抑制igf-1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的藥物組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明提供了一種抑制IGF-I信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的藥 物組合物。
【背景技術(shù)】
[0002] 結(jié)直腸癌是臨床常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。近20年來(lái)，世界多數(shù)國(guó)家的結(jié)腸癌呈上升 趨勢(shì)，我國(guó)大腸癌上升趨勢(shì)亦十分顯著。
[0003] 二甲雙胍是雙胍類(lèi)一線口服降糖藥，主要針對(duì)II型糖尿病治療。二甲雙胍可以抑 制肝臟糖異生，增加外周組織對(duì)葡萄糖的攝取和利用，從而降低血糖。它不僅可以降低血 糖，而且還具有不引起低血糖風(fēng)險(xiǎn)及較少引起乳酸中毒、改善胰島素抵抗的臨床優(yōu)勢(shì)。大量 研究證實(shí)，糖尿病患者與某些腫瘤之間存在相關(guān)性，而且與沒(méi)有糖尿病的腫瘤患者，糖尿病 合并腫瘤患者對(duì)化療藥物的敏感性降低，并且有更多的并發(fā)癥。近今年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，二甲雙 胍不僅可以降低血糖，還可以抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，增加機(jī)體對(duì)化療藥的敏感性。二甲雙胍對(duì) 多種類(lèi)型的腫瘤（如乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌、結(jié)直腸癌等）有抑制作用，其中以消化系統(tǒng) 腫瘤（如結(jié)腸癌）最為明顯。
[0004] VD3除了可以促進(jìn)鈣的吸收進(jìn)而調(diào)節(jié)多種生理功能外，其在腫瘤的預(yù)防科治療方 面也有重要的作用。VD3主要通過(guò)與其受體（VDR)結(jié)合，改變基因轉(zhuǎn)錄的速度，抑制腫瘤細(xì) 胞的增值和誘導(dǎo)分化。近年來(lái)，多方面的研究發(fā)現(xiàn)，VD3對(duì)結(jié)腸腫瘤有一定的抑制作用。
[0005] IGF-I又稱(chēng)生長(zhǎng)介素，它是一種在正常和腫瘤細(xì)胞中都具有強(qiáng)的有絲分裂效應(yīng)的 多肽類(lèi)生長(zhǎng)因子，除了可以刺激細(xì)胞增殖外，還能抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。IGF-I可 以與IGF-IR結(jié)合來(lái)發(fā)揮作用。IGFBP是調(diào)節(jié)血液IGF含量最直接的因素，其中在血清中 IGF-I與其受體結(jié)合并發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)主要由IGFBP-3所調(diào)節(jié)。胰島素和IGF-I可以與 IR、IGF-IR和IR/IGF-1R雜交受體結(jié)合，結(jié)合后可以導(dǎo)致受體P亞基酪氨酸殘基的自磷 酸化。IR/IGF-1R活化后作用于下游的一些生長(zhǎng)促進(jìn)通路，包括PI3K/AKT/mT0R信號(hào)網(wǎng)絡(luò)。 腫瘤患者血清IGFBP-I增加，IGFBP-I受血清胰島素水平的正向調(diào)節(jié)，可與IGF-I結(jié)合并抑 制IGF-I與受體的結(jié)合，從而抑制其活性。IGFBP-3也可與IGF-I結(jié)合并抑制IGF-I與受 體的結(jié)合并抑制其活性，患腫瘤時(shí)血清IGFBP-3減少?，F(xiàn)發(fā)現(xiàn)乳腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、肺 癌等多種腫瘤患者血循環(huán)IGF-I增高及IGFBP-3降低，并與腫瘤細(xì)胞的不良分化有關(guān)，認(rèn)為 IGF-1、IGFBP-1、IGFBP-3水平與腫瘤的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后有關(guān)。然而，本領(lǐng)域?qū)ζ渚唧w的影 響機(jī)理尚不清楚。同時(shí)，到目前為止，還沒(méi)有IGF-I相關(guān)的重組蛋白型藥物上市，因而提供 一種能夠用于調(diào)控血清IGF-I活性并阻斷其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的化學(xué)藥物，是本領(lǐng)域迫切需要 解決的問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種能夠用于調(diào)控血清IGF-I活性的藥物組合物。
[0007] 本發(fā)明的第一方面，提供了一種（a)二甲雙胍和（b)維生素D3類(lèi)物質(zhì)構(gòu)成的組合 的用途，所述組合用于制備增加IGFBP-3蛋白表達(dá)的組合物或藥盒，或用于制備IGFBP-3蛋 白促進(jìn)劑。
[0008] 在另一優(yōu)選例中，所述的組合還用于抑制IGF-IR的表達(dá)。
[0009] 在另一優(yōu)選例中，所述的組合還用于抑制IGF-I的信號(hào)傳導(dǎo)。
[0010] 在另一優(yōu)選例中，所述組合還用于制備增加P-AMPK蛋白表達(dá)量的組合物，或用于 制備P-AMPK蛋白促進(jìn)劑。
[0011] 在另一優(yōu)選例中，所述的維生素D3類(lèi)物質(zhì)包括維生素D3、骨化三醇、或其組合。
[0012] 在另一優(yōu)選例中，所述的組合包括：
[0013] (i)含有活性成分為（a)二甲雙胍和（b)維生素D3類(lèi)物質(zhì)的藥物組合物；
[0014] (ii)含有活性成分為（a)二甲雙胍的藥物制劑和含有活性成分為（b)維生素D3 類(lèi)物質(zhì)的藥物制劑所構(gòu)成的制劑組合。
[0015] 在另一優(yōu)選例中，所述的組合（物）還包括順鉬。
[0016] 在另一優(yōu)選例中，在所述的藥物組合物或制劑組合中，二甲雙胍的含量為 0. 05-95wt%，維生素D3類(lèi)物質(zhì)的含量為0. 05-95wt%。
[0017] 在另一優(yōu)選例中，在所述的藥物組合物或制劑組合中，二甲雙胍的含量為 500-2000mg/劑，維生素D3類(lèi)物質(zhì)的含量為400-2000IU/劑。
[0018] 在另一優(yōu)選例中，所述的組合還用于選自下組的一種或多種應(yīng)用：
[0019] 抑制IGF-IR蛋白的表達(dá)；
[0020] 抑制p-mTOR蛋白的表達(dá)；
[0021] 抑制P-P70S6K蛋白的表達(dá)；
[0022] 抑制P-S6P蛋白的表達(dá)；
[0023] 抑制cyclinDl蛋白的表達(dá)；
[0024] 抑制p-Bcl-2蛋白的表達(dá)；
[0025] 抑制c-Myc蛋白的表達(dá)。
[0026] 在另一優(yōu)選例中，所述的組合還用于制備促進(jìn)Cleavedcaspase-3蛋白表達(dá)的組 合物，或用于制備Cleavedcaspase-3蛋白促進(jìn)劑。
[0027] 在另一優(yōu)選例中，所述的組合物還用于促進(jìn)Bax蛋白的表達(dá)。
[0028] 在另一優(yōu)選例中，所述的組合還用于制備降低IGF-IR蛋白表達(dá)的組合物，或用于 制備IGF-IR蛋白抑制劑。
[0029] 在另一優(yōu)選例中，所述的組合還用于選自下組的一種或多種應(yīng)用：
[0030]a.抑制癌細(xì)胞增殖或使癌細(xì)胞凋亡，其中，所述的癌細(xì)胞選自下組：乳腺癌細(xì)胞、 前列腺癌細(xì)胞、膀胱癌細(xì)胞；
[0031]b.治療或預(yù)防腫瘤，其中，所述的腫瘤選自下組：乳腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、膀胱 癌、肺癌；
[0032]c.治療生長(zhǎng)素缺乏癥，或促進(jìn)生長(zhǎng)素分泌。
[0033]本發(fā)明的第二方面，提供了一種用于增加IGFBP-3蛋白表達(dá)量的組合，所述的組 合由（a)二甲雙胍和（b)維生素D3類(lèi)物質(zhì)所構(gòu)成。
[0034] 本發(fā)明的第三方面，提供了一種非治療性的、體外促進(jìn)細(xì)胞中IGFBP-3蛋白表達(dá) 的方法，其特征在于，包括步驟：
[0035] 將所述細(xì)胞與（a)二甲雙胍和（b)維生素D3類(lèi)物質(zhì)先后、按序或同時(shí)進(jìn)行接觸， 從而促進(jìn)所述細(xì)胞中IGFBP-3蛋白表達(dá)。
[0036] 在另一優(yōu)選例中，所述的癌細(xì)胞選自下組：乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231、乳腺癌細(xì)胞 MCF7、前列腺癌細(xì)胞DU145、膀胱癌細(xì)胞SW-780。
[0037] 在另一優(yōu)選例中，在所述組合物中，維生素D3的濃度為280iig/ml-320iig/ml，以 體系的終濃度計(jì)。
[0038] 在另一優(yōu)選例中，在所述組合物中，二甲雙胍的濃度為10000-20000iig/ml，以體 系的終濃度計(jì)。
[0039] 在另一優(yōu)選例中，所述組合物的作用時(shí)間為2_96h。
[0040] 本發(fā)明的第四方面，提供了一種提高哺乳動(dòng)物血清中IGFBP-3蛋白表達(dá)的方法， 所述方法包括步驟：給需要的對(duì)象，施用（a)二甲雙胍和（b)維生素D3類(lèi)物質(zhì)構(gòu)成的組合。[0041] 在另一優(yōu)選例中，所述方法用于治療結(jié)腸癌、乳腺癌（三陰性或三陽(yáng)性）、前列腺 癌細(xì)胞、膀胱癌。
[0042] 在另一優(yōu)選例中，所述的乳腺癌是三陰性乳腺癌或其他類(lèi)型的乳腺癌（如三陽(yáng)性 乳腺癌）。
[0043] 在另一優(yōu)選例中，施用量如下：二甲雙胍的用量為5-33. 3mg/kg/天；較佳地 8. 33-25mg/kg/ 天；維生素D3 的用量為 6. 67-33. 3IU/kg/ 天。
[0044] 應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文（如實(shí)施例）中具 體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在 此不再一一累述。
【附圖說(shuō)明】
[0045] 圖1實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)陽(yáng)性體征：a便血，b脫肛。
[0046] 圖2含維生素D3和二甲雙胍的藥物組合物對(duì)結(jié)腸炎相關(guān)的小鼠結(jié)腸腫瘤模型腫 瘤的影響。
[0047]圖 3 正常腺窩（A) ;ACF:ICrypt⑶，2Crypt(C)，3Crypt(D)，彡 4Crypt(E)。
[0048] 圖4小鼠空腹血糖濃度變化。
[0049] 圖5a小鼠血清IGF-I濃度變化；#和正常對(duì)照組比，P〈0. 05 ;n=9_13。
[0050] 圖5b小鼠血清胰島素濃度變化；#和正常對(duì)照組比，P〈0. 05 ;n=9_13。
[0051] 圖5c小鼠血清IGFBP-I濃度變化；n=9-13。
[0052] 圖5d小鼠血清IGFBP-3濃度變化；##和正常對(duì)照組比，P〈0. 01 和模型對(duì)照組 相比，P〈〇. 01;f和VD3中劑量組相比，P〈0. 05 ;n=9-13。
[0053] 圖6a小鼠結(jié)腸組織p-AMPK蛋白表達(dá)變化；##和正常對(duì)照組比，P〈0. 01 和模型 對(duì)照組相比，P〈〇. 01 和模型對(duì)照組相比，P〈〇. 001;tf和VD3中劑量組相比，P〈0. 01; IJ和二甲雙胍中劑量組相比，P〈0.01 ;n=3。
[0054] 圖6b小鼠結(jié)腸組p-AKT蛋白表達(dá)變化；**和模型對(duì)照組相比，P〈0. 01 ;tt和 VD3中劑量組相比，P〈0. 01;n=3。
[0055] 圖6c小鼠結(jié)腸組織p-mTOR蛋白表達(dá)變化；#和正常對(duì)照組比，P〈0. 05 和模型 對(duì)照組相比，P〈〇.Ol;t和VD3中劑量組相比，P〈0. 05 ;n=3。