一種應(yīng)用于靶向給藥系統(tǒng)的新的支鏈連接體的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種靶向給藥系統(tǒng)的新的支鏈連接體的設(shè)計(jì)、合成及在靶向給藥系統(tǒng) 中的應(yīng)用。其中所述肽鏈通過對氨基連接到支鏈連接體，所述藥物通過芐基醇的部分連接 到支鏈連接體，修飾片段及靶頭部分通過炔基連接到支鏈連接體；本發(fā)明進(jìn)一步涉及制備 所述多肽藥物偶聯(lián)物的中間體以及通過各種中間體制備所述多肽藥物偶聯(lián)物的方法，涉及 這樣的多肽藥物偶聯(lián)物的體外釋藥實(shí)驗(yàn)。
【背景技術(shù)】
[0002] 大部分化療藥物由于不具有選擇性，往往在其用于治療的過程中伴隨著嚴(yán)重的毒 副作用，這限制了它們的用途和療效。為了提高藥物對病變組織或細(xì)胞的特異性，越來越多 的研宄傾向于將藥物設(shè)計(jì)成靶向前藥。靶向前藥是指將藥物活性化合物通過連接體連接 至革G向劑（如單克隆抗體，iRGD，葉酸等）所形成的革El向藥物聯(lián)接體。其中，連接體的作用 是將靶向劑與藥物連接；靶向劑主要負(fù)責(zé)將靶向藥物聯(lián)接體特異性的運(yùn)送至病變組織或細(xì) 胞；藥物提供治療作用。
[0003] 相較于腙和二硫化物的連接體在細(xì)胞外的生理?xiàng)l件下的不穩(wěn)定性，肽鍵連接體在 細(xì)胞外的生理?xiàng)l件下有一定的穩(wěn)定性，提高靶向藥物聯(lián)接體（如ADCs)的治療窗。肽鍵連 接體可以通過組織蛋白酶進(jìn)行水解斷裂。
[0004] 組織蛋白酶（Cathepsins)是一大類主要存在于溶酶體的半胱氨酸蛋白水解酶， 包括組織蛋白酶B，C，F(xiàn)，H，K，L，0, S，V，W和X。組織蛋白酶多以無活性的酶原形式存在， 酶活性的調(diào)節(jié)是通過各種轉(zhuǎn)譯后的過程完成，其中，最重要的蛋白酶酶原的激活是通過核 內(nèi)體/溶酶體的酸性環(huán)境和來自半胱氨酸蛋白酶抑制劑家族的內(nèi)源性抑制劑的高親和力 的表達(dá)。由于腫瘤細(xì)胞能夠酸化其周圍環(huán)境，其分泌的組織蛋白酶在此環(huán)境中被活化，因 此，腫瘤組織及細(xì)胞中組織蛋白酶的活性遠(yuǎn)高于遠(yuǎn)離腫瘤的其他正常組織和細(xì)胞的組織蛋 白酶活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是設(shè)計(jì)一個用于靶向給藥系統(tǒng)的支鏈連接體。
[0006]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種應(yīng)用于祀向給藥系統(tǒng)的新的支鏈連接體，其特征在于該支鏈連接體具有下式結(jié) 構(gòu)：
2. -種權(quán)利要求1所述支鏈連接體（VII)的制備方法，其特征在于該方法包括W下具 體步驟：
式中，由原料I經(jīng)過醋化、漠代、取代、水解、醋化及還原反應(yīng)得到支鏈連接體（VII);其 中， i) 在堿性條件下，化合物III發(fā)生親核取代反應(yīng)同時伴隨著部分水解反應(yīng)得到混合 物，堿為氨氧化鋼或氨氧化鐘，溶劑為二氯甲燒，反應(yīng)溫度為0-20°C，其中，化合物III與堿 的摩爾比為1 : 5;在酸性條件下，該混合物經(jīng)過水解反應(yīng)得到化合物IV，酸為鹽酸，溶劑為 水； ii) 化合物IV在氯化亞諷的作用下生成酷氯中間體，與甲醇作用得到化合物V，溶劑為 甲醇，反應(yīng)溫度為20-80°C，其中，化合物IV與氯化亞諷的摩爾比為1 : 6.6; iii) 化合物V經(jīng)還原得到化合物VI，還原劑為化粉和氯化錠或者化粉和氯化錠，溶 劑為己醇和水的混合溶劑，反應(yīng)溫度為20-100°C，其中，化合物VJe粉或化粉W及氯化錠 的摩爾比為1 : 4 : 4,己醇與水的體積比為2 : 1; iv) 化合物VI經(jīng)過LAH還原得到化合物VII，溶劑為四氨快喃，反應(yīng)溫度為0-20°C，其 中，化合物VI與LAH的摩爾比為1 : 2. 5。
3. -種權(quán)利要求1所述支鏈連接體用于連接配體LI、引發(fā)劑R-PI W及藥物DR的方法， R-PI中PI選自；組織蛋白酶底物；R是取代基團(tuán)，為-H、PEG、糖、葉酸、多膚類、抗體或 保護(hù)基； DR是一種藥學(xué)上的活性藥物； LI選自；PEG、糖、葉酸、多膚類或抗體； 其特征在于；通過組織蛋白酶水解膚鍵，引發(fā)藥物釋放；

(+w)表示用于連接R-PI的連接部位； (+…）表示用于連接DR的連接部位； (++W+)表示用于連接LI的連接部位。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述組織蛋白酶底物為單個氨基酸或二 膚；所述多膚類為RGD或iRGD ;所述保護(hù)基為叔了氧幾基、節(jié)氧幾基或贊甲氧幾基。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述R-PI通過縮合反應(yīng)與支鏈連接體 (VII)連接，得到式（a)化合物；
式（a)中，PI 選自單個氨基酸（-AA-)，為-Lys-，-Cit-，-Arg-，-Leu-，-His-，-Asp-，-Glu-, -Ala-，-Val-，-1le-，-Pro-，-Phe-，-Trp-, -Met-，-Ser-，-Cys-或-Asn-；PI 選自 ^月太 (-AAi-AA]-)，為-Phe-Lys-，-Val-Lys-，-Ala-Lys-，-Val-Cit-，-Phe-Cit-，-Leu-Cit-，-lie -Cit，-Trp-Cit-，-Trp-Cit-或-Phe_Arg-〇
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述DR與支鏈連接體W式（b)或式（c)化 合物的形式連接；
DR如權(quán)利要求3中所定義； X是雜原子，為-N-或; 式化）化合物是在步驟（MIb)中制備； 步驟（M扣）包括反應(yīng)（M化），反應(yīng)（MIb)是由化合物（VIII)與化合物（VIIII)參與的 反應(yīng)；

式（VIII)化合物是在步驟中制備； 步驟（MIb_l)包括反應(yīng)（MIb_l)，反應(yīng)（MIb_l)是由化合物（a)與化合物狂）參與的反 應(yīng)； 式狂）化合物選自4-硝基苯基氯甲酸醋、二（對硝基苯）碳酸醋、光氣、雙光氣、S光 氣及其混合物；
式（vnn)化合物是在步驟（Mib_。中制備； 步驟（MIb_。包括反應(yīng)（MIb_2)，反應(yīng)（MIb_。是用立氣醋酸除去化合物煙）的保護(hù) 基=苯甲基的反應(yīng)；
式狂I)化合物是在步驟（MIb_3)中制備； 步驟（MIbJB)包括反應(yīng)（MIb_3)，反應(yīng)（MIbJB)是由化合物伽)、化合物佩與化合物 狂II)參與的反應(yīng)；
式（C)化合物是在步驟（MIb_4)中制備； 步驟（M扣）包括反應(yīng)（MIb_4)，反應(yīng)（MIb_4)是由化合物（Vin)與化合物值時參與的 反應(yīng)。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述LI與支鏈連接體W式（d)或式（e)化 合物的形式連接；

LI如權(quán)利要求3中所定義； X如權(quán)利要求6中所定義； LKi是連接修飾片段，為PEG、糖或燒基鏈。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述式（a)化合物選自：


9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述式（b)和式（c)化合物選自：

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于所述式（d)和式（e)化合物選自：



【專利摘要】本發(fā)明公開了一種應(yīng)用于靶向給藥系統(tǒng)的新的支鏈連接體、合成及在靶向給藥系統(tǒng)中的應(yīng)用，其中肽鏈通過對氨基連接到支鏈連接體，藥物通過芐基醇的部分連接到支鏈連接體，修飾片段及靶頭部分通過炔基連接到支鏈連接體；本發(fā)明使給藥后在體內(nèi)到達(dá)病變組織過程中有一定的穩(wěn)定性，并且靶向到特定組織或細(xì)胞后，在特定的條件下，釋放出藥物，達(dá)到治療效果并減少毒副作用。
【IPC分類】A61K47-48, C07C213-08, C07C217-76
【公開號】CN104587487
【申請?zhí)枴緾N201510005869
【發(fā)明人】呂偉, 劉雅倩, 張翾, 方艷芬, 羅宇, 鮑彬, 章雄文
【申請人】華東師范大學(xué)
【公開日】2015年5月6日
【申請日】2015年1月6日