一種生物酶法生產(chǎn)黃芩苷的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及到由黃芩中提取黃芩苷的方法，黃芩苷可用于保養(yǎng)品、藥品及化妝品方面的原料或作為添加劑使用。
【背景技術(shù)】
[0002]黃苳為唇形科植物黃苳(Scutellaria baicalensis Georgi)，以根入藥。有清熱燥濕，涼血安胎，解毒功效。主治溫?zé)岵?、上呼吸道感染、腦熱咳嗽、濕熱黃膽、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎動(dòng)不安、高血壓、癰腫癤瘡等癥。產(chǎn)于河北、遼±、陜西、山西、山東、內(nèi)蒙古、黑龍江等省、自治區(qū)。
[0003]黃苳根含黃苳式(baicalin)，黃苳素(baicalein)，黃苳新素(neobaicalein)，即黃苳黃酮II (skullcapflavone II )，漢黃苳素(wogonin)，漢黃苳式(wogono-side)等黃酮類化合物。黃芩苷(Baicalin)是從黃芩根中提取分離出來的一種黃酮類化合物，具有顯著的生物活性，具有抑菌、利尿、抗炎、抗變態(tài)及解痙作用，并且具有較強(qiáng)的抗癌反應(yīng)等生理效能。在臨床醫(yī)學(xué)已占有重要地位。黃芩苷還能吸收紫外線，清除氧自由基，又能抑制黑色童的生成，因此既可用于醫(yī)藥，也可用于化妝品，是一種很好的功能性美容化妝品原料。
[0004]黃芩苷生產(chǎn)多采用水提取、酸化沉淀、過濾、得到粗品、再將粗品加堿溶解在水中、加乙醇沉淀去雜，過濾、濾液酸化沉淀、過濾、得到黃芩苷的工藝。也有將粗品加堿溶解、過濾、酸化沉淀法制得，但含量較低。上述工藝生產(chǎn)黃芩苷收率較低，工藝程序復(fù)雜，效率低、成本尚。
[0005]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明涉及到從黃芩原料中提取黃芩苷的方法。目的是提高生產(chǎn)效率和收得率，降低生產(chǎn)成本。
[0007]一種生物酶法生產(chǎn)黃芩苷的提取方法，包括以下步驟:
(1)將原料粉碎成粗粉，加含有增溶劑的沸水溶液回流提??；
(2)將提取液，加生物酶，在一定溫度下保溫2-8h，加入抗氧化劑，用20%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液PH6-8，加熱至70-90°C，過濾；
(3)將濾液，加熱，用鹽酸調(diào)節(jié)PH1-2，保溫40-60分鐘，吸去上清液，加1_2倍量沸水，過濾；
(4)將濾餅用沸水洗滌至PH4-5；
(5 )將水洗滌后濾餅，70-80 0C干燥，得黃芩苷產(chǎn)品。
[0008]進(jìn)一步，步驟(I)中，其中原料為黃芩根部位；萃取用水為去離子水、純凈水、地下原水的含醇溶液；萃取用增溶劑為金屬硫酸鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽、醋酸鹽、硼酸鹽中一種，其濃度為0.1—5% ;萃取溶劑用量為原料的5-20倍，回流時(shí)間為1-3小時(shí)。
[0009]進(jìn)一步，步驟(2)中，生物酶為復(fù)合酶，其中成分為果膠酶、纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶、木糖醇酶中的2種或多種的混合物，其用量為原料的0.1—1.0% ;酶解時(shí)間為2—8h，溫度為40-75°C ;抗氧化劑為抗壞血酸、異抗壞血酸、亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉等中的一種或幾種混合使用，其用量為1_5%。
[0010]進(jìn)一步，步驟(3)中，加熱溫度為70— 100°C。
[0011]進(jìn)一步，步驟(4)中，水洗用水為純化水、蒸飽水、地下原水中一種。
[0012]進(jìn)一步，步驟(5)中，干燥方式為常壓或減壓干燥。
[0013]本發(fā)明采用生物酶發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)黃芩苷，對原料進(jìn)行酶解或?qū)μ崛∫哼M(jìn)行酶解處理，過濾除去雜質(zhì)，將濾液酸化結(jié)晶的方法，經(jīng)過一次結(jié)晶，可以生產(chǎn)出含量大于85%黃芩苷產(chǎn)品，符合《中國藥典》2010版一部標(biāo)準(zhǔn)要求。提高生產(chǎn)效率收得率、降低了成本。
[0014]本發(fā)明涉及到從黃芩原料中提取黃芩苷的方法，產(chǎn)物黃芩苷具有顯著的生物活性，具有抑菌、利尿、抗炎、抗變態(tài)及解痙作用，并且具有較強(qiáng)的抗癌反應(yīng)等生理效能。在臨床醫(yī)學(xué)已占有重要地位。黃芩苷還能吸收紫外線，清除氧自由基，又能抑制黑色素的生成，因此既可用于醫(yī)藥，也可用于化妝品，是一種很好的功能性美容化妝品原料。
【附圖說明】
[0015]圖1為本發(fā)明工藝流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0016]本發(fā)明實(shí)施方式提供一種生物酶法生產(chǎn)黃芩苷的提取方法，包括以下步驟:
(1)將原料粉碎成粗粉，加含有增溶劑的沸水溶液回流提取；
(2)將提取液，加生物酶，在一定溫度下保溫2-8h，加入抗氧化劑，用20%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液PH6-8，加熱至70-90°C，過濾；
(3)將濾液，加熱，用鹽酸調(diào)節(jié)PH1-2，保溫40-60分鐘，吸去上清液，加1_2倍量沸水，過濾；
(4)將濾餅用沸水洗滌至PH4-5；
(5 )將水洗滌后濾餅，70-80 0C干燥，得黃芩苷產(chǎn)品。
[0017]步驟(I)中，其中原料為黃芩根部位；萃取用水為去離子水、純凈水、地下原水的含醇溶液；萃取用增溶劑為金屬硫酸鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽、醋酸鹽、硼酸鹽中一種，其濃度為
0.1—5% ;萃取溶劑用量為原料的5-20倍，回流時(shí)間為1-3小時(shí)。
[0018]步驟(2)中，生物酶為復(fù)合酶，其中成分為果膠酶、纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶、木糖醇酶中的2種或多種的混合物，其用量為原料的0.1—1.0% ;酶解時(shí)間為2 — 8h，溫度為40-750C ;抗氧化劑為抗壞血酸、異抗壞血酸、亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉等中的一種或幾種混合使用，其用量為1_5%。
[0019]步驟(3)中，加熱溫度為70— 100°C。
[0020]步驟⑷中，水洗用水為純化水、蒸飽水、地下原水中一種。
[0021]步驟(5)中，干燥方式為常壓或減壓干燥。
[0022]下面結(jié)合具體實(shí)例對本發(fā)明技術(shù)方案做進(jìn)一步說明。
[0023]實(shí)例一:取黑米1kg，粉碎成細(xì)粉，加入8倍量水，用鹽酸調(diào)節(jié)PH5.0，加入淀粉酶，70°C保溫4h，過濾，濾液通過AB-8大孔吸附樹脂，下柱液濃縮至密度1.30，得黑米糖漿821g?樹脂用純化水5倍量洗滌，再用80%乙醇解析，解析液50°C減壓濃縮至密度1.10，噴霧干燥，得黑米花青素，11.2g，含量25.8%。濾渣加入4倍量水，用檸檬酸調(diào)節(jié)PH4.8，50°C保溫4h，過濾，濾餅加4%氫氧化鈉溶液8倍量，70°C保溫提取2h，過濾，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)PH3.5，加熱至85°C，靜置，過濾，濾餅，置70-80°C干燥，得黑米蛋白80g，蛋白含量75%。
[0024]實(shí)例二:取黑米渣1kg，粉碎成細(xì)粉，加入5倍量水，用檸檬酸酸調(diào)節(jié)PH4.5，加入糖化酶，90°C保溫2h，過濾，濾液通過XDA-6大孔吸附樹脂，下柱液濃縮至密度1.32，得黑米糖漿546g。樹脂用純化水5倍量洗滌，再用60%乙醇解析，解析液60°C減壓濃縮至密度1.15，-40°C冷凍干燥，得黑米花青素13.4g，含量27.2%。濾渣加入8倍量水，用檸檬酸調(diào)節(jié)PH4.8，50°C保溫4h，過濾，濾餅加4%氫氧化鈉溶液6倍量，70°C保溫提取lh，過濾，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)PH5，加熱至98°C，靜置，過濾，濾餅，加10倍量水，攪拌均勻，噴霧干燥，得黑米蛋白123g,蛋白含量80.2%ο
[0025]盡管以上實(shí)例對本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行描述，但本發(fā)明并不局限于上述計(jì)提實(shí)例，上述實(shí)例僅僅是示意性的、指導(dǎo)性的，而非限制性的。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本說明書的啟示下，在不脫離本發(fā)明權(quán)利要求所保護(hù)范圍的情況下，還可以做出很多形式，這些均屬于本發(fā)明保護(hù)之列。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種生物酶法生產(chǎn)黃芩苷的提取方法，其特征在于包括以下步驟: (1)將原料粉碎成粗粉，加含有增溶劑的沸水溶液回流提取； (2)將提取液，加生物酶，在一定溫度下保溫2-8h，加入抗氧化劑，用20%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液PH6-8，加熱至70-90°C，過濾； (3)將濾液，加熱，用鹽酸調(diào)節(jié)PH1-2，保溫40-60分鐘，吸去上清液，加1_2倍量沸水，過濾； (4)將濾餅用沸水洗滌至PH4-5； (5 )將水洗滌后濾餅，70-80 0C干燥，得黃芩苷產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于，步驟(I)中，其中原料為黃芩根部位；萃取用水為去離子水、純凈水、地下原水的含醇溶液；萃取用增溶劑為金屬硫酸鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽、醋酸鹽、硼酸鹽中一種，其濃度為0.1-5% ;萃取溶劑用量為原料的5-20倍，回流時(shí)間為1_3小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于，步驟(2)中，生物酶為復(fù)合酶，其中成分為果膠酶、纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶、木糖醇酶中的2種或多種的混合物，其用量為原料的0.1—1.0% ;酶解時(shí)間為2—8h，溫度為40-75°C;抗氧化劑為抗壞血酸、異抗壞血酸、亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉等中的一種或幾種混合使用，其用量為1_5%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于，步驟(3)中，加熱溫度為70—100°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于，步驟(4)中，水洗用水為純化水、蒸餾水、地下原水中一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于，步驟(5)中，干燥方式為常壓或減壓干燥。
【專利摘要】本發(fā)明涉及到用黃芩根為原料，采用生物酶發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)黃芩苷的高產(chǎn)技術(shù)。本發(fā)明的技術(shù)解決方案包括，原料先用含有增溶劑的沸水，回流提取黃芩苷，提取液加入復(fù)合酶進(jìn)行水解，通過精濾后，將濾液加熱至70-100℃，用鹽酸沉淀出黃芩苷，再用水洗滌除酸后干燥，制得含量達(dá)到85%以上，符合國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，該產(chǎn)物的溶解性、色澤等指標(biāo)達(dá)到優(yōu)質(zhì)水品。該技術(shù)簡化了黃芩苷生產(chǎn)過程，提高了收率和生產(chǎn)效率，成本低，適應(yīng)規(guī)?；a(chǎn)。
【IPC分類】A61P29-00, A61P31-04, A61Q19-08, A61K36-539, A61K8-97, A61P35-00, A61Q19-02, A61P37-08, A61P7-10
【公開號】CN104784254
【申請?zhí)枴緾N201510156727
【發(fā)明人】魏有良, 李丹, 范建禮
【申請人】寶雞市虹源生物科技有限公司
【公開日】2015年7月22日
【申請日】2015年4月3日