更詳細(xì)地描述按照本發(fā)明的混合物的成分可以使用的植物來源的固定油包括下列植物油中的一種或幾種成分大豆油、向日葵油、菜子油、棉子油、亞麻子油、蓖麻油、棕櫚油、棕櫚仁油、椰子油和橄欖油。
可以使用的植物固定油優(yōu)選對(duì)熱具有高穩(wěn)定性的植物固定油，諸如大豆油、向日葵油和橄欖油，特別是橄欖油。
可以使用的動(dòng)物固定油包括下列動(dòng)物油中的一種或幾種成分魚油、動(dòng)物腳油和牛油。
可以使用的動(dòng)物油優(yōu)選動(dòng)物腳油，特別是牛腳油。
可以使用的二元醇或多元醇包括二元醇，諸如乙二醇、丙二醇、丁二醇、戊二醇、己二醇；和聚乙二醇，諸如二甘醇、三甘醇；聚丙二醇，諸如一縮二丙二醇；三元醇，諸如甘油；四元醇，諸如蘇糖醇、赤蘚糖醇；五元醇，諸如阿糖醇、福壽糖醇、木糖醇；六元醇，諸如山梨糖醇、甘露糖醇、半乳糖醇；或高級(jí)多元醇。
優(yōu)選使用二元醇和三元醇，諸如乙二醇、丙二醇、丁二醇、戊二醇、己二醇，和聚乙二醇，諸如二甘醇、三甘醇，聚丙二醇，諸如一縮二丙二醇，和三元醇，諸如甘油。特別優(yōu)選用甘油作為“二元醇或多元醇”。
不希望受到理論的束縛，我們假定該二元醇或多元醇阻止了植物或動(dòng)物固定油的皂化。這使得有可能使該混合物保持長時(shí)間的可揉捏或乳脂狀稠度，從而可增加和改善膠原的生物合成。
按照本發(fā)明，從單獨(dú)的成分制備乳脂狀、可揉捏的制劑。將氫氧化鈣加入該制劑中，以該制劑的總重量計(jì)，加入量優(yōu)選為1-90重量％，更方便地優(yōu)選為10-70重量％，首選為20-60重量％。
將植物或動(dòng)物來源的固定油加入到該組合物中，使得產(chǎn)生乳脂狀、可揉捏的稠度，以該制劑的總重量計(jì)，加入量優(yōu)選為9-90重量％，更優(yōu)選為10-60重量％，首選為20-40重量％。
將二元醇或多元醇加入到該組合物中，使得產(chǎn)生乳脂狀、可揉捏的稠度，以該制劑的總重量計(jì)，加入量通常優(yōu)選為1-40重量％，更優(yōu)選為10-40重量％，首選為20-30重量％。
本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案涉及上面所提到的混合物，它另外還包含MgO。出于此目的加入的MgO的量，以該制劑的總重量計(jì)，可以是1-90重量％，優(yōu)選為10-70重量％，更優(yōu)選為20-60重量％。不過，現(xiàn)在假定MgO將優(yōu)選以小于10-20重量％的量加入。MgO在骨物質(zhì)中充當(dāng)抗酸劑，以中和骨中的酸性環(huán)境。
在按照本發(fā)明的混合物中，氫氧化鈣與植物或動(dòng)物固定油的比為5/1-1/5，優(yōu)選為5/1或1/1。但是，由于創(chuàng)傷的具體情況，可能需要偏離優(yōu)選混合比。
如果本發(fā)明的混合物要具有特別柔軟和光滑的稠度，也有可能向其中加入白凡士林。以該制劑的總重量計(jì)，白凡士林的加入量通?？赡苁?-60重量％，優(yōu)選為10-60重量％，更優(yōu)選為20-40重量％。
盡管一般不需要對(duì)骨的愈合或再生過程進(jìn)行放射學(xué)監(jiān)測(cè)，但在有些情況下也可能需要它。在這種情況下，也可能在本發(fā)明的混合物中加入硫酸鋇作為X射線造影劑。不過，由于用硫酸鋇導(dǎo)致的膠原再生不是很好，因此如果需要的話，硫酸鋇僅以剛好足夠的量加入本發(fā)明的混合物中(例如基于該制劑總重量的10-20重量％)，使得該混合物剛好能被放射照相顯現(xiàn)出來。
本發(fā)明的混合物可以根據(jù)其稠度，借助于注射器、軟膏刀或刷子應(yīng)用到骨損傷上或骨損傷中。
本發(fā)明的混合物在普通外科和矯形外科、矯形術(shù)、植入學(xué)、創(chuàng)傷學(xué)等中有很多可能的用途，因?yàn)楸景l(fā)明的混合物可以應(yīng)用到骨組織損傷上或其中，諸如折斷面、鉆孔、空洞等，并立即在體內(nèi)在特定的應(yīng)用部位誘導(dǎo)膠原再生。
眾所周知，在一些相關(guān)的醫(yī)學(xué)學(xué)科中使用金屬固定劑，但在這種情況下，最好還是在將固定劑插入預(yù)備插入固定劑的鉆孔中之前，先向其中填充本發(fā)明的混合物，然后再加入固定劑。以這種方式有可能對(duì)抗用這類方法難免造成的初期骨質(zhì)溶解，由此加速固定劑在周圍的骨組織中或?qū)χ車墙M織的擬合或適應(yīng)，加速骨組織對(duì)固定劑自身的固定。
而且，在這種情況下，過量的混合物不會(huì)造成干擾，因?yàn)殡S著在用該混合物填充的鉆孔中加入固定劑，它就既不會(huì)再被壓出來，也不會(huì)擴(kuò)散到骨松質(zhì)中。
不言而喻，本發(fā)明的混合物及其各成分必須在無菌條件下包裝和應(yīng)用。
還以非常令人驚奇的方式呈現(xiàn)出一個(gè)事實(shí)，即，本發(fā)明的混合物即使沒有抗生素和/或腎上腺皮質(zhì)激素的幫助也能對(duì)抗骨損傷引起的炎癥反應(yīng)，并迅速地使炎癥平息。本發(fā)明混合物的這種簡單的組合和顯著的體內(nèi)膠原再生效力，同時(shí)又能抑制炎癥，都使得它將成為一種在未來的骨創(chuàng)傷學(xué)中不可缺少的組合物。
以下實(shí)施例是為了更詳細(xì)地闡述本發(fā)明。
實(shí)施例1首先想要說明的是本發(fā)明的混合物與組織之間的相互作用。因此，有關(guān)本發(fā)明的混合物在骨組織中的分布的數(shù)據(jù)，是有可能提出關(guān)于藥物的適當(dāng)作用機(jī)理的理論的先決條件。因此，有關(guān)組織培養(yǎng)物的實(shí)驗(yàn)比對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物的實(shí)驗(yàn)更切合實(shí)際，因?yàn)橹挥性诮M織培養(yǎng)物中才有可能研究細(xì)胞與細(xì)胞間的相互作用。
1、材料與方法1．1組織材料通過醫(yī)院可獲得由骨切開術(shù)產(chǎn)生的人骨組織。
從10-17日大的雞胚(家庭原雞Gallus domesticus)得到胚性骨組織。
1．2組織培養(yǎng)物將組織切除后立即轉(zhuǎn)移到轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中。在無菌條件下制得大約2mm3的骨片段，確定其重量后，直接用于實(shí)驗(yàn)。
將帶有20mM Hepes緩沖劑的Earl修飾的Eagle極限必需培養(yǎng)基(MEM)用于該組織培養(yǎng)物。
在開始實(shí)驗(yàn)之前，向培養(yǎng)基中加入4％胎牛血清和1％抗生素溶液(青霉素/鏈霉素/兩性霉素B)，對(duì)于標(biāo)記實(shí)驗(yàn)來說，還要加入1mM β-氨基丙腈、2mM抗壞血酸鈉和2-10μg同位素(14C-脯氨酸)。在以最低頻率振搖的水浴中，在37℃下25ml錐形瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。
1．3確定呼吸活性呼吸活性是組織代謝活性的一個(gè)敏感標(biāo)志。組織生理狀況的變化即使非常小，也能由可測(cè)得的呼吸活性變化反映出來。
用克拉克傳感器(鉑/銀電極在飽和氯化鉀溶液中)測(cè)定呼吸活性。在電極上施加0.8V的電壓，氧還原電流立即成比例地在所測(cè)量的溶液(培養(yǎng)基)中產(chǎn)生氧分壓。當(dāng)氧分壓下降到特定值以下時(shí)提供氧氣飽和的培養(yǎng)基，用計(jì)算機(jī)進(jìn)行控制，并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
一般骨組織的呼吸活性為2-3μl O2×min-1×g1-。因此該呼吸活性在靜止肌肉組織的呼吸活性的數(shù)量級(jí)范圍內(nèi)。

圖1顯示了骨組織的典型呼吸曲線。圖1中顯示的齒形呼吸曲線源于下列事實(shí)當(dāng)所測(cè)量溶液中的氧分壓下降到特別值以下時(shí)，就提供新鮮的氧氣飽和的培養(yǎng)基。
圖2顯示了來自三次測(cè)量實(shí)驗(yàn)的平均O2消耗值。使用克拉克傳感器測(cè)定組織培養(yǎng)物中的胚性骨組織(家庭原雞Gallus domesticus)的耗氧量。耗氧量在3-5μl O2×min-1×g-1之間。經(jīng)過一段時(shí)間后，呼吸活性下降大約50％，這對(duì)組織培養(yǎng)物來說是完全正常的。
1．4酶測(cè)定被認(rèn)為與骨組織的礦化最密切相關(guān)的一種酶是堿性磷酸酶。在一段時(shí)間以前已描繪了此酶的特性，但是關(guān)于該酶在礦化中的功能仍在討論之中。既然成骨細(xì)胞活性與堿性磷酸酶的活性之間有緊密關(guān)聯(lián)，就有可能把堿性磷酸酶看作成骨細(xì)胞活性的一個(gè)標(biāo)志。在兒童期骨骼的生長過程中、骨再生的過程中和骨代謝紊亂中，都已發(fā)現(xiàn)血清中堿性磷酸酶活性的水平升高。
用粗提物測(cè)定堿性磷酸酶的活性。為此，將500mg組織與1ml裂解緩沖液混合，并用小刀將其切碎。隨后加入500mg研磨珠，裂解20分鐘。離心后，將該粗提物用于測(cè)量。
在對(duì)硝基苯磷酸轉(zhuǎn)化為硝基苯酚和磷酸鹽的基礎(chǔ)上檢測(cè)堿性磷酸酶。該水解中產(chǎn)生的硝基苯酚是黃色的，因此可以用光度計(jì)在410nm波長下進(jìn)行檢測(cè)。
圖3顯示了堿性磷酸酶活性的pH依賴性。在對(duì)硝基苯磷酸轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ)上測(cè)定骨的堿性磷酸酶活性。在pH10.5時(shí)活性最大。在生理pH7下，堿性磷酸酶僅具有大約1％的最大活性。
1．5 pH測(cè)定將含有氫氧化鈣、甘油和牛腳油(以該制劑的總重量計(jì)，重量比分別為30％、30％和40％)的本發(fā)明的混合物或氫氧化鈣的含水懸浮液用咪唑/HCl緩沖液(1mM，pH7)覆蓋，之后使用一個(gè)pH電極連續(xù)跟蹤該溶液中的pH。
從這些測(cè)量的結(jié)果顯示，氫氧化鈣和甘油在牛腳油中的混合物具有與氫氧化鈣的含水懸浮液根本不同的性能。圖4顯示，氫氧化鈣的含水懸浮液立即使pH突升至pH12，而本發(fā)明的甘油/氫氧化鈣/牛腳油混合物則使pH緩慢升至pH10以上。
1．6膠原測(cè)定正如已提到過的那樣，骨中有機(jī)物的主要部分由膠原組成，膠原是一種結(jié)締組織蛋白。骨的生長和再生過程與新膠原的合成有關(guān)。合成后是進(jìn)一步的細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外膠原加工。通過使用放射性膠原前體(14C-脯氨酸)有可能精確地定量測(cè)量組織培養(yǎng)物中膠原合成的速率。這使得有可能定性和定量記錄藥物對(duì)膠原合成的作用。
利用所謂的羥脯氨酸測(cè)定法測(cè)定總的膠原含量。氨基酸羥脯氨酸主要存在于膠原中，羥脯氨酸在其它蛋白質(zhì)中的含量可以忽略不計(jì)。當(dāng)氨基酸通過水解從蛋白質(zhì)中釋放出來以后(116℃，22％HCl,16小時(shí))，以及化學(xué)修飾后(4-羥基脯氨酸氧化為吡咯)，通過與對(duì)二甲氨基苯甲醛的特定顏色反應(yīng)定量測(cè)量測(cè)試混合物中羥脯氨酸的總含量。
1．7測(cè)定膠原合成的速率利用Proff(1991)對(duì)Miller和Rhodes方法的改進(jìn)方法得到在組織和培養(yǎng)基中的膠原(參見E.J.Miller和R.K.Rhodes，“酶學(xué)方法”82:33(1982))。經(jīng)過幾次沉淀、離心步驟，借助于SDS凝膠電泳和隨后的閃爍測(cè)量對(duì)膠原定量(測(cè)定比放射性)。為了計(jì)算新合成的速率，將通過加入14C-脯氨酸測(cè)得的膠原含量與利用羥脯氨酸測(cè)定法測(cè)得的總膠原含量聯(lián)系起來。
通過定量測(cè)量膠原的生物合成，可以研究氫氧化鈣產(chǎn)物對(duì)骨形成的作用。
如1.7中所示，利用膠原放射性標(biāo)記技術(shù)對(duì)膠原的生物合成進(jìn)行定量。膠原纖維的一種成分是氨基酸脯氨酸。將精確定量的14C標(biāo)記的脯氨酸加入培養(yǎng)基中。此脯氨酸被結(jié)合到組織培養(yǎng)過程中重新合成的蛋白質(zhì)中。將膠原與其它蛋白質(zhì)分離開后，通過測(cè)定比放射性，可能得到關(guān)于新膠原合成速率的準(zhǔn)確定量報(bào)告。
借助于數(shù)次沉淀、離心步驟以及SDS凝膠電泳分離膠原。在膠原的特定沉淀中，通過加入氯化鈉調(diào)節(jié)至適宜的鹽濃度，在該濃度下，非膠原蛋白大部分保留在溶液中，而膠原則從溶液中作為沉淀分離出來，由此使膠原纖維與其它蛋白質(zhì)分離。隨后膠原通過離心沉淀。在SDS凝膠電泳中，蛋白質(zhì)以尺寸依賴方式彼此分離。蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中通過一個(gè)高度交聯(lián)的聚合物(丙烯酰胺)基層移動(dòng)。因?yàn)榛鶎訉?duì)小分子的抗性小，所以小的蛋白質(zhì)迅速移動(dòng)通過該基層，而大的蛋白質(zhì)移動(dòng)更緩慢，因?yàn)樗鼈兊囊苿?dòng)性受到基層的極大阻滯。染色后，在此凝膠中可以看到蛋白質(zhì)的所謂的“帶”。以這種方式，可能在蛋白質(zhì)尺寸的基礎(chǔ)上利用內(nèi)在尺寸標(biāo)準(zhǔn)識(shí)別蛋白質(zhì)。
從凝膠中切下感興趣的蛋白質(zhì)帶，將蛋白質(zhì)用于進(jìn)一步的分析，例如放射性測(cè)量。
膠原的提取通過加入3％醋酸使組織培養(yǎng)(參見1.2)終止。已經(jīng)溶解的膠原在4℃下利用2M氯化鈉沉淀過夜，然后通過離心回收(1小時(shí)，24000×g,4℃)。將沉淀物溶于10ml 3％醋酸。通過將組織塊機(jī)械破碎，使分析中包括組織塊里面存在的重新合成的膠原。通過離心回收組織殘?jiān)?1小時(shí)，45000×g,4℃)。沉淀物溶解后利用凝膠電泳分離。為了檢查蛋白質(zhì)的分離情況，將它們?cè)谀z中染色。
上述操作后將凝膠垂直于移動(dòng)方向切成5mm寬的長條，然后將這些凝膠片段轉(zhuǎn)移到閃爍瓶中，并用閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)。
圖5顯示了活組織與熱變性組織之間的對(duì)比。
圖5中顯示了以凝膠中的放射性分布為基礎(chǔ)的對(duì)比情況。膠原作為相對(duì)較大的蛋白質(zhì)，在距離起始2cm的地方出現(xiàn)。
比放射性帶可以賦值為t，膠原帶可以通過考馬斯染色檢測(cè)。
圖5標(biāo)記Ⅰ，股骨頭，骨松質(zhì)，男性，45歲活組織與熱變性組織之間的膠原合成量的差異(CPM每分鐘的數(shù)目)。它顯示了凝膠中放射性的分布。在距離起始約2cm處發(fā)現(xiàn)了膠原帶。只有活組織中出現(xiàn)膠原帶，這意味著在凝膠中可檢測(cè)到的放射性相當(dāng)于培養(yǎng)過程中新的膠原合成。
活組織顯示了可檢測(cè)的膠原合成量，而死組織則不再顯示任何代謝活性。這表明，檢測(cè)出的放射性膠原事實(shí)上可歸因于組織培養(yǎng)物中新的膠原合成，而不是放射性脯氨酸與骨組織中蛋白質(zhì)的非特異性結(jié)合引起的。將可比量的組織材料用于所有實(shí)驗(yàn)(大約100mg)。
可以檢測(cè)出其它較小尺寸的放射性標(biāo)記帶，它們可能是膠原降解產(chǎn)物。特別是在標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)培養(yǎng)時(shí)間超過4天時(shí)，可以觀察到膠原在組織培養(yǎng)物中的降解。凝膠中還存在少量的放射性標(biāo)記的脯氨酸，它們不可能通過沉淀完全除去。
從與圖5中所示的實(shí)驗(yàn)平行的實(shí)驗(yàn)來看，骨組織對(duì)弱堿性pH的耐受性是明顯的。在平行實(shí)驗(yàn)中，用碳酸氫鹽緩沖液(pH8.0)替換培養(yǎng)基中的Hepes生理緩沖液(pH7.4)。結(jié)果顯示，培養(yǎng)基堿化至pH8.0沒有導(dǎo)致與pH7.4條件下有關(guān)膠原合成的可測(cè)量的差異。在pH8.5以上，不再能看到任何相對(duì)于自發(fā)膠原再生的增加的膠原再生。
圖6-9顯示了在具有各種本發(fā)明混合物的實(shí)驗(yàn)組中新合成的膠原量與在沒有該混合物或不存在二元醇或多元醇的對(duì)照組中新合成的膠原量的對(duì)比。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組中新合成的膠原量的差異用百分?jǐn)?shù)表示。0％表示與對(duì)照相比，新合成的膠原量沒有增加；100％表示在本發(fā)明混合物的影響下，膠原再生比對(duì)照增加兩倍。
從圖6可以明顯看出，四個(gè)實(shí)驗(yàn)中，在甘油/氫氧化鈣/牛腳油混合物(組成30重量％的氫氧化鈣，30重量％的甘油，40重量％的牛腳油)的影響下，與對(duì)照相比，膠原合成增加到100％-120％之間。這種增加是顯著的，因?yàn)槟z原合成量的試探性變化在10-20％范圍內(nèi)，而在甘油/氫氧化鈣/牛腳油混合物的影響下測(cè)得的增加在100-120％范圍內(nèi)。此外，與不含甘油的混合物相比，膠原合成量也有明顯的增加。
從圖7可以明顯看出，四個(gè)實(shí)驗(yàn)中，在丙二醇/氫氧化鈣/牛腳油混合物(組成30重量％的氫氧化鈣，30重量％的丙二醇，40重量％的牛腳油)的影響下，與對(duì)照相比，膠原合成增加到100％-120％之間。這種增加是顯著的，因?yàn)槟z原合成量的試探性變化在10-20％范圍內(nèi)，而在丙二醇/氫氧化鈣/牛腳油混合物的影響下測(cè)得的增加在100-120％范圍內(nèi)。此外，與不含丙二醇的混合物相比，膠原合成量也有明顯的增加。
從圖8可以明顯看出，四個(gè)實(shí)驗(yàn)中，在甘油/氫氧化鈣/橄欖油混合物(組成30重量％的氫氧化鈣，30重量％的甘油，40重量％的橄欖油)的影響下，與對(duì)照相比，膠原合成增加到100％-120％之間。這種增加是顯著的，因?yàn)槟z原合成量的試探性變化在10-20％范圍內(nèi)，而在甘油/氫氧化鈣/橄欖油混合物的影響下測(cè)得的增加在100-120％范圍內(nèi)。此外，與不含甘油的混合物相比，膠原合成量也有明顯的增加。
從圖9可以明顯看出，四個(gè)實(shí)驗(yàn)中，在甘油/氫氧化鈣/氧化鎂/牛腳油混合物(組成20重量％的氫氧化鈣，20重量％的甘油，20重量％的氧化鎂，40重量％的牛腳油)的影響下，與對(duì)照相比，膠原合成增加到100％-140％之間。這種增加是顯著的，因?yàn)槟z原合成量的試探性變化在l0-20％范圍內(nèi)，而在甘油/氫氧化鈣/氧化鎂/牛腳油混合物的影響下測(cè)得的增加在100-140％范圍內(nèi)。此外，與不含甘油和氧化鎂的混合物相比，膠原合成也有明顯的增加。
實(shí)施例2在穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)中，將下列混合物配制成可揉捏或乳脂狀團(tuán)塊后在室溫和環(huán)境濕度下儲(chǔ)存，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與不含醇的樣品相比，在二元醇或多元醇的存在下，保持所需稠度的混合物可以延長至少50％穩(wěn)定期。
所使用的混合物1)甘油/氫氧化鈣/牛腳油混合物(30重量％/30重量％/40重量％)2)丙二醇/氫氧化鈣/牛腳油混合物(30重量％/30重量％/40重量％)和3)甘油/氫氧化鈣/橄欖油混合物(30重量％/30重量％/40重量％)第一種混合物 沒有甘油有甘油可揉捏稠度 6個(gè)月 12個(gè)月乳脂狀稠度 12個(gè)月 18個(gè)月第二種混合物 沒有丙二醇 有丙二醇可揉捏稠度 6個(gè)月 12個(gè)月乳脂狀稠度 12個(gè)月 18個(gè)月第三種混合物 沒有橄欖油 有橄欖油可揉捏稠度 6個(gè)月 12個(gè)月乳脂狀稠度 12個(gè)月 18個(gè)月
權(quán)利要求
1.一種藥物制劑，它包含氫氧化鈣、植物或動(dòng)物來源的固定油以及可適當(dāng)加入的可藥用賦形劑，它還包含一種二元醇或多元醇。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物制劑，其中氫氧化鈣與植物或動(dòng)物固定油的體積比為5/1-1/5。
3.如權(quán)利要求1所述的藥物制劑，其中氫氧化鈣與植物或動(dòng)物固定油的體積比為1/1。
4.如權(quán)利要求1所述的藥物制劑，其中氫氧化鈣與植物或動(dòng)物固定油的體積比為5/1。
5.如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的藥物制劑，其中另外還含有硫酸鋇。
6.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的藥物制劑，其中另外還含有白凡士林。
7.如上述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的藥物制劑，其中另外還含有氧化鎂。
8.如權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的藥物制劑，其中的二元醇或多元醇是甘油。
9.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的藥物制劑，其中的植物或動(dòng)物固定油是牛腳油。
10.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的藥物制劑，其中的植物或動(dòng)物固定油是橄欖油。
11.上述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的藥物制劑的制備方法，該方法包括將氫氧化鈣和二元醇或多元醇混合到植物或動(dòng)物來源的固定油中。
12.一種藥物制劑在膠原再生中的用途，所述制劑包含氫氧化鈣、二元醇或多元醇、植物或動(dòng)物來源的固定油以及可適當(dāng)加入的可藥用賦形劑。
13.一種藥物制劑在制備用于促進(jìn)體內(nèi)膠原再生的藥物中的應(yīng)用，所述制劑包含氫氧化鈣、二元醇或多元醇、植物或動(dòng)物來源的固定油以及可適當(dāng)加入的可藥用賦形劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種制劑,它包含氫氧化鈣、二元醇或多元醇、植物或動(dòng)物來源的固定油以及可適當(dāng)加入的可藥用賦形劑;還公開了這種制劑的制備方法,該制劑用于膠原再生的用途,以及該制劑在制備用于促進(jìn)體內(nèi)膠原再生的藥物中的用途。
文檔編號(hào)A61L27/00GK1297364SQ99805072
公開日2001年5月30日 申請(qǐng)日期1999年4月16日 優(yōu)先權(quán)日1998年4月16日
發(fā)明者喬治·迪茨 申請(qǐng)人:喬治·迪茨