專利名稱：紫杉化物衍生物的新用途的制作方法
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本發(fā)明涉及紫杉化物(taxoid)衍生物的新用途。更確切地說，它涉及一種治療表達多抗藥性P-糖蛋白的不同抗性細胞系的異常細胞增殖的方法。這類細胞是結(jié)腸癌細胞的代表。本發(fā)明涉及表達多抗藥性P-糖蛋白的不同抗性細胞系異常細胞增殖的治療，還涉及表達多抗藥性P-糖蛋白的不同抗性細胞系異常細胞增殖的治療，還涉及通過施用通式(Ⅰ)的化合物或其藥物上可接受的鹽或其溶劑合物而治療哺乳動物(包括人)的結(jié)腸腫瘤 其中Z表示氫原子或下列通式的基 其中R1表示任選被一個或多個相同或不同的原子或基取代的苯甲?；?，所述原子或基選自鹵原子和含1～4個碳原子的烷基、含1～4個碳原子的烷氧基或三氟甲基，噻吩甲?；蜻秽柞；蛘呋鵕2-O-CO-，其中，R2表示-含1～8個碳原子的烷基，-含2～8個碳原子的烯基，-含3～8個碳原子的炔基，-含3～6個碳原子的環(huán)烷基，-含4～6個碳原子的環(huán)烯基或-含7～10個碳原子的二環(huán)烷基，這些基任選被一個或多個選自如下的取代基取代鹵原子和羥基，含1～4個碳原子的烷氧基，二烷基氨基(其中，每個烷基部分含1～4個碳原子)，哌啶子基或嗎啉代基，1-哌嗪基(任選在4位被含1～4個碳原子的烷基取代或被其中烷基部分含1～4個碳原子的苯基烷基取代)，含3～6個碳原子的環(huán)烷基，含4～6個碳原子的環(huán)烯基，苯基(任選被一個或多個選自如下的原子或基取代鹵原子和含1～4個碳原子的烷基或含1～4個碳原子的烷氧基)，氰基或羧基或烷氧基羰基(其中，烷基部分含1～4個碳原子)，-任選被一個或多個選自如下的原子或基取代的苯基或者α-或β-萘基鹵原子和含1～4個碳原子的烷基或含1～4個碳原子的烷氧基，或者-5元芳雜環(huán)基，優(yōu)選選自呋喃基和噻吩基，-或者含4～6個碳原子的飽和雜環(huán)基，任選被一個或多個含1～4個碳原子的烷基取代，R3表示含1～8個碳原子的無支鏈的或支鏈的烷基，含2～8個碳原子的無支鏈的或支鏈的烯基，含2～8個碳原子的無支鏈的或支鏈的炔基，含3～6個碳原子的環(huán)烷基，任選被一個或多個選自如下的原子或基取代的苯基或者α-或β-萘基鹵原子和烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、烷氧基、烷硫基、芳氧基、芳硫基、羥基、羥烷基、巰基、甲酰、?；?、酰氨基、芳酰氨基、烷氧基碳酰氨基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、烷氧羰基、甲氨酰、烷基甲氨酰、二烷基甲氨酰、氰基、硝基和三氟甲基，或者5元芳雜環(huán)，該芳雜環(huán)包含一個或多個選自氮原子、氧原子和硫原子的相同或不同的雜原子，并且任選被一個或多個選自如下的相同或不同的取代基取代鹵原子和烷基、芳基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基碳酰氨基、?；⒎蓟驶?、氰基、羧基、甲氨酰、烷基甲氨酰、二烷基甲氨?；蛲檠豸驶?，條件是在苯基、α-或β-萘基和芳雜環(huán)基的取代基中，烷基和其它基的烷基部分包含1～4個碳原子，并且烯基和炔基包含2～8個碳原子，而且芳基是苯基或者α-或β-萘基，R4表示在無支鏈或支鏈中含1～6個碳原子的烷氧基，在無支鏈或支鏈中含3～6個碳原子的烯氧基，在無支鏈或支鏈中含3～6個碳原子的炔氧基，含3～6個碳原子的環(huán)烷氧基或含4～6個碳原子的環(huán)烯氧基，這些基任選被一個或多個鹵原子或被如下的基取代含1～4個碳原子的烷氧基，含1～4個碳原子的烷硫基或羧基，烷氧羰基(其中，烷基部分含1～4個碳原子)，氰基或甲氨?；騈-烷基甲氨?；騈,N-二烷基甲氨?；?其中，每個烷基部分含1～4個碳原子)；或與它所連接的氮原子形成一個飽和5元或6元雜環(huán)基，該雜環(huán)基任選含選自氧、硫或氮原子的第二個雜原子，任選被含1～4個碳原子的烷基，或者苯基或苯基烷基(其中，烷基部分含1～4個碳原子)取代，R5表示在無支鏈或支鏈中含1～6個碳原子的烷氧基，含3～6個碳原子的烯氧基，含3～6個碳原子的炔氧基，
含3～6個碳原子的環(huán)烷氧基或含3～6個碳原子的環(huán)烯氧基，這些基任選被一個或多個鹵原子或被如下的基取代含1～4個碳原子的烷氧基，含2～4個碳原子的烷硫基或羧基，烷氧羰基(其中，烷基部分含1～4個碳原子)，氰基或甲氨酰基或N-烷基甲氨?；騈,N-二烷基甲氨?；?其中，每個烷基部分含1～4個碳原子)；或與它所連接的氮原子形成一個飽和5元或6元雜環(huán)基，該雜環(huán)基任選含選自氧、硫或氮原子的第二個雜原子，任選被含1～4個碳原子的烷基，或者苯基或苯基烷基(其中，烷基部分含1～4個碳原子)取代。
優(yōu)選地，可由R3表示的芳基是任選被選自如下的一個或多個原子或基取代的苯基或者α-或β-萘基鹵原子(氟、氯、溴、碘)和烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、烷氧基、烷硫基、芳氧基、芳硫基、羥基、羥烷基、巰基、甲酰、酰基、酰氨基、芳酰氨基、烷氧基碳酰氨基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、烷氧羰基、甲氨酰、二烷基甲氨酰、氰基、硝基和三氟甲基，條件是烷基和其它基的烷基部分包含1～4個碳原子，烯基和炔基包含2～8個碳原子，并且芳基是苯基或者α-或β-萘基。
優(yōu)選地，可由R3表示的雜環(huán)基是包含一個或多個選自氮、氧和硫原子的相同或不同原子的5元芳雜環(huán)基，該芳雜環(huán)基任選被一個或多個選自如下的相同或不同的取代基取代鹵原子(氟、氯、溴、碘)和含1～4個碳原子的烷基、含6～10個碳原子的芳基、含1～4個碳原子的烷氧基、含6～10個碳原子的芳氧基、氨基、含1～4個碳原子的烷基氨基、二烷基氨基(其中，每個烷基部分含1～4個碳原子)、酰氨基(其中，?；糠趾?～4個碳原子)、含1～4個碳原子的烷氧基碳酰氨基、含1～4個碳原子的?；?、芳基羰基(其中，芳基部分含6～10個碳原子)、氰基、羧基或甲氨?；⑼榛装滨；?其中，烷基部分含1～4個碳原子)、二烷基甲氨酰基(其中，每個烷基部分含1～4個碳原子)或烷氧羰基(其中，烷氧基部分含1～4個碳原子)。
優(yōu)選地，基R4和R5(它們可能相同或不同)表示含1～6個碳原子的無支鏈或支鏈烷氧基，任選被下列基取代甲氧基、乙氧基、乙硫基、羧基、甲氧羰基、乙氧羰基、氰基、甲氨酰、N-甲基甲氨酰、N-乙基甲氨酰、N,N-二甲基甲氨酰、N,N-二乙基甲氨酰、N-吡咯烷羰基或N-哌啶子基羰基。
更具體地說，本發(fā)明涉及通式(Ⅰ)的產(chǎn)品，其中，Z表示氫原子或通式(Ⅱ)的基，其中，R1表示苯甲?；蚧鵕2-O-CO-，其中，R2表示叔丁基，并且，R3表示含1～6個碳原子的烷基，含2～6個碳原子的烯基，含3～6個碳原子的環(huán)烷基，任選被一個或多個選自如下的相同或不同原子或基取代的苯基鹵原子(氟、氯)和烷基(甲基)，烷氧基(甲氧基)，二烷基氨基(二甲氨基)，酰氨基(乙酰氨基)，烷氧基碳酰氨基(叔丁氧基碳酰氨基)或三氟甲基；或者2-或3-呋喃基，2-或3-噻吩基或者2-、4-或5-噻唑基，并且R4和R5(它們可能相同或不同)各自表示含1～6個碳原子的無支鏈或支鏈烷氧基。
更具體地說，本發(fā)明涉及通式(Ⅰ)的產(chǎn)品，其中，Z表示氫原子或通式(Ⅱ)的基，其中，R1表示苯甲?；蚧鵕2-O-CO-，其中，R2表示叔丁基，并且，R3表示異丁基、異丁烯基、丁烯基、環(huán)己基、苯基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-噻唑基、4-噻唑基或5-噻唑基，并且R4和R5(它們可能相同或不同)各自表示甲氧基、乙氧基或丙氧基。
甚至更特別有意義的是通式(Ⅰ)的產(chǎn)品，其中，R3表示苯基，并且R1表示叔丁氧羰基，R4和R5(它們可能相同或不同)表示甲氧基、乙氧基或丙氧基。
在進一步更高的意義上，本發(fā)明涉及式(Ⅰa)的4α-乙酸基-2α-苯甲酸基-5β,20-環(huán)氧-1β-羥基-7β,10β-二甲氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13α-基(11-taxen-13α-yl)(2R,3S)-3-叔丁氧基碳酰氨基-2-羥基-3-苯基丙酸酯。
從專利W096/30355已知通過兩個過程制備本發(fā)明的衍生物。按第一個多步過程，從下式的10-脫乙酰漿果赤霉素Ⅲ開始 在7位和13位選擇性地保護它，例如呈甲硅烷基二醚的形式，接著，通過如下通式的產(chǎn)品的作用R-X (Ⅳ)其中，R表示如上定義的基，X表示活性酯殘基(例如硫酸酯或磺酸酯殘基)或者鹵原子，從而給出在10位具有單元-OR并且在7位和13位具有甲硅烷基的產(chǎn)物。然后，用氫原子替代甲硅烷基保護基而給出在10位仍具有基-OR并且在7位和13位具有OH基的化合物。后面的衍生物通過與式Ⅳ的衍生物反應(yīng)在7位被選擇性地醚化而給出式(Ⅰ)的衍生物(其中，Z等于氫)。
最后的步驟包括按本來已知的方法在13位酯化式(Ⅰa)的衍生物(其中，Z表示氫)，即，在β-內(nèi)酰胺的存在下，例如，按專利EP617,018中描述的方法；或者在噁唑烷的存在下，例如，在上述專利WO96/30355中描述的那樣。在7位和10位的保護基去保護后，獲得式(Ⅰa)的酯(其中，Z不是氫，而R表示氫)。下一步包括通過從式(Ⅴ)的亞砜和乙酸酐就地形成的試劑的作用在7位和10位同時反應(yīng)(Pummerer型反應(yīng))，R-SO-R (Ⅴ)其中，R具有上述相同的含義，在7位和10位形成烷硫基烷氧基型中間體。
最后的步驟(它能獲得所需的式(Ⅰa)化合物)是通過活性阮內(nèi)鎳的作用在前面獲得的中間體化合物上進行的。
通常，從通式(Ⅴ)的亞砜(優(yōu)選為二甲亞砜)和乙酸酐就地形成的試劑的作用是在乙酸或乙酸衍生物(例如鹵代乙酸)的存在下、在0和50℃之間的溫度下進行的。
通常，活性阮內(nèi)鎳在脂族醇或醚存在下的作用是在-10和60℃之間的溫度下進行的。
在FR97-14442申請中描述了又一種方法。該發(fā)明能在一步中實現(xiàn)10-脫乙酰漿果赤霉素或其在13位酯化的式(Ⅵ)衍生物的7位和10位上兩個羥基官能基的直接的、選擇性的和同時的烷基化 其中，A表示氫或下式(Ⅱa)的側(cè)鏈 其中，G表示羥基官能的保護基，R1和R3具有與式(Ⅱ)中相同的含義或者式(Ⅰd)的噁唑烷單元 其中，R1和R3具有與式(Ⅱ)中相同的含義，Ra和Rb(它們可能相同或不同)表示氫或烷基、芳基、鹵、烷氧基、芳烷基、烷氧芳基、鹵代烷基、鹵代芳基，這些取代基有可能任選形成4元到7元環(huán)。
優(yōu)選應(yīng)用10-脫乙酰漿果赤霉素[即，式(Ⅲ)的產(chǎn)品]作原料，它能使顯著節(jié)約操作方法的費用，此外，避免舊方法中必要的中間體保護和去保護步驟。
在保護式(Ⅱa)的羥基官能的基G中，通常優(yōu)選選擇描述于例如下列專著中的所有保護基Greene和Wuts，“有機合成中的保護基”(Protective Groups in Organic Synthesis),1991,John Wiley &Sons，以及MacOmie，“有機化學(xué)中的保護基”(Protective Groups inOrganic Chemistry),1975,Plenum Press，它們在很少降解或根本不降解分子的其它部分的條件下被去保護，例如●醚，優(yōu)選是例如下列醚甲氧基甲基醚、1-乙氧基乙基醚、芐氧基甲基醚、對-甲氧基芐氧基甲基醚、任選被一個或多個基(例如甲氧基、氯、硝基)取代的芐基醚、1-甲基-1-甲氧基乙基醚、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基醚、四氫吡喃基醚和甲硅烷基醚(例如三烷基甲硅烷基醚)，●碳酸酯(例如三氯乙基碳酸酯)。
更具體地說，通式(Ⅱb)的基Ra和Rb選自專利WO94/07878中描述的那些，并且所述衍生物尤其更優(yōu)選的是那些(其中，Ra是氫，Rb是對-甲氧基苯基)。
所述烷基化劑選自●烷基鹵，優(yōu)選選自烷基碘(RI)●烷基硫酸酯(例如硫酸二甲酯)●氧鎓，例如三烷基氧鎓硼酸鹽，特別是三甲基氧鎓四氟硼酸鹽(Me3OBF4)。
優(yōu)選應(yīng)用甲基碘。
在陰離子化劑(例如一種或多種強堿)存在下，在無水介質(zhì)中應(yīng)用烷基化劑。
可在無水介質(zhì)中應(yīng)用的堿中，下列堿值得一提●堿金屬氫化物，例如氫化鈉或氫化鉀●堿金屬醇鹽，例如叔丁醇鉀●氧化銀Ag2O●1,8-雙(二甲氨基)萘●一金屬堿或二金屬堿混合物，例如下列出版物中描述的那些P.Caubère，化學(xué)評論(Chem.Rev.),1993,93,2317～2334或者M.Schlosser，現(xiàn)代合成方法(Mod.Synth.Methods)(1992),6,227～271；尤其烷基鋰/叔丁醇堿金屬鹽或者氨基堿金屬/叔丁醇堿金屬鹽組合是優(yōu)選的。這兩種堿之一可“就地”生成。
在烷基化劑和陰離子化劑的全部可能的組合中，優(yōu)選在氫化鉀存在下應(yīng)用甲基碘。
反應(yīng)優(yōu)選在有機介質(zhì)(它在反應(yīng)條件下呈惰性)中進行。在溶劑中，優(yōu)選應(yīng)用●醚，例如四氫呋喃或二甲氧基乙烷●當應(yīng)用氧化銀時，優(yōu)選應(yīng)用極性非質(zhì)子溶劑(例如二甲基甲酰胺)，或者芳族溶劑(例如甲苯)●當應(yīng)用1,8-雙(二甲氨基)萘?xí)r，優(yōu)選應(yīng)用烷基酯(例如乙酸乙酯)。
為了更好地實施本發(fā)明，優(yōu)選應(yīng)用大于2、更優(yōu)選應(yīng)用2和20之間的陰離子化劑與底物的摩爾比。
還優(yōu)選應(yīng)用大于2、更優(yōu)選應(yīng)用2和40之間的烷基化劑與底物的摩爾比。
優(yōu)選應(yīng)用-30℃和80℃之間的反應(yīng)溫度。
反應(yīng)時間有利地在數(shù)小時和48小時的范圍內(nèi)，這取決于選定的試劑。
在烷基化步驟之后，當后者是在10-脫乙酰漿果赤霉素上進行時，該操作然后按已知方式轉(zhuǎn)到酯化步驟，例如按上述專利EP617,018或WO96/30355中描述的方法。
例如，根據(jù)第一種3步法，該操作首先始于10-脫乙酰漿果赤霉素的二烷基化，即，在強堿存在下應(yīng)用烷基化劑進行烷基化，在第二步中，在選自叔胺和金屬堿(它們保證在13位形成醇鹽)的活化劑存在下，在13位將7位和10位二醚化了的10-脫乙酰漿果赤霉素與適當保護的β-內(nèi)酰胺偶聯(lián)。然后，通過無機酸或有機酸的作用實現(xiàn)側(cè)鏈的去保護。
例如，根據(jù)第二種3步法，該操作首先始于10-脫乙酰漿果赤霉素的二烷基化，即，在強堿存在下應(yīng)用烷基化劑進行烷基化，在第二步中，在活化劑(例如二烷基氨基吡啶)存在下，在偶聯(lián)劑(例如二酰亞胺)存在下，在13位將7位和10位二醚化了的10-脫乙酰漿果赤霉素與噁唑烷偶聯(lián)。通過無機酸或有機酸的作用實現(xiàn)噁唑烷的裂開。
根據(jù)第三種方法，該操作始于在7位和10位適當保護的漿果赤霉素的13位酯化，即，在上述兩種方法中所述偶聯(lián)劑和/或活化劑存在下與β-內(nèi)酰胺或噁唑烷反應(yīng)。在7位和10位去保護后，在強堿存在下，通過烷基化劑進行7位和10位的二醚化。然后，通過無機酸或有機酸的作用實現(xiàn)側(cè)鏈的去保護。
通式(Ⅰ)的產(chǎn)品具有顯著的生物特性。
在體內(nèi)，證實了通式(Ⅰ)的產(chǎn)品在移植有結(jié)腸腺癌C51或C38的小鼠中顯示活性(在1～30mg/kg的劑量下)，并且對其它液態(tài)瘤或?qū)嶓w瘤顯示活性。
式Ⅰ的化合物具有抗腫瘤特性，更具體地說，具有抗腫瘤(它們抗Taxol和Taxotere)的活性。這樣的腫瘤例如包括結(jié)腸瘤，它們高量表達多抗藥性P-糖蛋白。“多抗藥性”是一個通常的術(shù)語，它涉及腫瘤對具有不同結(jié)構(gòu)和作用機制的各種化合物的抗性。通常已知紫杉化物被實驗瘤(例如P388/DOX)高度識別，P388/DOX是針對阿霉素(DOX)抗性選定的P388鼠白血病細胞系，它表達P-糖蛋白。本發(fā)明的化合物更少被P388/DOX識別。更具體地說，所述化合物比Taxotere更小程度地被識別。
式(Ⅰ)的化合物主要用于制備用來治療表達多抗藥性P-糖蛋白的細胞系的異常細胞增殖的藥物。式Ⅰ的化合物主要被用于制備治療結(jié)腸癌的藥物。
所述化合物，主要是式(Ⅰ)的化合物(其中，R4和R5各自是甲氧基)具有活性比其它已知紫杉化物化合物(例如Taxol或Taxotere，用于治療表達多抗藥性P-糖蛋白的癌細胞系)高的特性。它還具有抗(抗阿霉素或抗長春新堿的)腫瘤細胞的活性。
式(Ⅰ)的產(chǎn)品可與至少其它的治療處理同時應(yīng)用。更優(yōu)選與包括如下的治療處理結(jié)合應(yīng)用抗腫瘤藥、單克隆抗體、免疫療法、放射療法或生物應(yīng)答調(diào)節(jié)物。
式(Ⅰ)的產(chǎn)品優(yōu)選通過腸胃外施藥法(例如靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)或皮下施藥)被施用。
應(yīng)用標準方法，與連續(xù)暴露4天后的docetaxel相比較，檢測了產(chǎn)品Ⅰa對表達多抗藥性P-糖蛋白的不同抗性細胞系的細胞毒性。
通過將關(guān)于抗性細胞獲得的IC50值除以關(guān)于敏感細胞獲得的IC50值計算了抗性因子。
發(fā)現(xiàn)式Ⅰa的產(chǎn)品對已被評價的全部抗性腫瘤細胞系比docetaxel活性更大。有趣的是，發(fā)現(xiàn)式Ⅰa的產(chǎn)品在P388/TXT、P388/VCR、HL60/TAX和Calc18/TXT細胞系中具有極小的交差抗性(抗性因子1.8～4.3)，所述細胞系對docetaxel呈適中交差抗性(抗性因子4.8～23.5)，所以，它們可以更能代表臨床情況。
此外，發(fā)現(xiàn)式Ⅰa的產(chǎn)品在兩種最抗docetaxel的細胞系KB V1和P388/DOX(抗性因子59和50)中交差抗性急劇降低了(抗性因子7.6和10)。
還對鼠P388/CPT5細胞系(已獲得對喜樹堿的抗性，不表達P-糖蛋白)評價了式Ⅰa的產(chǎn)品。發(fā)現(xiàn)與喜樹堿(抗性因子286)相比，式Ⅰa的產(chǎn)品和docetaxel的交差抗性急劇降低了(抗性因子4.8和10.5)。該結(jié)果啟示式Ⅰa的產(chǎn)品在獲得了對喜樹堿衍生物的抗性的腫瘤治療方面的潛在應(yīng)用。表0.1式Ⅰa的產(chǎn)品和docetaxel對表達P-糖蛋白的抗性細胞系的相對抗性
*應(yīng)用人mdr1基因作為探針從RNA印跡試驗獲得的相對表達。CaCo2對人結(jié)腸腺癌CaCo-2細胞系(ATCC HTB37)(證實了它表現(xiàn)由mdr1基因編碼的P-糖蛋白的表達基礎(chǔ)水平)檢測了式Ⅰa的產(chǎn)品和docetaxel的抗增殖特性。應(yīng)用了方法學(xué)，即，96孔板，藥物的接觸時間(96小時)和活細胞的中性紅著色。以IC50表示結(jié)果，歸納于下表中。式Ⅰa的產(chǎn)品和docetaxel對CaCo-2細胞系的體外生長抑制效果
*括號內(nèi)的值實驗數(shù)式Ⅰa的產(chǎn)品對CaCo-2細胞呈細胞毒性，IC50值包括于關(guān)于測試的其它人細胞系[即，HL60、Calc18和KB(見前一節(jié))]描述的范圍內(nèi)。反之，docetaxel對CaCo-2細胞表現(xiàn)更高的IC50，相當于關(guān)于式Ⅰa的產(chǎn)品觀察到的值的4.9倍。因此，式Ⅰa的產(chǎn)品比docetaxel對CaCo-2細胞更高的抗增殖活性與通過該細胞系本身表達的P-糖蛋白識別式Ⅰa產(chǎn)品的能力比識別docetaxel的能力更低是一致的。
體內(nèi)抗腫瘤活性應(yīng)用式Ⅰa的產(chǎn)品在乙醇∶聚山梨酯80(50∶50,v/v)中的臨床前標準配方進行了體內(nèi)施藥計劃和抗腫瘤效能研究。稀釋后，最終濃度是5％乙醇，5％聚山梨酯，90％葡萄糖-5％于水中。
接著，設(shè)計了臨床配方，其中，將式Ⅰa的產(chǎn)品溶于聚山梨酯80。稀釋后，最終聚山梨酯80濃度是5％。在隨后的歸納中，除非另外說明，都應(yīng)用臨床前標準配方進行了體內(nèi)研究。
通過靜脈內(nèi)途徑(i.v.)施用式Ⅰa的產(chǎn)品。按標準方案進行了試驗和數(shù)據(jù)分析。
用于評定皮下植入的實體瘤的活性終點是-腫瘤生長抑制(T/C)，其中，T和C分別是處理組和對比組平均腫瘤重量(以mg表示)。按NCI標準，T/C＞42％,-，是不活潑的，T/C≤42％,+，是活性的最低水平。T/C＜10％,++，被認為是高抗腫瘤活性水平，它證明有進一步的進步(DN-2水平)。
在高抗腫瘤活性的情況下，還應(yīng)用了如下兩個終點-腫瘤生長延遲，T-C，其中，T和C是處理組和對比組腫瘤達到預(yù)定尺寸(750～1500mg)所需的平均時間(以天表示)。-log(殺傷的細胞)，它是通過處理殺傷的細胞總數(shù)的對數(shù)。可按Southern Research Institute(SRI)將該值轉(zhuǎn)化成人為評定的活性log(殺傷的細胞總數(shù))＜0.7=-不活潑；0.7～1.2=+；1.3～1.9=++；2.0～2.8=+++；＞2.8=++++高度活潑。
至于晚期腫瘤，消退可以是部分的(腫瘤質(zhì)量減輕50％以上)或者是完全的。完全消退包括于部分消退中。
用于估測在腹膜內(nèi)植入的白血病中的活性的終點是宿主壽命增大的百分數(shù)(％ILS)(相對于死亡的平均天數(shù)計算的)。
關(guān)于活性的NCI判據(jù)如下-P388高度活潑，++≥75％ILS；活潑，+27～74％ILS；不活潑，-＜27％ILS。
毒性基于藥物致死(≥10％)或重量損失最低點＞20％。
需要時，將docetaxel用于對比試驗。結(jié)腸瘤結(jié)腸51在第4、6、8天靜脈內(nèi)注射式Ⅰa的產(chǎn)品。在HNTD(9.3mg/kg/注射)下，發(fā)現(xiàn)高度活潑，0％T/C和2.6 log(殺傷的細胞)。更低的劑量給出2.2 log(殺傷的細胞)。還發(fā)現(xiàn)docetaxel高度活潑，3.1 log(殺傷的細胞)。評價對BALB/c雌性小鼠靜脈內(nèi)注射式Ⅰa產(chǎn)品抗結(jié)腸腺癌C51的效果
對比組中腫瘤達到750mg的平均時間=15.1天。應(yīng)用的縮寫HNTD=最高無毒劑量，bwl=體重損失，DD=藥物致死，bwl=體重損失。晚期結(jié)腸38對具有200～400mg腫瘤的小鼠靜脈內(nèi)注射式Ⅰa的產(chǎn)品。在HNTD(20mg/kg/注射)下，發(fā)現(xiàn)高度活潑，產(chǎn)生5/5完全消退，所有小鼠在第139天都成為無腫瘤的存活者。更低的劑量(12.4mg/kg/注射)引起相同的完全消退數(shù)目和80％無腫瘤的存活者。相比之下，在相同試驗中，docetaxel在HNTD下只產(chǎn)生40％部分消退。評價對B6D2F1雌性小鼠靜脈內(nèi)注射式Ⅰa產(chǎn)品抗晚期結(jié)腸腺癌C38的效果
對比組中腫瘤達到1000mg的平均時間=18.5天。應(yīng)用的縮寫HNTD=最高無毒劑量，bwl=體重損失，DD=藥物致死，TFS=第139天觀察到的無腫瘤存活者。
權(quán)利要求
1．式(Ⅰ)的化合物在制備用于治療表達多抗藥性P-糖蛋白的細胞系異常細胞增殖的藥物中的應(yīng)用，所述應(yīng)用包括給哺乳動物施用有效量式(Ⅰ)的化合物或藥物上可接受的鹽或溶劑合物 其中Z表示氫原子或如下通式的基 其中R1表示任選被一個或多個相同或不同的原子或基取代的苯甲?；?，所述原子或基選自鹵原子和含1～4個碳原子的烷基、含1～4個碳原子的烷氧基或三氟甲基，噻吩甲酰基或呋喃甲?；蛘呋鵕2-O-CO-，其中，R2表示含1～8個碳原子的烷基，含2～8個碳原子的烯基，含3～8個碳原子的炔基，含3～6個碳原子的環(huán)烷基，含4～6個碳原子的環(huán)烯基或含7～10個碳原子的二環(huán)烷基，這些基任選被一個或多個選自如下的取代基取代鹵原子和羥基，含1～4個碳原子的烷氧基，其中每個烷基部分含1～4個碳原子的二烷基氨基，哌啶子基或嗎啉代基，1-哌嗪基(任選在4位被含1～4個碳原子的烷基取代或被其中烷基部分含1～4個碳原子的苯基烷基取代)，含3～6個碳原子的環(huán)烷基，含4～6個碳原子的環(huán)烯基，苯基(任選被一個或多個選自如下的原子或基取代鹵原子和含1～4個碳原子的烷基或含1～4個碳原子的烷氧基)，氰基或羧基或其中烷基部分含1～4個碳原子的烷氧基羰基，-任選被一個或多個選自如下的原子或基取代的苯基或者α-或β-萘基鹵原子和含1～4個碳原子的烷基或含1～4個碳原子的烷氧基，或者-5元芳雜環(huán)基，優(yōu)選選自呋喃基和噻吩基，-或者含4～6個碳原子的飽和雜環(huán)基，任選被一個或多個含1～4個碳原子的烷基取代，R3表示含1～8個碳原子的無支鏈的或支鏈的烷基，含2～8個碳原子的無支鏈的或支鏈的烯基，含2～8個碳原子的無支鏈的或支鏈的炔基，含3～6個碳原子的環(huán)烷基，任選被一個或多個選自如下的原子或基取代的苯基或者α-或β-萘基鹵原子和烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、烷氧基、烷硫基、芳氧基、芳硫基、羥基、羥烷基、巰基、甲酰、?；?、酰氨基、芳酰氨基、烷氧基羰基氨基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、烷氧羰基、甲氨酰、烷基甲氨酰、二烷基甲氨酰、氰基、硝基和三氟甲基，或者5元芳雜環(huán)，該芳雜環(huán)包含一個或多個選自氮、氧和硫原子的相同或不同的雜原子，并且任選被一個或多個選自如下的相同或不同的取代基取代鹵原子和烷基、芳基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷氧基羰基氨基、酰基、芳基羰基、氰基、羧基、甲氨酰、烷基甲氨酰、二烷基甲氨?；蛲檠豸驶瑮l件是在苯基、α-或β-萘基和芳雜環(huán)基的取代基中，烷基和其它基的烷基部分包含1～4個碳原子，并且烯基和炔基包含2～8個碳原子，而且芳基是苯基或者I-或9-萘基，R4表示在無支鏈或支鏈中含1～6個碳原子的烷氧基，在無支鏈或支鏈中含3～6個碳原子的烯氧基，在無支鏈或支鏈中含3～6個碳原子的炔氧基，含3～6個碳原子的環(huán)烷氧基或含4～6個碳原子的環(huán)烯氧基，這些基任選被一個或多個鹵原子或被如下的基取代含1～4個碳原子的烷氧基，含1～4個碳原子的烷硫基或羧基，其中烷基部分含1～4個碳原子的烷氧羰基，氰基或甲氨?；騈-烷基甲氨?；蚱渲忻總€烷基部分含1～4個碳原子的N,N-二烷基甲氨?；?；或者與它所連接的氮原子形成一個飽和5元或6元雜環(huán)基，該雜環(huán)基任選含選自氧、硫或氮原子的第二個雜原子，任選被含1～4個碳原子的烷基，或者苯基或其中烷基部分含1～4個碳原子的苯基烷基取代，R5表示在無支鏈或支鏈中含1～6個碳原子的烷氧基，含3～6個碳原子的烯氧基，含3～6個碳原子的炔氧基，含3～6個碳原子的環(huán)烷氧基或含3～6個碳原子的環(huán)烯氧基，這些基任選被一個或多個鹵原子或被如下的基取代含1～4個碳原子的烷氧基，含2～4個碳原子的烷硫基或羧基，其中烷基部分含1～4個碳原子的烷氧羰基，氰基或甲氨酰基或N-烷基甲氨?；蚱渲忻總€烷基部分含1～4個碳原子的N,N-二烷基甲氨?；?，或者與它所連接的氮原子形成一個飽和5元或6元雜環(huán)基，該雜環(huán)基任選含選自氧、硫或氮原子的第二個雜原子，任選被含1～4個碳原子的烷基，或者苯基或其中烷基部分含1～4個碳原子的苯基烷基取代。
2．權(quán)利要求1的化合物的應(yīng)用，其中，Z表示氫原子或通式(Ⅱ)的基，其中，R1表示苯甲?；蚧鵕2-O-CO-，其中，R2表示叔丁基，并且，R3表示含1～6個碳原子的烷基，含2～6個碳原子的烯基，含3～6個碳原子的環(huán)烷基，任選被一個或多個選自如下的相同或不同原子或基取代的苯基鹵原子和烷基，烷氧基，二烷基氨基，酰氨基，烷氧基羰基氨基或三氟甲基；或者2-或3-呋喃基，2-或3-噻吩基或者2-、4-或5-噻唑基，并且R4和R5，它們可能相同或不同，各自表示含1～6個碳原子的無支鏈或支鏈烷氧基。
3．權(quán)利要求2的化合物的應(yīng)用，其中，Z表示氫原子或通式(Ⅱ)的基，其中，R1表示苯甲?；蚧鵕2-O-CO-，其中，R2表示叔丁基，并且，R3表示異丁基、異丁烯基、丁烯基、環(huán)己基、苯基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-噻唑基、4-噻唑基或5-噻唑基，并且R4和R5，它們可能相同或不同，各自表示甲氧基、乙氧基或丙氧基。
4．4α-乙酸基-2α-苯甲酸基-5β,20-環(huán)氧-1β-羥基-7β,10β-二甲氧基-9-氧代-11-紫杉烯-13α-基(2R,3S)-3-叔丁氧基羰基氨基-2-羥基-3-苯基丙酸酯在制備用于治療表達多抗藥性P-糖蛋白的細胞系的異常細胞增殖的藥物中的應(yīng)用。
5．權(quán)利要求1～4的化合物在制備可用于治療結(jié)腸癌的藥物中的應(yīng)用。
6．權(quán)利要求5的化合物的應(yīng)用，其中，該應(yīng)用是與至少其它治療處理同時進行的。
7．權(quán)利要求6的化合物的應(yīng)用，其中，其它治療處理包括抗腫瘤藥、單克隆抗體、免疫療法、放射療法或生物應(yīng)答調(diào)節(jié)物。
8．權(quán)利要求1的化合物的應(yīng)用，其中，所述藥物通過腸胃外施藥法被施用。
9．權(quán)利要求1～8任一項的化合物的應(yīng)用，其中，式(Ⅰ)的化合物通過靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)或皮下施藥法被施用。
全文摘要
本發(fā)明涉及紫杉化物衍生物的新用途。更確切地說,它涉及一種治療表達多抗藥性P－糖蛋白的不同抗性細胞系的異常細胞增殖的方法。這類細胞是結(jié)腸癌細胞的代表。本發(fā)明的產(chǎn)品還可用于治療哺乳動物(包括人)的結(jié)腸癌。優(yōu)選的化合物是:4α－乙酸基－2α－苯甲酸基－5β,20－環(huán)氧－1β－羥基－7β－二甲氧基－9－氧代－11－紫杉烯－13α－基(2R,3S)－3－叔丁氧基碳酰氨基－2－羥基－3－苯基丙酸酯。
文檔編號A61P35/00GK1313764SQ99809900
公開日2001年9月19日 申請日期1999年8月18日 優(yōu)先權(quán)日1998年8月20日
發(fā)明者M－C·比瑟里, P·維里格諾德, S·羅伯茨, C·布雷利 申請人:阿文蒂斯藥物股份有限公司