一種單克隆抗體藥物的凝膠組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種包含單克隆抗體凝膠組合物，屬于藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著生物技術(shù)的發(fā)展，以單克隆抗體為代表的生物藥物逐漸走進(jìn)人們的視野，日 益成為治療惡性腫瘤、自身免疫系統(tǒng)疾病中的主流。單克隆抗體藥物因其在發(fā)揮作用時(shí)具 有高度特異性，使得其可以克服普通化療藥物選擇性差，毒性大等缺點(diǎn)。
[0003] 在惡性腫瘤及自身免疫系統(tǒng)疾病治療中，單克隆抗體藥物與細(xì)胞表面相對(duì)應(yīng)抗原 特異性結(jié)合，親和度高，作用機(jī)制復(fù)雜，單種或者多種途徑共同作用，達(dá)到殺傷腫瘤細(xì)胞的 目的，其中包括1.抗體直接作用：受體阻斷、激動(dòng)劑抑制、介導(dǎo)自噬。2.免疫系統(tǒng)介導(dǎo)殺傷： 補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒、抗體依賴性細(xì)胞毒。3.特異性作用于血管和基質(zhì)。
[0004] 基于上述特點(diǎn)，在惡性腫瘤領(lǐng)域，與普通化療藥物相比，單克隆抗體藥物能夠更加 準(zhǔn)確地殺傷腫瘤細(xì)胞，極大地提高了治療效果，并減少了不良反應(yīng)，從而延長患者生存時(shí) 間，改善生活質(zhì)量。
[0005] 現(xiàn)如今，在取得巨大進(jìn)步的同時(shí)，單克隆抗體藥物也存在著不可回避的缺點(diǎn)。因其 為蛋白藥物的本質(zhì)，使得單克隆抗體藥物在提取、純化等過程中困難較大，儲(chǔ)存、使用過程 中穩(wěn)定性較差，生物活性易受影響，造成患者使用成本過高，單克隆抗體藥物的可及性低。 因其蛋白質(zhì)本質(zhì)，造成單克隆抗體藥物在口服過程中，極易被胃腸道的蛋白酶降解，加之其 生物大分子（分子量高達(dá)150000Da)特性，難以跨越小腸上皮等生物屏障，使得單克隆抗體 藥物不能口服使用。在臨床使用過程中，單克隆抗體藥物給藥方式多為單一的靜脈滴注，滴 注過程中，可能伴隨著嚴(yán)重的"輸液反應(yīng)"，且需長時(shí)間使用，例如：在Her-2陽性乳腺癌治 療過程中，需要患者每周或每三周靜脈滴注一次，治療時(shí)間長達(dá)52周，給患者帶來巨大痛 苦，順從性差。
[0006] 醫(yī)藥企業(yè)也在盡可能探索單克隆抗體藥物新的給藥途徑。公開號(hào)為US 20110044977的美國專利公開了一種治療Her-2陽性乳腺癌單克隆抗體的皮內(nèi)給藥方式， 由重組透明質(zhì)酸酶與曲拓珠單克隆抗體聯(lián)合使用，重組透明質(zhì)酸酶特異的可逆性降解皮膚 透明質(zhì)酸，使得曲妥珠單抗能夠順利進(jìn)入體循環(huán)，發(fā)揮治療作用，減少系統(tǒng)給藥的毒副作 用。利用此項(xiàng)聯(lián)合給藥技術(shù)，經(jīng)皮給藥的曲拓珠單抗和利妥昔單抗已經(jīng)獲得歐洲藥品管理 局的批準(zhǔn)。
[0007] 惡性腫瘤及其他疾病組織結(jié)構(gòu)中，細(xì)胞外基質(zhì)細(xì)胞均發(fā)揮了巨大作用。其中，細(xì) 胞外基質(zhì)中，膠原蛋白和透明質(zhì)酸為兩種最重要也是含量最多的組成成分。惡性腫瘤中， 纖維狀的兩種蛋白能夠增加腫瘤基質(zhì)的致密性，增加腫瘤組織的間質(zhì)壓，從而可以阻斷 治療藥物從腫瘤外部進(jìn)入腫瘤深部，破壞藥物的治療作用。特異性的降解腫瘤基質(zhì)能有 效地促進(jìn)治療藥物進(jìn)入腫瘤內(nèi)部作用，可進(jìn)一步提高藥物的治療效果。Mako Kato等報(bào) 道靜脈注射膠原酶能夠降低腫瘤間質(zhì)壓，提高陽離子脂質(zhì)體在腫瘤的蓄積（Kato et al， Collagenase-linjection improved tumor distribution and gene expression of cationic lipoplex,Int J Pharm. 2012 Feb 28 ；423 (2):428-34)〇
[0008] 溫度敏感性凝膠是由兩親性聚合物高分子組成的凝膠體系。低溫（低于臨界膠凝 溫度）時(shí)，聚合物高分子間間距較大且作用力小，親水端與水分子作用力為主要作用力，使 得其呈液態(tài)形式。高溫（高于臨界膠凝溫度）時(shí)，聚合物高分子間間距減小，兩親性嵌段呈 現(xiàn)膠束形式，膠束進(jìn)一步被壓縮，膠束分子間疏水內(nèi)核作用力急劇加強(qiáng)，使得其呈現(xiàn)固態(tài)形 式。聚合物高分子的特性造就了其不同溫度下，相轉(zhuǎn)變的特性。
[0009] 溫度敏感凝膠注射以液態(tài)形式注入人體后，在注射部位迅速發(fā)生相轉(zhuǎn)變，形成固 態(tài)凝膠，包載藥物后，可達(dá)到局部給藥效果，延長藥物在用藥部位的滯留時(shí)間，實(shí)現(xiàn)良好的 緩釋作用，達(dá)到一次注射，長時(shí)間治療的效果。公開號(hào)為CN 103239389的中國專利公開了 一種基于泊洛沙姆407的黃體酮溫度敏感凝膠，用做先兆性流產(chǎn)的治療。
[0010] 基于以上技術(shù)背景，本發(fā)明的目的在于提供一種包含單克隆抗體藥物和細(xì)胞外基 質(zhì)降解酶的凝膠組合物，特異性降解基質(zhì)組織，增強(qiáng)藥物向深部滲透，增強(qiáng)治療作用，單次 給藥，長時(shí)間起效的治療效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 本發(fā)明的目的在于提供一種單克隆抗體凝膠組合物。
[0012] 本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)上述目的：
[0013] 一種單克隆抗體凝膠組合物，所述單克隆抗體凝膠組合物包括：單克隆抗體、溫度 敏感性材料、細(xì)胞外基質(zhì)降解酶和溶媒。
[0014] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，其中所述細(xì)胞外基質(zhì)降解酶包括膠原 酶、透明質(zhì)酸酶、分散酶中的一種或多種。
[0015] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，其中所述溫度敏感性材料包括泊洛沙 姆、聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸、聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯丙交酯、聚乙二 醇-聚乳酸-聚乙二醇、聚乙二醇-聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇、聚己內(nèi)酯-聚乙二醇-聚 己內(nèi)酯、N-異丙基丙烯酰胺聚合物和殼聚糖及其衍生物中和一種或多種。
[0016] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，其中所述單克隆抗體包括：曲妥珠單抗、 西妥昔單抗、貝伐珠單抗、利妥昔單抗、帕妥珠單抗、尼妥珠單抗、英利昔單抗、阿達(dá)木單抗、 吉姆單抗、伊匹單抗中的一種或多種。
[0017] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，進(jìn)一步優(yōu)選，所述單克隆抗體是曲妥珠 單抗。
[0018] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，進(jìn)一步優(yōu)選，所述溫度敏感性材料是聚 乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯丙交酯，其中聚乙交酯丙交酯與聚乙二醇的摩爾比為 3:1，聚乙二醇分子量為1500Da，聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯丙交酯總分子量為 5000Da〇
[0019] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，進(jìn)一步優(yōu)選，所述溫度敏感性材料是泊 洛沙姆407或泊洛沙姆188或它們的混合物。
[0020] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，進(jìn)一步優(yōu)選，所述細(xì)胞外基質(zhì)降解酶為 I -膠原酶。
[0021] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，所述溶酶是水，生理鹽水，5%葡萄糖水 溶液中的一種。
[0022] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，其中所述組合物還包含緩沖劑，緩沖劑 為磷酸鹽緩沖液、組氨酸鹽酸鹽緩沖液中的一種，其pH為5. 5-7. 0,呈弱酸性，進(jìn)一步優(yōu)選 為組氨酸鹽酸鹽緩沖液。
[0023] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，其中所述組合物還包含穩(wěn)定劑，其穩(wěn)定 劑為乳糖、海藻糖、半乳糖種的一種，進(jìn)一步優(yōu)選為海藻糖。
[0024] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，其中所述組合物還包含和非離子表面活 性劑，其非離子表面活性劑為吐溫20或吐溫80中的一種，進(jìn)一步優(yōu)選為吐溫20。
[0025] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，其中單克隆抗體和細(xì)胞外基質(zhì)降解酶的 重量比為1:40-40:1，溫度敏感材料與溶媒的重量比為1:10-2:1。
[0026] 本發(fā)明所提供的單克隆抗體凝膠組合物，其中單克隆抗體和細(xì)胞外基質(zhì)降解酶的 重量比為1:20-20:1，溫度敏感材料與溶媒的重量比為1:10-1:1。
[0027] 進(jìn)一步優(yōu)選，本發(fā)明提供的單克隆抗體藥物凝膠組合物，其中，所述單克隆抗體藥 物和細(xì)胞外基質(zhì)降解酶的重量占溫敏凝膠組合物重量百分比為：
[0028] A. 0. 01% -5%的單克隆抗體藥物，
[0029] B. 0· 01% -5%的細(xì)胞外基質(zhì)降解酶。
[0030] 本發(fā)明提供的單克隆抗體藥物凝膠組合物，各種成分的含量為：
[0031] 單克隆抗體藥物 0.01%-5% 細(xì)胞外基質(zhì)降解酶 0.01%-5% 溫度敏感材料 15%-25% 溶媒 65%-85%。
[0032] 其中，所述百分比為重量百分比。
[0033] 進(jìn)一步優(yōu)選的，各種成分的含量為
[0034] 本發(fā)明提供的單克隆抗體藥物凝膠組合物，各種成分的含量為：
[0035] 單克隆抗體藥物 0.01%-5% 細(xì)胞外基質(zhì)降解酶 0.01%-5% 溫度敏感材料 15%-25% 溶媒 65%-84%,,
[0036] 本發(fā)明所述的單克隆抗體凝膠組合物，其制備方法如下：
[0037] A.選用溶媒和溫度敏感性材料制備空白溫度敏感凝膠；
[0038] B.將空白溫度敏感凝膠與單克隆抗體和細(xì)胞外基質(zhì)降解酶充分混勾，溶解，即得 單克隆抗體凝膠組合物。
[0039] 優(yōu)選的，本發(fā)明所述的單克隆抗體凝膠組合物，其制備方法如下：
[0040] A.稱取250mg聚乙交酯丙交酯-聚乙二醇-聚乙交酯丙交醋，加入1000 mg水，冰 浴下緩慢攪拌得到空白溫度敏感凝膠。
[0041] B.稱取膠原酶20mg，曲妥珠單抗7. 5mg，加入空白溫度敏感凝膠，冰浴下，緩慢攪 拌，得到單克隆抗體藥