可用于預(yù)防肉雞大腸桿菌感染的發(fā)酵中草藥制劑及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種可用于預(yù)防肉雞大腸桿菌感染的發(fā)酵中草藥制劑及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著飼料工業(yè)的快速發(fā)展，抗生素等飼料添加劑所產(chǎn)生的耐藥性和殘留已經(jīng)引起 了科技工作者和消費者的關(guān)注和憂慮。分析歐盟提出的獸藥殘留控制目錄可以發(fā)現(xiàn)，涉及 的獸藥主要是抗生素、化學(xué)合成藥和激素類等。就此，歐盟1999年立法禁止使用除黃霉素、 阿維拉霉素、莫能菌素和桿菌清之外的所有抗菌性和抗球蟲藥飼料添加劑。我國是世界第 二大飼料生產(chǎn)大國，但隨著人們物質(zhì)生活水平的提高及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，飼料安全問 題逐漸受到人們的廣泛關(guān)注，尤其是在飼料添加劑的使用方面更為突出。目前抗生素、磺胺 類和激素類藥物飼料添加劑的應(yīng)用較為普遍，這些添加劑的使用極易造成畜禽產(chǎn)品中藥物 殘留，耐藥性，更為嚴(yán)重的是對人體的"三致"（致癌、致畸、致突變）作用。無公害、安全、綠 色畜產(chǎn)品已成為現(xiàn)代畜牧業(yè)發(fā)展的方向，中草藥和微生態(tài)制劑作為飼料添加劑的兩大類， 具有純天然、無毒害、無藥殘、安全方便、功能全面等優(yōu)點已成為國內(nèi)外開展此項研宄的熱 點。
[0003] 肉雞在長期進化過程中，消化道內(nèi)的微生物與宿主形成了穩(wěn)定的共生關(guān)系，可保 持肉雞體內(nèi)的微生態(tài)平衡。但隨著肉雞養(yǎng)殖規(guī)模的逐漸擴大，集約式的飼養(yǎng)模式和抗生素 等預(yù)防藥物的濫用，極大的影響了肉雞體內(nèi)的微生態(tài)平衡，導(dǎo)致肉雞生產(chǎn)性能和免疫性能 的下降，影響了肉雞的品質(zhì)。其中，雞大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌引起的一種常見多發(fā) 病。該病可以在各種日齡雞群中發(fā)病，會嚴(yán)重影響肉雞的生長發(fā)育，給養(yǎng)雞業(yè)造成很大的損 失。
[0004] 大腸桿菌的血清型較多，使用疫苗防治往往效果不佳，抗生素防治如前所述，又會 產(chǎn)生耐藥性和殘留。因此，開發(fā)一種新型的純天然、無毒害、無藥殘、安全方便的用于預(yù)防肉 雞大腸桿菌感染的飼料添加劑是目前研宄的熱點和難點。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的是提供一種可用于預(yù)防肉雞大腸桿菌感染的發(fā) 酵中草藥制劑，既可以發(fā)揮中藥替代飼用抗生素的功能，又可以發(fā)揮微生態(tài)制劑的益生效 果。該發(fā)酵中草藥制劑純天然、無毒害、無藥殘、無異味，適口性好，使用安全方便。
[0006] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：
[0007] -種可用于預(yù)防肉雞大腸桿菌感染的發(fā)酵中草藥制劑，其活性成分是由乳酸菌發(fā) 酵以下按照質(zhì)量百分比的原料配方得到的培養(yǎng)物：
[0008] 復(fù)合中草藥77. 7-97. 7%，麩皮0-20%，硫酸銨1.3%，葡萄糖1.0% ;
[0009] 所述復(fù)合中草藥是由紫莖澤蘭脫毒草粉、白術(shù)、茯苓、苦地丁、黃柏、莪術(shù)按質(zhì)量比 5:1:1:1:1:1混合而成。
[0010] 優(yōu)選的，該發(fā)酵中草藥制劑的活性成分是由乳酸菌發(fā)酵以下按照質(zhì)量百分比的原 料配方得到的培養(yǎng)物：
[0011] 復(fù)合中草藥（紫莖澤蘭脫毒草粉、白術(shù)、茯苓、苦地丁、黃柏、莪術(shù)按質(zhì)量比 5:1:1:1:1:1 混合）87. 7%，麩皮 10%，硫酸銨 1. 3%，葡萄糖 1.0%。
[0012] 供發(fā)酵的乳酸菌選自豬源鏈球菌、羅伊氏乳桿菌、植物乳桿菌、鼠李糖乳桿菌或戊 糖片球菌；優(yōu)選為植物乳桿菌、鼠李糖乳桿菌或戊糖片球菌；更優(yōu)選的為鼠李糖乳桿菌。
[0013] 該用于預(yù)防肉雞大腸桿菌感染的發(fā)酵中草藥制劑的制備方法，包括以下步驟：
[0014] (1)稱取配方中的原料，加入1-1. 5倍量（g/mL)的水，攪拌均勻；
[0015] (2)取供發(fā)酵的乳酸菌菌粉接種至乳酸菌斜面培養(yǎng)基上，在35-38°C靜置培養(yǎng) 20-26h，接種斜面種子至乳酸菌液體培養(yǎng)基中，在35-38°C靜置培養(yǎng)20-26h;然后按照體積 百分?jǐn)?shù)3% -6%接種到步驟（1)的加水混勻后的原料中，在35-38°C發(fā)酵44-50h后自然晾 干，得發(fā)酵培養(yǎng)物；
[0016] (3)向步驟（2)的發(fā)酵培養(yǎng)物中加入枯草芽孢桿菌噴干粉，枯草芽孢桿菌噴干粉 終濃度為1. 〇X108 - 3. 0X108cfu/g，混合均勾，制粒，即得。
[0017]步驟⑴中，優(yōu)選的，向原料中加入1. 2倍量（g/mL)的水。
[0018] 步驟（2)中，優(yōu)選的，將乳酸菌菌粉接種到斜面培養(yǎng)基后，37°C靜置培養(yǎng)24h，接種 斜面種子至乳酸菌液體培養(yǎng)基中，37°C靜置培養(yǎng)24h;然后按照體積百分?jǐn)?shù)4%接種到步驟 (1)的加水混勻后的原料中，在37°C發(fā)酵48小時后自然晾干，得發(fā)酵培養(yǎng)物；
[0019] 步驟（3)中，優(yōu)選的，枯草芽孢桿菌噴干粉終濃度為2.OX108cfu/g。
[0020] 本發(fā)明的發(fā)酵中草藥制劑是一種復(fù)合中草藥微生態(tài)制劑，既可以通過乳酸菌聯(lián)合 中草藥防治肉雞大腸桿菌腹瀉，替代抗生素的功效，又可以發(fā)揮微生態(tài)制劑的益生效果，純 天然、無毒害、無藥殘、無異味、適口性好，使用安全方便。
[0021] 復(fù)合中草藥中，白術(shù)味苦、甘，性溫，主要化學(xué)成分為潷草烯、欖香醇、a-姜黃 烯、蒼術(shù)酮等，對傷寒桿菌、甲型副傷寒桿菌、福氏痢疾桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌等均有不 同程度的抑菌作用。
[0022] 茯苓，味甘、淡，性平，主要化學(xué)成分為多糖、三萜、脂肪酸、留醇類化合物，其中茯 苓多糖具有增強免疫系統(tǒng)的作用，既增強細胞免疫，又增強體液免疫，能顯著提高機體巨噬 細胞的吞噬能力。
[0023]苦地丁，味苦，為罌粟科植物紫堇的干燥全草，含有多種生物堿，具有抗菌活性，對 甲型鏈球菌、肺炎球菌、痢疾桿菌、大腸桿菌、綠膿桿菌均有抑制作用。
[0024]黃柏，苦，寒，含有小檗堿、藥根堿、木蘭花堿、黃柏堿等多種生物堿，具有清熱燥 濕，瀉火除蒸，解毒療瘡之功效。
[0025]莪術(shù)，味辛、苦，性溫，其主要化學(xué)成分為莪術(shù)呋喃烯酮、龍腦、姜黃烯、莪術(shù)二酮 等，還含有抗氧化劑活性的姜黃素類化合物，具有抗菌、消炎的作用，對胃腸平滑肌也具有 一定的影響。
[0026]紫莖澤蘭為多年生草本或亞灌木，是植物界里的"殺手"，所到之處寸草不生，對環(huán) 境的適應(yīng)性極強。紫莖澤蘭經(jīng)脫毒后制備的脫毒草粉富含植物蛋白，可用于制作成草粉飼 料，將紫莖澤蘭變廢為寶。
[0027]本發(fā)明的復(fù)合中草藥組方，是發(fā)明人經(jīng)過長期實驗得出的經(jīng)驗方，其以紫莖澤蘭 脫毒草粉為主，輔以白術(shù)、茯苓、苦地丁、黃柏和莪術(shù)，各組分相互配伍，共同起到免疫增強 的作用。在肉雞飼料中作為添加劑，具有促長、誘食、增強免疫、改善肉雞品質(zhì)的功效。
[0028] 本發(fā)明的復(fù)合中草藥經(jīng)乳酸菌發(fā)酵后，將中藥成分由大分子轉(zhuǎn)化為小分子，更利 于有機體的吸收，提高了藥物的藥效；發(fā)酵過程中還會將中藥中的有毒物質(zhì)分解，并且能顯 著改善中藥的口味，提高了其適口性。通過發(fā)酵將其制成微生態(tài)制劑，達到改善黏膜表面微 生物或酶的平衡，或者刺激特異性或非特異性免疫機制的作用。在禽類生產(chǎn)上主要用來提 前預(yù)防疾病和作為飼料添加劑使用。具有調(diào)節(jié)動物腸道內(nèi)微生態(tài)平衡、促進動物生長、增強 機體抗病能力。
[0029] 本發(fā)明的有益效果：
[0030] 本發(fā)明的發(fā)酵中草藥制劑通過調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，刺激免疫球蛋白slgA和IgG分 泌，同時促進T細胞介導(dǎo)因子IL-2和炎性因子IL-6的分泌，提高機體免疫力，有效防治肉 雞大腸桿菌引起的腹瀉，減少死亡率，達到與桿菌清類抗生素防治大腸桿菌腹瀉同樣的效 果。同時，該發(fā)酵中草藥制劑能夠明顯促進肉雞后期的育肥和生長，與桿菌清相比更加安 全、綠色、高效、無殘留。
【附圖說明】
[0031] 圖1為實施例2中草藥安全性試驗中各組小鼠臟器解剖圖；
[0032]圖2為實施例3發(fā)酵中草藥制劑對白羽肉雞的抗感染效果試驗中攻毒大腸桿菌后 各組雞只糞便情況。
【具體實施方式】
[0033] 結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的說明，應(yīng)該說明的是，下述說明僅是為了解釋本 發(fā)明，并不對其內(nèi)容進行限定。
[0034] 實施例1:發(fā)酵中草藥制劑的制備
[0035] 1材料與方法
[0036] 1. 1復(fù)合中草藥發(fā)酵前后抑菌性能的檢測
[0037] 1. 1. 1材料
[0038] 供試菌株：豬源鏈球菌（商品名稱：豬源鏈球菌菌粉；商品號：2014041302 ;生產(chǎn) 廠家：山東寶來利來生物工程股份有限公司）；羅伊氏乳桿菌（商品名稱：羅伊氏乳桿菌 菌粉；商品號：2014061401 ;生產(chǎn)廠家：山東寶來利來生物工程股份有限公司）；植物乳桿 菌LP(已于2010年06月21日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，其保藏編號為：CCTCCM 2010150,記載在中國專利申請CN201010240725.X中）；鼠李糖乳桿菌（商品名稱：鼠李糖 乳桿菌菌粉；商品號：2014091203 ;生產(chǎn)廠家：山東寶來利來生物工程股份有限公司）；戊 糖片球菌（已于2012年02月22日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，其保藏編號為CCTCC