專利名稱：富馬酸衍生物在移植藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及鹽或游離酸形式的某些富馬酸單烷基酯單獨(dú)或者與富馬酸二烷基酯組合在制備用于移植治療的藥物組合物中的應(yīng)用。更具體而言，本發(fā)明涉及所述包含富馬酸烷基酯的藥物組合物在治療、緩解或者抑制受體對移植物的排斥反應(yīng)(即宿主對抗移植物反應(yīng))中的應(yīng)用。
移植是指組織或者器官移植，即、組織如角膜、皮膚、骨(碎骨片)、血管或筋膜的轉(zhuǎn)移，或者器官如腎、心臟、肝臟、肺、胰腺或腸的轉(zhuǎn)移，或者單獨(dú)細(xì)胞如胰島細(xì)胞、α-細(xì)胞和肝細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，在移植器官中腎臟具有最重要的意義。
根據(jù)供體和受體之間的關(guān)系程度，我們分為自體移植(向相同個體的另一部分身體的轉(zhuǎn)移)、同系移植(向另一個遺傳相同的個體的轉(zhuǎn)移)或者同種移植(向相同種類的另一個個體的轉(zhuǎn)移)。根據(jù)原始部位和移植部位，我們進(jìn)一步區(qū)分同位移植(向相同部位的轉(zhuǎn)移)和異位移植(向不同部位的轉(zhuǎn)移)。上述移植在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中起著重要的作用。
移植醫(yī)學(xué)中的主要問題是組織、器官或細(xì)胞移植后由于受體的免疫抵抗反應(yīng)產(chǎn)生的移植物排斥反應(yīng)。此等移植物排斥反應(yīng)也稱為宿主對抗移植物反應(yīng)。生物體對抗異種蛋白的免疫抵抗反應(yīng)通常導(dǎo)致移植物的排斥反應(yīng)或死亡。通過使用現(xiàn)代免疫抑制劑，其最具代表性的例子是環(huán)孢菌素，特別是環(huán)孢菌素A，在近些年來已顯著改善了移植結(jié)果。現(xiàn)在，一年期存活率對于肝臟移植約為60％，對于心臟移植約為80％，而對于腎臟移植已超過90％。
在宿主對抗移植物的排斥反應(yīng)中，可分為不同的階段。根據(jù)受體和供體的差異程度，該反應(yīng)以不同的速度發(fā)生，我們將其分為急性、亞急性、或者慢性反應(yīng)。急性排斥反應(yīng)過程在48小時內(nèi)由于動脈炎或小動脈炎伴隨著移植物不可逆的丟失(壞死)，而且不能通過給藥藥物來影響。亞急性排斥反應(yīng)在移植后的第12天一第4個月期間表現(xiàn)為排斥反應(yīng)危機(jī)，伴隨者可逆的功能性紊亂，這是由于移植物的血管病變導(dǎo)致的。最后，由于血管變化如消滅性動脈病變導(dǎo)致的移植物功能喪失，其可能持續(xù)幾周或幾年，稱為慢性排斥反應(yīng)。
為避免所述排斥反應(yīng)，即宿主對抗移植物反應(yīng)，移植醫(yī)學(xué)基本上是利用免疫抑制作用，即減弱正常的免疫反應(yīng)。為此，通常與皮質(zhì)類固醇及所謂的抗代謝物例如嘌呤類似物如6-巰基嘌呤和硫鳥嘌呤組合使用抗淋巴細(xì)胞血清，其中抗代謝物影響核酸和蛋白質(zhì)的合成，并由此防止細(xì)胞分化和增殖。這導(dǎo)致對抗體和細(xì)胞免疫應(yīng)答產(chǎn)生的抑制。治療中所用的免疫抑制劑是特異性或非特異性地抑制或減弱身體中的免疫反應(yīng)的物質(zhì)。非特異性免疫抑制劑是抑細(xì)胞劑如烷基化劑或抗代謝物。另外，已知活性成分導(dǎo)致至少部分特異性免疫抑制，這些活性成分例如是皮質(zhì)類固醇、抗血清、抗體FK-506、他克莫司(tacrolimus)、mycophenolatemofetil和主要的環(huán)孢菌素如環(huán)孢菌素A。
使用免疫抑制劑時的危險在于減弱了身體抵抗感染性疾病的能力，并增加了惡性疾病的風(fēng)險。因此，本發(fā)明的目的是提供一種可在移植醫(yī)療中使用的藥物制劑，其可用于治療、特別是抑制、減弱和/或緩解宿主對抗移植物反應(yīng)，但沒有上述缺陷。
本發(fā)明的目的是通過單獨(dú)或者與富馬酸二烷基酯組合使用帶有單或二價陽離子的鹽或者游離酸形式的某些富馬酸單烷基酯制備用于移植醫(yī)療中的藥物組合物來實現(xiàn)的。本發(fā)明的主題的特征將在權(quán)利要求書中詳細(xì)說明。根據(jù)本發(fā)明的組合物不包含游離富馬酸本身。
已知的是，在給藥后于生物降解時進(jìn)入檸檬酸循環(huán)或者其一部分的藥物制劑可增加治療效力，特別是在高劑量時，這是因為它們可緩解或者治愈隱原性的疾病。
例如，富馬酸在鼠中抑制Ehrlich腹水腫瘤的生長，降低絲裂霉素C和黃曲霉素的毒性作用(K.Kuroda,M.Akao,Biochem.Pharmacol.29,2839-2844(1980)/Gann.72,777-782(1981)/Cancer Res.36,1900-1903(1976))，而且具有抗牛皮癬和抗菌活性(C.N.Huhtsnen,J.Food Sci.48,1574(1983)/M.N.Islam,1982年8月24日申請的US-A-4,346,118/C.A.97,161317b(1982))。
當(dāng)經(jīng)非胃腸道、透皮、特別是經(jīng)口給藥時，高劑量的富馬酸或其衍生物，目前已知的是例如二羥基富馬酸、富馬酰胺和富馬腈，具有不能令人接受的嚴(yán)重副作用和高毒性(P.Holland,R.G.White,Brit.Dermatol.85,259-263(1971)/M.Hagedom,K.W.Kalkoff,G.Kiefer,D.Baron,J.Hug,J.Petres,Arch.Derm.Res.254,67-73(1975))，使得過去在大多數(shù)情況下不得不放棄此等治療。
歐洲專利申請0188749已經(jīng)描述了富馬酸衍生物以及包含它們的藥物組合物可用于治療牛皮癬。DE-A-2530372公開了用于治療牛皮癬并包含富馬酸和其他富馬酸衍生物的混合物的藥物組合物。游離富馬酸的含量對于這些藥物是必要的。
DE-A-2621214公開了包含富馬酸單乙基酯及其無機(jī)酸鹽作為活性成分用于治療牛皮癬的藥物。出版物“Hautarzt(皮膚病學(xué)家)”(1987,270-285)討論了富馬酸單乙基酯鹽的應(yīng)用。EP0312697B1描述了用于治療牛皮癬、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)性皮炎和節(jié)段性回腸炎并包含富馬酸單烷基酯鹽和富馬酸二酯的混合物的藥物組合物。
令人驚奇的是，現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)富馬酸C1-5單烷基酯單獨(dú)或者與富馬酸二-C1-5烷基酯組合可有利地用于制備移植醫(yī)療中使用的藥物組合物，所述富馬酸C1-5單烷基酯可以是帶有單價或二價陽離子的鹽的形式或者為游離酸的形式，所述鹽形式優(yōu)選是鈣、鎂、鋅和鐵鹽或者鋰、鈉或鉀鹽的形式。包含此等富馬酸C1-5單烷基酯的組合物令人驚奇地允許正向調(diào)節(jié)宿主對抗移植物反應(yīng)中的免疫系統(tǒng)。
本發(fā)明優(yōu)選使用包含一種或多種選自于以下通式的富馬酸單烷基酯的鈣、鎂、鋅和鐵鹽或者鋰、鈉或鉀鹽的化合物 任選地與以下通式的富馬酸二烷基酯混合 并任選地包含常規(guī)藥物賦形劑和載體，其中A是選自于以下組中的二價陽離子Ca、Mg、Zn或Fe，或者是以下組中的單價陽離子Li、Na或K，而n根據(jù)陽離子的類型代表1或2的數(shù)。
也可有利地使用包含一種或多種以下通式的烷基氫富馬酸酯 上述組分任選地與下式之富馬酸二烷基酯混合 并任選地包含常規(guī)使用的藥物賦形劑和載體。
在使用時，優(yōu)選以片劑、在膠囊中的微片劑、丸劑或顆?；蛘?軟明膠或硬明膠)膠囊劑給藥。
根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選組合物包括富馬酸單甲基酯或單乙基酯的鈣鹽，或者與富馬酸二甲酯混合的富馬酸單甲基酯或單乙基酯的鈣鹽。
包含10-300mg富馬酸單烷基酯鈣鹽或游離酸形式之富馬酸烷基酯的制劑特別適合于給藥，而活性成分的總重量為10-300mg。
其他優(yōu)選的口服給藥制劑分別包含10-290重量份的富馬酸單烷基酯鈣鹽和290-10重量份的富馬酸二甲酯以及1-50重量份的富馬酸單烷基酯鋅鹽或者1-250重量份富馬酸單烷基酯(優(yōu)選單甲基酯)鎂鹽和1-50重量份的富馬酸單烷基酯鋅鹽或單甲基酯，而活性成分的總重量為30-300mg。
本發(fā)明的優(yōu)選組合物還包含10-300mg的甲基氫富馬酸酯。
還可通過經(jīng)皮和透皮給藥的組合物以及經(jīng)直腸給藥的組合物的形式使用藥物。
包含在本發(fā)明組合物中的富馬酸衍生物可如下制得a)用已知的方法使下式化合物 與2摩爾的烷基醇(ROH)縮合，得到二酯，然后進(jìn)行受控水解，制得單酯，或者b)按照常規(guī)方法與1摩爾有關(guān)烷基醇(ROH)縮合，然后水解如此得到的單酰氯，以制得酸，或者c)直接用已知的方法使富馬酸與2摩爾烷基醇(ROH)縮合，得到有關(guān)的二酯，然后進(jìn)行受控水解，以制得單酯，或者d)直接用已知的方法使馬來酸或馬來酸酐與1-2摩爾的有關(guān)烷基醇(ROH)縮合，得到單或二酯，然后進(jìn)行催化異構(gòu)化，以制得相應(yīng)的富馬酸衍生物。
富馬酸單烷基酯的鹽也可如下制得在甲苯中使以下通式的化合物(其中R為C1-C5烷基) 與等摩爾量的Na、K、Fe、Ca、Mg或Zn氫氧化物或氧化物反應(yīng)，然后除去在該反應(yīng)期間形成的水。
對于特別優(yōu)選的應(yīng)用，可如下使用包含所述劑量和比例之以下活性成分的制劑(1)以片劑、在膠囊中的微片或丸劑或者膠囊劑型口服給藥藥物組合物，其特征在于，該組合物包含10-300mg的富馬酸單甲基酯鈣鹽，而活性成分的總重量為10-300mg；(2)以片劑、在膠囊中的微片或丸劑或者膠囊劑型口服給藥的藥物組合物，其特征在于，該組合物包含10-290重量份的富馬酸單甲基酯鈣鹽和290-10重量份的富馬酸二甲酯，而活性成分的總重量為20-300mg；(3)以片劑、在膠囊中的微片或丸劑或者膠囊劑型口服給藥的藥物組合物，其特征在于，該組合物包含10-250重量份的富馬酸單甲基酯鈣鹽、1-50重量份的富馬酸二甲酯和1-50重量份的富馬酸單甲基酯鋅鹽，而活性成分的總重量為20-300mg；(4)以片劑、在膠囊中的微片或丸劑或者膠囊劑型口服給藥的藥物組合物，其特征在于，該組合物包含10-250重量份的富馬酸單甲基酯鈣鹽、250-10重量份的富馬酸二甲酯、1-50重量份的富馬酸單甲基酯鎂鹽和1-50重量份的富馬酸單甲基酯鋅鹽，而活性成分的總重量為30-300mg。
以下藥物劑型、劑量和比例也是優(yōu)選的。
(5)口服給藥的藥物組合物，其特征在于，該組合物包含一種或多種選自以下通式之富馬酸單烷基酯的游離酸的化合物
上述組分任選地與下式之富馬酸二烷基酯混合 該組合物還包含載體，但不包含游離形式的富馬酸；(6)以片劑、在膠囊中的微片或丸劑或者膠囊劑型口服給藥的藥物組合物，其特征在于，該組合物包含10-300mg的烷基氫富馬酸酯，優(yōu)選甲基氫富馬酸酯，而活性成分的總重量為10-300mg；(7)以片劑、在膠囊中的微片或丸劑或者膠囊劑型口服給藥的藥物組合物，其特征在于，該組合物包含10-290重量份的烷基氫富馬酸酯和290-10重量份的富馬酸二烷基酯，優(yōu)選甲基氫富馬酸酯，而活性成分的總重量為20-300mg。
口服藥物組合物可用腸溶包衣包敷。所述組合物可為包含在膠囊中的微片、丸劑和顆粒劑的劑型。此等膠囊可以是軟明膠或硬明膠膠囊。
根據(jù)優(yōu)選實施方案，丸劑或微片劑的尺寸或平均直徑為300-2000μm的范圍內(nèi)，特別是在500-1500μm的范圍內(nèi)，或者是1000μm。
根據(jù)本發(fā)明，用富馬酸單烷基酯或其鹽的治療也可與器官移植中通常使用的三重藥物療法的一種或多種組合物結(jié)合或者與環(huán)孢菌素A結(jié)合使用，特別是用于治療、緩解或抑制宿主對抗移植物反應(yīng)。
為此目的，給藥的組合物可包含已知劑量或量的活性成分。同樣，組合治療可包括通過相同或不同給藥途徑平行給藥單獨(dú)組合物。任選地，除富馬酸衍生物外，包含在根據(jù)本發(fā)明之給藥劑量中的活性成分的劑量可降低，以產(chǎn)生有利的結(jié)果。
根據(jù)本發(fā)明的應(yīng)用的其他實施方案是，在用例如環(huán)孢菌素的免疫抑制劑的治療方案后順序地輪換給藥上述富馬酸衍生物。換言之，給藥如上定義的富馬酸衍生物1或幾周的時間可跟在1或幾周的環(huán)孢菌素治療之后。這可以降低環(huán)孢菌素A的劑量，其結(jié)果是可大大降低長期環(huán)孢菌素A治療的已知副作用的發(fā)生率。
為進(jìn)一步說明本發(fā)明的應(yīng)用，以下給出有關(guān)優(yōu)選藥物制備的一些制備實施例將活性成分添加至整個粉末混合物中，混合，并用200篩網(wǎng)使其均化，然后用2％聚乙烯吡咯烷酮(PVP,Kollidon25)的水溶液按常規(guī)方法處理成粘合顆粒，接著再在干燥狀態(tài)下與外相混合。后者包括2.000kg的所謂FST復(fù)合物，其包含80％滑石、10％硅酸和10％硬脂酸鎂。
然后用常規(guī)方法將該混合物壓制成凸形片，每片重量為400mg，直徑為10.0mm。除這些典型的緊壓法外，也可使用其他方法來制備片劑，如直接緊壓或根據(jù)熔化和噴霧干燥法的固體分散法。腸溶包衣將2.250kg鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素(HPMCP,PharmacoatHP50)的溶液溶解在由2.50升去離子水、13.00升丙酮(Ph.Helv.Ⅶ)和13.00升乙醇(94重量％)組成的溶劑混合物中，然后在該溶液中添加0.240kg的蓖麻油(Ph.Eur.Ⅱ)。按照常規(guī)方法在包衣鍋中將上述溶液按比例地傾倒或噴霧在片劑芯上或者用合適結(jié)構(gòu)的流化床裝置來包覆。
干燥后，涂敷薄膜包衣。所述包衣是由在溶劑混合物中的Eudragit E12.5％4.800kg、滑石(Ph.Eur.Ⅱ)0.340kg、氧化鈦(Ⅳ)Cronus RN560.520kg、著色漆ZLT-2蘭(Siegle)0.210 kg、和聚乙二醇6000(Ph.Helv.Ⅶ)0.120kg組成的溶液，所述溶劑混合物由8.200kg的2-丙醇(Ph.Helv.Ⅶ)、0.600kg的甘油三乙酸酯(Triacetin)和0.200kg的去離子水組成。均勻分布在包衣鍋或流化床中之后，按照常規(guī)方法干燥并拋光混合物。
按常規(guī)方法與2％聚乙烯吡咯烷酮(Kollidon25)的水溶液一起將整個粉末混合物處理成粘合顆粒，然后在干燥狀態(tài)下與外相混合。所述外相由0.350kg的膠體硅酸(Aerosil)、0.500kg的硬脂酸鎂和1.500kg的滑石(Ph.Helv.Ⅶ)組成。將該均勻的混合物按500.0mg的比例填充在合適的膠囊中。所述膠囊可接著按照已知的方法用硬脂酸羥丙基甲基纖維素和作為軟化劑的蓖麻油來施加腸溶包衣。除硬明膠膠囊外，所述混合物也可填充在合適的耐胃酸的膠囊中，該膠囊由鄰苯二甲酸乙酸纖維素(CAP)和鄰苯二甲酸羥丙基乙基纖維素(HPMCP)的混合物組成。
將以下組成的均勻粉末混合物混合在上述活性成分中噴霧干燥的乳糖12.900kg、膠體硅酸1.000kg、微晶纖維素(Avicel)2.000kg、硬脂酸鎂(Ph.Helv.Ⅶ)1.000kg和滑石(Ph.Helv.Ⅶ)2.000kg。再次用200篩網(wǎng)使整個粉末混合物均化，填充至硬明膠膠囊中并密封，其凈重為400mg。如實施例2所述涂敷耐胃酸的包衣。
按照常規(guī)方法將耐胃酸的包衣傾倒或噴霧在典型的包衣鍋中或者在用合適的流化床施用。為實現(xiàn)耐胃酸性，將2.250kg鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素(HPMCP,Pharmacoat HP 50)的溶液部分地溶解在由13.00升丙酮、13.50升乙醇(94重量％，已用2％酮變性)和2.50升去離子水組成的溶劑混合物中。在上述溶液中添加0.240kg的蓖麻油作為軟化劑，然后按照常規(guī)方法部分地涂敷在片劑芯上。
薄膜包衣完成干燥后，在相同的裝置中涂敷以下組成的懸浮液作為薄膜包衣滑石0.340kg、氧化鈦(Ⅳ)Cronus RN 56 0.400kg、著色漆L紅漆86837 0.324kg、Eudragit E 12.5％4.800kg、和聚乙二醇6000 ph.11 Ⅺ 0.120kg，它們在由8.170kg的2-丙醇、0.200kg的去離子水和0.600kg的甘油三乙酸酯(Triacetin)組成的溶劑混合物中。
然后將耐胃酸的微片填充在硬明膠膠囊中，其凈重為500.0mg，然后密封。實施例5制備腸溶包衣薄膜片(“mite”片)，其包含67.0mg的富馬酸單甲基酯鈣鹽、30.0mg的富馬酸二甲酯、5.0mg的富馬酸單乙基酯鎂鹽和3.0mg的富馬酸單乙基酯鋅鹽，這相當(dāng)于總共75mg的富馬酸采取必要的防范措施(呼吸面罩、手套、保護(hù)衣等)，粉碎3.000kg的富馬酸二甲酯、6.700kg的富馬酸單乙基酯鈣鹽、0.500kg的富馬酸單乙基酯鎂鹽和0.300kg的富馬酸單乙基酯鋅鹽，然后充分混合并用800篩網(wǎng)均化。按與實施例4類似的方法制備如下組成的賦形劑混合物30.00kg的淀粉衍生物(STA-RX 1500)、3.000kg的微晶纖維素(Avicel PH 101)、0.750kg的聚乙烯吡咯烷酮(PVP,Kollidon25)、4.000kg的Primogel、0.250kg的膠體硅酸(Aerosil)。將賦形劑與活性成分的混合物緊密混合，然后用200篩網(wǎng)使其均化。用2％聚乙烯吡咯烷酮(PVP,Kollidon25)的水溶液按常規(guī)方法將上述物質(zhì)處理成粘合顆粒。將以下賦形劑的粉末混合物添加至干燥顆粒中作為外相0.500kg的硬脂酸鎂(Ph.Eur.)和0.800kg的滑石(Ph.Eur.Ⅱ)。
用常規(guī)方法將所述均勻顆粒混合物壓制成凸形片芯，其重量為500.0mg，直徑為11.5mm。除粘合法外，也可使用根據(jù)實施例1和4的壓片法。類似于實施例1和4所述的，在片劑芯上涂敷耐胃酸的包衣和薄膜包衣。
根據(jù)本發(fā)明的組合物優(yōu)選以片劑或膠囊的劑型通過口服給藥。這些固體單劑量劑型優(yōu)選具有耐胃酸的包衣，該包衣在通過胃后由于小腸中的腸液而在幾分鐘之內(nèi)溶解，并由藥物中釋放活性成分。在全身治療的開始和結(jié)束時，需要較低的劑量(mite)，而對于初始階段后的療程則需要較高的劑量(forte)。
將賦形劑與活性成分緊密混合，用200篩網(wǎng)使其均化，然后用2％的聚乙烯吡咯烷酮(PVP,Kollidon25)水溶液按常規(guī)方法將其處理成粘合顆粒，并在干燥狀態(tài)下與外相混合。所述外相由0.500kg的硬脂酸鎂(Ph.Eur.)和1.500kg的滑石(Ph.Eur.Ⅱ)組成。
用常規(guī)方法將所述均勻顆?；旌衔飰褐瞥赏剐纹?，其重量為400mg，直徑為10mm。除這些典型的壓片法外，也可使用其他方法來制備片劑，如直接壓片或根據(jù)熔化和噴霧干燥法的固體分散法。類似于實施例1和4所述的，在片劑芯上涂敷耐胃酸的包衣和薄膜包衣。
將活性成分添加至該粉末混合物中，然后混合并用200篩網(wǎng)使其均化，用2％聚乙烯吡咯烷酮(KollidonK30)的水溶液按常規(guī)方法將其處理成粘合顆粒，接著在干燥狀態(tài)下與外相混合。所述外相由2.000kg的所謂FST復(fù)合物組成，該復(fù)合物包含80％滑石、10％硅酸和10％硬脂酸鎂。
用常規(guī)方法將整個顆粒物壓制成凸形片，其重量為400mg，直徑為10mm。除這些典型的壓片法外，也可使用其他方法來制備片劑，如直接壓片或根據(jù)熔化和噴霧干燥法的固體分散法。類似于實施例1和4所述的，在片劑芯上涂敷耐胃酸的包衣和薄膜包衣。
用Eudragit S 12.5％溶液噴灑丸劑，然后用滑石干燥。在每個噴灑/干燥循環(huán)后，測量活性成分的釋放，并再加入Eudragit S 12.5％溶液/滑石，持續(xù)至釋放體積符合規(guī)定要求。
然后將腸溶包衣的丸劑填充在膠囊(146mg丸劑/膠囊)中。
所述膠囊可接著按照已知的方法用鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素和作為軟化劑的蓖麻油來包覆腸溶包衣。除硬明膠膠囊外，所述活性成分也可填充在合適的耐胃酸的膠囊中，該膠囊由鄰苯二甲酸乙酸纖維素(CAP)和鄰苯二甲酸羥丙基乙基纖維素(HPMCP)的混合物組成。
將所述丸劑填充在膠囊(126.5mg丸劑/膠囊)中。
應(yīng)用實施例以下將在鼠的腎移植模型中調(diào)查富馬酸甲基酯鈣鹽對急性和慢性排斥模型中的宿主對抗移植物反應(yīng)的作用。急性排斥慢性為調(diào)查富馬酸甲酯鈣鹽對移植物的急性排斥反應(yīng)的影響，如下進(jìn)行動物試驗(在鼠上)。為此目的，用富馬酸甲酯鈣鹽(CaMF，劑量33.3mg/kg/天)或者安慰劑處理兩組大鼠，總的時間為56天(腎移植前28天(-28)-移植后28天(+28))。用于結(jié)果擬合評估的動物數(shù)量在安慰劑組為n=9，而在試驗組中為n=12。之后，評估移植后動物存活的天數(shù)。表1顯示了試驗結(jié)果。
在給藥富馬酸甲酯鈣鹽后，平均存活天數(shù)顯著增加，清楚地表明該藥物可抑制排斥反應(yīng)，也就是說，其對宿主對抗移植物反應(yīng)的影響對于移植醫(yī)療是正面的。
表1動物在腎移植后的存活時間
慢性排斥反應(yīng)模型為調(diào)查富馬酸甲酯鈣鹽對慢性排斥反應(yīng)的作用，在動物試驗中有三組大鼠接受移植物(腎臟)。從移植前28天直至移植后28天，第1和2組分別接受安慰劑(第1組)或作為活性成分的富馬酸甲酯鈣鹽(CaMF)(第2組)。第3組在腎臟移植后從第30-60天給藥CaMF。所有動物都從移植后的第0-9天接受環(huán)孢菌素。環(huán)孢菌素的給藥劑量為1.5mg/kg/天(皮下)，CaMF為33.3mg/kg/天(口服)。
在第0、1、3、5和10天測量血清中的肌酸酐濃度，然后每周測量一次，并觀察尿蛋白濃度，其是每周測量一次，由此檢查治療的效果。在第1和2組中，n=10只動物，分別產(chǎn)生適合于評估的結(jié)果，在第3組中，n=9。移植后10周的治療結(jié)果見表2所示。
10周跟蹤觀察后，用安慰劑治療的動物表現(xiàn)出比兩個試驗組顯著增高的血清肌酸酐濃度和蛋白尿，而經(jīng)過預(yù)處理的第2組的結(jié)果比隨后治療的第3組的結(jié)果更好。這些結(jié)果表明富馬酸甲酯鈣鹽顯著抑制了對腎臟的損害。
表2慢性排斥反應(yīng)模型
權(quán)利要求
1.一種或多種富馬酸C1-5單烷基酯單獨(dú)或者與富馬酸二-C1-5烷基酯組合在治療器官和細(xì)胞移植中宿主對抗移植物反應(yīng)中的應(yīng)用，所述富馬酸C1-5單烷基酯為帶有單價或二價陽離子的鹽的形式或者為游離酸的形式。
2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中使用一種或多種以下通式的富馬酸單烷基酯的單價或二價陽離子鹽 任選地與以下通式的富馬酸二烷基酯混合 其中A是選自于以下組中的二價陽離子Ca、Mg、Zn或Fe，或者是以下組中的單價陽離子Li、Na或K，而n根據(jù)陽離子的類型代表1或2的數(shù)，和/或一種或多種以下通式的烷基氫富馬酸酯 任選地與下式之富馬酸二烷基酯混合 并任選地包含常規(guī)使用的藥物賦形劑和載體。
3.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，使用富馬酸單甲基酯或乙基酯的鈣鹽。
4.如權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征在于，使用富馬酸單乙基酯的鈣鹽、鎂鹽和/或鋅鹽中的一種或多種，并與富馬酸二甲基酯混合。
5.如權(quán)利要求1-4之一所述的應(yīng)用，其特征在于，活性成分以片劑、或者在膠囊中的微片劑、丸劑或顆?；蛘吣z囊劑口服給藥。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，富馬酸單烷基酯鈣鹽的用量為10-300mg，而活性成分的總重量為10-300mg。
7.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，使用10-290重量份的富馬酸單烷基酯鈣鹽和290-10重量份的富馬酸二甲酯，而活性成分的總重量為20-300mg。
8.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，使用1-250重量份的富馬酸單烷基酯鈣鹽、1-50重量份的富馬酸二甲酯和1-50重量份的富馬酸單烷基酯鋅鹽，而活性成分的總重量為20-300mg。
9.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，使用10-250重量份的富馬酸單烷基酯鈣鹽、250-10重量份的富馬酸二甲酯、1-50重量份的富馬酸單烷基酯鎂鹽和1-50重量份的富馬酸單烷基酯鋅鹽，而活性成分的總重量為30-300mg。
10.如權(quán)利要求1-9之一所述的應(yīng)用，其特征在于，與免疫抑制劑組合進(jìn)行治療。
11.如權(quán)利要求10所述的應(yīng)用，其特征在于，與給藥富馬酸化合物一起順序或者交替地使用環(huán)孢菌素。
12.如權(quán)利要求1-9之一所述的應(yīng)用，其特征在于，與一種或多種移植醫(yī)療中使用的藥物組合進(jìn)行治療。
13.如權(quán)利要求5-12之一所述的應(yīng)用，其特征在于，丸劑或微片劑的尺寸或平均直徑在300-2000μm的范圍內(nèi)，特別是在500-1500μm的范圍內(nèi)或為1000μm。
14.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，以軟或硬明膠膠囊的劑型使用藥物。
15.如權(quán)利要求1-14之一所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物的劑量單元具有耐胃酸的包衣。
16.如權(quán)利要求1-4之一所述的應(yīng)用，其特征在于，以經(jīng)皮或透皮給藥制劑、非胃腸道給藥的制劑以及直腸給藥的制劑的劑型給藥所述藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及某些鹽或游離酸形式的富馬酸單烷基酯單獨(dú)或者與富馬酸二烷基酯組合在制備用于移植治療的藥物制劑中的應(yīng)用，特別是用于治療、緩解或抑制宿主對抗移植物反應(yīng)。富馬酸單烷基酯也可為此目的與移植醫(yī)療中通常使用的制劑組合，特別是與免疫抑制劑如環(huán)孢菌素組合使用。
文檔編號A61K45/00GK1316901SQ99810485
公開日2001年10月10日 申請日期1999年8月20日 優(yōu)先權(quán)日1998年8月31日
發(fā)明者拉金德拉·庫瑪爾·喬希, 漢斯－彼得·施特雷貝爾 申請人:富瑪法姆股份公司