新疆鼠尾草提取物在制備防治糖尿病腎病藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物制備領(lǐng)域，具體涉及新疆鼠尾草提取物在制備防治糖尿病腎病藥 物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 糖尿病腎?。―N)是糖病最常見(jiàn)和最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一，是導(dǎo)致慢性腎功 能不全的常見(jiàn)原因，也是糖尿病患者致死、致殘的重要原因。DN的防病機(jī)制較為復(fù)雜，如 何有效地治療DN是目前研宄者面臨的一個(gè)重大的難題。天然藥物防治DN的實(shí)驗(yàn)研宄和 臨床應(yīng)用有較多報(bào)道，嘗試從分子生物學(xué)及基因水平對(duì)DN的保護(hù)也有探索。新疆鼠尾草 (Salvia deserta Schang)為唇形科（Labiatae)鼠尾草屬（Salvia L)植物，拉丁學(xué)名含義 為荒漠鼠尾草，因分布在新疆戈壁荒原而得名，亦稱(chēng)新疆丹參（Salvia deserta Shang的根 或根莖），在我國(guó)新疆北部有廣泛的分布。新疆鼠尾草為多年生草本植物，在民間以全草用 藥，用于清熱解毒、止咳祛痰、消腫利尿。在前期的研宄中發(fā)現(xiàn)，新疆鼠尾草水溶性提取部位 具有一定的抗氧化活性，能夠降低糖尿病小鼠中MDA的含量，改善糖尿病小鼠的腎臟病變。 而酚酸類(lèi)成分是新疆鼠尾草中的主要水溶性成分，新疆醫(yī)科大學(xué)分離得到了兩個(gè)比較重要 的化合物：丹酚酸K與迷迭香酸，對(duì)其藥理學(xué)初步研宄發(fā)現(xiàn)它們具有較強(qiáng)的抑制醛糖還原 酶的作用，文獻(xiàn)調(diào)研也發(fā)現(xiàn)迷迭香酸及其它的酚酸類(lèi)成分具有明顯的抗氧化活性。但目前 關(guān)于新疆鼠尾草對(duì)DN的防治作用及其作用機(jī)制的研宄尚未見(jiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的就是針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，結(jié)合DN的防病機(jī)制，提供了新疆 鼠尾草提取物在制備防治糖尿病腎病藥物中的應(yīng)用。
[0004] 為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：新疆鼠尾草提取物在制備防治糖 尿病腎病藥物中的應(yīng)用。
[0005] 進(jìn)一步的，上述的應(yīng)用，所述新疆鼠尾草提取物為新疆鼠尾草總酚酸提取物。
[0006] 進(jìn)一步的，上述的應(yīng)用，所述新疆鼠尾草總酚酸提取物的制備方法為：將新疆鼠尾 草藥材加25倍量40 %乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)，合并提取液，回收溶劑后制備得到新 疆鼠尾草總酚酸提取物。
[0007] 進(jìn)一步的，上述的應(yīng)用，所述新疆鼠尾草總酚酸提取物的給藥劑量為150mg/ kg_600mg/kg〇
[0008] 本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明提供的新疆鼠尾草提取物在制備防治糖尿病腎病 藥物中的應(yīng)用，通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)新疆鼠尾草總酚酸提取物的安全性作出客觀、科學(xué)的評(píng)價(jià)，為防 治DN的實(shí)驗(yàn)研宄提供了劑量依據(jù)，首先通過(guò)小鼠的經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)確定其半數(shù)致死量 (LD 5tl),在此基礎(chǔ)上，通過(guò)體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，確定了新疆鼠尾草總酚酸提取物對(duì)DN的防治作用 及其可能的作用機(jī)制，為天然藥物防治DN提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，也為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用新疆鼠尾 草提供技術(shù)資料。
【附圖說(shuō)明】
[0009] 圖1為對(duì)糖尿病大鼠血糖的影響（I ±八η = 6)結(jié)果。
[0010] 圖2為對(duì)糖尿病大鼠各項(xiàng)血脂水平的影響（, η = 6)。
[0011] 圖3為對(duì)糖尿病大鼠血清肌酐及血尿素（元± s , η = 6)。
[0012] 圖4為對(duì)糖尿病大鼠血清ALT及AST含量的影響（I ± ' η = 6)。
[0013] 圖5為對(duì)糖尿病大鼠血清SOD及MDA含量的影響（無(wú)± ' η = 6)。
[0014] 圖6為對(duì)糖尿病大鼠血漿中NO含量的影響（，η = 6)。
[0015] 圖7為對(duì)糖尿病大鼠血清中AGEs含量的影響（，η = 6)。
[0016] 圖8為對(duì)糖尿病大鼠血清TNF- α含量的影響（i ± ^ η = 6)。
[0017] 圖9為對(duì)糖尿病腎臟組織學(xué)病變的影響（10X40倍）。
[0018] 圖10為不同組別大鼠腎臟組織TGF-β i免疫組化結(jié)果（10X40倍）。
[0019] 圖11為不同組別大鼠腎臟組織VEGF免疫組化結(jié)果（10X40倍）。
[0020] 圖12為免疫組化染色I(xiàn)OD值（無(wú)± s , η = 125)。
【具體實(shí)施方式】
[0021] 實(shí)施例1 :
[0022] 新疆鼠尾草總酚酸提取物在制備防治糖尿病腎病藥物中的應(yīng)用，新疆鼠尾草總酚 酸提取物的制備方法為：將新疆鼠尾草藥材加25倍量40%乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)， 合并提取液，回收溶劑后制備得到新疆鼠尾草總酚酸提取物。
[0023] 新疆鼠尾草總酷酸提取物的給藥劑量為150mg/kg-600mg/kg。
[0024] 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：
[0025] 1、研宄內(nèi)容與方法：
[0026] L 1小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)：
[0027] I. I. 1材料和動(dòng)物：
[0028] I. I. I. 1 供試品：
[0029] 按新疆鼠尾草總酚酸的最佳提取工藝制備得到新疆鼠尾草總酚酸提取物，褐色粉 末，應(yīng)用時(shí)以蒸餾水配制成所需濃度。
[0030] I. I. 1. 2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：
[0031] 健康昆明種小鼠，體重20. 0±2. 0g，雌雄各半，由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提 供，許可證號(hào)：SCXK (新）2011-0004。
[0032] I. I. L 3 實(shí)驗(yàn)條件：
[0033] 飼料來(lái)源及證號(hào)：SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施合格證號(hào)：SCXK (新）2011-0004 ;環(huán)境 溫度：22±2°C ;相對(duì)濕度40~70%，全部動(dòng)物自由飲食飲水。
[0034] I. 1. 2實(shí)驗(yàn)方法：
[0035] I. L 2. 1 預(yù)實(shí)驗(yàn)：
[0036] 取昆明種小鼠20只，體重20. 0±2. 0g，雌雄各半，平均隨機(jī)分為兩組，每組各10 只，雌雄各半。首先稱(chēng)取一定量的新疆鼠尾草總酚酸提取物，將其配成最大濃度的溶液 (I. 3g · mr1)，給第一組動(dòng)物每只灌胃給藥0. 4mL/10g。間隔6小時(shí)后，按上述條件灌胃第 二次，一日總劑量相當(dāng)于52g ·ΚΡ提取物。第二組動(dòng)物每只灌胃給與新疆鼠尾草總酚酸提 取物溶液（0. 65g · ml/1) 0. 4mL/10g。間隔6小時(shí)后，按上述條件灌胃第二次，一日總劑量相 當(dāng)于26g · kg4提取物。兩組動(dòng)物給藥后連續(xù)觀察7天，觀察動(dòng)物的反應(yīng)情況，并記錄動(dòng)物 的外觀，行為活動(dòng)，精神狀態(tài)，食欲，大、小便及其顏色，被毛、膚色、死亡情況。預(yù)試實(shí)驗(yàn)?zāi)康?是為了找出引起動(dòng)物10 %和90 %死亡的劑量，即LDltl和LD 9(|，以便安排正式實(shí)驗(yàn)。
[0037] L L 2. 2急性毒性實(shí)驗(yàn)：
[0038] 取健康昆明種小鼠 50只，雌雄各半。適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，按體重隨機(jī)分為5組，每 組10只。取受試藥物，按預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)出的實(shí)驗(yàn)濃度配制溶液，以0. 4mL/10g體重灌胃 給藥，連續(xù)2次，給藥間隔6小時(shí)，給藥后連續(xù)觀察14天。觀察動(dòng)物出現(xiàn)的死亡情況，記錄 動(dòng)物死亡數(shù)。
[0039] I. 1. 2. 3 計(jì)算：
[0040] (I) i值的計(jì)算：
[0041] 公式如下：求得值后以最低劑量組的對(duì)數(shù)值加上一個(gè)i值即是第二個(gè)劑量組的對(duì) 數(shù)劑量，依次推至最高劑量組，查各自反對(duì)數(shù)及得出各組劑量的真實(shí)值。
[0042]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 新疆鼠尾草提取物在制備防治糖尿病腎病藥物中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述新疆鼠尾草提取物為新疆鼠尾草總 酚酸提取物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述新疆鼠尾草總酚酸提取物的制備方 法為：將新疆鼠尾草藥材加25倍量40%乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)，合并提取液，回收 溶劑后制備得到新疆鼠尾草總酚酸提取物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述新疆鼠尾草總酚酸提取物的給藥劑 量為 150mg/kg-600mg/kg。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了新疆鼠尾草提取物在制備防治糖尿病腎病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明提供的新疆鼠尾草提取物在制備防治糖尿病腎病藥物中的應(yīng)用，通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)新疆鼠尾草總酚酸提取物的安全性作出客觀、科學(xué)的評(píng)價(jià)，為防治DN的實(shí)驗(yàn)研究提供了劑量依據(jù)，首先通過(guò)小鼠的經(jīng)口急性毒性實(shí)驗(yàn)確定其半數(shù)致死量（LD50），在此基礎(chǔ)上，通過(guò)體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，確定了新疆鼠尾草總酚酸提取物對(duì)DN的防治作用及其可能的作用機(jī)制，為天然藥物防治DN提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，也為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用新疆鼠尾草提供技術(shù)資料。
【IPC分類(lèi)】A61P13-12, A61P3-10, A61K36-53
【公開(kāi)號(hào)】CN104644735
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410842730
【發(fā)明人】熱娜·卡斯木, 王曉梅, 胡君萍, 王新玲, 王小青, 李敏
【申請(qǐng)人】新疆醫(yī)科大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年5月27日
【申請(qǐng)日】2014年12月30日