專利名稱：新的法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的制作方法
背景技術(shù)：
基于專利合作條約(PCT)的專利申請WO 95/00497(
公開日1995年1月5日)描述了能夠抑制酶--抑制法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶(FTase)以及抑制癌基因蛋白質(zhì)Ras的化合物。癌基因頻繁編碼信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的蛋白質(zhì)成分，導(dǎo)致刺激細(xì)胞生長和發(fā)生有絲分裂。癌基因在培養(yǎng)細(xì)胞中的表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化，其特征在于細(xì)胞在軟瓊脂中的生長能力和細(xì)胞密集集灶性生長缺乏非轉(zhuǎn)化細(xì)胞表現(xiàn)出的接觸抑制作用。一些癌基因的突變和/或過度表達(dá)往往與人類癌癥有關(guān)。
為了獲得轉(zhuǎn)化能力，Ras癌蛋白的前體必須經(jīng)受位于羧基端四肽的半胱氨酸殘基的法尼基化作用。因而，能催化這種變化的酶(亦即法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶)的抑制劑已表明為某些腫瘤(即其中Ras對轉(zhuǎn)化起作用的腫瘤)的抗癌劑。Ras的突變、致癌基因形式常見于許多人類癌癥中，最引人注意的是見于超過50％的結(jié)腸癌和胰腺癌中(Kohl等，Science，Vol.260，1834-1837，1993)。
鑒于法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的現(xiàn)實意義，對此領(lǐng)域所作的有益貢獻(xiàn)就在于提供可用于抑制法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶的其它化合物。而本發(fā)明則作出了這種貢獻(xiàn)。
發(fā)明概述本發(fā)明化合物對法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制作用先前尚無報道。因此，本發(fā)明提供了使用本發(fā)明化合物抑制法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶的方法，所述化合物能夠(i)在體外有效地抑制法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶，但對香葉基香葉基蛋白轉(zhuǎn)移酶I無抑制作用；(ii)阻斷由轉(zhuǎn)化Ras形式(法尼基受體)誘導(dǎo)的表型變化，但不阻斷改造為香葉基香葉基受體的轉(zhuǎn)化Ras形式所誘導(dǎo)的表型變化；(iii)阻斷法尼基受體Ras的胞內(nèi)加工，但不阻斷改造為香葉基香葉基受體的Ras的胞內(nèi)加工；和(iv)阻斷轉(zhuǎn)化Ras誘發(fā)的培養(yǎng)細(xì)胞異常生長。
本發(fā)明提供了通過施用有效量的本發(fā)明化合物抑制細(xì)胞(包括轉(zhuǎn)化細(xì)胞)異常生長的方法。細(xì)胞異常生長是指不受正常調(diào)節(jié)機(jī)制支配的細(xì)胞生長(如接觸抑制喪失)。這包括下列細(xì)胞的異常生長(1)表達(dá)激活Ras致癌基因的腫瘤細(xì)胞(腫瘤)；(2)由于另一基因的致癌突變導(dǎo)致其中Ras激活的腫瘤細(xì)胞；和(3)其中發(fā)生異常Ras激活的其它增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞。
本發(fā)明化合物為式1.0所示的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物 其中Q為 Z代表氫，烷基，芳基，芳烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基， 雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)烷基，雜環(huán)烷基烷基，環(huán)烯基，環(huán)烯基烷基，或-CY3Y4，其中Y3和Y4獨立地代表烷基和芳基，或者Y3和Y4與它們所連接的碳原子(-C)一起可以形成環(huán)烷基或環(huán)烯基環(huán)；其中R1，R2，R3，R20，R22，R30和R32獨立地代表氫，烷基，芳基，芳烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)烷基或雜環(huán)烷基烷基；R25可以代表氫，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜環(huán)烷基，雜環(huán)烷基烷基或-OR40，其中R40可以代表烷基，芳基，芳烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)烷基或雜環(huán)烷基烷基；Y代表芳基，雜芳基，雜環(huán)烷基或環(huán)烷基，t為0，1，2或3；w為0或1；和A不存在，氫，烷基，芳基，芳烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜環(huán)烷基，雜環(huán)烷基烷基，氰基，雜芳基或雜芳基烷基。
在另一實施方案中，本發(fā)明涉及用于抑制細(xì)胞異常生長的藥物組合物，它包括有效量的化合物(1.0)與可藥用載體。
在另一實施方案中，本發(fā)明涉及抑制細(xì)胞(包括轉(zhuǎn)化細(xì)胞)異常生長的方法，其包括對需要這種治療的哺乳動物(如人)施用有效量的化合物(1.0)。細(xì)胞異常生長是指不受正常調(diào)節(jié)機(jī)制支配的細(xì)胞生長(如接觸抑制喪失)。這包括下列細(xì)胞的異常生長(1)表達(dá)激活Ras致癌基因的腫瘤細(xì)胞(腫瘤)；(2)由于另一基因的致癌突變導(dǎo)致其中Ras激活的腫瘤細(xì)胞；(3)其中發(fā)生異常Ras激活的其它增殖性疾病的良性和惡性細(xì)胞；和(4)由除了Ras蛋白質(zhì)以外的其它機(jī)制激活的良性和惡性細(xì)胞。雖不擬囿于理論，但據(jù)信這些化合物通過阻斷G-蛋白異戊二烯化來抑制G-蛋白例如ras p21的功能而起作用，從而使得它們適于治療增殖性疾病如腫瘤生長與癌癥，或者通過抑制ras法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶，從而使得它們對ras轉(zhuǎn)化細(xì)胞表現(xiàn)出抗增殖活性。
要抑制的細(xì)胞可以是表達(dá)激活Ras致癌基因的腫瘤細(xì)胞。例如，可以被抑制的細(xì)胞類型包括胰腺腫瘤細(xì)胞，肺癌細(xì)胞，骨髓性白血病腫瘤細(xì)胞，甲狀腺囊腫瘤細(xì)胞，脊髓發(fā)育不良腫瘤細(xì)胞，表皮癌腫瘤細(xì)胞，膀胱癌腫瘤細(xì)胞，前列腺腫瘤細(xì)胞，乳腺腫瘤細(xì)胞或結(jié)腸腫瘤細(xì)胞。還有，經(jīng)用化合物(1.0)治療，可以通過抑制ras法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶而抑制細(xì)胞的異常生長。這種抑制可以發(fā)生于其中Ras蛋白由于非Ras基因的基因中致癌突變而被激活的腫瘤細(xì)胞。另一方面，化合物(1.0)還可以抑制除Ras蛋白質(zhì)之外的蛋白質(zhì)激活的腫瘤細(xì)胞。
本發(fā)明還提供了通過對需要這種治療的哺乳動物(例如人)施用有效量的化合物(1.0)而抑制腫瘤生長的方法。特別是，本發(fā)明提供了通過施用有效量的上述化合物抑制表達(dá)激活Ras致癌基因的腫瘤生長方法?？梢员灰种颇[瘤的實例包括、但不限于肺癌(如肺腺癌)，胰腺癌(諸如外分泌性胰腺癌之類胰腺癌)，結(jié)腸癌(例如結(jié)腸直腸癌，如結(jié)腸腺癌和結(jié)腸腺瘤)，骨髓性白血病(如急性骨髓性白血病(AML))，甲狀腺囊癌，脊髓發(fā)育不良綜合癥(MDS)，膀胱癌，黑素瘤，前列腺癌和乳腺癌以及表皮癌。
據(jù)信本發(fā)明還提供了抑制良性與惡性增殖性疾病的方法，其中由于其它基因的致癌突變而導(dǎo)致Ras蛋白被異常激活，即Ras基因本身并不因突變而被激活成致癌形式，并且所述抑制通過對需要這種治療的哺乳動物(例如人)施用有效量本文所述的N-取代脲化合物(1.0)實現(xiàn)。例如，良性增殖性疾病多發(fā)性神經(jīng)纖維瘤，或其中因酪氨酸激活致癌基因(如neu，src，abl，lck和fyn)的突變或過度表達(dá)而導(dǎo)致Ras激活的腫瘤可以用N-取代脲化合物(1.0)抑制。
在另一實施方案中，本發(fā)明涉及通過對哺乳動物，尤其是人，施用有效量的化合物(1.0)抑制法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶和致癌基因蛋白Ras法尼基化的方法。對患者施用能抑制法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶的本發(fā)明化合物可用于治療上述癌癥。發(fā)明祥述除非另有說明，本文所用的下列術(shù)語如下定義BOC-表示叔丁氧羰基；BOC-ON-表示[2-(叔丁氧羰氧基亞氨基)-2-苯基乙腈]；C-表示碳；CBZ-表示芐氧基羰基；ClCO2Et-氯甲酸乙酯；CPh3-表示三苯基甲基；環(huán)烷基-表示含3-20個碳原子、優(yōu)選3-7個碳原子的有支鏈或無支鏈飽和碳環(huán)；DBU-表示1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯；DCC-表示二環(huán)己基碳二亞胺；DCM-表示二氯甲烷；DIC-表示二異丙基碳二亞胺；
DIPEA-二異丙基乙胺DMAP-表示4-二甲氨基吡啶；DMF-表示N，N-二甲基甲酰胺；EDC(也稱為DEC)-表示1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽或1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽；EtOAc-乙酸乙酯；EtOH-乙醇；Et3N-三乙胺；FMOC-表示9-芴基甲氧基羰基；FMOC-Cl-表示氯甲酸9-芴基甲酯；HATU-表示[六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓]；HOAc或AcOH-乙酸；HOBT-羥基苯并三唑；盧剔啶-2，6-二甲基吡啶；MCPBA-表示間-氯過苯甲酸；Me-甲基；MeOH-甲醇；NaBH5CN-氰基硼氫化鈉Ph-表示苯基；TBAF-表示四丁基氟化銨；TFA-表示三氟乙酸；TFAA-三氟乙酸酐；THF-表示四氫呋喃；M+-表示質(zhì)譜中分子的分子離子；MH+-表示質(zhì)譜中分子的分子離子加氫；Bu-表示丁基；Et-表示乙基；Me-表示甲基；Ph-表示苯基；苯并三唑-1-基氧基表示 1-甲基-四唑-5-基硫基表示 烷基-(包括烷氧基、烷基氨基和二烷基氨基的烷基部分)-表示直鏈和支鏈碳鏈并且含有1-20個碳原子，優(yōu)選1-10個碳原子，更優(yōu)選1-6個碳原子；例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、己基、異壬基等；其中所述烷基可以任選地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)獨立取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、芳氧基、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12可以獨立地表示氫，烷基，烷氧基，芳基，芳烷基，雜芳基，雜芳烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜環(huán)烷基或雜環(huán)烷基烷基；鏈烯基-表示含有2-12個碳原子(優(yōu)選2-6個碳原子，且最優(yōu)選3-6個碳原子)并且具有至少一個碳-碳雙鍵的直鏈和支鏈碳鏈；其中所述鏈烯基可以任選地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)獨立取代鹵素、烷基、芳基、烷氧基、氨基、烷基氨基、氰基(-CN)、-CF3、二烷基氨基、羥基、氧代(＝O)、苯氧基、-OCF3、雜環(huán)烷基、-SO2NH2、-NHSO2R10、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10、-NCOR10或-COOR10；烷氧基-通過氧原子與鄰近結(jié)構(gòu)單元共價鍵連的1-20個碳原子的烷基部分，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基等；其中所述烷氧基基團(tuán)可任選地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)獨立取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、芳氧基、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義；芳基(包括芳烷基的芳基部分)-表示含有一個或兩個芳環(huán)的6-15個碳原子碳環(huán)基(如芳基為苯基)，其中所述芳基可任選地與一個其它芳基、環(huán)烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)稠合，條件是當(dāng)化合物(1.0)中的“Z”部分為芳基時，稠合芳基為二環(huán)(例如萘)，而不是三環(huán)或更大的稠合環(huán)系；并且其中所述芳環(huán)和/或所述稠合環(huán)中的任何可取代碳和氮原子可任選并且獨立地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)獨立取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、芳氧基、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義；芳烷基-表示如上定義的烷基，其中烷基部分的一個或多個氫原子已被一個或多個上述芳基基團(tuán)取代(例如芳烷基為芐基或苯乙基)；其中所述芳烷基基團(tuán)可任選地與一個其它芳基、環(huán)烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)稠合，條件是當(dāng)化合物(1.0)中的“Z”部分為芳烷基時，稠合芳烷基為二環(huán)(例如萘)，而不是三環(huán)或更大的稠合環(huán)系；其中所述芳烷基基團(tuán)可任選地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)獨立取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義；環(huán)烷基-表示含3-20個碳原子(優(yōu)選3-7個碳原子)的有支鏈或無支鏈飽和碳環(huán)(例如環(huán)烷基為環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等)；其中所述環(huán)烷基環(huán)可任選地與一個其它環(huán)烷基、環(huán)烯基或雜環(huán)烷基環(huán)稠合形成二環(huán)，而不是三環(huán)或更大的稠合環(huán)系；其中所述環(huán)烷基環(huán)和/或所述稠合環(huán)中的任何可取代碳和氮原子可任選并且獨立地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、芳氧基、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義；環(huán)烷基烷基-表示如上定義的烷基，其中烷基部分的一個或多個氫原子已被一個或多個上述環(huán)烷基環(huán)取代；其中所述環(huán)烷基烷基基團(tuán)可任選地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)獨立取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義；環(huán)烯基-表示具有一個或兩個不飽和鍵(即碳-碳雙鍵)并且含有3-20個碳原子、優(yōu)選3-7個碳原子的碳環(huán)，其中所述的一個或兩個不飽和鍵不會賦予環(huán)烯基環(huán)芳香特性；其中所述環(huán)烯基環(huán)可任選地與一個其它環(huán)烷基、環(huán)烯基或雜環(huán)烷基環(huán)稠合形成二環(huán)(例如降冰片烯基)，而不是三環(huán)或更大的稠合環(huán)系；其中所述環(huán)烯基環(huán)和/或所述稠合環(huán)中的任何可取代碳和氮原子可任選并且獨立地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義；環(huán)烯基烷基-表示如上定義的烷基，其中烷基部分的一個或多個氫原子被一個或多個上述環(huán)烯基環(huán)取代；其中所述環(huán)烯基烷基基團(tuán)可任選地與一個其它環(huán)烷基、環(huán)烯基或雜環(huán)烷基環(huán)稠合形成二環(huán)(例如降冰片烯基甲基)；其中所述環(huán)烯基烷基和/或所述稠合環(huán)中的任何可取代碳和氮原子可任選并且獨立地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義；鹵素-表示氟、氯、溴和碘；
雜烷基-表示被1-3個選自-O-、-S-和-N-的雜原子間隔的、含有1-20個碳原子(優(yōu)選1-6個碳原子)的直鏈或支鏈碳鏈；其中所述雜烷基中的任何可取代碳和氮原子可任選并且獨立地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義；雜芳基-表示具有至少一個選自O(shè)、S或N雜原子的環(huán)狀基團(tuán)，所述雜原子插入碳環(huán)結(jié)構(gòu)并具有足夠數(shù)量的離域pi電子以提供芳香特性，這種芳族雜環(huán)基含有2-14個碳原子(例如雜芳基為咪唑基)；其中所述雜芳基可任選地與一個芳基、環(huán)烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)稠合形成二環(huán)，而不是三環(huán)或更大的稠合環(huán)系；并且其中所述雜芳基和/或所述稠合環(huán)中的任何可取代碳或氮原子可任選并且獨立地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、芳烷基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義。代表性的雜芳基可以包括例如呋喃基、咪唑基、嘧啶基、三唑基、2-、3-或4-吡啶基或2-、3-或4-吡啶基N-氧化物，其中的吡啶基N-氧化物可表示為 雜芳基烷基-表示如上定義的烷基，其中的一個或多個氫原子已由一個或多個雜芳基基團(tuán)置換；其中所述雜芳基可任選地與一個芳基、環(huán)烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)稠合形成二環(huán)，而不是三環(huán)或更大的稠合環(huán)系；并且其中所述雜芳基和/或所述稠合環(huán)中的任何可取代碳或氮原子可任選并且獨立地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)取代其中所述雜芳基烷基基團(tuán)可任選被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)獨立取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-CH2NR12COR10、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義；雜環(huán)烷基-表示含有3-15個碳原子、優(yōu)選4-6個碳原子的飽和、有支鏈或無支鏈碳環(huán)，其中碳環(huán)被1-3個選自-O-、-S-或-N-的雜原子間斷，其中所述環(huán)可含有一個或兩個不會賦予該環(huán)具有芳香性質(zhì)的不飽和鍵；其中所述雜環(huán)烷基可任選地與一個芳基、環(huán)烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基環(huán)稠合形成二環(huán)，而不是三環(huán)或更大的稠合環(huán)系；并且其中所述雜環(huán)烷基和/或所述稠合環(huán)中的任何可取代碳或氮原子可任選并且獨立地及在環(huán)中任何碳原子如氮原子的取代可以任選并獨立地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、芳氧基、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義。代表性的雜環(huán)烷基基團(tuán)可以包括2-或3-四氫呋喃基、2-或3-四氫噻吩基、1-、2-、3-或4-哌啶基、2-或3-吡咯烷基、1-、2-或3-哌嗪基、2-或4-二噁烷基、嗎啉基、 其中R10定義如上，并且t為0，1或2。
雜環(huán)烷基烷基-表示如上定義的烷基，其中的一個或多個氫原子已由一個或多個雜環(huán)烷基基團(tuán)置換；其中所述環(huán)可包含一個或兩個不會賦予環(huán)芳香特性的不飽和鍵；并且其中所述雜環(huán)烷基烷基可任選地被一個、兩個、三個或更多個下列基團(tuán)獨立取代鹵素、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基(-CN)、-CF3、氧代(＝O)、芳氧基、-OR10、-OCF3、雜環(huán)烷基、雜芳基、-NR10R12、-NHSO2R10、-SO2NH2、-SO2NHR10、-SO2R10、-SOR10、-SR10、-NHSO2、-NO2、-CONR10R12、-NR12COR10、-COR10、-OCOR10、-OCO2R10或-COOR10，其中R10和R12如上定義。
某些本發(fā)明化合物可能會以不同的立體異構(gòu)形式(例如對映體、非對映體和阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體)存在。本發(fā)明涉及所有這些以純凈形式和包括外消旋混合物在內(nèi)的混合物形式存在的立體異構(gòu)體。
某些化合物的性質(zhì)呈酸性。例如具有羧基或酚類羥基的化合物。這些化合物可以形成可藥用鹽。這類鹽的實例可以包括鈉、鉀、鈣、鋁、金和銀鹽。同樣還包括與可藥用胺如例如氨、烷基胺、羥基烷基胺、N-甲基葡糖胺等所成的鹽。
某些堿性化合物也可以形成可藥用鹽，如酸加成鹽。例如，吡啶氮原子可以與強酸成鹽，而具有堿性取代基如氨基的化合物也可以與弱酸成鹽。成鹽用的合適酸的實例包括鹽酸、硫酸、磷酸、乙酸、檸檬酸、草酸、丙二酸、水楊酸、蘋果酸、富馬酸、琥珀酸、抗壞血酸、馬來酸、甲磺酸以及本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的其它無機(jī)酸或羧酸。這些鹽可通過使游離堿形式化合物與足量成鹽所需的酸以常規(guī)方式接觸而制備。通過用合適的稀堿水溶液如氫氧化鈉、碳酸鉀、氨和碳酸氫鈉的稀水溶液處理鹽，可以再生為游離堿形式。游離堿形式和它們的各種鹽形式在某些物理性質(zhì)上多少有些不同，如在極性溶劑中的溶解性，但就本發(fā)明目的而言，所述酸和堿的鹽與它們的相應(yīng)游離堿形式在其它方面的性質(zhì)卻是等同的。
所有這些酸和堿的鹽都為本發(fā)明范圍內(nèi)的可藥用鹽，而且對本發(fā)明的目的而言，所有酸和堿的鹽與相應(yīng)化合物的游離形式是等同的。 本發(fā)明化合物可以按照下列路線制備。
庫(Library)制備化合物庫通過平行合成制備。這些化合物的通式結(jié)構(gòu)見結(jié)構(gòu)式1所示。側(cè)鏈組胺上的“A”基團(tuán)和哌嗪N-4上的“Z”基團(tuán)在化合物庫中是可變的。庫中的每一化合物都含有位于哌嗪核N-1位上的甲基磺酸酯(methyl sulfonate)(結(jié)構(gòu)式1)。

圖1 參照路線A，側(cè)鏈胺2通過用相應(yīng)的三氟甲磺酸酯處理-Boc組胺1、隨后除去Boc基團(tuán)制得?；衔飵斓闹苽湓赥entaGel(德國Rapp有限公司商標(biāo))樹脂3上進(jìn)行，這種樹脂被4-(4-甲酰基-3-甲氧基苯氧基)丁酸4(見路線1所示)官能化形成官能化樹脂5。TentaGel樹脂為低交聯(lián)聚苯乙烯與聚乙二醇的復(fù)合材料，并且末端已被氨基官能化。合成在Merrifield搖動反應(yīng)器中通過利用官能化樹脂5的酸裂解連接基上的醛還原胺化側(cè)鏈胺2開始，首先生成6。繼而偶聯(lián)N-4-Fmoc N-1-Boc哌嗪羧酸7與6得到8。除去8的Fmoc基團(tuán)得到9。干燥樹脂9，進(jìn)而填裝到Robbins FlexChem裝置(block)(96孔)內(nèi)，并在該裝置中進(jìn)行后續(xù)反應(yīng)。樹脂9在DMF中和2％HOAc存在下用各種相應(yīng)的醛和NaBH3CN還原烷基化，或者在CH2Cl2中用相應(yīng)的酰氯和盧剔啶或者在CH2Cl2中用磺酰氯酰化，或者在CH2Cl2中用異氰酸酯和DIPEA處理。樹脂10依次用10％HCl/MeOH和甲磺酰氯處理，產(chǎn)生樹脂11。使用三氟乙酸從樹脂1中裂解出產(chǎn)物12。路線1 路線2 PS 461400的制備方法(路線2)1.化合物2的制備。-75℃及攪拌下，在Ar氛中向三氟甲磺酸酐(1.9mL，11.3mmol)的二氯甲烷(35mL)溶液內(nèi)逐滴加入4-氰基芐醇(1)(1.37g，10.3mmol)和二異丙基乙胺(1.97mL，11.3mmol)在二氯甲烷(12mL)中的溶液。-78℃繼續(xù)攪拌20分鐘，然后加入N-Bis-Boc-組胺(3.2g，10.3mmol)的二氯甲烷(35mL)溶液。緩慢溫?zé)岱磻?yīng)物到室溫，攪拌過夜。反應(yīng)混合物用碳酸鈉飽和溶液(30mL)洗滌。干燥(Na2SO4)有機(jī)相，然后真空除去溶劑。殘留物通過柱色譜純化(使用5％MeOH/CH2Cl2)，從而得到1.38g產(chǎn)物，產(chǎn)率41％。MSm/z 327(MH+).將這一化合物在CH2Cl2(20mL)中用25％三氟乙酸處理1小時。然后真空除去溶劑。將殘留物溶于5％HCl(15mL)，用CH2Cl2(10mL×2)洗滌。水層用NaOH堿化至pH＝9，進(jìn)而用乙酸乙酯(30mL×4)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)相，真空除去溶劑后得到600mg所需胺2，產(chǎn)率66％。MSm/z 227(MH+)。2.化合物3的制備。攪拌下，向胺(2)(600mg，2.65mmol)和N-4-Fmoc-N-1-Boc-哌嗪羧酸(1g，2.21mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液內(nèi)加入DCC(547mg，2.65mmol)和HOBt(358mg，2.65mmol)。攪拌反應(yīng)物過夜。過濾反應(yīng)混合物。濾液用水(20mL)洗滌。干燥(硫酸鈉)有機(jī)相并真空除去溶劑。殘留物進(jìn)而通過快速柱色譜純化，以5％MeOH/CH2Cl2洗脫，得到酰胺。將此酰胺在CHCl3(10mL)中用20％哌啶處理2小時。真空除去溶劑。殘留物通過柱色譜純化，以5-10％MeOH/CH2Cl2洗脫，得到713mg所需胺，產(chǎn)率74％。MSm/z439(MH+)。3.化合物4的制備。將胺3(40mg，0.09mmol)溶于MeOH(3mL)，加入環(huán)己基乙醛(23μL，0.18mmol)和氰基硼氫化鈉(182μL，1.0MTHF溶液，0.18mmol)。攪拌反應(yīng)過夜。真空除去溶劑，進(jìn)而將殘留物通過快速柱色譜純化，以3-5％MeOH/CH2Cl2洗脫，從而得到22mg所需產(chǎn)物，產(chǎn)率44％。MSm/z 549(MH+)。4.PS461400的制備。攪拌下，向化合物4(22mg，0.04mmol)的CH2Cl2(2mL)溶液內(nèi)加入三氟乙酸(0.5mL)。攪拌混合物1小時，真空除去溶劑。殘留物在高真空線上抽吸2小時，進(jìn)而溶于CH2Cl2(2mL)。向此溶液中加入二異丙基乙胺(35μL，0.2mmol)和異氰酸環(huán)己酯(28.5μL，0.2mmol)。攪拌反應(yīng)物過夜，再溶于水(10mL)，以CH2Cl2(15mL×2)提取。干燥(Na2SO4)有機(jī)層，并真空除去溶劑。殘留物通過快速柱色譜純化，以4％MeOH/CH2Cl2洗脫，得11mg所需產(chǎn)物，產(chǎn)率48％.MSm/z 574(MH+)。
采用與上述實例基本相同的反應(yīng)路線，使用合適的醇1可制得下列化合物PS287238 PS812520 PS465781 PS159773 PS372802PS793961 PS478500 PS783003 PS593455 PS320451PS477090 PS516972 PS410892 PS241936 PS409643PS725556 PS769295 PS075114 PS990951 PS192638PS354164 PS395570 PS956973 PS859989 PS467023路線3 PS 321542的制備方法(路線3)1.化合物3的制備。攪拌下，向酸酐1(100mg，0.39mmol)的CH2Cl2(4mL)溶液內(nèi)加入胺1(105mg，0.39mmol)在MeOH/CH2Cl2(0.5mL/2mL)混合液中的溶液。攪拌反應(yīng)1小時。冷卻反應(yīng)物到0℃，加入異氰酸環(huán)己酯(111μL，0.78mmol)。攪拌反應(yīng)過夜。將反應(yīng)物分配到CH2C12(40mL)與飽和NaCl溶液(20mL)之間。干燥(Na2SO4)有機(jī)層，真空除去溶劑后得到200mg所需產(chǎn)物，產(chǎn)率85％.MSm/z 607(MH+)。2.化合物PS321542的制備。攪拌下，向化合物3(137mg，0.226mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液內(nèi)加入三氟乙酸(1mL)。攪拌混合物1小時，然后真空除去溶劑。將殘留物分配到1N NaOH(20mL)與CH2Cl2(20mL)之中。水層用CH2Cl2和EtOAc提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)相，并在真空下除去溶劑。將所得胺溶于MeOH(3mL)。向這一溶液內(nèi)加入環(huán)己基乙醛(57mg，0.45mmol)和氰基硼氫化鈉(1.0M THF溶液，452μL，0.45mmol)。攪拌反應(yīng)物過夜。真空除去溶劑，將殘留物分配到1N NaOH(20mL)與CH2Cl2(20mL)之間。干燥(Na2SO4)并蒸發(fā)有機(jī)層。殘留物進(jìn)而通過快速柱色譜純化，以4％MeOH/CH2Cl2洗脫，得到52mg產(chǎn)物，產(chǎn)率37％。MSm/z 617(M+)。
采用與上述實例基本相同的反應(yīng)路線，使用外消旋酸酐2制得下列化合物PS815156 PS288326 PS130057 PS064691 PS028348PS813558 PS319448 PS420083 PS259236 PS437810PS381385 PS201633路線4 1-(2-氨基乙基)-5-芐基咪唑(10)和1-(2-氨基乙基)-4-芐基咪唑(12)的制備步驟(路線4)1.化合物2的制備。0℃及攪拌下，向咪唑(5g，73.4mmol)的CH2Cl2(30mL)溶液內(nèi)逐滴加入三乙胺(15.4mL，110mmol)和二甲氨基磺酰氯(8.3mL，77.1mmol)。緩慢溫?zé)岱磻?yīng)物至室溫，攪拌過夜。加水(30mL)終止反應(yīng)，用CH2Cl2(30mL×2)提取。干燥(Na2SO4)有機(jī)相，真空除去溶劑得到化合物2，產(chǎn)率89％.MSm/z 176(MH+)。2.化合物5的制備。-78℃及攪拌下，在Ar氛中向化合物2(1.0g，5.72mmol)的THF(20mL)溶液內(nèi)加入n-BuLi的己烷溶液(2.5M溶液，2.44mL，6.12mmol)。-78℃攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，然后加入三乙基氯硅烷(1.92mL，11.44mmol)。室溫攪拌反應(yīng)物5小時，然后在減壓下通過溫和加熱除去溶劑和過量的氯硅烷，得到中間體3。向中間體3中加入THF(20mL)，冷卻所得溶液至-78℃。加入仲丁基鋰的環(huán)己烷溶液(1.3M溶液，8.8mL，11.44mmol)，-78℃攪拌此混合物30分鐘，然后再加入芐基溴(2.04mL，17.16mmol)。-78℃下繼續(xù)攪拌30分鐘，繼而室溫攪拌過夜。真空除去溶劑，得到中間體4。將中間體4與2N HCl(50mL)一同攪拌3小時，然后用乙醚(20mL×2)洗滌所得混合物。水相用NaOH(40％w/w)堿化至pH＝11，爾后用乙醚(50mL×3)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)相，并真空除去溶劑。殘留物進(jìn)而通過快速柱色譜純化，以35％己烷/Et0Ac洗脫，從而得到560mg化合物5，產(chǎn)率37％.MSm/z 266(MH+)。3.化合物6的制備。在4％NaOH(w/w，100mL)中回流化合物5(560mg，2.11mmol)過夜。真空除去溶劑。殘留物用THF研制，過濾并干燥(Na2SO4)。減壓除去溶劑后得到240mg 4(5)-芐基咪唑(6)，產(chǎn)率72％。MSm/z 159(MH+)。4. 1-(2-氨基乙基)-5-芐基咪唑(10)的制備。攪拌下，向化合物6(230mg，1.45mmol)在H2O/二噁烷(1∶1，20mL)中的溶液內(nèi)加入碳酸鈉(31mg，0.29mml)和二碳酸二叔丁酯(400mg，1.74mmol)。攪拌混合物過夜，然后用CH2Cl2(40mL×2)提取。水洗(20mL)合并的有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，進(jìn)而真空除去溶劑，從而得到305mg化合物7，產(chǎn)率82％.MSm/z 259(MH+)。-78℃及攪拌下，在氬氣氛中向三氟甲磺酸酐(219μL，1.3mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液內(nèi)加入化合物8(249mg，1.3mmol)與DIEA在CH2Cl2(5mL)中的溶液。-78℃繼續(xù)攪拌20分鐘，逐滴加入化合物7的CH2Cl2(5mL)溶液。逐漸溫?zé)岱磻?yīng)物至室溫反應(yīng)過夜。向反應(yīng)物中加入飽和NaHCO3(10mL)?；旌衔镉肅H2Cl2(20mL×2)提取。水(10mL)洗有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并真空除去溶劑。殘留物進(jìn)而通過柱色譜純化，以1-5％MeOH/CH2Cl2洗脫，得到60mg化合物9。MSm/z 332(MH+)。隨后將化合物9溶于MeOH(2mL)，加入肼(10μL)。攪拌反應(yīng)過夜，爾后真空除去溶劑。將殘留物溶于0.1N HCl(10mL)，用EtOAc(10mL)洗滌。水相用NaOH堿化至pH＝11，接著用EtOAc(20mL×3)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層，真空除去溶劑后得到標(biāo)題化合物10.MSm/z 202(MH+)。5. 1-(2-氨基乙基)-4-芐基咪唑(12)的制備。-78℃及攪拌下，在氬氣氛中向三氟甲磺酸酐(245μL，1.46mmol)的CH2Cl2(5mL)加入化合物8(278mg，1.46mmol)與DIEA在CH2Cl2(5mL)中的溶液。-78℃繼續(xù)攪拌20分鐘，逐滴加入化合物6的CH2Cl2(5mL)溶液。逐漸溫?zé)岱磻?yīng)物至室溫反應(yīng)過夜。向反應(yīng)物中加入飽和NaHCO3(10mL)?；旌衔镉肅H2Cl2(20mL×2)提取。用水(10mL)洗有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并真空除去溶劑。殘留物進(jìn)而通過柱色譜純化，以1-5％MeOH/CH2Cl2洗脫，得到112mg化合物11.MSm/z 332(MH+)。隨后將化合物11溶于MeOH(2mL)，加入肼(10μL)。攪拌反應(yīng)過夜，并真空除去溶劑。將殘留物溶于0.1N HCl(10mL)，用EtOAc(10mL)洗滌。水相用NaOH堿化至pH＝11，接著用EtOAc(20mL×3)提取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)層，真空除去溶劑后得到標(biāo)題化合物12.MSm/z 202(MH+)。
應(yīng)用路線2中所述方法，使用化合物10制備PS319448。同樣應(yīng)用路線2中所述方法，使用化合物12制備PS204446。
保護(hù)與脫保護(hù)化合物用的試劑和反應(yīng)條件是眾所周知的，例如見T.W.Greene和P.Wuts在《有機(jī)合成中的保護(hù)基》，第2版，WileyInterscience，N.Y.1991，p.473中所述。
本發(fā)明化合物及其制備用的起始原料用下列實施例舉例說明，但它們不得認(rèn)作是對本發(fā)明內(nèi)容范圍的限制。在本發(fā)明范圍內(nèi)，其它可供選擇的機(jī)制途徑和相似結(jié)構(gòu)對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的，例如WO95/10516中所述的方法。
式(1.0)化合物可以采用常規(guī)方法自反應(yīng)混合物中分離出來，例如，用有機(jī)溶劑從水中提取反應(yīng)混合物、蒸發(fā)有機(jī)溶劑、隨后通過硅膠或其它適宜的色譜介質(zhì)進(jìn)行層析?；蛘?，可以將化合物(1.0)溶在與水混溶的溶劑如甲醇中，將甲醇溶液加到水中以沉淀化合物，并且通過過濾或離心分離沉淀物。
本發(fā)明化合物及其制備用的起始原料用下列實施例舉例說明，但它們不得認(rèn)作是對本發(fā)明范圍的限制。實施例1 氮氣氛下，105℃溫和回流由10(50mg，0.108mmol，1.0eq.)、1-氯-1-苯基乙烷(170μl，1.29mmol，12.0eq.)和三乙胺(180μl，1.29mmol，12.0eq.)在無水對-二噁烷(10ml)中形成的溶液12小時。冷卻溶液到室溫，于30℃真空除去揮發(fā)物。殘留物吸收到蒸餾水(10ml)中，用二氯甲烷(5×5ml)提取。合并的有機(jī)提取物用鹽水(5ml)洗滌、硫酸鈉干燥、過濾、并于30℃真空濃縮。經(jīng)制備級硅膠薄層層析(CH3CN∶2N NH3/MeOH＝90∶10 v/v作為洗脫劑)后得到亮黃色半固體物N2-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-N1-環(huán)己基-4-(1-苯基乙基)-1，2(R)-哌嗪二甲酰胺(12mg，0.021mmol，20％)。HR-MS(FAB)C33H42N7O2([M+H]+)的計算值568.3400.實測值568.3407.實施例2 室溫及攪拌下，在5分鐘內(nèi)向酸酐8(701mg，2.74mmol，1.2eq.)的無水二氯甲烷(10ml)溶液內(nèi)逐滴加入14(500mg，2.28mmol，1.0eq.)的無水二氯甲烷(5ml)溶液。向溶液中通入氮氣流以驅(qū)除析出的二氧化碳，并在通氮氣的情形下攪拌所得無色溶液1小時。停止通氣，5分鐘內(nèi)逐滴加入異氰酸環(huán)己酯(594ml，4.56mmol，2.0eq.)。室溫攪拌此亮黃色溶液1小時。在30℃下真空除去揮發(fā)物。將所得粘性油狀物分配到二氯甲烷(25ml)與1N NaOH水溶液(25ml)之間。水層用二氯甲烷(3×10ml)提取。合并的有機(jī)提取物用鹽水(5ml)洗滌、硫酸鈉干燥、過濾并于30℃真空濃縮。制備級硅膠薄層層析(CH2Cl2∶2N NH3/MeOH＝90∶10 v/v)得到1-[(環(huán)己基氨基)羰基]-2(R)-[[[2-[1-(4-氟苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]氨基]羰基]-4-哌嗪羰酸1，1-二甲基乙酯(190mg，0.34mmol，15％)，為灰白色泡沫物。熔點72℃(分解)。MS(FAB+)m/e 557([M+H]+)。HR-MS(FAB)C29H42FN6O4([M+H]+)的計算值557.3252.實測值557.3240.實施例3 將實施例2的標(biāo)題化合物(190mg，0.34mmol，1.0eq.)溶于無水二氯甲烷(10ml)與三氟乙酸(10ml)的混合液中。在氮氣氛中室溫攪拌所形成的黃色溶液1小時。于30℃真空蒸發(fā)揮發(fā)物，剩余的粘性油狀物直接通過硅膠快速層析(CH2Cl2∶2N NH3/MeOH＝90∶10 v/v)，從而得到灰白色固體N2-[2-[1-[(4-氟苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-N1-環(huán)己基-1，2(R)-哌嗪甲酰胺(121mg，0.27mmol，78％)。實施例4 0℃及攪拌下，在氮氣氛中向10(50mg，0.108mmol，1.0eq.)和苯甲醛(R＝苯基)(0.336mmol，3.1eq.)在冰乙酸(0.5ml)與無水二氯甲烷(10ml)混合液中的溶液內(nèi)分批(3×25mg)加入三乙酰氧基硼氫化鈉(75mg，0.336mmol，3.1eq.)。緩慢(3小時)溫?zé)峄旌衔锏绞覝?，另攪?2小時。于30℃真空除去揮發(fā)物。殘留物吸收到1N NaOH水溶液(10ml)內(nèi)，用二氯甲烷(5×5ml)提取。合并的有機(jī)提取物用鹽水(5ml)洗滌、硫酸鈉干燥、過濾并于25℃真空濃縮。經(jīng)制備級硅膠薄層層析(使用CH2Cl2∶2N NH3/MeOH＝90∶10 v/v或CH3CN∶2NNH3/MeOH＝90∶10 v/v作為洗脫劑)得到產(chǎn)物。
在實施例5-28中，采用與實施例4所述基本相同的方法，只是用相應(yīng)的醛替換苯甲醛，從而制得標(biāo)題化合物。實施例5 分解點80℃實施例6 計算值570.3556.精確質(zhì)量([M+H]+)計算值570.3556.實測值570.3570.實施例7 分解點90℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值504.4339.實測值504.4313.實施例8 分解點85℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值561.2760.實測值561.2755.實施例9 分解點65℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值548.3713實測值548.3712.實施例10 分解點155℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值579.3196.實測值579.3200.實施例11 分解點95℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值579.3196.實測值579.3189.實施例12 分解點油狀物精確質(zhì)量([M+H]+)計算值584.3349.實測值584.3352.實施例13 分解點半固體精確質(zhì)量([M+H]+)計算值560.3713.實測值560.3712.實施例14 分解點半固體精確質(zhì)量([M+H]+)計算值572.3149.實測值572.3145.實施例15 分解點165℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值622.3117.實測值622.3134.實施例16 分解點180℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值588.2854.實測值588.2850.實施例17 分解點半固體精確質(zhì)量([M+H]+)計算值632.2349.實測值632.2334.實施例18 分解點油狀物精確質(zhì)量([M+H]+)計算值597.3665.實測值597.3653.實施例19 分解點205℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值612.3298.實測值612.3308.實施例20 分解點120℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值611.3458.實測值611.3474.實施例21 分解點100℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值611.3400.實測值611.3424.實施例22 分解點185℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值568.3400.實測值568.3410.實施例23 分解點半固體精確質(zhì)量([M+H]+)計算值570.3193.實測值570.3194.實施例24. 分解點185℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值622.2464.實測值622.2452.實施例25 分解點130℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值588.2854.實測值588.2857.實施例26 分解點160℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值584.3349.實測值584.3347.實施例27 分解點130℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值584.3349.實測值584.3356.實施例28 分解點110℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值588.2854.實測值588.2844.
使用實施例3的標(biāo)題化合物，按照與實施例4所述基本相同的方法可以制得下列化合物。實施例28A 分解點155℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值547.3197實測值547.3192實施例28B 分解點165℃精確質(zhì)量([M+H]+)計算值565.3103實測值565.3106實施例28CN4-苯甲基-N2-[2-[1-[(4-氯苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-N1-環(huán)己基-1，2(R)-哌嗪二甲酰胺 0℃下，向溶在冰乙酸(0.5mL)與無水二氯甲烷(10ml)中的制備實施例12標(biāo)題化合物(75mg，0.16mmol)與苯甲醛(0.05mL，0.5mmol)內(nèi)加入三乙酰氧基硼氫化鈉(102mg，0.5mmol)，溫?zé)崴没旌衔镏潦覝?，另攪?2小時。真空濃縮反應(yīng)混合物，加二氯甲烷稀釋，并用1N NaOH(水溶液)洗滌。有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥、過濾、真空濃縮、并通過硅膠制備板色譜純化，使用7％MeOH(用氨2M飽和)-CH3CN作為洗脫劑，從而得到白色固體標(biāo)題化合物(60mg，MH+＝563，mp＝116.2℃)。實施例28DN4-苯甲基-N2-[2-[1-(苯乙基)-1H-咪唑-5-基]乙基]-N1-環(huán)己基-1，2(R)-哌嗪二甲酰胺 0℃下，向溶在冰乙酸(0.5mL)與無水二氯甲烷(10ml)中的制備實施例12A標(biāo)題化合物(75mg，0.17mmol)和苯甲醛(0.05mL，0.5mmol)內(nèi)加入三乙酰氧基硼氫化鈉(108mg，0.5mmol)，溫?zé)崴没旌衔镏潦覝?，另攪?2小時。真空濃縮反應(yīng)混合物，加二氯甲烷稀釋，并用1N NaOH(水溶液)洗滌。有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥、過濾、真空濃縮、并通過制備板色譜(硅膠)純化，使用7％MeOH(用氨2M飽和)-CH3CN作為洗脫劑，從而得到白色固體標(biāo)題化合物(61mg，MH+＝543，mp＝64.4℃)。實施例28EN-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-1-(1-氧代丙基)-4-苯基(甲基)-2(R)-哌嗪二甲酰胺 向制備實施例11的標(biāo)題化合物(50mg，0.12mmol，1.0eq)和三乙胺(33mL，0.24mmol)在無水二氯甲烷(2ml)中的溶液內(nèi)加入丙酰氯(15.2mL，0.18mmol)。所形成的混合物在氮氣氛中室溫攪拌48小時，然后用飽和NaHCO3(水)溶液終止反應(yīng)。混合物用二氯甲烷提取，進(jìn)而用無水硫酸鈉干燥。過濾有機(jī)相，真空濃縮，并將殘留物通過制備板色譜(硅膠)純化，使用氫氧化銨飽和的6％甲醇-二氯甲烷洗脫，得到灰白色固體標(biāo)題化合物(38.1mg，mp＝88.2-168.6℃，MH+＝485)。實施例28FN-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-1-(1-氧代丁基)-4-苯基(甲基)-2(R)-哌嗪二甲酰胺 按照實施例28E所述的類似方法，但使用丁酰氯代替丙酰氯，從而制得灰白色固體標(biāo)題化合物(34.3mg，mp＝82.32-142.5℃，MH+＝499)。實施例28G1-苯甲?；?N-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-4-苯甲基-2(R)-哌嗪二甲酰胺 按照實施例28E所述的類似方法，但使用苯甲酰氯代替丙酰氯，從而制得灰白色固體標(biāo)題化合物(33.2mg，mp＝115.3-170.3℃，MH+＝533)。實施例28H1-乙?；?N-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-4-(苯甲基)-2(R)-哌嗪二甲酰胺 按照實施例28E所述的類似方法，但使用乙酰氯代替丙酰氯，從而制得灰白色固體標(biāo)題化合物(44.0mg，mp＝93.0-174.9℃，MH+＝471)。實施例28IN-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-1-苯基乙?；?4-(苯甲基)-2(R)-哌嗪二甲酰胺 按照實施例28E所述的類似方法，但使用苯乙酰氯代替丙酰氯，從而制得灰白色固體標(biāo)題化合物(57.7mg，45％，mp＝85.6-96.7℃，MH+＝547)。實施例28JN-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-1-(甲磺酰基)-4-(苯甲基)-2(R)-哌嗪甲酰胺
按照實施例28E所述的類似方法，但使用甲磺酰氯代替丙酰氯，從而制得灰白色固體標(biāo)題化合物(52.4mg，mp＝96.5-161.7℃，MH+＝507)。實施例28KN-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-1-(乙磺?；?-4-(苯甲基)-2(R)-哌嗪甲酰胺 按照實施例28E所述的類似方法，但使用乙磺酰氯代替丙酰氯，從而制得灰白色固體標(biāo)題化合物(40.4mg，mp＝97.3-150.2℃，MH+＝521)。實施例28LN-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-1-(苯磺?；?-4-(苯甲基)-2(R)-哌嗪甲酰胺 按照實施例28E所述的類似方法，但使用苯磺酰氯代替丙酰氯，從而制得灰白色固體標(biāo)題化合物(50mg，75％，mp＝105.7-166.5℃，MH+＝569)。實施例28MN-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-1-[(苯甲基)磺?；鵠-4-(苯甲基)-2(R)-哌嗪甲酰胺 按照實施例28E所述的類似方法，但使用芐基磺酰氯代替丙酰氯，從而制得灰白色固體標(biāo)題化合物(26.8mg，mp＝118.1-180.5℃，MH+＝583)。實施例28NN2-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-N1-苯基-4-(苯甲基)-1，2(R)-哌嗪甲酰胺 按照制備例12所述的類似方法，但使用制備例11的標(biāo)題化合物，并用異氰酸苯酯替代異氰酸環(huán)己酯，從而制得灰白色固體標(biāo)題化合物(28.8mg，mp＝128.0-139.2℃，MH+＝548)。實施例280N2-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-N1-(1，1-二甲基乙基)-4-(苯甲基)-1，2(R)-哌嗪二甲酰胺
按照制備例12所述的類似方法，但使用制備例11的標(biāo)題化合物，并用異氰酸叔丁酯替代異氰酸環(huán)己酯，從而制得灰白色固體標(biāo)題化合物(66.8mg，mp＝97.8℃，MH+＝528)。實施例28PN-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-4-(苯甲基)-1-(4-吡啶基乙?；?-2(R)-哌嗪甲酰胺N1-氧化物 向制備例11的標(biāo)題化合物(100mg，0.23mmol)中加入HOBt(47mg，0.35mmol)、DEC(67mg，0.35mmol)、吡啶基乙酸N-氧化物(53mg，0.35mmol)、NMM(39mL，0.35mmol)和無水DMF(10mL)?；旌衔镌诘獨夥罩惺覝財嚢柽^夜。真空濃縮混合物，加二氯甲烷稀釋，并用碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌。有機(jī)相用無水MgSO4干燥、過濾并真空濃縮。殘留物進(jìn)而通過制備板色譜(硅膠)純化，使用水合氫氧化銨飽和的6％MeOH-98％CH2Cl2，從而得到灰白色固體標(biāo)題化合物(54mg，MH-＝564)。實施例28Q.1-[[1-(氨基羰基)-4-哌啶基]乙?；鵠-N-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-4-(苯甲基)-2(R)-哌嗪甲酰胺 按照實施例28P所述的類似方法，但使用制備例11的標(biāo)題化合物，并用制備例中得到的哌啶基乙酸替代吡啶基乙酸N-氧化物，從而制得灰白色固體標(biāo)題化合物(76mg，55％，mp＝118.5℃，MH+＝597)。實施例28RN2-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-N1-環(huán)己基-4-(苯磺?；?-1，2(R)-哌嗪二甲酰胺 向制備例8與9得到的標(biāo)題化合物(50mg，0.12mmol，1.0eq)和三乙胺(0.05mL，0.36mmol)在無水二氯甲烷(3ml)中的溶液內(nèi)加入苯磺酰氯(0.02mL，0.12mmol)。所得混合物在氮氣氛中室溫攪拌72小時，然后另外加二氯甲烷稀釋，用氫氧化鈉水溶液(1M)提取并以無水硫酸鎂干燥。過濾有機(jī)相，真空濃縮，并將殘留物通過制備板色譜(硅膠)純化，使用10％甲醇(被氨飽和)-90％乙腈洗脫，進(jìn)而使用水合氫氧化銨飽和的5％甲醇-二氯甲烷再次純化，從而制得橙色固體標(biāo)題化合物(5mg，mp＝143.6℃，MH+＝604)。實施例28SN1-環(huán)己基-N2-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]-N2，4-雙(苯甲基)-1，2(R)-哌嗪二甲酰胺 向?qū)嵤├?8Y標(biāo)題化合物(0.13g，0.3mmol)的無水二氯甲烷(3ml)溶液中加入異氰酸環(huán)己酯(0.054mL，0.43mmol)，室溫攪拌所得溶液過夜，然后真空濃縮。殘留物通過制備板色譜(硅膠)純化(使用水合氫氧化銨飽和的5％MeOH-CH2Cl2)，從而制得白色固體標(biāo)題化合物(164mg，mp＝89.1℃，MH+＝543)。實施例28TN1-(1，1-二甲基乙基)-N2-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]-N2，4-雙(苯甲基)-1，2(R)-哌嗪二甲酰胺 向?qū)嵤├?8Y標(biāo)題化合物(0.13g，0.3mmol)的無水二氯甲烷(3ml)溶液中加入異氰酸叔丁酯(0.05mL，0.43mmol)，室溫攪拌所得溶液過夜，然后真空濃縮。殘留物通過制備板色譜(硅膠)純化(使用水合氫氧化銨飽和的5％MeOH-CH2Cl2)，從而得到白色固體標(biāo)題化合物(131mg，mp＝57.8℃，MH+＝517)。實施例28U.1-[(環(huán)己基氨基)羰基]-2(R)-[[[2-(2-甲基-1H-苯并咪唑-1-基)乙基]氨基]羰基]-4-哌嗪羧酸1，1-二甲基酯 室溫攪拌由制備例14的標(biāo)題化合物(0.9g，5.14mmol)和制備例中得到的酸酐(1.398g，1.05eq)在無水二氯甲烷(10ml)中形成的溶液過夜。再加入另一份酸酐(0.105g)，1小時后向反應(yīng)混合物中加入異氰酸環(huán)己酯(0.98mL，7.71mmol)，進(jìn)而另攪拌1.5小時。真空濃縮并且通過快速柱色譜(硅膠)純化，使用氫氧化銨飽和的1-3％MeOH-CH2Cl2作為洗脫劑，從而得到白色固體標(biāo)題化合物(1.82g，mp＝126.9-128.9℃，MH+＝513)。實施例28V. 4-(1，1-二甲基乙基)，1-(苯甲基)-2(R)-[[[2-(2，4-二甲基-1H-咪唑-1-基)乙基]氨基]羰基]-1，4-哌嗪二羧酸酯和4-(1，1-二甲基乙基)，1-(苯甲基)-2(R)-[[[2-(2，5-二甲基-1H-咪唑-1-基)乙基]氨基]羰基]-1，4-哌嗪二羧酸酯 室溫攪拌由制備例15的標(biāo)題化合物(2.12g，15.2mmol)、三乙胺(30.4mmol)和制備例中得到的酸酐(3.89g，15.2mmol)在無水二氯甲烷(30ml)中溶解形成的溶液30分鐘。加入芐氧基羰基琥珀酰亞胺(4.17g，16.7mmol)，室溫攪拌所得混合物過夜。真空濃縮，并且通過快速柱色譜(硅膠)純化，使用氫氧化銨飽和的2％MeOH-CH2Cl2作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物(2.57g)。利用5％異丙醇-95％己烷-0.2％二乙胺通過HPLC分離位置異構(gòu)體，從而得到2，4-二甲基異構(gòu)體(mp＝64.2℃，MH+＝486)和2，5-二甲基異構(gòu)體(mp＝71.5℃，MH+＝486)。實施例28W. N1-環(huán)己基-N2-[2-(2-甲基-1H-苯并咪唑-1-基)乙基]-4-(苯甲基)-1，2(R)-哌嗪二羧酸酯 室溫攪拌實施例28U(101)的標(biāo)題化合物(0.49g，0.89mmol)在無水二氯甲烷(10ml)與三氟乙酸(2ml)中的溶液3小時。真空濃縮所得溶液，然后將殘留物與無水二氯甲烷(10ml)、苯甲醛(0.28mL，2.68mmol)、冰乙酸(1mL)和三乙酰氧基硼氫化鈉(0.76g，3.6mmol)混合，并在室溫下攪拌48小時。真空濃縮反應(yīng)混合物，加二氯甲烷稀釋，并且用1N NaOH(水溶液)洗滌。有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥、過濾、真空濃縮、并通過快速柱色譜(硅膠)純化，使用氫氧化銨飽和的1-3％MeOH-CH2Cl2作為洗脫劑，從而得到白色固體標(biāo)題化合物(0.40g，mp＝192.9-194.9℃，MH+＝503)。實施例28X. 2(R)-[[[2-(苯基甲氧基)乙基]氨基]羰基]-1，4-哌嗪二羧酸雙(1，]-二甲基乙基酯) 室溫攪拌2-氨基乙酸芐酯鹽酸鹽(1.3g，7.8mmol)、三乙胺(3.26mL，23.4mmol)和制備例中得到的酸酐(2g，7.8mmol)在無水二氯甲烷(40ml)中形成的溶液過夜。加二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物，并用1N NaOH(水溶液)和鹽水洗滌。有機(jī)相以無水硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮，從而得到白色固體標(biāo)題化合物(1.03g，MH+＝478(35％)，322(100％))。實施例28Y. N2-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]N2，4-雙(苯甲基)-1，2(R)-哌嗪甲酰胺和N2-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]N1，2，4-三(苯甲基)-1，2(R)-哌嗪甲酰胺
0℃下，向制備例17的標(biāo)題化合物(381mg，1.16mmol)與苯甲醛(0.12mL，1.16mmol)在冰乙酸(1mL)和無水二氯甲烷(15ml)中的溶液內(nèi)加入三乙酰氧基硼氫化鈉(740mg，3.5mmol)，溫?zé)崴没旌衔镏潦覝?，另攪?2小時。反應(yīng)混合物用1N NaOH(水溶液)洗滌，以無水硫酸鎂干燥有機(jī)相，過濾并真空濃縮。殘留物通過制備板色譜(硅膠)純化，使用水合氫氧化銨飽和的2-5％MeOH-CH2Cl2，從而得到標(biāo)題二芐基化合物(256mg，MH+＝418)和標(biāo)題三芐基化合物(78.4mg，MH+＝508)。實施例28Y1. N1-環(huán)己基-N2-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]N2，4-雙(苯甲基)-1，2(R)-哌嗪二甲酰胺 向?qū)嵤├?8Y的標(biāo)題化合物(0.13g，0.3mmol)的無水二氯甲烷(3ml)溶液中加入異氰酸環(huán)己酯(0.054mL，0.43mmol)，室溫攪拌所得溶液過夜，然后真空濃縮。殘留物通過制備板色譜(硅膠)純化(使用水合氫氧化銨飽和的5％MeOH-CH2Cl2)，從而得到白色固體標(biāo)題化合物(164mg，99％，mp＝89.1℃，MH+＝543)。實施例28Y2. N1-(1，1-二甲基乙基)-N2-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]-N2，4-雙(苯甲基)-1，2(R)-哌嗪二甲酰胺 向?qū)嵤├?8Y的標(biāo)題化合物(0.13g，0.3mmol)的無水二氯甲烷(3ml)溶液中加入異氰酸叔丁酯(0.05mL，0.43mmol)，室溫攪拌所得溶液過夜，然后真空濃縮。殘留物通過制備板色譜(硅膠)純化(使用水合氫氧化銨飽和的5％MeOH-CH2Cl2)，從而得到白色固體標(biāo)題化合物(131mg，83％，mp＝57.8℃，MH+＝517)。實施例28Z 室溫攪拌制備例23步驟B的標(biāo)題化合物(0.23g，0.86mmol)在4M HCl/二噁烷(4ml)中的溶液過夜。濃縮此溶液，并與二氯甲烷(10mL)、DMF(10mL)和TEA(0.47mL，5eq.)一同攪拌，然后分批加入哌嗪酸酐(0.26g，1.2eq.)。室溫攪拌所形成的溶液1.5小時，再加入另一份酸酐(0.043g，0.2eq.)。攪拌反應(yīng)混合物0.5小時，然后加入CBZ-OSuc(0.28g，1.2eq.)。攪拌所得溶液3小時，然后加入NaHCO3(10mL)終止反應(yīng)，接著加入水(20mL)稀釋，用二氯甲烷(3×50mL)提取。合并的有機(jī)物用硫酸鈉干燥、過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物通過快速色譜純化，使用5％MeOH的二氯甲烷溶液作為洗脫劑，從而得到白色固體物(0.32g)mp＝71-75℃；LCMSMH+＝515。實施例28Z1
按照與實施例28Z所述基本相同的方法，只是使用制備例24步驟B的標(biāo)題化合物，從而制得標(biāo)題化合物(1.66g)mp＝77-79℃；LCMSMH+＝461。實施例28Z2 按照與實施例28Z所述基本相同的方法，只是使用制備例25步驟C的標(biāo)題化合物(0.17g，0.950mmol)，從而制得標(biāo)題化合物(0.37g)mp＝58-60℃；LCMSMH+＝489。實施例29.PS 287238-1-0 實施例30.PS 812520-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+) 精確質(zhì)量([M+H]+)計算值568 計算值521實測值568 實測值521實施例31.PS 465781-1-0 實施例32.PS 461400-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+)精確質(zhì)量([M+H]+)計算值527 計算值574實測值527實測值574實施例33.PS 815156--1-0 實施例34.PS 159773-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+)精確質(zhì)量([M+H]+)計算值588 計算值487實測值588實測值487實施例35.PS 372802-1-0 實施例36.PS 793961-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+) 精確質(zhì)量([M+H]+)計算值564 計算值617實測值564 實測值617實施例37.PS 321542-1-0 實施例38.PS 288326-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+)精確質(zhì)量([M+H]+)計算值617 計算值617實測值617 實測值617實施例39.PS 478500-1-0 實施例40.PS 783003-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+)精確質(zhì)量([M+H]+)計算值592 計算值591實測值592實測值591實施例41.PS 241936-1-0 實施例42.PS 409643-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+) 精確質(zhì)量([M+H]+)計算值554 計算值569實測值554 實測值569實施例43.PS 725556-1-0 實施例44.PS 769295-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+) 精確質(zhì)量([M+H]+)計算值569 計算值544實測值569實測值544實施例45.PS 075114-1-0 實施例46.PS 990951-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+) 精確質(zhì)量([M+H]+)計算值551 計算值516實測值551實測值516實施例47.PS 192638-1-0 實施例48.PS 354164-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+) 精確質(zhì)量([M+H]+)計算值563 計算值537實測值563實測值537實施例49.PS 395570-1-0 實施例50.PS 956973-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+) 精確質(zhì)量([M+H]+)計算值554計算值603實測值554實測值603實施例51.PS 859989-1-0 實施例52.PS 467023-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+)精確質(zhì)量([M+H]+)計算值582 計算值625實測值582 實測值625實施例53.PS 437810-1-0 實施例54.PS 381385-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+) 精確質(zhì)量([M+H]+)計算值645計算值602實測值645實測值602實施例55.PS 201633-1-0 實施例56.PS 593455-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+)精確質(zhì)量([M+H]+)計算值596 計算值591實測值596實測值591實施例57.PS 320451-1-0 實施例57A.PS 477090-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+)精確質(zhì)量([M+H]+)計算值566 計算值565.實測值566 實測值565實施例58.PS 130057-1-0 實施例59.PS 516972-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+)精確質(zhì)量([M+H]+)計算值628 計算值601實測值628 實測值601實施例60.PS 064691-1-0 實施例61.PS 028348-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+) 精確質(zhì)量([M+H]+)計算值556 計算值556實測值556 實測值556實施例62.PS 410892-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+)計算值計算值607實測值607實施例64.PS 813558-1-0 實施例65.PS 319448-1-0 精確質(zhì)量([M+H]+) 精確質(zhì)量([M+H]+)計算值549 計算值549實測值549 實測值549實施例66.PS 4200838-1-0 實施例67.PS 259236-1-0 實施例68. 實施例69. 實施例70. 實施例71 實施例72 實施例73. 實施例74 實施例75 實施例76 實施例77 實施例78 實施例79 實施例80 實施例81 實施例82 實施例83 實施例84 實施例85 實施例86 實施例87 實施例88 實施例89 實施例90 實施例91 實施例92 實施例93 實施例94 實施例95 實施例96 實施例97 實施例98 實施例99 實施例100 實施例101 實施例102 實施例103 實施例104 實施例105 實施例106 實施例107 實施例108 實施例109 實施例110 實施例111 實施例112 實施例113 實施例114 實施例115 實施例116 實施例117 實施例118 實施例119 實施例120 實施例121 實施例122 實施例123 實施例124 實施例125 實施例126 實施例127 實施例128 實施例129 實施例130-165. 實施例165-193 實施例193-235 實施例236-237 起始原料的制備用于制備本發(fā)明化合物的起始原料用下列制備例舉例說明，但它們不得認(rèn)為是對本發(fā)明內(nèi)容范圍的限制。制備不同起始原料用的方法還可見于各種文獻(xiàn)，例如Emmett，J.C.，Holloway，F(xiàn).H.，Turner，J.L.J.Chem.Soc.Perkin Trans.11979，1341-1344和Abdel-Magid，A.F.，Maryanoff，C.A.，Carson，K.G.TetrahedronLett.1990，31，5595。制備例1 室溫及攪拌下，30分鐘內(nèi)向組胺二鹽酸鹽2(46.7g，0.250mol，1.0eq.)和碳酸鈉(54.3g，0.513mol，2.05eq.)在蒸餾水(1250ml)中的溶液內(nèi)分批加入N-乙氧基羰基鄰苯二甲酰亞胺1(62.8g，0.275mol，1.1eq.)。在室溫下劇烈攪拌所形成的雪白色懸浮液90分鐘。濾出固體，用冰冷蒸餾水(4×50ml)充分洗滌。收集固體物，使用P2O5在60℃真空干燥12小時，得到高純度(＞95％，根據(jù)1H NMR)Nα-鄰苯二甲酰組胺3(59.2g，0.245mol，98％)。此雪白色固體無需進(jìn)一步純化而直接使用。制備例2 90℃及攪拌下，在氮氣氛中向3(25.0g，0.104mol，1.0eq.)和碳酸鉀(17.2g，0.125mol，1.2eq.)在無水DMF(500ml)中的混合物內(nèi)分批加入新戊酸氯甲酯(18.5m，0.125mol，1.2eq.)的無水N，N-二甲基甲酰胺(DMF，100ml)溶液，歷時1小時。90℃攪拌混合物12小時。然后于50℃真空除去揮發(fā)物。殘留物吸收到鹽水(100ml)內(nèi)，用乙酸乙酯(4×25ml)提取。合并的有機(jī)提取物以硫酸鈉干燥、過濾，并在30℃下真空濃縮。殘留的灰白色固體通過硅膠快速層析(己烷∶丙酮＝6∶4 v/v)，得到N-新戊酰氧基甲基-Nα-鄰苯二甲酰組胺4(20g，0.056mol)，為一高純度白色結(jié)晶固體。制備例3 氮氣氛下，50℃攪拌4(10.2g，28.7mmol，1.0eq.)和α-溴-對-甲苯基氰(11.4g，57.4mmol，2.0eq.)在無水乙腈(150ml)中的溶液12小時。冷卻產(chǎn)生的雪白色懸浮液到室溫，在-20℃冰箱中冷凍1小時。濾出沉淀物，用冰冷乙酸乙酯(4×50ml)充分洗滌。收集固體物，在P2O5存在下50℃真空干燥12小時，得到溴化1-新戊酰氧基甲基-3-(4-氰基芐基)-4-(2-鄰苯二甲酰亞氨基乙基)咪唑鎓5(14.4g，26.2mmol)。制備例3A.氯化1-新戊酰氧基甲基-3-(4-氯芐基)-4-(2-鄰苯二甲酰亞氨基乙基)咪唑鎓 在氮氣氛中攪拌回流制備例2的標(biāo)題化合物(5g，14.1mmol)與4-氯芐基氯(2.5g，15.5mmol)在無水乙腈(60ml)中的溶液48小時。真空濃縮混合物，并用乙酸乙酯-己烷重結(jié)晶，從而得到標(biāo)題化合物固體(3.2g，MH+＝480)，濃縮濾液另外得到3.6g產(chǎn)物。制備例3B.溴化1-新戊酰氧基甲基-3-(4-苯基乙基)-4-(2-鄰苯二甲酰亞氨基乙基)咪唑鎓 在氮氣氛中攪拌回流制備例2的標(biāo)題化合物(5g，14.1mmol)與2-溴乙基苯(15.5mmol，1.1eq.)在無水乙腈(50ml)中的溶液72小時。真空濃縮混合物，得到粘稠油狀標(biāo)題化合物(100％，NH+＝460)。制備例3C 氮氣氛下，50℃攪拌4(3.0g，8.4mmol，1.0eq.)和4-氟芐基溴(2.2ml，16.9mmol，2.0eq.)在無水乙腈(50ml)中的溶液12小時。冷卻所產(chǎn)生的雪白色懸浮液到室溫，并在-20℃冰箱中冷凍1小時。濾出沉淀物，用冰冷乙酸乙酯(4×25ml)充分洗滌。收集固體物，在P2O5存在下50℃真空干燥12小時，得到溴化1-新戊酰氧基甲基-3-(4-氟芐基)-4-(2-鄰苯二甲酰亞氨基乙基)咪唑鎓12(4.32g，7.93mmol)，產(chǎn)率94％。制備例4 0℃及攪拌下，在氮氣氛中向5(40g，0.073mol，1.00eq.)的無水甲醇(1000ml)溶液內(nèi)逐滴加入7N氨甲醇溶液(75ml，0.525mol，7.25eq.)，歷時75分鐘。然后緩慢(3h)溫?zé)峄旌衔锏绞覝兀頂嚢?2小時。于30℃真空蒸發(fā)揮發(fā)物，殘留的白色固體通過硅膠快速層析(CH2Cl2∶2N NH3/MeOH＝90∶10 v/v)，得到N-(4-氰基芐基)-Nα-鄰苯二甲酰組胺6(21g，0.059mol)。制備例4A.N-[(4-氯苯基)甲基]-N-鄰苯二甲酰組胺 -20℃及攪拌下，向制備例3A的標(biāo)題化合物(3.2g，6.6mmol)的MeOH(10mL)溶液內(nèi)緩慢加入7N氨甲醇溶液(10ml，0.07mol)。溫?zé)崴没旌衔镏潦覝?，另攪?2小時，然后真空濃縮，并通過快速柱色譜(硅膠)純化，使用氫氧化銨飽和的3％MeOH-CH2Cl2作為洗脫劑，從而得到粘著固體標(biāo)題化合物(1.2g，51％，MH+＝366)。制備例4B.N-(4-苯基乙基)-N-鄰苯二甲酰組胺 -20℃及攪拌下，向制備例3B的標(biāo)題化合物(15.8mmol)的MeOH(60mL)溶液內(nèi)緩慢加入7N氨甲醇溶液(23ml，0.16mol)。溫?zé)崴没旌衔镏潦覝?，再攪?6小時，然后真空濃縮，并通過快速柱色譜(硅膠)純化，使用氫氧化銨飽和的3％MeOH-CH2Cl2作為洗脫劑，從而得到標(biāo)題化合物(1.6g，MH+＝346)。制備例4C 0℃及攪拌下，在氮氣氛中向12(4.0g，7.35mmol，1.00eq.)的無水甲醇(50ml)溶液內(nèi)逐滴加入7N氨甲醇溶液(8.0ml，55.10mmol，7.25eq.)，歷時10分鐘。然后緩慢(3小時)溫?zé)峄旌衔镏潦覝?，另攪?2小時。于30℃真空蒸除揮發(fā)物，殘留的白色固體通過硅膠快速層析(CH2Cl2∶2N NH3/MeOH＝97∶3 v/v)，從而得到N-(4-氟芐基)-Nα-鄰苯二甲酰組胺13(1.62g，4.63mmol，63％)，為雪白色固體。制備例5 氮氣氛中，50℃攪拌6(21g，0.059mol，1.0eq.)和一水合肼(15ml，0.884mol，15.0eq.)在無水乙醇(250ml)中的溶液12小時。冷卻形成的雪白色懸浮液至室溫，進(jìn)而在冰箱中-20℃冷凍1小時。濾出沉淀物(鄰苯二甲酰肼)，用冰冷乙醇(190標(biāo)準(zhǔn)，500ml)充分洗滌。合并濾液，于30℃真空濃縮。殘留物通過快速硅膠柱層析(CH2Cl2∶2N NH3/MeOH＝90∶10 v/v)，從而得到N-(4-氰基芐基)組胺7(11.4g，0.050mol，85％)，為一亮棕色粘稠油狀物。制備例5A.N-[(4-氯苯基)甲基]-組胺 氮氣氛中50℃攪拌制備例4A的標(biāo)題化合物(1.21g，3.3mmol)和一水合肼(1.7ml，0.033mol，10eq.)在無水乙醇(20ml)中的溶液20分鐘。用乙醇和二氯甲烷稀釋所得懸浮液，然后過濾。真空濃縮濾液得到黃色油狀固體標(biāo)題化合物(0.7g，MH+＝236)。制備例5B.N-(苯乙基)組胺 氮氣氛中50℃攪拌制備例4B的標(biāo)題化合物(1.54g，4.4mmol)和一水合肼(2.2ml，0.044mol，10eq.)在無水乙醇(25ml)中的溶液20分鐘，然后室溫攪拌過夜。用乙醇和二氯甲烷稀釋所得懸浮液，并且過濾。真空濃縮濾液得到油狀固體標(biāo)題化合物(0.88g，MH+＝216)。制備例5C. 氮氣氛中50℃攪拌13(1.6g，4.6mmol，1.0eq.)和一水合肼(1.1ml，22.9mmol，5.0eq.)在無水乙醇(25ml)中的溶液12小時。冷卻形成的雪白色懸浮液至室溫，進(jìn)而在冰箱中-20℃冷凍1小時。濾出沉淀物(鄰苯二甲酰肼)，用冰冷乙醇(190標(biāo)準(zhǔn)，50ml)充分洗滌。合并濾液，于30℃真空濃縮。殘留物通過硅膠快速柱層析(CH2Cl2∶2N NH3/MeOH＝90∶10 v/v)，從而得到N-(4-氟芐基)組胺14(870mg，3.97mmol，87％)，為棕色油狀物。制備例8和9 室溫、攪拌下，向酸酐8(2.04g，7.95mmol，1.2eq.)的無水二氯甲烷(30ml)溶液內(nèi)逐滴加入7(1.50g，6.63mmol，1.0eq.)的無水二氯甲烷(30ml)溶液，歷時30分鐘。向溶液中通入氮氣流以驅(qū)除析出的二氧化碳。在通氮氣的情況下攪拌所形成的無色溶液1小時。停止通氣，5分鐘內(nèi)逐滴加入異氰酸環(huán)己酯(1.75ml，13.26mmol，2.0eq.)。室溫攪拌此棕色溶液1小時得到9(由1H NMR證實)。在30℃下真空除去揮發(fā)物。殘留物吸收到三氟乙酸(TFA，30ml)與無水二氯甲烷(30ml)的混合液內(nèi)，在氮氣氛中室溫攪拌24小時。30℃真空濃縮此混合物，將殘留的亮棕色油狀物吸收到1N NaOH水溶液(100ml)中，以二氯甲烷(4×25ml)提取。合并的有機(jī)提取物用鹽水(25ml)洗滌、硫酸鈉干燥、過濾并于30℃真空濃縮。殘留油狀物通過硅膠快速層析(CH2Cl2∶2N NH3/MeOH＝90∶10 v/v)，得到N2-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-N1-環(huán)己基-1，2(R)-哌嗪二甲酰胺10(1.34g，2.95mmol)，系亮黃色泡沫物。制備例10A.N4-(1，1-二甲基乙氧基羰基)-N2-[2-[1-[(4-氯苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-1，2(R)-哌嗪甲酰胺 室溫攪拌制備例5A的標(biāo)題化合物(0.695g，2.94mmol)與制備例中制得的酸酐(0.75g，2.94mmol)在無水二氯甲烷(10ml)中的溶液過夜。再加入另一份酸酐(0.1g)，1小時后加二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物，用1MHCl(水溶液)提取。水相用1N NaOH(水溶液)堿化，然后用二氯甲烷提取，并將有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥。過濾后，真空濃縮有機(jī)相，得到白色泡沫物(0.744g，MH+＝448)。制備例10B.N4-(1，1-二甲基乙氧基羰基)-N2-[2-[1-(苯乙基)-1H-咪唑-5-基]乙基]-1，2(R)-哌嗪甲酰胺 室溫攪拌制備例5B的標(biāo)題化合物(0.874g，4.04mmol)與制備例中制得的酸酐(1.04g，4.04mmol)在無水二氯甲烷(10ml)中的溶液過夜。再加入另一份酸酐(0.23g)，1小時后加二氯甲烷稀釋反應(yīng)混合物，并用1M鹽酸提取。水相用1N NaOH(水溶液)堿化，然后用二氯甲烷提取，并將有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥。過濾后，真空濃縮有機(jī)相，得到白色泡沫物(1.22g，71％，MH+＝428)。制備例10.N4-(1，1-二甲基乙氧基羰基)-N2-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-1，2(R)-哌嗪甲酰胺 室溫攪拌制備例5的標(biāo)題化合物(7.8g，34.5mmol)、三乙胺(10mL)以及制備例中制得的酸酐(10g，39.0mmol)在無水二氯甲烷(300ml)中的溶液過夜。真空濃縮反應(yīng)混合物，加二氯甲烷稀釋并用1M鹽酸提取。水相用1N NaOH(水溶液)堿化，然后用二氯甲烷提取，并將有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥。過濾后，真空濃縮有機(jī)相，得到標(biāo)題化合物(10.0g，MH+＝448)。制備例11. N2-[2-[1-[(4-氰基苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-N4-苯基-1，2(R)-哌嗪甲酰胺 室溫攪拌制備例10的標(biāo)題化合物(5g，1.1.4mmol)溶在無水二氯甲烷(50ml)與三氟乙酸(10ml)中的溶液1小時，然后真空濃縮。殘留物與苯甲醛(1.4mmol)混合，加冰乙酸(25mL)和無水二氯甲烷(100ml)稀釋，然后冷卻到0℃。加入三乙酰氧基硼氫化鈉(4.83g，22.8mmol)，0℃攪拌所得混合物2小時，爾后室溫攪拌過夜。真空濃縮反應(yīng)混合物，加二氯甲烷稀釋并用1N HCl(水溶液)提取。水相用1N NaOH(水溶液)堿化，并用二氯甲烷提取，然后無水硫酸鈉干燥、過濾和真空濃縮?？焖僦鶎游?硅膠)，使用氫氧化銨飽和的10％MeOH-CH2Cl2作為洗脫劑，從而得到標(biāo)題化合物(1.5g，MH+＝428)。制備例12. N2-[2-[1-[(4-氯苯基)甲基]-1H-咪唑-5-基]乙基]-N1-環(huán)己基-1，2(R)-哌嗪甲酰胺 向制備例10A的標(biāo)題化合物(0.30g，0.67mmol)溶在無水二氯甲烷(3ml)中的溶液內(nèi)加入異氰酸環(huán)己酯(0.09mL，0.7mmol)，室溫攪拌所形成的溶液30分鐘，然后真空濃縮。殘留物用二氯甲烷(3ml)和三氟乙酸(3ml)稀釋。室溫攪拌所得溶液過夜，然后真空濃縮，加二氯甲烷稀釋，并用1N NaOH(水溶液)洗滌。有機(jī)相以無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，從而得到黃色泡沫物(0.319g，MH+＝473)。制備例12A. N2-[2-[1-(苯乙基)-1H-咪唑-5-基]乙基]-N1-環(huán)己基-1，2(R)-哌嗪二甲酰胺 向制備例10B的標(biāo)題化合物(0.33g，0.77mmol)溶在無水二氯甲烷(3ml)中的溶液內(nèi)加入異氰酸環(huán)己酯(0.11mL，0.9mmol)，室溫攪拌所形成的溶液30分鐘，然后真空濃縮。殘留物用二氯甲烷(3ml)和三氟乙酸(3ml)稀釋。室溫攪拌所得溶液過夜，然后真空濃縮，加二氯甲烷稀釋，并用1N NaOH(水溶液)洗滌。有機(jī)相以無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，從而得到黃色泡沫物(0.338g，MH+＝453)。制備例13. 步驟a. 2-R-羧基-哌嗪-二-(R)-樟腦磺酸 60℃、攪拌下，向2.5kg(R)-(-)-樟腦磺酸在1250ml蒸餾水中的溶液內(nèi)加入2-羧基-哌嗪的鉀鹽(565mg，3.35mol)溶液?；旌衔镌?5℃下攪拌至完全溶解。室溫放置所形成的溶液48小時。過濾產(chǎn)生的沉淀物，得到1444gm潮濕固體。然后將此固體溶于1200ml蒸餾水中，在蒸汽浴上加熱到所有固體都溶解為止。然后將此熱溶液擱置一旁緩慢冷卻72小時。過濾結(jié)晶固體，得到362gm純凈產(chǎn)物，為白色結(jié)晶固體。[α]＝-14.9°步驟b. N，N-二-叔丁氧羰基-2-R-羧基-哌嗪 將步驟a得到的2-R-羧基-哌嗪-二-(R)-(-)-樟腦磺酸(362gm，O.608mol)溶于1.4L蒸餾水與1.4L甲醇中。攪拌下向該反應(yīng)混合物滴加75ml 50％NaOH，形成大約pH＝9.5的溶液。向此溶液內(nèi)加入二碳酸二叔丁酯固體(336gm，1.54mol)。pH降到大約7.0。用50％NaOH(總計175ml)維持反應(yīng)混合物的pH為9.5，攪拌反應(yīng)混合物2.5小時得到白色沉淀物。加9L冰/水稀釋反應(yīng)混合物，接著用2L乙醚洗滌。棄去乙醚物，通過分批加入固體檸檬酸調(diào)節(jié)水層的pH至pH3.0。酸化水層然后二氯甲烷(3×2L)提取。合并有機(jī)層，硫酸鈉干燥、過濾并蒸發(fā)，從而得到201.6gm白色玻璃狀固體標(biāo)題化合物。FABMS(M+1)＝331。步驟c.“N-Boc-哌嗪-2-酰氨酐” 氮氣氛下，在5L圓底燒瓶中向N，N-二甲基甲酰胺(49.6ml)的冰冷溶液內(nèi)逐滴加入亞硫酰氯(46.7ml)，歷時5分鐘。然后攪拌反應(yīng)混合物5分鐘，移去冰浴，室溫攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。爾后在冰浴中再冷卻反應(yīng)混合物，并通過套管向反應(yīng)混合物中加入步驟b的N，N-二-叔丁氧羰基-2-R-羧基-哌嗪(201.6gm，0.61mmol)在51.7ml吡啶與1.9L乙腈中的溶液。溫?zé)岱磻?yīng)混合物到室溫，得到淡黃色混濁溶液。室溫攪拌18小時后，過濾反應(yīng)混合物，將濾液倒入冰水(7L)內(nèi)，然后用4×2L乙酸乙酯提取，硫酸鈉干燥，過濾并真空蒸發(fā)至干，得到115.6gm白色固體標(biāo)題化合物。FABMS(M+1)＝257。制備例14.[2-(2-甲基-1H-苯并咪唑-1-基)乙基]胺 攪拌回流由2-甲基苯并咪唑(4.93g，37.3mmol)、2-氯乙胺鹽酸鹽(4.67g，40.3mmol)、硫酸四丁銨(0.51g，1.5mmol)、氫氧化鈉(5.37g，134.2mmol)和乙腈(80mL)形成的混合物48小時。冷卻所得混合物至室溫，過濾并真空濃縮。殘留物通過快速柱色譜(硅膠)純化，使用氫氧化銨飽和的1-3％MeOH-CH2Cl2作為洗脫劑，得到標(biāo)題化合物(3.56g，MH+＝176)。制備例15.[2-(2，4-二甲基咪唑-1-基)乙基]胺和[2-(2，5-二甲基咪唑-1-基)乙基]胺 按照制備例14所用的類似方法，但使用2，4-二甲基咪唑代替2-甲基苯并咪唑，從而制得位置異構(gòu)體混合物形式的標(biāo)題化合物(10.7g，MH+＝)。制備例16. 3-(1H-咪唑-1-基)丙基-苯甲基胺 室溫下，在氮氣氛中攪拌由1-(3-氨基丙基)咪唑(Aldrich，37.1g，297mmol)、苯甲醛(30g，283mmol)、3分子篩(50g)、乙酸鈉(24.1g，283mmol)和無水甲醇(700mL)構(gòu)成的混合物過夜。冷卻混合物到0℃，1小時內(nèi)分批加入硼氫化鈉(10.9g，288mmol)。室溫攪拌混合物3小時?；旌衔锿ㄟ^硅藻土過濾，以甲醇洗滌，并且真空濃縮。加二氯甲烷稀釋所得殘留物，并用10％氫氧化鈉水溶液洗滌。有機(jī)相用鹽水洗滌、無水硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮，從而得到淺黃色油狀標(biāo)題化合物(56.3g，MH+＝216)。制備例17. 2(R)-[[[3-(1H-咪唑-1-基)丙基](苯甲基)氨基]羰基]哌嗪 室溫攪拌由制備例16的標(biāo)題化合物(1.34g，6.2mmol)、制備例13的標(biāo)題化合物(1.6g，6.2mmol)、三乙胺(1.3mL，9.3mmol)和無水二氯甲烷(10mL)形成的混合物48小時。加入三氟乙酸(10mL)，再攪拌所得混合物1.5小時。滴加氫氧化鈉水溶液(1N)中和反應(yīng)混合物，并用二氯甲烷提取所得混合物。有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，所得殘留物進(jìn)而通過快速柱色譜(硅膠)純化，使用水合氫氧化銨飽和的1％MeOH-99％CH2Cl2洗脫，從而得到油狀標(biāo)題化合物(520mg，MH+＝328)。制備例18. 4-哌啶基乙酸乙酯 在500mL Parr瓶內(nèi)放入4-吡啶基乙酸乙酯(4.5g，27.24mmol)，進(jìn)而溶于無水EtOH(70mL)。向該瓶內(nèi)加入10％鈀-碳(1.0g)。將上述瓶置于氫化器上，在55psi氫氣壓下25℃振搖內(nèi)容物94小時?；旌衔锿ㄟ^Celite過濾，并用4x40mL無水EtOH洗滌。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濾液，殘留物通過硅膠層析，采用3％(10％濃NH4OH/甲醇)二氯甲烷作為洗脫劑，從而得到2.944g標(biāo)題化合物。制備例19. 1-氨基羰基-4-哌啶基乙酸乙酯 將4-哌啶基乙酸乙酯(500mg；2.92mmol)溶于無水二氯甲烷(25mL)。攪拌下向此溶液內(nèi)加入異氰酸三甲基甲硅烷基酯(5.9mL；43.8mmol)，25℃攪拌所得溶液17小時。然后在CH2Cl2-飽和NaHCO3中對上述溶液進(jìn)行后處理，產(chǎn)物通過硅膠層析，使用2→3％(濃NH4OH/甲醇)二氯甲烷作為洗脫劑，從而得到622mg標(biāo)題化合物。制備例20. 1-氨基羰基-4-哌啶基乙酸 將1-氨基羰基-4-哌啶基乙酸乙酯(153.6mg，0.717mmol)溶于無水CH2Cl2(3.58mL)與EtOH(3.58mL)中。向此溶液內(nèi)加入1.0MLiOH(1.73mL，1.73mmol)，50℃攪拌所形成的混合物5.5小時。迅速冷卻混合物到25℃，加入1.0N HCl(2.02mL，2.02mmol)，進(jìn)而攪拌混合物5分鐘，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得到標(biāo)題化合物，該產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化而直接使用。制備例21步驟A 90℃攪拌2，2-二甲基丙烯酸乙酯(50.0g，2.0eq.)與咪唑(13.28g，200mmol)48小時。冷卻所得溶液，用水(150mL)和二氯甲烷(150mL)稀釋，然后分離。水層用二氯甲烷(2×75mL)洗滌，硫酸鈉干燥合并的有機(jī)物，進(jìn)而真空濃縮?；旌衔锎制吠ㄟ^硅膠快速色譜純化，使用10％MeOH的二氯甲烷溶液作為洗脫劑，從而得到清亮透明油狀純凈產(chǎn)物(11.27g)。步驟B 用LiAlH4(51mL，1M乙醚溶液，1.0eq.)處理步驟A標(biāo)題化合物(10.0g，50.96mmol)的溶液。室溫攪拌反應(yīng)混合物1小時，然后滴加飽和硫酸鈉(～3.0mL)終止反應(yīng)。用硫酸鈉(固體)干燥所得漿狀物，然后加EtOAc(100mL)稀釋，并通過Celite塞過濾。濃縮濾液得到一黃色油狀物(6.87g，87％產(chǎn)率)，該產(chǎn)物無需進(jìn)一步純化而直接使用。步驟C 0℃下，10分鐘內(nèi)向步驟B的標(biāo)題化合物(6.85g，44.42mmol)、鄰苯二甲酰亞胺(7.19g，1.1eq.)和三苯膦(Ph3P)(12.82g，1.1eq.)在THF(200mL)中的溶液內(nèi)加入DEAD(7.69mL，1.1eq.)。溫?zé)崴萌芤旱绞覝?，攪?8小時。然后減壓濃縮反應(yīng)混合物，產(chǎn)物通過用CH2Cl2/Et2O結(jié)晶加以分離，從而得到白色固體物(10.03g)。步驟D 加熱回流步驟C標(biāo)題化合物(9.50g，33.53mmol)和(N2H4)(1.25mL，1.2eq.)在EtOH(100mL)中的溶液4小時。冷卻所形成的漿狀物，過濾，進(jìn)而減壓濃縮濾液。粗產(chǎn)物通過快速色譜純化，使用15％(10％NH4OH/MeOH)的二氯甲烷溶液作為洗脫劑，從而得到淺黃色油狀物(2.80g)。制備例22 向制備例21步驟D的標(biāo)題化合物(0.17g，1.2mmol)在CH2Cl2(5.0mL)中的溶液內(nèi)分批加入哌嗪酐(0.28g，1.0eq.)，室溫攪拌所形成的溶液10分鐘，然后加入異氰酸環(huán)己酯(0.21mL，1.5eq.)。室溫攪拌15分鐘后，加MeOH(1mL)驟冷反應(yīng)混合物，然后真空濃縮，并且通過快速色譜純化，使用10％MeOH的二氯甲烷溶液作為洗脫劑，從而得到白色固體物(0.46g).mp＝71-74℃。制備例23步驟A -78℃下，逐滴向N-BOC氨基丙基咪唑(0.50g，2.22mmol)的THF(15mL)溶液內(nèi)加入n-BuLi(2.79mL；1.75M己烷溶液；2.2eq.)。溫?zé)崴萌芤褐?20℃，攪拌2小時，爾后加入TMSCl(0.65mL，2.3eq.)。溫?zé)岱磻?yīng)混合物到室溫，攪拌1小時，再冷卻至-78℃，用ClCO2Et(0.25g，1.2eq.)處理。溫?zé)崴萌芤褐潦覝?，攪?0小時。加水(10mL)終止反應(yīng)，用CH2Cl2(3×20mL)提取。合并的有機(jī)物以硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物通過快速色譜純化，使用5％MeOH的CH2Cl2溶液作為洗脫劑(0.35g，53％產(chǎn)率)。步驟B 攪拌步驟A標(biāo)題化合物(0.35g，1.18mmol)在EtOH(10mL)和30％NH4OH(2mL)中的溶液24小時。減壓濃縮反應(yīng)混合物，進(jìn)而通過快速色譜純化，使用EtOAc作為洗脫劑(0.23g)。制備例24步驟A 采用與制備例21步驟C所述基本相同的方法，只是使用S-(+)-5-羥甲基-2-吡咯烷酮(1.0g，8.69mmol)，從而制得標(biāo)題化合物(1.50g)。步驟B 采用與制備例21步驟D所述基本相同的方法，只是使用制備例24步驟A的標(biāo)題化合物(1.50g，6.14mmol)，從而制得標(biāo)題化合物(0.59g)。制備例25步驟A 按照與制備例21步驟C所述基本相同的方法，只是其中使用N-BOC-S-脯氨醇(0.50g，2.48mmol)，從而制得標(biāo)題化合物(0.59g)。步驟B 按照與制備例21步驟D所述基本相同的方法，只是其中使用制備例25步驟A的標(biāo)題化合物(0.59g，1.79mmol)，從而制得標(biāo)題化合物(0.36g)。步驟C 向制備例25步驟B的標(biāo)題化合物(0.36g，1.80mmol)和TEA(0.30mL，1.2eq.)在CH2Cl2(8.0mL)中的溶液內(nèi)加入Ac2O(0.20mL，1.2eq.)。攪拌所得溶液2小時，然后加飽和NaHCO3(10mL)驟冷。所得溶液用CH2Cl2(2×20mL)提取，硫酸鈉干燥后真空濃縮。將粗產(chǎn)物通過快速色譜純化，順序使用EtOAc和5％MeOH/EtOAc洗脫(0.23g)。測定1.體外酶測定按照WO/10515或WO 95/10516所述方法測定FPT IC50(體外酶測定中對法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶的抑制)。所得數(shù)據(jù)表明本發(fā)明化合物為部分純化的大鼠腦法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶(FPT)所致的Ras-CVLS法尼基化的抑制劑。這些數(shù)據(jù)還說明，本發(fā)明化合物可以認(rèn)作是部分純化大鼠腦FPT所致的Ras-CVLS法尼基化的強有效抑制劑(IC50＜10μM)。
實施例1-3、5-28、28A-28X、28Y1、28Y2、28Z、28Z1、28Z2、29-57、57A、58-62、和64-67的化合物具有0.18-4000nM的FPT IC50(其中的nM表示納摩爾)。
實施例1、5、6、8-17、20-28、28C、28E、28F、28G、28I、28M、280、28P、28Q、28R、28S、28T、28V、28Y1、28Y2、29、31、32、34、36-38、42、43、47、53-56、58、61和64具有0.18-21 nM的FPT IC50。
化合物20、25、26、27、28、280、54和55具有0.18-1.5nM的FPT IC50。
按照與上文所述基本相同的方法還可以進(jìn)行其它測定，但用選擇指示腫瘤細(xì)胞系替代T24-BAG細(xì)胞。這些測定可以使用表達(dá)活化K-ras基因的DLD-1-BAG人結(jié)腸癌細(xì)胞或表達(dá)活化K-ras基因的SW620-BAG人結(jié)腸癌細(xì)胞來進(jìn)行。使用本領(lǐng)域已知的其它腫瘤細(xì)胞系，可以測定本發(fā)明化合物對其它類型癌細(xì)胞的活性。
軟瓊脂測定不依賴于貼壁的生長是致瘤細(xì)胞系的一種特征。將人腫瘤細(xì)胞懸浮于含有0.3％瓊脂和指定濃度法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的生長培養(yǎng)基內(nèi)。將溶液覆蓋在用含相同濃度法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的0.6％瓊脂固化的生長培養(yǎng)基上作為頂層。待頂層固化后，于5％CO2下37℃培養(yǎng)測定板10-16天，使集落自然生長。培養(yǎng)后，通過用MTT(溴化3-[4，5-二甲基-噻唑-2-基]-2，5-二苯基四唑鎓，噻唑藍(lán))(1mg/mL PBS)覆蓋瓊脂染色集落。計數(shù)集落并測定IC50。
使用本發(fā)明化合物制備藥物組合物時，惰性可藥用載體可以為固體或液體。固體形式的制劑包括粉劑、片劑、可分散性顆粒劑、膠囊劑、扁囊劑和栓劑。粉劑和片劑可以包含約5-約95％的活性成分。合適的固體載體是本領(lǐng)域已知的，例如碳酸鎂，硬脂酸鎂，滑石，蔗糖或乳糖。片劑、粉劑、扁膠囊劑和膠囊劑可用作適合口服給藥的固體劑型?？伤幱幂d體以及制備各種不同組合物方法的實例可見于A.Gennaro編輯的Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，(1990)，Mack Publishing Co.，Easton，Pennsylvania。
液體形式制劑包括溶液、懸浮液和乳液?？商峒暗膶嵗羞m合非腸道注射用的水或水-丙二醇溶液，或者對于口服溶液、懸浮液和乳液來講要加入甜味劑和不透明劑。液體形式制劑還包括鼻內(nèi)給藥用的溶液。
適合吸入給藥的氣霧劑可以包含溶液和粉末形式的固體，它們可與可藥用載體如惰性壓縮氣體(例如氮氣)混合。
同樣還包括臨用前轉(zhuǎn)化為供口服或非腸道給藥用液體形式制劑的固體制劑。這種液體形式包括溶液，懸浮液和乳液。
本發(fā)明化合物也可以透皮給藥。透皮組合物可以為霜劑，洗劑，氣霧劑和/或乳劑，并且它們可以包括在本領(lǐng)域常用于此目的的基質(zhì)型或儲庫型透皮貼劑中。
優(yōu)選所述化合物通過口服施用。
優(yōu)選所述藥物制劑為單位劑型。在此類劑型中，所述制劑可細(xì)分為含有適當(dāng)量(如達(dá)到所需目的的有效量)活性成分的單位劑量。
根據(jù)具體應(yīng)用，單位劑量制劑中的活性成分量可以在大約0.01mg-1000mg之間變化和調(diào)整，優(yōu)選大約0.01mg-大約750mg，更優(yōu)選大約0.01mg-大約500mg，且最優(yōu)選大約0.01mg-大約250mg。
實際使用劑量可能會隨患者的需要和受治疾病的嚴(yán)重程度而變化。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以確定特定情況下的合適劑量。為了方便起見，可以將總?cè)談┝考?xì)分，并根據(jù)需要全天分?jǐn)?shù)次給藥。
本發(fā)明化合物和/或其可藥用鹽的給藥量和給藥頻率由主治醫(yī)師根據(jù)下列因素加以判斷調(diào)整患者的年齡、身體狀況和身高體重以及所治療疾病的嚴(yán)重程度?？诜o藥的典型推薦日劑量為大約0.04mg/天-大約4000mg/天，分成2-4個分劑量施用。
盡管結(jié)合上述具體實施例對本發(fā)明進(jìn)行了說明，但對本領(lǐng)域技術(shù)人員來講，對其進(jìn)行的各種改進(jìn)、修飾和改變都將是顯而易見的。并且所有這些替換、修飾和改進(jìn)都落在本發(fā)明的宗旨與范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.下式化合物或其可藥用鹽或溶劑化物 其中Q為 Z代表氫，烷基，芳基，芳烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基， 雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)烷基，雜環(huán)烷基烷基，環(huán)烯基，環(huán)烯基烷基，或-CY3Y4，其中Y3和Y4獨立地代表烷基和芳基，或者Y3和Y4與它們所連接的碳原子(-C)一起可以形成環(huán)烷基或環(huán)烯基環(huán)；其中R1，R2，R3，R20，R22，R30和R32獨立地代表氫，烷基，芳基，芳烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)烷基或雜環(huán)烷基烷基；R25可以代表氫，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜環(huán)烷基，雜環(huán)烷基烷基或-OR40，其中的R40可以代表烷基，芳基，芳烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜芳基，雜芳基烷基，雜環(huán)烷基或雜環(huán)烷基烷基；Y代表芳基，雜芳基，雜環(huán)烷基或環(huán)烷基，t為0，1，2或3；w為0或1；和A不存在，為氫，烷基，芳基，芳烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜環(huán)烷基，雜環(huán)烷基烷基，氰基，雜芳基或雜芳基烷基。
2.權(quán)利要求1的化合物，它選自實施例1-237的標(biāo)題化合物。
3.權(quán)利要求1的化合物，它選自實施例1、3、4、5、6、9、10、11、13、14和15的標(biāo)題化合物。
4.用于抑制細(xì)胞異常生長的藥物組合物，它包括有效量的權(quán)利要求1-3中任一項的化合物以及可藥用載體。
5.抑制細(xì)胞異常生長的方法，該方法包括施用有效量的權(quán)利要求1-3中任一項的化合物。
6.權(quán)利要求5的方法，其中受抑制細(xì)胞為腫瘤細(xì)胞。
7.權(quán)利要求5的方法，其中受抑制細(xì)胞為胰腺腫瘤細(xì)胞，肺癌細(xì)胞，骨髓性白血病腫瘤細(xì)胞，甲狀腺囊腫瘤細(xì)胞，脊髓發(fā)育不良腫瘤細(xì)胞，表皮癌腫瘤細(xì)胞，膀胱癌腫瘤細(xì)胞或前列腺腫瘤細(xì)胞，黑素瘤腫瘤細(xì)胞，乳腺腫瘤細(xì)胞和結(jié)腸腫瘤細(xì)胞。
8.權(quán)利要求5的方法，其中細(xì)胞異常生長的抑制通過抑制ras法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶實現(xiàn)。
9.權(quán)利要求5的方法，其中所述抑制是對其中Ras蛋白由于非Ras基因的基因中致癌突變而激活的腫瘤細(xì)胞的抑制。
10.權(quán)利要求1-3中任一項的化合物在制備用于抑制細(xì)胞異常生長的藥物中的應(yīng)用。
11.權(quán)利要求10的用途，其中受抑制細(xì)胞為腫瘤細(xì)胞。
12.權(quán)利要求10的用途，其中受抑制細(xì)胞為胰腺腫瘤細(xì)胞，肺癌細(xì)胞，骨髓性白血病腫瘤細(xì)胞，甲狀腺囊腫瘤細(xì)胞，脊髓發(fā)育不良腫瘤細(xì)胞，表皮癌腫瘤細(xì)胞，膀胱癌腫瘤細(xì)胞或前列腺腫瘤細(xì)胞，黑素瘤腫瘤細(xì)胞，乳腺腫瘤細(xì)胞或結(jié)腸腫瘤細(xì)胞。
13.權(quán)利要求10的用途，其中細(xì)胞異常生長的抑制通過抑制ras法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶實現(xiàn)。
14.權(quán)利要求10的用途，其中所述抑制是對其中Ras蛋白由于非Ras基因的基因中致癌突變而激活的腫瘤細(xì)胞的抑制。
15.權(quán)利要求1-3中任一項的化合物在抑制胰腺腫瘤細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、骨髓性白血病腫瘤細(xì)胞、甲狀腺囊腫瘤細(xì)胞、脊髓發(fā)育不良腫瘤細(xì)胞、表皮癌腫瘤細(xì)胞、膀胱癌腫瘤細(xì)胞或前列腺腫瘤細(xì)胞、黑素瘤腫瘤細(xì)胞、乳腺腫瘤細(xì)胞或結(jié)腸腫瘤細(xì)胞方面的應(yīng)用。
16.權(quán)利要求1-3中任一項的化合物在抑制ras法尼基蛋白轉(zhuǎn)移酶方面的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了新化合物與藥物組合物,它們?yōu)槊福峄鞍邹D(zhuǎn)移酶的抑制劑。本發(fā)明還公開了抑制Ras功能,并因而抑制細(xì)胞異常生長的方法。該方法包括對生物系統(tǒng)施用新的氨基氧代酰胺化合物。特別是所述方法能抑制哺乳動物如人的細(xì)胞異常生長。
文檔編號A61P35/00GK1346355SQ99816155
公開日2002年4月24日 申請日期1999年12月22日 優(yōu)先權(quán)日1998年12月23日
發(fā)明者A·B·科珀, R·J·多爾, J·A·菲雷拉, A·甘古利, V·M·吉里雅瓦拉布漢, A·G·塔維拉斯, 巢健萍, J·J·巴爾德溫, 黃嘉瑜, 李革 申請人:先靈公司, 法馬科皮亞公司