專利名稱：皮膚增白劑的制作方法
相關(guān)申請的交叉參考該申請是基于1998年5月22日在韓國工業(yè)產(chǎn)權(quán)局申請的98-17641號申請，其內(nèi)容在此作為參考引入。
背景技術(shù)：
(a)發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及能夠與藥物和具有皮膚增白效果的化妝品物質(zhì)一起使用的皮膚增白劑，特別是包含具有極好的抑制黑色素形成作用的用于使雀斑或斑點褪色和皮膚增白的倍半萜烯型的蛇床(selina)-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的增白劑。
(b)相關(guān)技術(shù)的描述人的膚色遺傳上通常根據(jù)皮膚內(nèi)部黑色素的濃度和分布決定。然而，它也受到周圍條件或生理條件例如太陽紫外線、疲乏和壓力的影響。上述黑色素是在酶酪氨酸酶作用于氨基酸酪氨酸之后經(jīng)過非酶催化氧化反應(yīng)將其轉(zhuǎn)變成多巴和多巴醌而形成的。
由此可見形成黑色素的過程是已知的，但是誘發(fā)黑色素合成的機理或在酪氨酸酶作用之前的步驟還沒有詳細地公開。
因此，常用的具有抑制酪氨酸酶活性的物質(zhì)(例如氫醌，抗壞血酸，曲酸和谷胱甘肽)在與軟膏或化妝品混合之后已經(jīng)被用于皮膚增白以及使雀斑和斑點褪色。
然而，由于產(chǎn)品安全性差、皮膚刺激性以及有限的有效性，這些產(chǎn)品具有適用范圍有限的缺點。
發(fā)明概述因此，本發(fā)明是為了解決上述問題。本發(fā)明的目的在于提供具有較強抑制黑色素形成作用以及使用中出現(xiàn)較少問題的皮膚增白劑。
用于實現(xiàn)上述目的的本發(fā)明的皮膚增白劑，其特征在于其包括下面通式1表示的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。 盡管研究已經(jīng)報道上述蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮具有抗炎癥效果[Chem.Pharm.Bull.，27(12)，2954，1979]、抗癡呆效果[日本公告的專利JP09094452]等，但是這些效果與本發(fā)明完全不同。
蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮是15個碳原子的有機化合物，其是在不同文獻中提到的一般已知的物質(zhì)，可以從微生物、植物和動物中獲得。
可以說，本發(fā)明的皮膚增白劑可以通過提取包含在紅術(shù)(red atractylodesrhizome)、白術(shù)(white atractylodes rhizome)、蒼術(shù)(atractylodes rhizome)、獐耳細辛(hepatica)、紫金牛(bladhia japanica)、繡球藥(asiasarum)、華澤蘭(bladhiajapanica)等中的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮而獲得。
附圖簡述當(dāng)結(jié)合附圖考慮并參照下面詳細描述時本發(fā)明變得更好理解，對本發(fā)明將更全面地領(lǐng)會及其許多伴隨的優(yōu)點將容易明白，其中

圖1是分離的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的NMR譜圖；以及圖2是分離的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的質(zhì)譜圖。
優(yōu)選實施方案的詳細說明在下面的詳細說明中，僅僅是通過實施本發(fā)明的發(fā)明人考慮的最佳方式的舉例說明簡單地描述本發(fā)明的優(yōu)選實施方案。應(yīng)當(dāng)認識到本發(fā)明在許多明顯的方面能夠被改進，所有這些不脫離本發(fā)明。因此，附圖和描述實際上被認為是說明性的，而不是限制性的。
如上所述，本發(fā)明的目的在于提供皮膚增白劑，其特征在于其包括蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮，一種倍半萜烯，其是可以從自然中獲得的天然有機化合物。
上述蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮優(yōu)選從特別作為原料藥出售的植物中提取。蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的來源包括例如紅術(shù)、白術(shù)、蒼術(shù)、獐耳細辛、紫金牛、繡球花、華澤蘭等植物。
從這些植物中分離蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的技術(shù)包括各種通常已知的方法，例如，干燥用有機溶劑從精細粉碎的植物碎片中提取的提取液，然后懸浮在水中，在懸浮液中加入相同體積的己烷。干燥通過液-液分配獲得的己烷餾份，通過柱色譜法和高效液相色譜法從中獲得純的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
當(dāng)用這種純分離的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮處理小鼠B-16黑色素瘤細胞時，顯示了非常強的抑制黑色素合成的作用。另外，當(dāng)將這種化合物放進不同的化妝品物質(zhì)例如皮膚外用軟膏或洗液并且應(yīng)用于人的皮膚時，皮膚的增白效果極好。此外沒有顯示其他副作用，因此可以看出它是一種用于使雀斑或斑點褪色以及皮膚增白的安全性高并且非常有效的藥劑。
蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮在化妝品或外用的皮膚軟膏中的優(yōu)選固體含量是0.000001至10重量％。然而，由于當(dāng)含量低于0.001重量％時皮膚的增白效果不那么好以及當(dāng)含量增加到1重量％以上時在效果方面沒有觀察到顯著的改進，因此0.001至1重量％的范圍是更優(yōu)選的。
盡管在下文中將根據(jù)下列試驗、比較實施例以及制備實施例詳細地說明本發(fā)明，但是本發(fā)明并不局限于這些實施例。
實施例1在購買并且粉碎白術(shù)之后，將100克粉碎的白術(shù)碎片放進500毫升100％正己烷溶劑中，在帶有冷卻冷凝器的回流提取器中沸騰3小時，其后將其提取然后用300目的濾布過濾。剩余的物質(zhì)用如上相同的方法再次處理。合并提取液，用Whatman 2號濾紙過濾，除去不溶性物質(zhì)。然后用蒸餾設(shè)備將液體在60℃減壓下濃縮，然后將濃縮液懸浮在300毫升凈化水中。加入300毫升己烷，均勻搖動混合物，獲得可溶于己烷的物質(zhì)。通過用硅膠柱色譜分離該可溶物質(zhì)獲得450毫克含有有效成分的餾份。該餾份通過高效液相色譜法再次提純，分離出210毫克蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
圖1表示分離的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的質(zhì)子核磁共振譜，圖2表示質(zhì)譜。
實施例2在購買并且粉碎白術(shù)之后，將100克粉碎的白術(shù)碎片放進500毫升100％乙醇溶劑中，按照與上述實施例1中相同的方法獲得155毫克蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
實施例3在購買并且粉碎白術(shù)之后，將100克粉碎的白術(shù)碎片放進500毫升100％氯仿溶劑中，按照與上述實施例1中相同的方法獲得175毫克蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
實施例4在購買并且粉碎白術(shù)之后，將100克粉碎的白術(shù)碎片放進500毫升100％癸酸/辛酸三酯(capric/caprillic triester)中，在帶有冷卻冷凝器的回流提取器中沸騰3小時，其后將其提取然后用300目的濾布過濾。再用Whatman 2號濾紙在室溫下過濾，除去不溶性物質(zhì)。使用高效液相色譜法定量蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮，結(jié)果從100克粉碎的碎片中獲得280毫克蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
實施例5將100克粉碎的蒼術(shù)碎片放進500毫升正己烷溶劑中，按照與上述實施例1中相同的方法獲得170毫克蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
實施例6
將100克粉碎的紅術(shù)碎片放進500毫升正己烷溶劑中，按照與上述實施例1中相同的方法獲得150毫克蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
實施例7將100克粉碎的獐耳細辛碎片放進500毫升正己烷溶劑中，按照與上述實施例1中相同的方法獲得170毫克蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
實施例8將100克粉碎的紫金牛碎片放進500毫升正己烷溶劑中，按照與上述實施例1中相同的方法獲得140毫克蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
實施例9將100克粉碎的繡球花根碎片放進500毫升正己烷溶劑中，按照與上述實施例1中相同的方法獲得150毫克蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
實施例10將100克粉碎的華澤蘭碎片放進500毫升正己烷溶劑中，按照與上述實施例1中相同的方法獲得165毫克蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
試驗實施例1通過在小鼠B16黑色素瘤細胞(Lotan R.，Lotan D.Cancer Res.403345-3350，1980)上處理根據(jù)上述實施例1獲得的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮測試細胞水平上的增白效果。
小鼠B16黑色素瘤細胞在含有5％FCS的Eagle的MEM介質(zhì)中培養(yǎng)一天，然后轉(zhuǎn)移到Φ60mm的盤子中。
然后，分別向盤子中加入含有1μg/ml、5μg/ml和20μg/ml蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮和1μg/ml作為正性對照的氫醌的介質(zhì)，再培養(yǎng)三天。細胞通過離心作用收集在試管中。將1ml氫氧化鈉溶液(1N濃度)加入到這些試管中，試管在沸水浴中保溫10分鐘以溶解黑色素。通過在400nm處讀取吸光率測量黑色素含量，表示為A400/106細胞，相對于對照組的黑色素形成量計算為抑制比率(％)。結(jié)果顯示在表1中。在該表中，蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮表示為“AT-1”，其是重復(fù)測試3次的結(jié)果。
如上述表1中所示，能夠看出當(dāng)與目前已知的增白物質(zhì)氫醌相比較時，根據(jù)實施例獲得的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮對于培養(yǎng)的小鼠黑色素瘤細胞具有相等的黑色素形成抑制性。此外，氫醌在低濃度時具有較強的黑色素形成抑制性，但是由于其高細胞毒性其在1μg/ml濃度以上不能測試。相反，蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮，甚至在20μg/ml濃度時也不顯示細胞毒性并且比氫醌具有較高的黑色素形成抑制效果。
含有蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的化妝品物質(zhì)的制劑實施例也由下列配制實施例表示制劑實施例1和比較實施例1含有蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的外用皮膚軟膏的制劑實施例如下列表2所示。
制劑實施例2和比較實施例2含有蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的化妝品膏的制劑實施例如由下列表3表示[表3]
制劑實施例3和比較實施例3含有蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的溫和的花露水(洗液)化妝品的制劑實施例如下列表4所示。
制劑實施例4和比較實施例4含有蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的化妝品香精的制劑實施例如下列表5所示。
制劑實施例5和比較實施例5含有蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的化妝潤面膏的制劑實施例如下列表6所示。
制劑實施例6和比較實施例6含有蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的有營養(yǎng)的花露水(洗液)化妝品的制劑實施例如下列表7所示。
試驗實施例2選擇一組由年輕男人和女人組成的20人用1,000瓦ORIEL太陽能模擬器照射。在照射之前，將排列成兩排、每排6孔、孔徑為7毫米(mm)的鋁箔掩模覆蓋兩臂的下面部分。目標(biāo)區(qū)域也用70％乙醇水溶液擦洗干凈。從距離10厘米(cm)處以強度為每平方厘米60毫焦耳照射該臂。將來自制造實施例1至6和比較實施例1至6的物質(zhì)涂覆在試驗人皮膚的分別指定的孔位置上。該涂覆劑每天涂覆兩次，從開始照射之前三天開始，在照射之后繼續(xù)三周。(注意制造實施例5和比較實施例5的潤面膏制劑在施用之后15分鐘除去。)制劑實施例和比較實施例孔位中顏料的沉積度通過用肉眼目視觀察來測定。抑制顏料沉積的程度分為有效或者無差異，結(jié)果顯示在下列表8中。
如上述表8中的結(jié)果所示，含有根據(jù)制造實施例1至6制備的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的軟膏和化妝品物質(zhì)對于測試的20人當(dāng)中至少10人顯示了增白效果。特別是在制造實施例1中，應(yīng)用了大量的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮，70％顯示抑制顏料沉積的作用，沒有檢測到消極的副作用。因此能夠看出蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮是一種用于使雀斑和斑點褪色或皮膚增白的安全并且非常有效的改進劑。
如上文所詳細描述的那樣，包含本發(fā)明有效成分蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的皮膚增白劑不僅安全、對皮膚沒有負的效應(yīng)，而且具有極好的使雀斑和斑點褪色以及皮膚增白的效果。
雖然本發(fā)明已經(jīng)根據(jù)其優(yōu)選實施方案進行了詳細描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員將領(lǐng)會在不離開如附屬的權(quán)利要求所列出的本發(fā)明精神和范圍下可以對其作出不同的改進和替換。
權(quán)利要求
1.包含有效成分蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮的皮膚增白劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的皮膚增白劑，其特征在于蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮從選自白術(shù)、紅術(shù)、蒼術(shù)、獐耳細辛、紫金牛、繡球花和華澤蘭的一個或多個植物中提取。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的皮膚增白劑，其特征在于其含有0.000001至10重量％的蛇床-4(14)，7(11)-二烯-8-酮。
全文摘要
本發(fā)明涉及能被用作藥物和具有皮膚增白效果的化妝品物質(zhì),特別是用作具有安全并且具有極好皮膚增白效果的皮膚增白劑,其由有效成分蛇床－4(14),7(11)－二烯－8－酮組成。
文檔編號A61K8/02GK1352546SQ99816739
公開日2002年6月5日 申請日期1999年5月21日 優(yōu)先權(quán)日1999年5月21日
發(fā)明者金清澤, 金鎬正, 鄭珉渙, 陳戊鉉 申請人:Lg生活健康株式會社