防治水產(chǎn)動物細(xì)菌性疾病的中西復(fù)合藥物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物細(xì)菌性疾病藥物。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖地域的擴(kuò)展、養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大、集約化水平的提高、養(yǎng)殖環(huán)境的變 化、養(yǎng)殖種苗因過于追求快速生長而抗病力降低、抗生素濫用導(dǎo)致病原耐藥提高等，水產(chǎn)養(yǎng) 殖病害日益嚴(yán)峻，其中細(xì)菌性疾病是最常見也是危害最嚴(yán)重的水產(chǎn)疾病，具有病原種類多、 流行范圍廣、死亡率高等特點(diǎn)，對水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。
[0003] 近年來，由無乳鏈球菌和海豚鏈球菌等病原引起的鏈球菌病對水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成了 嚴(yán)重危害，該病發(fā)病速度快、流行范圍廣、死亡率高，廣泛危害羅非魚、虹鱒、斑點(diǎn)叉尾鮰、牙 鲆和多耙等淡海水養(yǎng)殖魚類，特別對羅非魚等熱帶養(yǎng)殖魚類危害尤為嚴(yán)重。2009年我國廣 東、海南、福建和廣西等地養(yǎng)殖羅非魚鏈球菌發(fā)病率為20%~50%，死亡率達(dá)50%~70%; 2011年以來，羅非魚鏈球菌病不僅發(fā)病時間提前，而且危害范圍擴(kuò)大，逐漸向原來不發(fā)病的 小規(guī)格魚種和魚苗蔓延，損失極為慘重。由于許多水產(chǎn)養(yǎng)殖人員缺乏科學(xué)用藥知識，在養(yǎng)殖 生產(chǎn)中為防治該病暴發(fā)常常濫用藥物，導(dǎo)致病原耐藥性增強(qiáng)和防治難度增加。此外，由于 鏈球菌存在多種耐藥和免疫逃避途徑，進(jìn)一步加大了該病的防治難度，在耐藥途徑方面，僅 針對陽離子抗菌肽的耐藥途徑就存在改變細(xì)胞表面電荷、青霉素結(jié)合蛋白調(diào)節(jié)、菌毛調(diào)節(jié) 等途徑；在免疫逃避方面，研究較多的有莢膜多糖抗原、Alp家族、0蛋白、C5a肽酶、Lmb、 FbsA、Sip等介導(dǎo)的途徑，其中莢膜多糖抗原含有末端唾液酸的成分，是抗吞噬細(xì)胞功能的 重要因子，0蛋白具有與人IgA和因子H結(jié)合能力，有助于免疫逃避。水產(chǎn)養(yǎng)殖中抗生素等 違禁藥物的濫用還使羅非魚等養(yǎng)殖產(chǎn)品藥物殘留超標(biāo)，嚴(yán)重影響產(chǎn)品品質(zhì)和消費(fèi)者安全。 中西復(fù)合藥物是將中草藥與化學(xué)藥品進(jìn)行合理配伍，以臨床療效為依據(jù)，經(jīng)科學(xué)評價后制 備的復(fù)方制劑。中西復(fù)合藥物可集化學(xué)藥高效快速治標(biāo)的優(yōu)勢和中草藥多靶位發(fā)揮功效的 優(yōu)勢，既克服了因大量使用抗生素而易產(chǎn)生耐藥性、造成環(huán)境污染、藥物殘留等缺點(diǎn)，也解 決了中草藥作用溫和、起效慢、用量大等不足，通過優(yōu)勢互補(bǔ)和協(xié)同作用，不僅顯著提高了 療效和縮短療程，還有效避免了耐藥性和藥物殘留等缺陷，使中西藥配伍在臨床上的使用 越來越普遍。
[0004] 本發(fā)明是以水產(chǎn)鏈球菌等病原為研究對象，通過研究抗生素與中草藥配伍對抗菌 效果的影響和它們之間的交互作用，篩選具有協(xié)同作用的抗生素和中草藥。采用高效液相 色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜（HPLC-MS-MS)分析技術(shù)研究應(yīng)用中西復(fù)合藥物后抗生素在羅非魚體內(nèi) 的藥代動力學(xué)規(guī)律，制定中西藥復(fù)方制劑的安全高效配伍使用方案，減少抗生素的使用量， 降低鏈球菌的耐藥性和避免抗生素的藥物殘留，促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康和可持續(xù)發(fā)展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供了高效、來源廣泛、不易引起病原菌耐藥的中西復(fù)合藥物，同 時建立其科學(xué)、合理的使用方法；按此使用方法，這些中西復(fù)合藥物可對水產(chǎn)養(yǎng)殖動物鏈球 菌等細(xì)菌性疾病進(jìn)行安全高效防治。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為：提供一種防治水產(chǎn)動物細(xì)菌性疾病的 中西復(fù)合藥物，所述中西復(fù)方藥物按重量份數(shù)由雞血藤丙酮提取浸膏55~120份和硫酸鏈 霉素1~3份組成；所述雞血藤丙酮提取浸膏制備方法如下步驟：
[0007] A、將雞血藤50°C烘干至恒重，粉碎，過40目篩；
[0008] B、按液料比為10 :l(ml :g)加入丙酮，50°C提取1~3h，過濾；
[0009] C、在步驟B的濾渣中按液料比為10 :1加入丙酮，50°C提取1~3h，過濾；
[0010] D、合并步驟B和步驟C的濾液，減壓蒸餾將丙酮全部回收，獲取雞血藤丙酮提取浸 膏；
[0011] 所述硫酸鏈霉素符合《中國獸藥典》2010年版標(biāo)準(zhǔn)的市售；
[0012] 所述雞血藤符合《中國獸藥典》2010年版標(biāo)準(zhǔn)的市售；
[0013] 所述雞血藤丙酮提取浸膏用量是按其抑菌活性為0. 62IU 土霉素/mg計(jì)算，根據(jù)抑 菌活性調(diào)整其用量。本發(fā)明中所述的雞血藤丙酮提取浸膏均按此法進(jìn)行應(yīng)用。
[0014] 本發(fā)明中西復(fù)合藥物的應(yīng)用方法：采用拌料投喂或藥浴的使用方法。拌料投喂方 法：將雞血藤丙酮提取浸膏85份和硫酸鏈霉素2份融入適量的水，然后噴灑拌入飼料，使飼 料中雞血藤丙酮提取浸膏濃度為3. 43g/Kg、硫酸鏈霉素濃度為0. 08g/Kg，按魚體重1~2% 投喂，早晚各投喂一次，連續(xù)投喂7d，休藥期要為15d以上；藥浴方法：用含雞血藤丙酮提取 浸膏3. 43g/L和硫酸鏈霉素0. 08g/L藥液浸泡病魚30min，每天浸泡兩次，連續(xù)7d，休藥期 為15d以上。
[0015] 本發(fā)明的中西復(fù)合藥物具有如下優(yōu)點(diǎn)和有益效果：采用微孔板法進(jìn)行初篩、瓊脂 擴(kuò)散法進(jìn)行復(fù)篩敏感的中草藥和抗生素，采用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法篩選具有協(xié)同作用的中草藥 和抗生素，避免因沿用人用或獸用中西藥成方而不適于水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的情況。以水產(chǎn)鏈球 菌為研究對象，進(jìn)行篩選和組合，通過體外抑菌實(shí)驗(yàn)和魚體實(shí)驗(yàn)，本發(fā)明的中西復(fù)合藥物可 有效防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物細(xì)菌性疾病。尤其是對于羅非魚鏈球菌病，用于預(yù)防，保護(hù)率可達(dá)到 100%，而用于治療，治愈率可達(dá)50%以上。采用中西藥配伍使用技術(shù)，通過中西藥互補(bǔ)優(yōu)勢 和協(xié)同抗菌，降低抗生素類藥物的使用劑量，降低鏈球菌耐藥性、縮短療程和休藥期，解決 水產(chǎn)養(yǎng)殖動物細(xì)菌性疾病的危害和藥物殘留等制約水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)快速發(fā)展的瓶頸問題。提高 養(yǎng)殖成活率、產(chǎn)品品質(zhì)和養(yǎng)殖效益，促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康快速發(fā)展。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 實(shí)施例一
[0017] 雞血藤丙酮提取浸膏116份，硫酸鏈霉素1份，制備成雞血藤丙酮提取浸膏 23. 20mg/ml+硫酸鏈霉素0? 20mg/ml的中西復(fù)合藥液；
[0018] 實(shí)施例二
[0019] 雞血藤丙酮提取浸膏116份，硫酸鏈霉素3份，制備成雞血藤丙酮提取浸膏 23. 20mg/ml+硫酸鏈霉素0. 60mg/ml的中西復(fù)合藥液；
[0020] 實(shí)施例三
[0021]雞血藤丙酮提取浸膏69. 5份，硫酸鏈霉素2份，制備成雞血藤丙酮提取浸膏 13. 92mg/ml+硫酸鏈霉素0? 40mg/ml的中西復(fù)合藥液；
[0022] 實(shí)施例四
[0023] 雞血藤丙酮提取浸膏81. 25份，硫酸鏈霉素1份，制備成雞血藤丙酮提取浸膏 32. 48mg/ml+硫酸鏈霉素0. 40mg/ml的中西復(fù)合藥液；
[0024] 實(shí)施例五
[0025] 雞血藤丙酮提取浸膏56份，硫酸鏈霉素1份，制備成雞血藤丙酮提取浸膏 27. 84mg/ml+硫酸鏈霉素0. 50mg/ml的中西復(fù)合藥液；
[0026] 實(shí)施例六
[0027] 雞血藤丙酮提取浸膏62份，硫酸鏈霉素1份，制備成雞血藤丙酮提取浸膏 18. 56mg/ml+硫酸鏈霉素0. 30mg/ml的中西復(fù)合藥液；
[0028] 實(shí)施例七
[0029] 雞血藤丙酮提取浸膏85份，硫酸鏈霉素2份，制備成雞血藤丙酮提取浸膏 20. 23mg/ml+硫酸鏈霉素0? 48mg/ml的中西復(fù)合藥液；
[0030]試驗(yàn)：
[0031] 1、抑菌效果：
[0032] (1)以0. 03mg/ml的土霉素作為陽性對照，采用瓊脂擴(kuò)散測定中西復(fù)合藥物的對 羅非魚無乳鏈球菌抑制活性，結(jié)果如表1。
[0033] 表1各中西復(fù)合藥液的抑菌效果
[0034]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種防治水產(chǎn)動物細(xì)菌性疾病的中西復(fù)合藥物，其特征在于所述中西復(fù)方藥物按重 量份數(shù)由雞血藤丙酮提取浸膏55~120份和硫酸鏈霉素1~3份組成；所述雞血藤丙酮提 取浸膏制備方法如下步驟： A、 將雞血藤50°C烘干至恒重，粉碎，過40目篩； B、 按液料比為10 :1加入丙酮，50°C提取1~3h，過濾； C、 在步驟B的濾渣中按液料比為10 :1加入丙酮，50°C提取1~3h，過濾； D、 合并步驟B和步驟C的濾液，減壓蒸餾將丙酮全部回收，獲取雞血藤丙酮提取浸膏； 所述雞血藤丙酮提取浸膏用量是按其抑菌活性為0. 62IU 土霉素/mg計(jì)算，根據(jù)抑菌活 性調(diào)整其用量。
2. 如權(quán)利要求1所述的防治水產(chǎn)動物細(xì)菌性疾病的中西復(fù)合藥物，其特征在于：所述 的中西復(fù)合藥物的優(yōu)選重量份數(shù)為：雞血藤丙酮提取浸膏85份，抑菌活性為0. 62IU土霉素 /mg,硫酸鏈霉素2份。
3. 如權(quán)利要求1所述的防治水產(chǎn)動物細(xì)菌性疾病的中西復(fù)合藥物，其特征在于：將中 西復(fù)合藥物溶于水后拌入飼料投喂或藥浴方式使用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種防治水產(chǎn)動物細(xì)菌性疾病的中西復(fù)合藥物，所述中西復(fù)方藥物按重量份數(shù)由雞血藤丙酮提取浸膏55～120份和硫酸鏈霉素1～3份組成；本發(fā)明中西復(fù)合藥物采用拌料投喂或藥浴的使用方法；本發(fā)明采用中西藥配伍使用技術(shù)，通過中西藥互補(bǔ)優(yōu)勢和協(xié)同抗菌，降低抗生素類藥物的使用劑量，降低鏈球菌耐藥性、縮短療程和休藥期，解決水產(chǎn)養(yǎng)殖動物細(xì)菌性疾病的危害和藥物殘留等制約水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)快速發(fā)展的瓶頸問題。提高養(yǎng)殖成活率、產(chǎn)品品質(zhì)和養(yǎng)殖效益，促進(jìn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康快速發(fā)展。
【IPC分類】A61K31-7036, A61P31-04, A61K36-486
【公開號】CN104622948
【申請?zhí)枴緾N201510070985
【發(fā)明人】郭偉良, 周永燦, 王文慧, 胡文婷, 吳學(xué)貴, 謝珍玉, 王世鋒
【申請人】海南大學(xué)
【公開日】2015年5月20日
【申請日】2015年2月11日