一種用于治療慢性腎炎的腎茶總酚及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于民族醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種制備腎茶總酚的方法及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 慢性腎小球腎炎（Chronic glomerulonephritis, CGN)，簡稱慢性腎炎，是多病因 的慢性腎小球疾病，也是導(dǎo)致慢性腎功能衰竭的重要原因之一，發(fā)病率居腎臟疾病首位。其 早期臨床表現(xiàn)為乏力、疲倦、腰痛等癥狀，隨病變進(jìn)展表現(xiàn)為長期持續(xù)性尿異常，出現(xiàn)蛋白 尿或血尿，可能伴有高血壓和水腫，最終導(dǎo)致腎衰。
[0003] 傳統(tǒng)民族醫(yī)藥治療慢性腎炎具有良好的前景。在眾多傳統(tǒng)民族醫(yī)藥中，傣族藥腎 茶（Clerodendranthusspicatus. (Thunb.)C.Y.Wu)具有清火解毒、利尿排石、涼血止血之 功效，用于治療急性腎炎、慢性腎炎、膀胱炎、尿路結(jié)石等，使用歷史悠久?，F(xiàn)代研宄表明，可 用該藥水煎煮治療慢性腎炎，能有效消除水腫和蛋白尿。臨床上還常常以腎茶為主藥，配伍 補(bǔ)氣、利水、清熱、止血、滋陰等傳統(tǒng)藥物用于慢性腎炎，取得較好治療效果。據(jù)已公開發(fā)表 的文獻(xiàn)（柳丹萍，黃榮桂.腎茶研宄新進(jìn)展，海峽藥學(xué)，2013年25卷11期，56-58)，目前從 全球各地腎茶中分離、鑒定了近200種化學(xué)成分，主要包括黃酮、酚酸、二萜、揮發(fā)油、三萜 類成分，此外還有糖、有機(jī)酸、氨基酸和礦物質(zhì)。藥理實(shí)驗(yàn)表明，腎茶總酚為腎茶發(fā)揮藥效的 重要有效部位之一。
[0004] 然而，現(xiàn)有技術(shù)中只有提取腎茶黃酮的方法（專利申請公布號：CN103127214 A)， 而無法同時(shí)得到腎茶酚酸和腎茶黃酮，亦即沒有提取獲得腎茶總酚的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對現(xiàn)有技術(shù)中所存在的問題，本發(fā)明的目的在于提供一種制備腎茶總酚的方法 及其應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 本發(fā)明的第一方面提供了一種制備腎茶總酚的方法，所述方法包括如下步驟：
[0008] (1)提?。喝∧I茶，加入乙醇，浸泡，回流，過濾，合并濾液，減壓濃縮，得腎茶粗提 液，然后將所得腎茶粗提液離心，取上清液，調(diào)節(jié)PH，作為上樣液；
[0009] (2)采用離子交換樹脂進(jìn)行分離純化：將步驟（1)中所得上樣液經(jīng)過弱堿型陰離 子交換樹脂進(jìn)行靜態(tài)吸附，然后水洗上述樹脂，再采用解析劑對樹脂柱進(jìn)行靜態(tài)解吸附得 解析液，將所得解吸液調(diào)節(jié)PH至中性并回收乙醇后作為待脫酸液；
[0010] (3)采用大孔吸附樹脂進(jìn)行脫鹽及再純化：將步驟（2)中的待脫酸液經(jīng)大孔吸附 樹脂進(jìn)行干法吸附，吸附完畢后，裝柱，用水洗滌，棄去洗滌液，加入乙醇對樹脂柱進(jìn)行動(dòng)態(tài) 解吸得解吸液；解吸液回收溶劑，真空干燥后即得到腎茶總酚。
[0011] 優(yōu)選的，步驟（1)中，所述提取的具體方法為：取腎茶，加入8-15倍量的乙醇，浸 泡，回流1-3次，每次l_3h，過濾，合并濾液，減壓濃縮至0. 2-0. 5g生藥/mL，得腎茶粗提液， 然后將所得腎茶粗提液離心，取上清液，調(diào)節(jié)PH至2~6,作為上樣液。
[0012] 優(yōu)選的，步驟（1)中，所述乙醇濃度為30~90%。更優(yōu)選為50%。
[0013] 優(yōu)選的，步驟（2)中，所述解析劑為含鹽酸的乙醇。
[0014] 更優(yōu)選的，所述含鹽酸的乙醇中，乙醇濃度為50~90%，所含鹽酸的體積濃度為 1 ~10%〇
[0015] 最優(yōu)選的，所述含鹽酸的乙醇中，乙醇濃度為70%，所含鹽酸的體積濃度為5%。
[0016] 優(yōu)選的，步驟（2)中，所述離子交換樹脂選自D301R、D392、ADS-7、D296R、717、 D315、DEAE-650M。更優(yōu)選為D301R型離子交換樹脂。
[0017] 優(yōu)選的，步驟（2)中，所述上樣液與所述弱堿型陰離子交換樹脂的重量比為1:1~ 1:10 ;所述弱堿型陰離子交換樹脂制成的樹脂柱徑和柱高比為1:4~1:12。
[0018] 優(yōu)選的，步驟（2)中，所述靜態(tài)吸附的時(shí)間為3~8h，所述靜態(tài)解吸附的時(shí)間為 3 ~8h〇
[0019]優(yōu)選的，步驟（3)中，所述大孔吸附樹脂選自NKA-9、ADS-21、DM-301、HPD400、 AB-8、DM-130、D101、D4020。更優(yōu)選為DM130型大孔吸附樹脂。
[0020] 優(yōu)選的，步驟（3)中，所述乙醇濃度為30% -90%。
[0021] 優(yōu)選的，步驟⑶中，所述動(dòng)態(tài)解析的速度為lBV/h-4BV/h ;乙醇用量為 10BV-20BV〇
[0022] 本發(fā)明的第二方面提供了一種由前述制備方法獲得的腎茶總酚。
[0023] 優(yōu)選的，所述腎茶總酚中，酚類成分的總重量百分比為50%~60%，所述腎茶總 酚包括咖啡酸、迷迭香酸、香草酸、龍膽酸、綠原酸、紫草酸、對羥基苯甲酸、秦皮乙素、以及 6-甲氧基菀花素。
[0024] 進(jìn)一步優(yōu)選的，所述腎茶總酚中，咖啡酸的總重量百分比為0.5%~0.8%，迷迭 香酸的總重量百分比為0. 5%~0. 8%。
[0025] 本發(fā)明的第三方面提供了前述腎茶總酚在制備慢性腎炎治療藥物中的用途。
[0026] 本發(fā)明的第四方面還提供了一種用于治療慢性腎炎的藥物組合物，所述藥物組合 物包括前述腎茶總酚。
[0027] 優(yōu)選的，所述藥物組合物的有效成份為前述腎茶總酚。
[0028] 進(jìn)一步的，本發(fā)明的用于治療慢性腎炎的藥物組合物還包括一種或多種常規(guī)的藥 學(xué)上可接受的輔料。主藥藥效成分與藥學(xué)上可接受載體的總重量比例可為1 : 〇. 1~10。
[0029] 藥學(xué)上可接受的輔料包括（但并不限于）：藥物可接受的載體、稀釋劑、填充劑、結(jié) 合劑及其它賦形劑。本領(lǐng)域枝術(shù)人員已知的治療惰性的無機(jī)或有機(jī)的載體包括（但不限 于）乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、植物油、蠟、脂肪、多羥基化合物例如聚乙二醇、水、 蔗糖、乙醇、甘油，諸如此類，各種防腐劑、潤滑劑、分散劑、矯味劑。保濕劑、抗氧化劑、甜味 劑、著色劑、穩(wěn)定劑、鹽、緩沖液諸如此類也可加入其中，這些物質(zhì)根據(jù)需要用于幫助配方的 穩(wěn)定性或有助于提高活性或它的生物有效性或在口服的情況下產(chǎn)生可接受的口感或氣味。
[0030] 本發(fā)明的藥物組合物可以為口服制劑，如膠囊、片劑、分散片、口含片、咀嚼片、泡 騰片、緩釋片、顆粒劑等?？捎行Ц淖儌鹘y(tǒng)湯劑外觀差、不便攜帶、服用不便、服用量大的缺 點(diǎn)，為研制治療慢性腎炎的劑量小、藥效強(qiáng)、穩(wěn)定性好的新劑型提供了新途徑。
[0031] 本發(fā)明的藥物組合物可采用常規(guī)方法制備，如將各有效成分混勻，或者根據(jù)各種 制劑的常規(guī)制法，將藥效成分與相應(yīng)輔料混配后制備獲得。本發(fā)明的藥物組合物還可與其 他治療劑一起使用。
[0032] 本發(fā)明的藥物組合物可用于治療慢性腎炎。
[0033] 本發(fā)明的藥物組合物的有效治療劑量還應(yīng)考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素， 這些都是熟練醫(yī)師技能范圍之內(nèi)的。
[0034] 本發(fā)明的有益效果為：
[0035] (1)本發(fā)明經(jīng)過廣泛而深入的研宄，首次采用離子交換樹脂-大孔吸附樹脂聯(lián)用 方法提取獲得了腎茶總酚，所述腎茶總酚既包括腎茶酚酸類有效成分，也包括腎茶黃酮類 有效成分。
[0036] (2)采用本發(fā)明的方法，制備獲得的腎茶總酚中酚類成分的總重量百分比為大于 50 %，有效成分含量高，治療慢性腎炎效果顯著。
[0037] (3)采用本發(fā)明的方法，無需使用有機(jī)溶劑，既降低了使用成本，又保護(hù)了環(huán)境； 洗脫液選用乙醇，回收方便，無毒環(huán)保；整個(gè)提取過程經(jīng)濟(jì)無污染，適合工業(yè)化大生產(chǎn)。
【附圖說明】
[0038] 圖1 :為本發(fā)明的實(shí)施例所制備的腎茶總酚中有效成分的HPLC圖譜（A.咖啡酸 B.迷迭香酸）。
[0039] 圖2 :為負(fù)離子模式下香草酸切8044的UPLC/Q-TOF-MS/MS鑒定的質(zhì)譜圖：
[0040] 圖2A :-級質(zhì)譜圖；圖2B :二級質(zhì)譜圖。
[0041] 圖3 :為負(fù)離子模式下龍膽酸(：711604的UPLC/Q-TOF-MS/MS鑒定的質(zhì)譜圖：
[0042] 圖3A :-級質(zhì)譜圖；圖3B :二級質(zhì)譜圖。
[0043] 圖4 :為負(fù)離子模式下綠原酸C16H18Oi^ UPLC/Q-TOF-MS/MS鑒定質(zhì)譜圖：
[0044] 圖4A :-級質(zhì)譜圖；圖4B :二級質(zhì)譜圖。
[0045] 圖5 :為負(fù)離子模式下紫草酸C16H18Oi^ UPLC/Q-TOF-MS/MS鑒定質(zhì)譜圖：
[0046] 圖5A :-級質(zhì)譜圖；圖5B :二級質(zhì)譜圖。
[0047] 圖6 :負(fù)離子模式下對羥基苯甲酸C7H6O3的UPLC/Q-TOF-MS/MS鑒定質(zhì)譜圖：
[0048] 圖6A :-級質(zhì)譜圖；圖6B :二級質(zhì)譜圖。
[0049] 圖7 :為負(fù)離子模式下秦皮乙素〇^604的UPLC/Q-TOF-MS/MS鑒定質(zhì)譜圖：
[0050] 圖7A :-級質(zhì)譜圖；圖7B :二級質(zhì)譜圖。
[0051] 圖8 :為負(fù)離子模式下6-甲氧基菀花素C17H14Of^ UPLC/Q-TOF-MS/MS鑒定質(zhì)譜圖：
[0052] 圖8A :-級質(zhì)譜圖；圖8B :二級質(zhì)譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0053] 在進(jìn)一步描述本發(fā)明【具體實(shí)施方式】之前，應(yīng)理解，本發(fā)明的保護(hù)范圍不局限于下 述