一種富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一種富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物及 其制備方法以及在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 據(jù)世界衛(wèi)生組織2013年2月1日發(fā)表的調(diào)查報(bào)告顯示，2008年全球死于癌癥的人 數(shù)達(dá)760萬(wàn)，每年約有1300萬(wàn)新增癌癥患者，其中近60%為肺癌、胃癌、乳腺癌、前列性癌、 結(jié)腸直腸癌、口腔癌、肝癌、宮頸癌及食管癌，是僅次于心血管疾病的第二大死因。目前，癌 癥的治療有手術(shù)、放化療、介入等多種手段，但死亡率依然居高不下。世界各國(guó)的專家學(xué)者 都在積極研究尋找治療各種癌癥的方法和藥物。中藥和天然藥物對(duì)于治療癌癥等疑難病癥 有著悠久的歷史，近年來(lái)，藥用植物中的活性成分及其衍生物，如長(zhǎng)春新堿、羥基喜樹堿、紫 杉醇、多西紫杉醇等已經(jīng)作為一線抗癌藥物被廣泛使用，因此從藥用植物中尋找高效的抗 癌藥物已經(jīng)成為了國(guó)內(nèi)外抗癌藥物研究的重點(diǎn)。
[0003]馬利筋（AsclepiascurassavicaL.)為蘿摩科（Asclepiadaceae)馬利筋屬一 年或多年生草本植物。原產(chǎn)于熱帶美洲地區(qū)，喜歡溫暖多濕的環(huán)境。清代《植物名實(shí)圖考》 (1848年）就已有記載，傳入我國(guó)至少已有160多年的歷史，如今在我國(guó)熱帶、亞熱帶地區(qū)已 廣泛栽種。據(jù)《中華本草》傣藥篇中記載，味甘，性涼，有小毒，主要功效為調(diào)經(jīng)止血，清火退 熱，消腫止痛等。
[0004] 近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)馬利筋的化學(xué)成分進(jìn)行了深入系統(tǒng)的研究，已從其中分離 鑒定數(shù)十種強(qiáng)心苷類成分，并進(jìn)行了體外抗腫瘤細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，證明該類化合物對(duì)肺癌 細(xì)胞A549、乳腺癌細(xì)胞MCF-7和MDA-MB-231、肝癌細(xì)胞H印G2以及前列腺癌細(xì)胞DU145 都有很強(qiáng)的抗腫瘤活性（Chemical&PharmaceuticalBulletin，1991，39, 2709;Journal ofnaturalproducts,2005, 68, 1494；MedicinalChemistryLetters,2009, 19, 1956 ； Organic&biomolecularchemistry, 2014，D01:10. 1039/010B01545B.)，但這些研究均是 分離馬利筋全草中的單體化合物，之后再進(jìn)行活性篩選。馬利筋全草中的強(qiáng)心留較多，單 一化合物的含量較低（分離收率均低于1 %，Organic&biomolecularchemistry，2014， D01:10. 1039/C40B01545B.)，因此，從馬利筋全草中分離單體化合物再開發(fā)成抗腫瘤藥物 較為費(fèi)時(shí)費(fèi)力。并且，這些單體化合物無(wú)選擇性，對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的抑制活性相似。
[0005] 馬利筋也有其它方面的用途。中國(guó)發(fā)明專利（公開號(hào)101603209)公開了"一種紡 紗用馬利筋纖維棉條及其加工方法和設(shè)備"涉及紡紗用馬利筋纖維棉條及其加工方法和設(shè) 備；另一發(fā)明專利申請(qǐng)（公開號(hào)104082347A)公開了"一種具有殺蟲作用的植物提取物"涉 及一種效果顯著、環(huán)境友好的新型植物源殺蟲劑，該殺蟲劑系以馬利筋干燥全草為原料，用 乙醇加熱回流提取制得。這些文獻(xiàn)均是以馬利筋為研究對(duì)象，但是未涉及馬利筋提取物在 抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的缺點(diǎn)和不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種富含強(qiáng)心苷 的馬利筋乳汁提取物的制備方法。該制備方法以馬利筋的乳汁為原料。通過對(duì)馬利筋各組 織部位化學(xué)成分的研究發(fā)現(xiàn)，乳汁中所含的強(qiáng)心苷不僅種類特別豐富，含量也非常大，幾乎 是葉中強(qiáng)心苷含量的一百倍。并且，乳汁中的總的強(qiáng)心苷對(duì)腫瘤細(xì)胞的毒性高，而對(duì)正常細(xì) 胞的毒性低。從馬利筋乳汁中可以獲得高效低毒的抗腫瘤活性物質(zhì)。
[0007] 本發(fā)明的另一目的在于提供由上述制備方法得到的富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提 取物。
[0008] 本發(fā)明的再一目的在于提供上述富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物在抗腫瘤藥物 中的應(yīng)用。
[0009] 本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0010] 一種富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物的制備方法，具體包括以下步驟：
[0011] (1)將馬利筋的乳汁用水稀釋，得到稀釋液；向稀釋液中加入有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取， 收集萃取后的有機(jī)層；再向剩下的水層中加入有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，再次收集有機(jī)層，如此循 環(huán)萃取2?4次，棄去水層，將有機(jī)層合并，得到馬利筋乳汁的強(qiáng)心苷提取液；
[0012] (2)將馬利筋乳汁的強(qiáng)心苷提取液進(jìn)行減壓濃縮至恒重，得到白色漿狀物，即為富 含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物。
[0013] 步驟（1)中所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯或正丁醇；所述馬利筋的乳汁用水稀釋中水 的用量為乳汁體積的5?10倍。
[0014] 步驟（1)中所述有機(jī)溶劑每次加入量為乳汁體積的3?5倍
[0015] 步驟⑵中所述減壓濃縮的溫度為30?50°C。
[0016] 所述富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物中含有化合物l(calotropin)，化合物 2(voruscharin)以及化合物3(uscharin);所述化合物1在所述提取物中的質(zhì)量百分含量 為31?33%，所述化合物2在所述提取物中的質(zhì)量百分含量為29?31%，所述化合物3 在所述提取物中的質(zhì)量百分含量為9?10%。
[0017] 化合物1的結(jié)構(gòu)式如下所示：
[0018]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物的制備方法，其特征在于：具體包括以下步 驟： (1) 將馬利筋的乳汁用水稀釋，得到稀釋液；向稀釋液中加入有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，收集 萃取后的有機(jī)層；再向剩下的水層中加入有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，再次收集有機(jī)層，如此循環(huán)萃 取2?4次，棄去水層，將有機(jī)層合并，得到馬利筋乳汁的強(qiáng)心苷提取液； (2) 將馬利筋乳汁的強(qiáng)心苷提取液進(jìn)行減壓濃縮至恒重，得到白色漿狀物，即為富含強(qiáng) 心苷的馬利筋乳汁提取物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物的制備方法，其特征在于：步 驟（1)中所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯或正丁醇。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物的制備方法，其特征在于：步 驟（1)中所述馬利筋的乳汁用水稀釋中水的用量為乳汁體積的5?10倍。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物的制備方法，其特征在于：步 驟（1)中所述有機(jī)溶劑每次加入量為乳汁體積的3?5倍。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物的制備方法，其特征在于：步 驟（2)中所述減壓濃縮的溫度為30?50°C。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物的制備方法，其特征在于：所 述富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物中含有化合物1，化合物2以及化合物3 ; 所述化合物1的結(jié)構(gòu)式為：
化合物2的結(jié)構(gòu)式為：
化合物3的結(jié)構(gòu)式為：
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物的制備方法，其特征在于：所 述化合物1在所述提取物中的質(zhì)量百分含量為31?33%，所述化合物2在所述提取物中的 質(zhì)量百分含量為29?31%，所述化合物3在所述提取物中的質(zhì)量百分含量為9?10%。
8. -種富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物通過權(quán)利要求1所述的制備方法制備得到。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物的應(yīng)用，其特征在于：所述富 含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，公開了一種富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物及其制備方法與應(yīng)用。所述提取物的制備方法為：(1)將馬利筋的乳汁用水稀釋，得到稀釋液；向稀釋液中加入有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，收集萃取后的有機(jī)層；再向剩下的水層中加入有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，再次收集有機(jī)層，如此循環(huán)萃取2～4次，棄去水層，將有機(jī)層合并，得到馬利筋乳汁的強(qiáng)心苷提取液；(2)將馬利筋乳汁的強(qiáng)心苷提取液進(jìn)行減壓濃縮至恒重，得到富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物。本發(fā)明的富含強(qiáng)心苷的馬利筋乳汁提取物具有良好的抗腫瘤活性，對(duì)正常細(xì)胞的毒性低；該提取物中強(qiáng)心苷的種類多，含量豐富。本發(fā)明的制備方法簡(jiǎn)單、成本低、提取率高且抗腫瘤的選擇性高。
【IPC分類】A61K31-585, A61K36-27, A61P35-00
【公開號(hào)】CN104523792
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410824396
【發(fā)明人】江仁望, 張容容, 譚亞芳, 田海妍, 朱自榮
【申請(qǐng)人】暨南大學(xué)
【公開日】2015年4月22日
【申請(qǐng)日】2014年12月24日