用續(xù)段制備促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的水溶性精煉物的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物活性物質(zhì)制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用續(xù)斷制備促進(jìn)分泌類(lèi)胰 島素生長(zhǎng)因子的水溶性精煉物的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 成長(zhǎng)荷爾蒙是從人的腦下垂體前瓣分泌出來(lái)的，蛋白質(zhì)性質(zhì)的，主要促進(jìn)生長(zhǎng)和 修復(fù)功能的荷爾蒙。人的成長(zhǎng)荷爾蒙由191個(gè)氨基酸構(gòu)成，自然分泌成長(zhǎng)荷爾蒙要針對(duì)腦 下垂體有所刺激。成長(zhǎng)荷爾蒙在體內(nèi)的主要機(jī)能是，促使肝等末梢組織生成類(lèi)胰島素生長(zhǎng) 因子，類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子刺激軟骨組織生長(zhǎng)，通過(guò)代謝作用增加蛋白質(zhì)合成，進(jìn)而增加肌肉 的同時(shí)增加脂肪組織的脂肪酸化、減少體脂肪。正因?yàn)槌砷L(zhǎng)荷爾蒙具有這些機(jī)能，早已用于 治療矮小患者，近來(lái)廣泛用于青少年助長(zhǎng)，以及治療肥胖癥。
[0003] 1985年開(kāi)始，通過(guò)微生物再組合方式，大量生產(chǎn)供給成長(zhǎng)荷爾蒙，廣泛適用于缺乏 成長(zhǎng)荷爾蒙患者。而微生物再組合方式生產(chǎn)的成長(zhǎng)荷爾蒙是蛋白質(zhì)構(gòu)造，不能用口服方式 送入體內(nèi)，目前普遍使用注射方式投入體內(nèi)肌肉里。使用這樣的成長(zhǎng)荷爾蒙，治療費(fèi)用較 高，且有注射到肌肉的諸多不便。
[0004] 本發(fā)明著眼于中草藥，研宄了可能具有促進(jìn)成長(zhǎng)效果的30種素材，即山楂、魚(yú)腥 草、桂皮、乾姜、五味子、桑白皮、蘇葉、赤芍、桔梗、甘菊、桂枝、白何首烏、遠(yuǎn)志、蛇床子、竹 葉、石菖蒲、烏梅、覆盆子、續(xù)斷、百合、柴胡、砂仁、肉豆蔻、側(cè)柏葉、沒(méi)藥、五加皮、桑葉、栗 葉、冬蟲(chóng)夏草等天然藥材，從中選擇了助長(zhǎng)性能最佳的續(xù)斷，利用其中的分泌促生長(zhǎng)因子 (IGF-I)及促進(jìn)骨骼成長(zhǎng)效能的有效成分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種用續(xù)斷制備促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的水溶性精煉 物的方法，該發(fā)明方法是續(xù)斷為主成分的，水溶性抽取精煉物質(zhì)的產(chǎn)品制造技術(shù)，以及檢驗(yàn) 該精煉物質(zhì)產(chǎn)品促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素一號(hào)生長(zhǎng)因子（IGF-I)及促進(jìn)骨骼成長(zhǎng)的效能。
[0006] 本發(fā)明所提供的用續(xù)斷制備促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的水溶性精煉物的方法 具體步驟如下：
[0007] (1)將干的續(xù)斷切成2~5mm長(zhǎng)的切片，放入抽取罐，在抽取罐中加入續(xù)斷切片10 倍重的水，水溫保持在80°C~100°C，攪拌6~10小時(shí)獲取續(xù)斷第一次抽取物，然后將所述 第一次抽取物溫度降到70°C。
[0008] (2)在步驟（1)得到的所述第一次抽取物中加入續(xù)斷切片重量比3%的淀粉酶，在 溫度70°C中發(fā)酵6小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后，抽取物溫度提升到95°C，溫度達(dá)到95°C時(shí)，迅速冷卻 抽取物，抑制抽取物繼續(xù)發(fā)酵，制得續(xù)斷第二次抽取物。
[0009] (3)利用離心式脫水機(jī)或壓力過(guò)濾器分離所述第二次抽取物中的固態(tài)粉，利用高 速離心式脫水機(jī)祛除所述第二次抽取物中不溶性微粒子以及蛋白質(zhì)，制得續(xù)斷第三次抽取 物，所述高速離心式脫水機(jī)的轉(zhuǎn)速為15000轉(zhuǎn)/分~20000轉(zhuǎn)/分。
[0010] (4)通過(guò)活性炭過(guò)濾器祛除所述第三次抽取物中的脂肪成分、非活性有機(jī)化合物、 丹寧酸成分以及重金屬，制得續(xù)斷第四次抽取物。
[0011] (5)通過(guò)正切流動(dòng)過(guò)濾方式的超微型過(guò)濾器，將所述第四次抽取物反復(fù)過(guò)濾3~5 次，制得續(xù)斷第五次抽取物。
[0012] (6)利用減壓濃縮器，把所述第五次抽取物濃縮到10白利度以上，獲得續(xù)斷最終 抽取物。
[0013] (7)將所述最終抽取物在36小時(shí)內(nèi)，從-60°C升溫到40°C，制得目標(biāo)產(chǎn)物：續(xù)斷促 進(jìn)分泌類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的水溶性精煉物。
[0014] 續(xù)斷含有生物堿、香精油、維生素等成分。本發(fā)明把續(xù)斷成分中的糖苷山梔苷甲 酯、環(huán)烯醚萜，選定為分泌促生長(zhǎng)因子及促進(jìn)骨骼成長(zhǎng)效能的主要成分。本發(fā)明以續(xù)斷 糖苷為主成分制備水溶性精煉物，該水溶性精煉物能夠促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素一號(hào)生長(zhǎng)因子 (IGF-I)及促進(jìn)骨骼成長(zhǎng)的效能。本發(fā)明有效利用具有補(bǔ)肝、強(qiáng)筋骨、定經(jīng)絡(luò)之功效的續(xù)斷， 抽取續(xù)斷中的促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素一號(hào)生長(zhǎng)因子（IGF-I)及促進(jìn)骨骼成長(zhǎng)效能的糖苷，制造 口服方式的，糖苷成分為主成分的，水溶性精煉物質(zhì)。本發(fā)明方法所制備的水溶性精煉物是 比遺傳因子再組合方式生產(chǎn)的成長(zhǎng)荷爾蒙更廉價(jià)、使用更方便、對(duì)人體無(wú)毒物副作用的物 質(zhì)，能夠用于醫(yī)學(xué)治療以及保健食品，提高人類(lèi)健康水平并且具有顯著地經(jīng)濟(jì)社會(huì)效益。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 本發(fā)明所提供的用續(xù)斷制備促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的水溶性精煉物的方法 具體步驟如下：
[0016] (1)把干的續(xù)斷切成2~5mm長(zhǎng)的切片，放入抽取罐，在抽取罐中加入續(xù)斷切片10 倍重的水，水溫保持在90°C，攪拌8小時(shí)獲取續(xù)斷第一次抽取物，然后將所述第一次抽取物 溫度降到70 °C。
[0017] (2)在步驟（1)得到的所述第一次抽取物中加入續(xù)斷切片重量比3%的淀粉酶，在 溫度70°C中發(fā)酵6小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后，抽取物溫度提升到95°C，溫度達(dá)到95°C時(shí)，迅速冷卻 抽取物，抑制抽取物繼續(xù)發(fā)酵，制得續(xù)斷第二次抽取物。
[0018] (3)利用離心式脫水機(jī)或壓力過(guò)濾器分離所述第二次抽取物中的固態(tài)粉，利用高 速離心式脫水機(jī)祛除所述第二次抽取物中不溶性微粒子以及蛋白質(zhì)，制得續(xù)斷第三次抽取 物，所述高速離心式脫水機(jī)的轉(zhuǎn)速為18000轉(zhuǎn)/分。
[0019] (4)通過(guò)活性炭過(guò)濾器，祛除所述第三次抽取物中的脂肪成分、非活性有機(jī)化合 物、丹寧酸成分以及重金屬，制得續(xù)斷第四次抽取物。
[0020] (5)通過(guò)正切流動(dòng)過(guò)濾方式的超微型過(guò)濾器，將所述第四次抽取物反復(fù)過(guò)濾4次， 祛除非活性高分子、碳水化合物以及微生物，制得續(xù)斷第五次抽取物。
[0021] (6)利用減壓濃縮器，把所述第五次抽取物濃縮到10白利度以上，獲得續(xù)斷最終 抽取物。
[0022] (7)將所述最終抽取物在36小時(shí)內(nèi)，從_60°C升溫到40°C，獲得本發(fā)明目標(biāo)產(chǎn)物： 續(xù)斷促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的水溶性精煉物。
[0023] 本發(fā)明續(xù)斷促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的水溶性精煉物的糖苷含量比較：
[0024] (1)糖苷含量比較實(shí)驗(yàn)方法：
[0025] ①提取1~2g樣品，用60ml蒸餾水溶解，移到分液漏斗，用60ml乙醚抽取脂肪。
[0026] ②60ml隨同化丁醇加入分液漏斗，晃動(dòng)的方式進(jìn)行分離，回收上層部分。晃動(dòng)、回 收反復(fù)3次。
[0027] ③把回收的丁醇層全部合在分液漏斗，用50ml蒸餾水溶解，回收上層部分。
[0028] ④倒入長(zhǎng)頸瓶，80°C中蒸發(fā)減壓濃縮，105°C烘箱中烘干15分鐘。
[0029] ⑤倒入保干器中完全冷卻后稱(chēng)重。
[0030] ⑥用下面的計(jì)算式獲得糖苷含量：
[0031]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用續(xù)斷制備促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的水溶性精煉物的方法，其特征在于該 方法具體步驟如下： (1) 將干的續(xù)斷切成2~5mm長(zhǎng)的切片，放入抽取罐，然后在所述抽取罐中加入續(xù)斷切 片10倍重的水，水溫保持在80°C~100°C，攪拌6~10小時(shí)獲取續(xù)斷第一次抽取物，然后 將所述第一次抽取物溫度降到70°C; (2) 在步驟（1)得到的所述第一次抽取物中加入續(xù)斷切片重量比3%的淀粉酶，在溫度 70°C中發(fā)酵6小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束后，抽取物溫度提升到95°C，溫度達(dá)到95°C時(shí)，迅速冷卻抽取 物，抑制抽取物繼續(xù)發(fā)酵，制得續(xù)斷第二次抽取物； (3) 利用離心式脫水機(jī)或壓力過(guò)濾器分離所述第二次抽取物中的固態(tài)粉，利用高速離 心式脫水機(jī)祛除所述第二次抽取物中不溶性微粒子以及蛋白質(zhì)，制得續(xù)斷第三次抽取物， 所述高速離心式脫水機(jī)的轉(zhuǎn)速為15000轉(zhuǎn)/分~20000轉(zhuǎn)/分； (4) 通過(guò)活性炭過(guò)濾器祛除所述第三次抽取物中的脂肪成分、非活性有機(jī)化合物、丹寧 酸成分以及重金屬，制得續(xù)斷第四次抽取物； (5) 通過(guò)正切流動(dòng)過(guò)濾方式的超微型過(guò)濾器，將所述第四次抽取物反復(fù)過(guò)濾3~5次， 制得續(xù)斷第五次抽取物； (6) 利用減壓濃縮器，將所述第五次抽取物濃縮到10白利度以上，獲得續(xù)斷最終抽取 物； (7) 將所述最終抽取物在36小時(shí)內(nèi)，從-60°C升溫到40°C，制得目標(biāo)產(chǎn)物：續(xù)斷促進(jìn)分 泌類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的水溶性精煉物。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)用續(xù)斷制備促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子的水溶性精煉物的方法，屬于生物活性物質(zhì)制備技術(shù)領(lǐng)域。該方法將續(xù)斷切片放入抽取罐后加入水，在80℃～100℃攪拌6～10小時(shí)獲取第一次抽取物，然后加入淀粉酶，在溫度70℃中發(fā)酵6小時(shí)制得第二次抽取物，利用離心式脫水機(jī)以及高速離心式脫水機(jī)制得第三次抽取物，然后通過(guò)活性炭過(guò)濾器制得第四次抽取物，將第四次抽取物過(guò)濾3～5次制得第五次抽取物，將第五次抽取物濃縮到10白利度以上得最終抽取物，將最終抽取物在36小時(shí)內(nèi)從-60℃升溫到40℃，制得續(xù)斷水溶性精煉物。本發(fā)明制備的續(xù)斷水溶性精煉物，具有促進(jìn)分泌類(lèi)胰島素一號(hào)生長(zhǎng)因子及促進(jìn)骨骼成長(zhǎng)的效能。
【IPC分類(lèi)】A61P5-00, A61K36-185, A61P19-08
【公開(kāi)號(hào)】CN104784225
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510161408
【發(fā)明人】王恭順, 李承根, 樸太杰, 楊立, 楊慶智, 岳徐冬, 李慶中, 周翔
【申請(qǐng)人】安徽廣生堂生物科技有限公司
【公開(kāi)日】2015年7月22日
【申請(qǐng)日】2015年4月7日