寧泌泰在治療婦科炎癥藥物中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及寧泌泰在治療細(xì)菌性、真菌性等多種因素引 起急、慢性陰道炎的藥物用途。
[0002]
【背景技術(shù)】
[0003] 寧泌泰是源于民間驗(yàn)方，由三顆針、四季紅、芙蓉葉、白茅根、連翹、仙鶴草、大風(fēng)藤 等中草藥運(yùn)用現(xiàn)代制藥技術(shù)精制而成的純天然中藥，具有清熱解毒，涼血止血，利濕通淋， 止帶等功效。寧泌泰膠囊1996年上市，在10多年的臨床使用中，治療男性前列腺炎療效得 到了患者的認(rèn)可，臨床使用5000多萬人次。近年來，我們一直致力于將其功效應(yīng)用于更廣 泛的用途，使其發(fā)揮更大的作用。
[0004]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供寧泌泰在治療婦科炎癥藥物中的用途。
[0006] 本發(fā)明寧泌泰作為在治療陰道炎的藥物中的應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明在臨床使用過程中，在女性生殖系統(tǒng)炎癥方面有一定的療效，對(duì)急性盆腔 炎、急性外陰炎、衣原體性陰道炎，陰道細(xì)菌病患者有很好的療效，總有效率為90. 10%。
【具體實(shí)施方式】
[0008] 以下通過實(shí)驗(yàn)例來對(duì)寧泌泰在治療細(xì)菌性、真菌性等多種因素引起急、慢性陰道 炎的藥物中的新用途。
[0009] 一、試驗(yàn)材料 1. 受試藥物 受試樣品為寧泌泰膠囊原料藥，外觀為深棕色粉末，由貴陽新天藥業(yè)股份有限公司提 供。每克原料藥相當(dāng)于原藥材3. 997g。陽性藥：婦科千金片，18片/板X6板/盒，株洲千 金藥業(yè)股份有限公司。
[0010] 2.儀器與試劑 2. 1儀器 BS210S精密電子天平（0· Img~IOg),德國(guó)賽多利斯（sartorius) ;TDL80_2B臺(tái)式離 心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠。ZDX-35B1，30立升不銹鋼座式滅菌器，上海申安醫(yī)療器械廠。 CKX31顯微鏡，日本奧林巴斯 2. 2主要試劑 LB培養(yǎng)基：按Trypton 10g、Yeast extraction 5g、NaCl 10g、蒸饋水 1000 ml 的比例配 制（pH7. 0-7. 2)，高壓滅菌后供大腸桿菌增菌用。普通肉湯培養(yǎng)基，250g/瓶，杭州微生物試 劑有限公司，用于金黃色葡萄球菌增菌。沙氏培養(yǎng)基，250g/瓶，杭州微生物試劑有限公司， 用于白色念珠菌增菌及計(jì)數(shù)用。
[0011] 3.動(dòng)物 SD大鼠，150-180g，雌性，120只，清潔級(jí)，購自南京軍區(qū)醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，動(dòng)物合格 證號(hào)SCXK (軍）2007-012。家兔，2. 0-3. 0kg，雌性，48只，普通級(jí)，購自南京江寧區(qū)青龍山 動(dòng)物繁殖場(chǎng)，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK (蘇）2007-0008。
[0012] 4.試驗(yàn)菌株 大腸桿菌（ATCC 25922)，金黃色葡萄球菌（ATCC 25923)，白色念珠菌（ATCC 28001)， 均由中國(guó)藥科大學(xué)微生物教研室余江河教授提供。
[0013] 二、試驗(yàn)方法 1.對(duì)大鼠大腸桿菌+金黃色葡萄球菌混合感染性陰道炎的作用 1. 1劑量設(shè)置與分組 寧泌泰膠囊原臨床用量為：〇.38g/粒，口服，一次3-4粒，一日3次。按最大劑量 (4. 56g/天/60kg)根據(jù)體表面積折算成大鼠0. 48g/kg。此外，預(yù)試驗(yàn)結(jié)果顯示，本品灌胃給 藥對(duì)于大鼠炎癥模型的起效劑量為I. 〇 g/kg。婦科千金片臨床用量為：0. 32g/片，口服，一 次6片，一日3次。按最大劑量（5. 76g/天/60kg)根據(jù)體表面積折算成大鼠為0. 60g/kg。
[0014] 1.2試驗(yàn)菌液制備 取4°C保存的預(yù)培養(yǎng)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌液0. 6ml，分別接種于6ml的LB培養(yǎng) 基和肉湯培養(yǎng)基中，置37°C搖床（280轉(zhuǎn)/min)培養(yǎng)16h。取出后用0. 9%氯化鈉注射液稀 釋濃度〇. 5號(hào)麥?zhǔn)媳葷峁軡舛?，此時(shí)細(xì)菌數(shù)即為I. 5X108CFU/ml，將兩種菌液按1 :6體積 比混合，30min內(nèi)供動(dòng)物陰道注射用。
[0015] 1.3試驗(yàn)方法 大鼠60只，取其中50只用滅菌I ml注射器接7號(hào)針頭(針尖磨平)，抽取混合菌液，造 模大白鼠取頭朝下位，使針頭插入陰道，來回幾次輕輕摩擦，造成粘膜損傷，隨后將〇. I ml 混合菌液注入，原位停留l_2min，防止液體溢出。每天1次，共3次。造模后可見大白鼠外 陰紅腫，伴少量白色分泌物，表明造模成功。余下10只作為空白對(duì)照組。
[0016] 手術(shù)后正常清潔飼養(yǎng)。術(shù)后第2天測(cè)定體重（D0)，按上述分組，并開始每天灌胃給 藥2次，上午、下午各1次。每天上午給藥前，觀察動(dòng)物行為、陰道外觀及分泌物等一般狀況 1次。第7次給藥24h后測(cè)定體重1次（D7)，將動(dòng)物股動(dòng)脈放血處死，取血以顯微鏡進(jìn)行血 液白細(xì)胞計(jì)數(shù)。取陰道，然后用10%中性甲醛固定，石蠟包埋、切片，HE染色，顯微鏡下閱 片，觀察陰道組織形態(tài)學(xué)變化。
[0017] 2.對(duì)兔白色念珠菌感染性陰道炎的作用 2. 1劑量設(shè)置 本試驗(yàn)中受試品寧泌泰膠囊設(shè)高、中、低三個(gè)劑量組，分別為1.2、0.6、0.3g /kg。陽性 藥婦科千金片劑量設(shè)為〇. 6g/kg。各組藥物配制不同濃度，等容灌胃給藥（3. 0ml/kg)，每天 2次。
[0018] 2. 2 分組 48只家兔隨機(jī)分為6組，每組8只，分別為：空白對(duì)照組(生理鹽水，3. 0ml/kg)，模型組 (0. 5%CMC-Na，3. 0ml/kg)，婦科千金片（0. 6g/kg)，寧泌泰膠囊高（1.2g/kg)、中（0. 6g/kg) 和低劑量（〇. 3g/kg)。
[0019] 2.3試驗(yàn)菌液制備 取4°C保存的預(yù)培養(yǎng)白色念珠菌0. 6ml，分別接種于6ml的沙氏培養(yǎng)基中，置37°C搖 床（280轉(zhuǎn)/min)培養(yǎng)16h。取出后用0.9%氯化鈉注射液稀釋，比濁法測(cè)定菌液濃度為 I. 5X107CFU/ml，30min內(nèi)供陰道注射用。
[0020] 2. 4試驗(yàn)方法 家兔48只，取其中40只，用滅菌I ml注射器接7號(hào)針頭(針尖磨平)，抽取混合菌液， 造模家兔置于兔箱中固定，使針頭插入陰道，來回幾次輕輕摩擦，造成粘膜損傷，隨后將〇. 2 ml菌液注入，原位停留l-2min，防止液體溢出。每天1次，共3次。造模后可見兔陰道充 血、水腫、糜爛、分泌物增多等陰道炎病變體征，表明造模成功。余下8只作為空白對(duì)照組。
[0021] 造模后正常清潔飼養(yǎng)。第2天測(cè)定體重（D0)，按上述分組，并開始每天灌胃給藥2 次，上午、下午各1次。每天上午給藥前，觀察動(dòng)物行為、陰道外觀及分泌物等一般狀況1次。
[0022] 分別在給藥后3天和7天時(shí)，用消毒棉簽蘸取陰道分泌物，涂于沙氏培養(yǎng)基表面， 涂抹面積應(yīng)盡量一致，25 °C培養(yǎng)48h，肉眼觀察菌落數(shù)，以菌落數(shù)多少分級(jí)判定療效。治愈： 〈5個(gè)；顯效：菌落5~20個(gè)；有效：菌落21~50個(gè)；好轉(zhuǎn)：菌落51~80 ;無效：菌落>80 個(gè)。
[0023] 第7次給藥24h后測(cè)定體重1次（D7)，耳中動(dòng)脈取血以顯微鏡進(jìn)行血液白細(xì)胞計(jì) 數(shù)。隨后空氣栓塞將動(dòng)物處死，取陰道稱重，計(jì)算臟器系數(shù)，用10%中性甲醛固定，石蠟包 埋、切片，HE染色，顯微鏡下閱片，觀察陰道組織形態(tài)學(xué)變化。
[0024] 3.數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)方法 各組數(shù)據(jù)均以? ± s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)考察顯著性，以P〈0. 05作為顯著性指 標(biāo)。組織形態(tài)學(xué)結(jié)果和微生物計(jì)數(shù)結(jié)果比較用參比差值法進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。
[0025] 三、結(jié)果 1.對(duì)大鼠大腸桿菌+金黃色葡萄球菌混合感染性陰道炎的作用 1. 1 一般狀況觀察 模型組10只大鼠觀察期間均可見不同程度的陰道口擴(kuò)張、紅腫，有的有膿狀分泌物流 出。試驗(yàn)完畢處死后可見大鼠宮頸及陰道腫脹、發(fā)硬，部分與周圍組織粘連，形成硬結(jié)。寧 泌泰膠囊各治療組給藥初期陰道口出現(xiàn)與模型組類似的癥狀，給藥3~4天后可見各癥狀 呈逐漸減輕恢復(fù)。給藥完畢處死后可見部分大鼠的宮頸仍有不同程度腫脹、肥大，未見與周 圍組織有粘聯(lián)發(fā)生?？瞻讓?duì)照組大鼠觀察期間陰道口未見明顯異常，解剖后子宮亦未見明 顯異常。
[0026] 1. 2對(duì)血中白細(xì)胞數(shù)量的影響 由表1可見，造?？梢鸫笫笱邪准?xì)胞顯著升高（P〈〇. 01)。與模型組相比，寧泌泰膠 囊高、中劑量組可顯著減少血中白細(xì)胞的數(shù)量（P〈〇. 05)。低劑量組有一定的改善作用，但未 達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異。
[0027] 表1.寧泌泰膠囊對(duì)混合菌陰道炎大鼠血中白細(xì)胞數(shù)量的影響（n=10，i ±s) I;·b: e !. Π\：；·I of Ni iu>h i I；i : nsu !c on l.eukocy Io (：i：；i n： I ] ies hi r；i I s iv i ih v,：* η i η ? ! I s hn；i；i：od b\ i::ixctl biieiori;· Ui-10, ? 土s)
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種寧泌泰在治療細(xì)菌性、真菌性等多種因素引起急、慢性陰道炎的藥物用途。
【專利摘要】本發(fā)明公開了寧泌泰在治療婦科炎癥藥物中的用途，特別是涉及寧泌泰膠囊對(duì)于細(xì)菌性、真菌性等多種因素引起急、慢性陰道炎藥物中的用途，實(shí)驗(yàn)證明對(duì)細(xì)菌性、真菌性感染的動(dòng)物模型的相關(guān)癥狀具有明顯的改善作用?？筛纳蒲装Y引起的肉眼可見癥狀，減少血中白細(xì)胞數(shù)量，降低炎癥組織的臟器系數(shù)，提示緩解炎癥部位的腫脹，同時(shí)，可顯著改善炎癥部位的組織病理學(xué)改變。
【IPC分類】A61K36-899, A61P15-00, A61P31-04, A61P15-02
【公開號(hào)】CN104667004
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510108226
【發(fā)明人】董大倫
【申請(qǐng)人】貴陽新天藥業(yè)股份有限公司
【公開日】2015年6月3日
【申請(qǐng)日】2015年3月12日