B)試劑盒(南京建成 生物工程研究所)。
[0028] 1. 3 儀器 ECG6511型心電圖機(上海光電醫(yī)用電子儀器有限公司），BP-211D型電子天平(德國賽 多利斯公司），80-2型臺式低速離心機(上海醫(yī)療器械有限公司），SABA-18型全自動生化分 析儀(意大利AMS公司）。
[0029] 2 方法 2. 1大鼠冠狀動脈結(jié)扎致大鼠急性心肌缺血 2. I. 1分組、給藥與造模：采用文獻方法(黎菊鳳，林少珠，唐少麗，等.參麥皂苷注射液 抗心肌缺血作用研究[J].中藥材.2013. 36 (8M322)建立大鼠急性心肌缺血模型。取大 鼠80只，隨機分為8組，假手術(shù)組(生理鹽水20mg .kg-1)、模型組(生理鹽水20mg .kg-1)、本 發(fā)明中藥組（220mg .kg4)、對比中藥I組（220mg .kg4)、對比中藥II組（220mg .kg4)、對比 中藥III組（220mg · kg-1)、對比中藥IV組（220mg · kg-1)和復(fù)方丹參片組（250mg · kg-1)，每 組10只。大鼠禁食12h后，ig給藥，每天給藥1次，連續(xù)7d。于末次給藥后lh，用12%水合 氯醛（360mg ?kg^ip麻醉，測定正常II導(dǎo)聯(lián)心電圖后，切開皮膚、肌層，環(huán)肌層作荷包縫合， 切斷第四肋骨，將心臟擠出胸腔，于肺動脈圓錐及左心耳間找出冠狀動脈左前降支，除假手 術(shù)組僅穿線不結(jié)扎外，其余各組均以5/0號線立即結(jié)扎造成心肌缺血。結(jié)扎后縫合傷口，在 完全縫合前用注射器抽吸胸腔內(nèi)氣體，動物回籠飼養(yǎng)。以上手術(shù)均在無菌條件下操作。
[0030] 2. 1. 2心電圖ST段變化：分別記錄結(jié)扎前和結(jié)扎后5, 30,60,120min的II導(dǎo)聯(lián)心 電圖，以手術(shù)前的II導(dǎo)聯(lián)心電圖做為正常心電圖，以給藥后大鼠心電圖ST段T波的變化值 為表示心肌缺血程度。
[0031] 2. 1. 3血清中酶學(xué)指標(biāo)的檢測：24h后于大鼠腹主動脈取血，離心，分離血清，按試 劑盒說明測定血清AST，LDH，CK-MB水平。
[0032] 2. 1.4心肌梗死范圍測定：處死大鼠摘取心臟，生理鹽水沖洗，稱量全心質(zhì)量。從 心尖至心基部橫切成1?2mm的左心室組織切片，生理鹽水洗凈，置于1%TTC (氯化三苯基 四氮唑)溶液中，37°C水浴染色15min。生理鹽水沖洗多余染料，梗死區(qū)不染色，非梗死區(qū)被 染成紅色，將未著色的梗死區(qū)域切下，稱濕重，計算左心室梗死范圍（IS)。
[0033] IS=梗死心肌質(zhì)量/左心室質(zhì)量X 100% 2. 2小鼠密閉耐缺氧試驗 小鼠70只，隨機等分為7組，分別為生理鹽水組、本發(fā)明中藥組（220mg · kg4)、對比中 藥I組（220mg · kg4)、對比中藥II組（220mg · kg4)、對比中藥III組（220mg · kg4)、對比 中藥IV組（220mg ^kg4)和復(fù)方丹參片組（360mg ?kg4)。小鼠禁食12h，ig給藥，每天給藥 1次，連續(xù)7d。于末次給藥后lh，將小鼠分別放入250mL容積的密閉廣口瓶內(nèi)，瓶內(nèi)放入鈉 石灰l〇g，瓶口涂凡士林。自放入小鼠，將瓶加蓋密閉開始計時，記錄小鼠的存活時間。
[0034] 2. 3統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS13. 0軟件分析，所得數(shù)據(jù)以土 s表示，組間比較采用t檢驗，以P < 0. 05為 有統(tǒng)計學(xué)意義。
[0035] 3 結(jié)果 3. 1對心電圖ST段的影響 如表1所示，與假手術(shù)組比較，模型組大鼠冠脈結(jié)扎后，心電圖ST段即刻出現(xiàn)顯著性抬 高> 0. lmV(P < 0. 01)。與模型組比較，本發(fā)明中藥組可對抗冠脈結(jié)扎所致的心電圖ST段 的抬高，顯著降低結(jié)扎后30?120min心電圖ST段的抬高幅度（P < 0. 05)，對抗效果甚至 好于復(fù)方丹參片。而對比中藥I組至對比中藥IV組作用效果則不明顯。
[0036] 表1本發(fā)明中藥對心肌缺血大鼠心電圖ST段的影響(i ±s，n=10)
【主權(quán)項】
1. 一種治療心肌缺血的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物是由以下重量份的原 料制成的：熱痱草1?5,鐵羅傘1?5,脆骨風(fēng)1?5、泰菜根1?5。
2. 如權(quán)利要求1中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物是由以下重量份的原料制成 的：熱痱草2,鐵羅傘3,脆骨風(fēng)2、泰菜根3。
3. 如權(quán)利要求1中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物是由以下重量份的原料制成 的：熱痱草3,鐵羅傘2,脆骨風(fēng)3、泰菜根2。
4. 如權(quán)利要求1中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物是由以下重量份的原料制成 的：熱痱草1，鐵羅傘1，脆骨風(fēng)1、泰菜根1。
5. 如權(quán)利要求1?4中任意一項所述的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物采用藥 學(xué)中常規(guī)的制藥方法制備成片劑、丸劑、硬膠囊劑、顆粒劑、口服液。
6. 如權(quán)利要求5所述的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物采用如下方法制備：取 熱痱草置于揮發(fā)油提取器中蒸餾，提取揮發(fā)油，所得熱痱草揮發(fā)油備用；熱痱草蒸餾后的水 溶液另器收集，備用；提取揮發(fā)油后的熱痱草藥渣與鐵羅傘、脆骨風(fēng)、泰菜根加水煎煮2? 4次，每次0. 5?2h，合并煎液，濾過，濾液與熱痱草蒸餾后的水溶液合并，靜置沉淀12? 36h，濾過，濾液濃縮至60°C相對密度為1. 00?1. 10的清膏，取清膏加蔗糖粉和糊精，置噴 霧干燥制粒機中，制成顆粒劑，加入熱痱草揮發(fā)油，混勻，即得。
7. 如權(quán)利要求6所述的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物采用如下方法制備：取 熱痱草置于揮發(fā)油提取器中蒸餾，提取揮發(fā)油，所得熱痱草揮發(fā)油備用；熱痱草蒸餾后的水 溶液另器收集，備用；提取揮發(fā)油后的熱痱草藥渣與鐵羅傘、脆骨風(fēng)、泰菜根加水煎煮3次， 每次lh，合并煎液，濾過，濾液與熱痱草蒸餾后的水溶液合并，靜置沉淀24h，濾過，濾液濃 縮至60°C相對密度為1.05的清膏，取清膏加蔗糖粉和糊精，置噴霧干燥制粒機中，制成顆 粒劑，加入熱痱草揮發(fā)油，混勻，即得。
8. 如權(quán)利要求1?4任意一項所述的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物的檢測方 法為： (1) 色譜條件：采用C18色譜柱；流動相：甲醇-乙腈，比例為40 :60 ;檢測波長：238nm ; 柱溫：15 ?25°C ;靈敏度：0· IAUFS ;流速：1. OmL · min-1;進樣量：10μ L ; (2) 對照品溶液的制備：精密稱取80°C干燥至恒重的側(cè)柏酮對照品適量，加甲醇制成 每ImL含0· 2mg的溶液； (3) 供試品溶液與陰性對照液的制備：精密稱取本發(fā)明中藥顆粒劑10g，加甲醇40mL， 加熱回流4h，提取液回流溶劑并濃縮至干，殘渣加水IOmL溶解，用水飽和的正丁醇振搖提 取5次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌3次，每次15mL，正丁醇提取液回收溶 劑至干，殘渣加甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至IOmL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取濾液即得； (4) 樣品含量測定：分別量取對照品溶液和供試品溶液適量，用微孔濾膜濾過，各進樣 10 μ L0
9. 如權(quán)利要求1?4任意一項所述的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物在制備 治療心肌缺血的中藥中的應(yīng)用。
10. 如權(quán)利要求1?4任意一項所述的中藥組合物，其特征在于，該中藥組合物在制備 治療心肌炎中藥中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體涉及一種治療心肌缺血的中藥組合物。發(fā)明名稱為一種治療心肌缺血的中藥及其制備方法與質(zhì)量檢測方法。該中藥組合物是由以下重量份的原料制成的：取熱痱草置于揮發(fā)油提取器中蒸餾，提取揮發(fā)油，所得熱痱草揮發(fā)油備用；熱痱草蒸餾后的水溶液另器收集，備用；提取揮發(fā)油后的熱痱草藥渣與鐵羅傘、脆骨風(fēng)、菾菜根加水煎煮2～4次，每次0.5～2h，合并煎液，濾過，濾液與熱痱草蒸餾后的水溶液合并，靜置沉淀12～36h，濾過，濾液濃縮至60℃相對密度為1.00～1.10的清膏，取清膏加蔗糖粉和糊精，置噴霧干燥制粒機中，制成顆粒劑，加入熱痱草揮發(fā)油，混勻，即得。該中藥組合物可用于制備治療心肌缺血的中藥。
【IPC分類】A61P9-10, A61K36-53, G01N30-02
【公開號】CN104586931
【申請?zhí)枴緾N201510049474
【發(fā)明人】初麗萍
【申請人】初麗萍
【公開日】2015年5月6日
【申請日】2015年1月31日