一種治療骨科疾病的藥物及其制法與檢測(cè)方法及其應(yīng)用
【專利說(shuō)明】
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域： 本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，涉及一種由苦茄、松蒿、軟水黃連組成的具有治療股骨頭壞死的 藥物組合物。
[0002] 技術(shù)背景： 股骨頭缺血壞死（ONFH)是由不同病因?qū)е鹿晒穷^血液供應(yīng)破壞而引起軟骨下骨變 性、壞死，繼而造成股骨頭塌陷，最終導(dǎo)致髖關(guān)節(jié)退行性破壞性改變。該病多發(fā)生于35? 55歲的青壯年，若不及時(shí)治療，70%患者股骨頭將塌陷，約3?4年后需行全髖關(guān)節(jié)置換。 通常認(rèn)為激素和酒精的攝入是股骨頭缺血壞死最常見(jiàn)的兩大病因，約占股骨頭缺血壞死病 例的40%。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)股骨頭壞死的病因和發(fā)病機(jī)制進(jìn)行了深入研究，并且提出 了眾多學(xué)說(shuō)，主要有：脂類代謝紊亂學(xué)說(shuō)、血管內(nèi)凝血學(xué)說(shuō)、骨內(nèi)壓增高學(xué)說(shuō)、二次碰撞學(xué)說(shuō) 等。最近研究發(fā)現(xiàn)，股骨頭缺血壞死患者中，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的活性和數(shù)量受到抑制，從 而提示股骨頭缺血壞死可能是一種骨細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞性疾病，但其確切病理生理學(xué)機(jī) 制現(xiàn)仍不完全明了。
[0003] 目前，激素性股骨頭壞死的發(fā)病機(jī)制依然是研究的熱點(diǎn)、難點(diǎn)。當(dāng)前對(duì)于激素性股 骨頭壞死領(lǐng)域的研究逐漸呈現(xiàn)以下兩個(gè)趨勢(shì)：一是隨著分子生物學(xué)、干細(xì)胞研究、細(xì)胞凋亡 研究的不斷發(fā)展，我們能夠從更微觀的水平探尋激素性股骨頭壞死的本質(zhì)，為各種假說(shuō)提 供分子水平的證據(jù)，甚至找出各假說(shuō)之間的內(nèi)在聯(lián)系；二是個(gè)體間對(duì)激素的敏感性差異越 來(lái)越受到重視，越來(lái)越多的多態(tài)性基因被發(fā)現(xiàn)與激素性股骨頭壞死的發(fā)病呈相關(guān)性。其意 義不僅在于揭示其發(fā)病機(jī)理，更在于對(duì)潛在的高危人群進(jìn)行篩選，提前采取預(yù)防措施，最大 限度的保證激素作為藥物在人群中的治療作用，同時(shí)又可避免激素對(duì)激素性股骨頭壞死高 危人群的危害。
[0004]

【發(fā)明內(nèi)容】
： 本發(fā)明的目的是提供一種治療股骨頭壞死的藥物組合物。
[0005] 本發(fā)明的另一目的是提供藥物組合物的制備方法。
[0006] 本發(fā)明的還提供該藥物組合物在制備治療股骨頭壞死以及骨質(zhì)增生、骨關(guān)節(jié)炎藥 物中的應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明的目的是通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)的： 一種治療股骨頭壞死的藥物組合物，是由以下重量份的原料制成的：苦茄1?3,松蒿 1?3,軟水黃連1?3。
[0008] 所述藥物組合物優(yōu)選是由以下重量份的原料制成的：苦茄1，松蒿2,軟水黃連3。
[0009] 所述藥物組合物優(yōu)選是由以下重量份的原料制成的：苦茄2,松蒿3,軟水黃連2。
[0010] 所述藥物組合物優(yōu)選是由以下重量份的原料制成的：苦茄1，松蒿1，軟水黃連1。
[0011] 所述藥物組合物采用藥學(xué)中常規(guī)的制藥方法制備成口服制劑。
[0012] 所述藥物組合物制備成的口服制劑為片劑、丸劑、硬膠囊劑、顆粒劑、口服液。
[0013] 所述藥物組合物采用如下方法制備：取干燥的苦茄、松蒿、軟水黃連，混合，藥材加 5?15倍量水微波提取1?5次，每次15?60min，提取液合并，濃縮，干燥，粉碎成細(xì)粉， 加入輔料，混勻，制成顆粒劑，即得。
[0014] 所述藥物組合物優(yōu)選采用如下方法制備：取干燥的苦茄、松蒿、軟水黃連，混合，藥 材加10倍量水微波提取3次，每次30min，提取液合并，濃縮，干燥，粉碎成細(xì)粉，加入輔料， 混勻，制成顆粒劑，即得。
[0015] 所述藥物組合物的檢測(cè)方法為： (1)色譜條件：色譜柱：C18柱，流動(dòng)相：甲醇-1 %冰乙酸比例為10:90,流速：1. OmL/ min，檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm。理論塔板數(shù)按山奈酚峰計(jì)算應(yīng)不< 2500。
[0016] (2)溶液制備： ① 供試品溶液：取本發(fā)明藥物l〇g，研細(xì)，取約〇.8g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密 加入50%甲醇25mL，稱定重量，超聲處理（200W，40kHz)30min，放冷，再稱定重量，用50%甲 醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； ② 對(duì)照品溶液：精密稱取山奈酚對(duì)照品5. 95mg，置50mL容量瓶中，加50%甲醇溶解，并 稀釋至刻度，搖勻；然后再?gòu)闹芯芰咳?mL，置IOmL容量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖 勻，即得濃度為53. 55 μ g/mL的山奈酚對(duì)照品溶液； ③ 測(cè)定：分別精密量取上述供試品溶液、對(duì)照品溶液各5 μ L，注入HPLC儀，進(jìn)行檢測(cè)。
[0017] 所述藥物組合物可用于制備治療激素性股骨頭壞死的藥物。
[0018] 所述藥物組合物可用于制備治療骨質(zhì)增生的藥物。
[0019] 所述藥物組合物可用于制備治療骨關(guān)節(jié)炎的藥物。
[0020] 通過(guò)如下實(shí)驗(yàn)研究驗(yàn)證本發(fā)明的技術(shù)效果： 實(shí)驗(yàn)例一：本發(fā)明藥物組合物治療激素性股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)研究 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀測(cè)兔血清中的骨鈣素（BGP)和降鈣素（CT)的水平及股骨頭病理表現(xiàn)，探 討本發(fā)明藥物組合物治療激素性股骨頭壞死（SONFH)的療效。
[0021] 1實(shí)驗(yàn)材料與方法 1. 1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 6月齡新西蘭白兔60只，雌雄各半，體重（2. 0?2. 5)kg，由煙臺(tái)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提 供。
[0022] 1. 2實(shí)驗(yàn)藥品及試劑 本發(fā)明藥物組合物：取干燥的苦茄333g、松蒿333g、軟水黃連333g，混合，藥材加 IOOOOmL水微波提取3次，每次30min，提取液合并，濃縮，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得。
[0023] 對(duì)比藥物A :取干燥的苦茄500g，松蒿500g，混合，藥材加 IOOOOmL水微波提取3 次，每次30min，提取液合并，濃縮，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得。
[0024] 對(duì)比藥物B :取干燥的松蒿500g、軟水黃連500g，混合，藥材加 IOOOOmL水微波提 取3次，每次30min，提取液合并，濃縮，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得。
[0025] 對(duì)比藥物C :取干燥的軟水黃連500g、苦茄500g，混合，藥材加 IOOOOmL水微波提 取3次，每次30min，提取液合并，濃縮，干燥，粉碎成細(xì)粉，即得。
[0026] 醋酸潑尼松龍注射液，浙江仙琚制藥有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字：H33020824。
[0027] 仙靈骨葆膠囊，貴州同濟(jì)堂制藥有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字：Z20025337。兔BGP及 CT(ELISA)試劑盒：購(gòu)自蘇州卡爾文生物科技有限公司。
[0028] 1. 3實(shí)驗(yàn)方法 60只新西蘭白兔隨機(jī)分成空白組（n=10)和造模組（n=50)。采用賀氏造模法（賀西 京，毛履真，王坤正，等.腎上腺皮質(zhì)激素引起股骨頭缺血壞死的機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究[J].中 華骨科雜志，1992, 12 (6) :440?443)，造模組肌注醋酸潑尼松龍注射液7. 5mg/kg，每 周2次，共6周；空白組肌注生理鹽水0. 32mg/kg，每周2次，共6周，同時(shí)全部動(dòng)物每周 注射青霉素鈉2次以預(yù)防感染，每次5萬(wàn)U/只。在第7周分別隨機(jī)處死兩組動(dòng)物各2 只，每只動(dòng)物分別取兩側(cè)股骨頭縱切面做He染色切片以觀察造模情況。在第9周將造 模組動(dòng)物隨機(jī)分為6組：本發(fā)明藥物組合物組（n=8)、仙靈骨德組（n=8)、對(duì)比藥物A組 (n=8)、對(duì)比藥物B組（n=8)、對(duì)比藥物C組（n=8)及陽(yáng)性對(duì)照組（n=8),空白組：剩余的 動(dòng)物為空白對(duì)照組（ri=l〇)。自第9周起本發(fā)明藥物組合物組每天用本發(fā)明藥物組合物 (45g · kg4 · (Γ1)分兩次灌胃，對(duì)比藥物A組每天用對(duì)比藥物A(45g · kg4 · (Γ1)分兩次 灌胃，對(duì)比藥物B組每天