倍他米松戊酸酯在制備抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散的藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及倍他米松戊酸酯在制藥領(lǐng)域新的用途，具體涉及倍他米松戊酸酯在制 備抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散的藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 倍他米松戊酸酯是腎上腺皮質(zhì)激素類藥。具有抗炎、抗過敏及止癢的作用。硫酸 新霉素有局部抗菌作用，能抑制多數(shù)革蘭氏陽性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌包括葡萄球菌、變 形桿菌屬和假單胞菌屬，但對(duì)真菌無作用。
[0003] 主要用于皮膚類炎癥的外用藥，抑制和減輕皮膚的瘙癢，紅腫等癥狀。如濕瘆，牛 皮癬和皮炎。倍他米松戊酸酯易被機(jī)體吸收，但如果長期用藥會(huì)有副作用。
[0004] 現(xiàn)有公開文獻(xiàn)中尚未發(fā)現(xiàn)倍他米松戊酸酯的其他藥理作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 發(fā)明目的：本發(fā)明目的在于提供一種倍他米松戊酸酯在制備抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和 擴(kuò)散的藥物中的應(yīng)用。
[0006] 技術(shù)方案：倍他米松戊酸酯在制備抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散的藥物中的應(yīng)用。
[0007] 優(yōu)選地，所述腫瘤細(xì)胞為結(jié)腸癌細(xì)胞。
[0008] 優(yōu)選地，其中倍他米松戊酸酯的濃度為10?40uM。
[0009] 發(fā)明人通過細(xì)胞層面的實(shí)驗(yàn)研宄發(fā)現(xiàn)，倍他米松戊酸酯對(duì)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力有 一定的抑制作用。目前針對(duì)現(xiàn)有的適應(yīng)癥定性其為外用藥，直接涂抹于患處。
[0010] 本發(fā)明需要在現(xiàn)有的細(xì)胞層面實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上根據(jù)新的適應(yīng)癥療效以及后續(xù)相關(guān)實(shí) 驗(yàn)設(shè)計(jì)確定新的臨床給藥方法及劑量。
[0011] 本發(fā)明通過將腫瘤細(xì)胞采集培養(yǎng)后，再利用藥物刺激細(xì)胞，觀察細(xì)胞形態(tài)、并定量 分析細(xì)胞層的面積，即細(xì)胞能夠與其他細(xì)胞接觸的面積，從而判斷腫瘤細(xì)胞的擴(kuò)散能力。細(xì) 胞層面積越大越有利于與其他細(xì)胞形成連接。細(xì)胞迀移需要內(nèi)外因素的配合。外部的因素 指的是細(xì)胞外的信號(hào)分子。內(nèi)部因素則指細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)和執(zhí)行運(yùn)動(dòng)的細(xì)胞骨架和分 子馬達(dá)，還有參與粘著斑形成的各種分子。細(xì)胞外信號(hào)結(jié)合胞膜受體完成其使命后，需要 細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子接力，將運(yùn)動(dòng)信息進(jìn)一步傳給細(xì)胞迀移的執(zhí)行單位一一細(xì)胞骨架和分子馬 達(dá)。種類繁多的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子會(huì)相互作用，影響后述這兩種分子的分布，結(jié)構(gòu)和活性，達(dá) 到精細(xì)調(diào)整細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的目的。由此可見，腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，與細(xì)胞本身以及細(xì)胞之間的關(guān)系 緊密。
[0012] 癌細(xì)胞與其同源正常組織相比，細(xì)胞間的粘著性降低，故癌細(xì)胞在體內(nèi)容易分散 和轉(zhuǎn)移。在正常細(xì)胞外被中的纖粘連蛋白是一種細(xì)胞外粘著糖蛋白，它增強(qiáng)了細(xì)胞與細(xì)胞 外基質(zhì)間的粘著。癌細(xì)胞的纖粘連蛋白顯著減少或缺失，鈣粘蛋白合成發(fā)生障礙，從而破 壞了細(xì)胞與基質(zhì)之間和細(xì)胞與細(xì)胞之間的粘著，因此癌細(xì)胞具有易于侵潤組織和轉(zhuǎn)移的屬 性。癌細(xì)胞的面積的增大增強(qiáng)了各個(gè)細(xì)胞之間的接觸面積更利于相互之間的粘連和附著。
[0013] 雖然腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移是由多種因素共同形成導(dǎo)致的，但是以細(xì)胞層的面積，即細(xì) 胞能夠與其他細(xì)胞接觸的面積作為細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力大小的依據(jù)，以此作為細(xì)胞間連接強(qiáng)度的 測(cè)定的方法，具有成本低廉、操作簡便、結(jié)果易判的優(yōu)點(diǎn)，其表現(xiàn)出來的細(xì)胞面積增大是最 容易直接觀察辨別的，主要就是通過加藥刺激后對(duì)細(xì)胞間連接分子Ε-cadherin蛋白質(zhì)進(jìn) 行免疫染色，繼而進(jìn)行定量測(cè)定。細(xì)胞層面積越大越有利于與其他細(xì)胞形成連接。
[0014] 本發(fā)明以為倍他米松戊酸酯為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，評(píng)估考量其在抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的能力 評(píng)價(jià)。具體以藥物刺激前后細(xì)胞面積的變化為主要依據(jù)。
[0015] 有益效果：1、本發(fā)明利用倍他米松戊酸酯制備的藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力進(jìn)行 抑制，倍他米松戊酸酯為低毒藥物，可在腫瘤擴(kuò)散過程中起到較大的阻斷作用，與此同時(shí)再 采用其他相關(guān)腫瘤藥物進(jìn)行治療，可以大量減少正常細(xì)胞的死亡量；而現(xiàn)有的腫瘤藥物多 為細(xì)胞毒藥物，在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)大量正常細(xì)胞也一起死亡；2、本發(fā)明所使用的倍他 米松戊酸酯為成藥庫的現(xiàn)有藥物化合物，研發(fā)周期與新藥研發(fā)的周期相比可明顯減少。
【附圖說明】
[0016] 圖1為IOuM濃度倍他米松戊酸酯處理后的結(jié)腸癌細(xì)胞圖；
[0017] 圖2為40uM濃度倍他米松戊酸酯處理后的結(jié)腸癌細(xì)胞圖；
[0018] 圖3為60uM濃度倍他米松戊酸酯處理后的結(jié)腸癌細(xì)胞圖；
[0019] 圖4為80uM濃度倍他米松戊酸酯處理后的結(jié)腸癌細(xì)胞圖；
[0020] 圖5為IOOuM濃度倍他米松戊酸酯處理后的結(jié)腸癌細(xì)胞圖；
[0021] 圖6為陽性對(duì)照組，由IOuM濃度nocodazole處理后的結(jié)腸癌細(xì)胞圖；
[0022] 圖7為陰性對(duì)照組。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面通過附圖對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案進(jìn)行詳細(xì)說明，但是本發(fā)明的保護(hù)范圍不局限于 所述實(shí)施例。
[0024] 實(shí)施例1 :倍他米松戊酸酯在制備抑制結(jié)腸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散的藥物中的應(yīng)用。 具體實(shí)驗(yàn)方案如下：
[0025] 1、實(shí)驗(yàn)材料
[0026] 本發(fā)明實(shí)驗(yàn)階段采用的是結(jié)腸癌細(xì)胞（HT29)，陽性對(duì)照采用的藥物是 nocodazole (實(shí)驗(yàn)濃度為IOuM)。陰性對(duì)照組沒有經(jīng)過任何處理。
[0027] 其中實(shí)驗(yàn)采用倍他米松戊酸酯化合物C27H37FO 6, CAS NO.為2152-44-5,濃度分別 為 100uM，80uM，60uM，40uM，10uM。
[0028] 2、實(shí)驗(yàn)方法
[0029] 對(duì)培養(yǎng)24小時(shí)的結(jié)腸癌細(xì)胞（細(xì)胞密度：105)進(jìn)行藥物刺激2小時(shí)處理：
[0030] (1)將培養(yǎng)皿中狀態(tài)較好的結(jié)腸癌細(xì)胞離心，加入適量培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸浮液；
[0031] (2)取細(xì)胞懸液計(jì)數(shù)，按照IO5的密度加入24孔盤中，放入37°C的CO 2培養(yǎng)箱中培 養(yǎng)；
[0032] (3) 24小時(shí)后，換液，培養(yǎng)液中加入相應(yīng)量的倍他米松戊酸酯化合物配置到實(shí)驗(yàn)所 需濃度，以及陽性對(duì)照藥物，然后繼續(xù)培養(yǎng)2小時(shí)；
[0033] (4)培養(yǎng)2小時(shí)后將細(xì)胞于2%的PFA溶液下37°C固定10分鐘，再進(jìn)行熒光染色。
[0034] 3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果處理
[0035] 對(duì)熒光染色后的結(jié)腸癌細(xì)胞觀察，將觀察的圖片用Image J處理并計(jì)算其細(xì)胞面 積在加藥前后的數(shù)據(jù)，Ratio是實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組的比值。結(jié)果見表1。
[0036] 表1倍他米松戊酸酯對(duì)HT29細(xì)胞刺激2小時(shí)后的面積大小
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 倍他米松戊酸酯在制備抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散的藥物中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中腫瘤細(xì)胞為結(jié)腸癌細(xì)胞。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中倍他米松戊酸酯的濃度為10~40uM。
【專利摘要】本發(fā)明公開倍他米松戊酸酯在制備抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散的藥物中的應(yīng)用。發(fā)明利用倍他米松戊酸酯制備的藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力進(jìn)行抑制，倍他米松戊酸酯為低毒藥物，可在腫瘤擴(kuò)散過程中起到較大的阻斷作用，與此同時(shí)再采用其他相關(guān)腫瘤藥物進(jìn)行治療，可以大量減少正常細(xì)胞的死亡量；而現(xiàn)有的腫瘤藥物多為細(xì)胞毒藥物，在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)大量正常細(xì)胞也一起死亡。
【IPC分類】A61K31-573, A61P35-04
【公開號(hào)】CN104546869
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510068109
【發(fā)明人】滕文臣
【申請(qǐng)人】江蘇澳格姆生物科技有限公司
【公開日】2015年4月29日
【申請(qǐng)日】2015年2月9日