一種胡柚提取物的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及天然來源的胡柚提取物在制備降脂功能食品、保健品或 藥物中的應(yīng)用，尤其涉及胡柚提取物的制備方法和在小鼠體內(nèi)水平上降脂的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 近幾十年來，肥胖已經(jīng)成為世界范圍內(nèi)主要的公共健康問題。肥胖可以增加諸如 2型糖尿病、冠心病、高血壓等慢性病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。肥胖是由能量攝入和代謝支出不平衡誘 發(fā)的代謝綜合癥，具體表現(xiàn)為脂肪組織的脂肪積累，導(dǎo)致脂肪細(xì)胞數(shù)量增多，脂肪細(xì)胞尺寸 增大。目前，用于肥胖治療的方法主要有節(jié)食、吃減肥藥等，但具有很多限制因素，比如副作 用和容易反彈等。因此，副作用較小的天然產(chǎn)物越來越引起人們的研究興趣。
[0003] 胡柚（CY tras CAaflg1S1Aaflefl1Si1S)是柚和酸橙的雜交后代，是浙江省衢州市常山縣 特有的雜柑類良種，至今己有上百年的種植歷史。其香氣獨(dú)特、濃郁，果實(shí)外形美觀，呈鮮黃 色，富有光澤，果肉金黃色，汁液豐富，食之酸甜適中，略帶苦味，食后使人覺得非常爽口。胡 柚具有清涼祛火，鎮(zhèn)咳化痰，潤喉醒酒，養(yǎng)顏益壽等諸多藥理功效，營養(yǎng)價(jià)值很高。然而，對 于胡柚提取物在活體內(nèi)是否具有降脂活性、胡柚不同組織部位提取物降脂是否具有組織特 異性，尚未見諸報(bào)道。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種胡柚提取物在制備降脂功能食品、保健品或藥物中的應(yīng) 用，所述胡柚提取物是指胡柚油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末，經(jīng)過丙酮 超聲提取、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、過固相萃?。⊿PE)柱、真空干燥得到。
[0005] 本發(fā)明強(qiáng)調(diào)胡柚提取物這種天然產(chǎn)物在降脂中的最新發(fā)現(xiàn)。本發(fā)明證實(shí)胡柚油胞 層、白皮層和囊衣層提取物(劑量均為40mg/kg BW)能夠在高脂誘導(dǎo)肥胖C57BL/6小鼠體內(nèi) (i/7 Wra)降低體重，顯著降低肝臟和脂肪組織質(zhì)量，顯著降低血清中含有的甘油三酯、總 膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇，降低肝臟中含有的甘油三酯和總膽固醇。
[0006] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種胡柚提取物在制備脂肪代謝異常相關(guān)降脂產(chǎn)品 中的應(yīng)用，所述胡柚提取物是將胡柚油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末，經(jīng) 過丙酮超聲提取、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、過固相萃取柱、真空干燥得到，所述脂肪代謝異常相關(guān)降脂產(chǎn) 品為功能食品、保健品或防治藥物。
[0007] 本發(fā)明提供的胡柚提取物能夠降低高脂誘導(dǎo)肥胖C57BL/6小鼠體內(nèi)（i/7 w>〇)體 重，顯著降低肝臟和脂肪組織質(zhì)量，顯著降低血清中含有的甘油三酯、總膽固醇以及低密度 脂蛋白膽固醇，降低肝臟中含有的甘油三酯和總膽固醇?？勺鳛楣δ苁称?、保健品或防治藥 物用于脂肪代謝異常相關(guān)疾病的防治。
【附圖說明】
[0008] 圖1是以高脂飲食誘導(dǎo)C57BL/6小鼠為飼喂對象，胡柚油胞層、白皮層和囊衣層 SPE粉末對其小鼠狀態(tài)的影響。低脂+清水組為低脂飲食組，高脂+清水組為高脂飲食誘導(dǎo) 糖尿病組，3個(gè)處理組劑量都為40 mg/kg BW，n=10。
[0009] 圖2-1是以高脂飲食誘導(dǎo)C57BL/6小鼠為飼喂對象，胡柚油胞層、白皮層和囊衣層 SPE粉末對其肝臟質(zhì)量的影響。
[0010] 圖2-2是以高脂飲食誘導(dǎo)C57BL/6小鼠為飼喂對象，胡柚油胞層、白皮層和囊衣層 SPE粉末對其睪周脂肪質(zhì)量的影響。
[0011] 圖2-3是以高脂飲食誘導(dǎo)C57BL/6小鼠為飼喂對象，胡柚油胞層、白皮層和囊衣層 SPE粉末對其腎周脂肪質(zhì)量的影響。
[0012] 圖3-1是以高脂飲食誘導(dǎo)C57BL/6小鼠為飼喂對象，胡柚油胞層、白皮層和囊衣層 SPE粉末對其血清甘油三酯的影響。
[0013] 圖3-2是以高脂飲食誘導(dǎo)C57BL/6小鼠為飼喂對象，胡柚油胞層、白皮層和囊衣層 SPE粉末對其血清總膽固醇的影響。
[0014] 圖3-3是以高脂飲食誘導(dǎo)C57BL/6小鼠為飼喂對象，胡柚油胞層、白皮層和囊衣層 SPE粉末對其血清低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C)的影響。
[0015] 圖4-1是以高脂飲食誘導(dǎo)C57BL/6小鼠為飼喂對象，胡柚油胞層、白皮層和囊衣層 SPE粉末對其肝臟甘油三酯的影響。
[0016] 圖4-2是以高脂飲食誘導(dǎo)C57BL/6小鼠為飼喂對象，胡柚油胞層、白皮層和囊衣層 SPE粉末對其肝臟總膽固醇的影響。
【具體實(shí)施方式】
[0017] 本發(fā)明結(jié)合附圖和實(shí)施例作進(jìn)一步的說明。
[0018] 實(shí)施例1胡柚提取物的制備 胡柚果實(shí)經(jīng)過手工分離得到油胞層、白皮層和囊衣層，液氮速凍后經(jīng)過低溫真空干燥， 磨樣后得到冷凍干燥粉末。分別稱取胡柚油胞層、白皮層和囊衣層冷凍干燥粉末I g，用80% 丙酮20 mL (固液比1:20)超聲30 min，頻率為60 kHz，功率為30 W。提取液通過減壓抽 濾得到澄清提取液，如此重復(fù)3次，合并上清液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸去丙酮，得到胡柚提取 物水溶液。
[0019] 水溶液用固相萃取（SPE) S印-Pak? C18柱進(jìn)行純化（12 cc/2 g，Waters)，純化過 程分為活化、平衡、上樣、淋洗和洗脫五個(gè)步驟：SPE小柱首先用20 mL甲醇活化，再用20 mL 去離子水平衡，然后水溶液上樣，待充分吸附后，小柱用40 mL去離子水淋洗以洗去果實(shí)中 的糖酸等極性物質(zhì)，真空抽干后用80 mL甲醇充分洗脫，洗脫液用真空干燥儀蒸干，分別得 到粉末66. 3 mg、63. 6 mg和42. I mg，得到的粉末即為胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉 末。
[0020] 實(shí)施例2胡柚提取物的C57BL/6小鼠試驗(yàn) C57BL/6小鼠購自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司，飼喂的低脂飼料(含10%脂 肪）和高脂飼料(含45%脂肪）購自江蘇美迪森生物醫(yī)藥有限公司。所有小鼠在恒溫恒 濕環(huán)境下飼養(yǎng)，提供12 h光照12 h黑暗環(huán)境。每組10只小鼠，低脂+清水組為低脂飲 食組，高脂+清水組為高脂飲食誘導(dǎo)肥胖組，胡柚油胞層、白皮層和囊衣層提取物3個(gè)處 理組劑量都為40 mg/kg BW。所有小鼠可以自由攝取食物和蒸餾水，處理組通過灌胃針 灌胃的方式進(jìn)行給藥，低脂和高脂對照組灌胃蒸餾水。試驗(yàn)為期16周，1周連續(xù)給藥6 天，停藥1天。試驗(yàn)每周測定1次小鼠重量，1次小鼠攝食量，數(shù)據(jù)用平均值土標(biāo)準(zhǔn)誤（ Γ± SE)表示，使用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，進(jìn)行Duncan多重比較，不同的上標(biāo)字母表示具 差異顯著性(#〇. 05)，具體的小鼠初始體重、最終體重和平均攝食量見附表1。表1是以高 脂飲食誘導(dǎo)C57BL/6小鼠為飼喂對象，胡柚油胞層、白皮層和囊衣層SPE粉末對其體重和 攝食量的影響。給藥16周，每周監(jiān)測小鼠體重變化，第1周測定初始體重，第16周測定最 終體重。每周監(jiān)測1次小鼠攝食量，16周平均得到平均攝食量。低脂+清水組為低脂飲食 組，高脂+清水組為高脂飲食誘導(dǎo)肥胖組，3個(gè)處理組劑量都為40 mg/kg BW，n=7-10。用 SPSS軟件進(jìn)行差異顯著性分析，進(jìn)行Duncan多重比較，不同的上標(biāo)字母表示具差異顯著性 (/X0· 05)。
[0021]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種胡柚提取物在制備降脂藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述胡柚提取物是將胡柚 油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末，經(jīng)過丙酮超聲提取、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、過固相 萃取柱、真空干燥得到。
2. -種胡柚提取物在制備降脂功能食品中的應(yīng)用，其特征在于，所述胡柚提取物是將 胡柚油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末，經(jīng)過丙酮超聲提取、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、過 固相萃取柱、真空干燥得到。
3. -種胡柚提取物在制備降脂保健品中的應(yīng)用，其特征在于，所述胡柚提取物是將胡 柚油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末，經(jīng)過丙酮超聲提取、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、過固 相萃取柱、真空干燥得到。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的一種胡柚提取物的應(yīng)用，其特征在于，所述降脂是降 低肝臟和脂肪組織重量，降低血清中含有的甘油三酯、總膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇， 降低肝臟中含有的甘油三酯和總膽固醇。
5. -種胡柚提取物在制備脂肪代謝異常相關(guān)降脂產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，所述胡 柚提取物是將胡柚油胞層、白皮層和囊衣層的提取物的冷凍干燥粉末，經(jīng)過丙酮超聲提取、 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、過固相萃取柱、真空干燥得到，所述脂肪代謝異常相關(guān)降脂產(chǎn)品為功能食品、保 健品或防治藥物。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種胡柚提取物在制備降脂功能食品、保健品或藥物中的應(yīng)用。胡柚油胞層、白皮層和囊衣層提取物的冷凍干燥粉末，經(jīng)過丙酮超聲提取、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、過固相萃取柱、真空干燥得到。胡柚提取物能夠在高脂誘導(dǎo)肥胖C57BL/6小鼠體內(nèi)降低體重，顯著降低肝臟和脂肪組織質(zhì)量，顯著降低血清中含有的甘油三酯、總膽固醇以及低密度脂蛋白膽固醇，降低肝臟中含有的甘油三酯和總膽固醇?？勺鳛楣δ苁称?、保健品或防治藥物用于脂肪代謝異常相關(guān)疾病的防治。
【IPC分類】A61K36-752, A23L1-212, A61P3-06, A23L1-29
【公開號(hào)】CN104547166
【申請?zhí)枴緾N201410786811
【發(fā)明人】李鮮, 賈勝, 孫崇德, 陳昆松
【申請人】浙江大學(xué)
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2014年12月18日