用于制備治療性納米顆粒的方法
【專利說明】用于制備治療性納米顆粒的方法
[0001] 相關(guān)申請的交叉引用
[0002] 本申請要求2012年9月17日提交的美國臨時專利申請61/702, 037的權(quán)益和優(yōu) 先權(quán)，其特此通過引用整體并入。
【背景技術(shù)】
[0003] 長期以來，已經(jīng)公認(rèn)將某些藥物遞送至患者（例如，靶向特定的組織或細(xì)胞類型 或靶向具體的疾病組織而非正常組織）的系統(tǒng)或控制藥物釋放的系統(tǒng)是有益的。
[0004] 例如，包含活性藥物和那些例如靶向特定的組織或細(xì)胞類型或靶向特異性的疾病 組織而非正常組織的治療劑，可以減少藥物在身體非靶向組織中的量。當(dāng)治療諸如癌癥 (其中希望細(xì)胞毒劑量的藥物遞送至癌細(xì)胞而不殺死周圍的癌性組織）的病癥時，這是特 別重要的。有效的藥物靶向作用可以減少在抗癌治療中常見的不希望的和有時威脅生命的 副作用。此外，這樣的治療劑可以允許藥物到達(dá)某些它們以其它方式不能到達(dá)的組織。
[0005] 提供控制釋放和/或靶向療法的治療劑也必須能夠遞送有效量的藥物，所述藥物 在其它納米顆粒遞送系統(tǒng)中是公知的限制。例如，它可以解決下述問題：制備納米顆粒系統(tǒng) (含有適當(dāng)量的藥物相關(guān)的各納米顆粒），同時保持所述納米顆粒的尺寸足夠小，從而具有 有利的遞送特性。希望用高量的治療劑裝載納米顆粒，而使用過高的藥物負(fù)荷（drug load) 的納米顆粒制劑將產(chǎn)生對實際治療應(yīng)用而言過大的納米顆粒。
[0006] 相應(yīng)地，存在對納米顆粒治療劑和制備所述納米顆粒的方法的需求，其能夠遞送 治療水平的藥物以治療疾病諸如癌癥，同時也減少患者的副作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本文描述了用于制備治療性納米顆粒的方法，其中所述方法包括將治療劑與有機(jī) 酸組合。
[0008] 在一個方面，提供了制備多個治療性納米顆粒的方法。所述方法包括將治療劑、第 一聚合物和有機(jī)酸與有機(jī)溶劑組合以形成具有約1至約50%固體的第一有機(jī)相，將所述第 一有機(jī)相與第一水溶液組合以形成所述多個治療性納米顆粒，和通過過濾來回收所述治療 性納米顆粒。
[0009] 在某些實施方案中，所述有機(jī)酸可以具有在25°C小于約3. 5的pKa。在其它實施方 案中，所述有機(jī)酸可以具有在25°C小于約2. 0的pKa。在其它實施方案中，所述有機(jī)酸可以 具有在25°C小于約1的pKa。在其它實施方案中，所述有機(jī)酸可以具有在25°C小于約0的 pKa〇
[0010] 在某些情況下，所述有機(jī)酸可以具有約50°c至約110°C的沸點。在某些實施方案 中，所述有機(jī)酸可以具有約-30°C至約0°C的熔點。
[0011] 在某些情況下，所述治療性納米顆?？梢园s〇. 2至約35重量％的治療劑。在 其它情況下，所述治療性納米顆?？梢园s1至約10重量％的治療劑。
[0012] 在某些實施方案中，所述方法可以是第一種方法，且所述治療性納米顆粒可以具 有與通過第二種方法制備的治療性納米顆粒相比高至少約2倍的治療劑負(fù)荷，其中除了所 述第二種方法不包括所述有機(jī)酸以外，所述第二種方法與所述第一種方法相同。在某些情 況下，所述治療性納米顆?？梢跃哂懈咧辽偌s5倍的治療劑負(fù)荷。在其它情況下，所述治療 性納米顆?？梢跃哂懈咧辽偌s10倍的治療劑負(fù)荷。
[0013] 在某些情況下，與由所述治療劑和所述有機(jī)溶劑組成的第二溶液相比，所述治療 劑在由所述治療劑、所述有機(jī)溶劑和所述有機(jī)酸組成的第一溶液中可以具有高至少5倍的 溶解度。在其它情況下，與由所述治療劑和所述有機(jī)溶劑組成的第二溶液相比，所述治療劑 在由所述治療劑、所述有機(jī)溶劑和所述有機(jī)酸組成的第一溶液中可以具有高約2至約20倍 的溶解度。在某些實施方案中，所述有機(jī)酸的濃度可以是至少約1重量％、至少約2重量％ 或至少約3重量％。在其它實施方案中，所述有機(jī)酸的濃度可以是約1至約10重量％。
[0014] 在某些實施方案中，所述有機(jī)酸可以是鹵代羧酸。例如，所述鹵代羧酸可以是三氟 乙酸。
[0015] 在某些情況下，當(dāng)置于在37°C的磷酸鹽緩沖溶液中時，所述治療性納米顆?？梢?基本上立即釋放小于約5%的治療劑。在其它情況下，當(dāng)置于在37°C的磷酸鹽緩沖溶液中 時，所述治療性納米顆?？梢栽诩s1小時釋放約〇. 01至約25%的治療劑。在其它情況下， 當(dāng)置于在37°C的磷酸鹽緩沖溶液中時，所述治療性納米顆粒可以在約4小時釋放約10至約 45 %的治療劑。
[0016] 在某些實施方案中，所述治療性納米顆粒可以具有約60nm至約150nm、約80nm至 約150nm、或約90nm至約140nm的直徑。
[0017] 在某些情況下，將所述第一有機(jī)相與所述第一水溶液組合可以包括乳化通過將所 述第一有機(jī)相與所述第一水溶液組合而形成的第二相，以形成乳相。
[0018] 在某些實施方案中，所述方法進(jìn)一步包括淬滅所述乳相以形成淬滅相。例如，所述 方法可以進(jìn)一步包括將藥物增溶劑加入所述淬滅相中以形成未包封的治療劑的增溶相。
[0019] 在某些情況下，乳化所述第二相可以包括乳化所述第二相以形成粗乳狀液，和乳 化所述粗乳狀液以形成細(xì)乳相。
[0020] 在某些實施方案中，所述有機(jī)溶劑可以包含選自以下的溶劑：乙酸乙酯、苯甲醇、 二氯甲烷、氯仿、甲苯、甲基乙基酮、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、丙酮、乙腈、乙酸、吐溫80和 司盤80,和其中的2種或更多種的組合。
[0021] 在某些實施方案中，所述水溶液可以包含選自以下的試劑：膽酸鈉、乙酸乙酯、苯 甲醇或它們的組合。
[0022] 在某些實施方案中，乳化所述第二相可以包括，使用轉(zhuǎn)子-定子式勻漿器、探頭 超聲破碎器（probe sonicator)、攪拌棒或高壓勾衆(zhòng)器。在某些情況下，乳化所述粗乳狀 液可以包括使用高壓勻漿器。在某些實施方案中，乳化所述粗乳狀液可以包括穿過勻漿 器約2至約3次。在某些情況下，勻漿器進(jìn)料壓力可以是每個相互作用腔室約2000至約 8000psi。在某些情況下，所述勾衆(zhòng)器可以包含多個相互作用腔室（multiple interaction chamber)〇
[0023] 在某些實施方案中，淬滅可以至少部分地在約5°C或更低的溫度進(jìn)行。在其它實施 方案中，淬滅可以在約〇°C至約5 °C進(jìn)行。
[0024] 在某些情況下，所述淬滅液：乳液比率可以是約2:1至約40:1或約5:1至約15:1。
[0025] 在某些實施方案中，所述藥物增溶劑可以選自吐溫80、吐溫20、聚乙烯吡咯烷酮、 環(huán)葡聚糖（cyclodextran)、十二烷基硫酸鈉和膽酸鈉。在其它實施方案中，所述藥物增溶劑 可以選自二乙基亞硝胺、醋酸鈉、脲、甘油、丙二醇、糖原質(zhì)、聚乙二醇、三（聚氧乙烯二醇） 十二烷基醚（bris(polyoxyethyleneglycolddodecyl ether)、苯甲酸鈉和水楊酸鈉。在某 些實施方案中，藥物增溶劑與治療劑的比率可以是約200:1至約10:1。
[0026] 在某些情況下，過濾可以包括切向流過濾。在某些實施方案中，過濾可以包括約 (TC至約5°C的第一溫度過濾。在某些情況下，過濾可以進(jìn)一步包括約20°C至約30°C的第二 溫度過濾。在某些實施方案中，過濾可以包括，在約〇°C至約5°C處理約1至約30個透析體 積（diavolume)和在約20°C至約30°C處理至少一個透析體積。在另一個實施例中，過濾可 以包括在約〇°C至約5°C處理約1至約30個透析體積和在約20°C至約30°C處理約1至約 15個透析體積。在某些情況下，過濾可以包括在不同的特殊溫度處理不同透析體積。
[0027] 在某些實施方案中，所述方法可以進(jìn)一步包括在過濾之前純化所述增溶相以基本 上除去所述有機(jī)溶劑、未包封的治療劑和/或藥物增溶劑。
[0028] 在某些情況下，過濾可以包括無菌過濾。例如，所述無菌過濾可以包括使用過濾串 (filtration train)以受控的速率過濾治療性納米顆粒。在某些情況下，所述過濾串可以 包含深層過濾器（depth filter)和無菌過濾器。
[0029] 在某些實施方案中，所述第一聚合物可以是二嵌段聚乳酸-聚乙二醇共聚物。在 其它實施方案中，所述第一聚合物可以是二嵌段聚乳酸-共聚-聚乙醇酸-聚乙二醇共聚 物(poly(lactic)-c〇-poly (glycolic)acid-poly (ethylene)glycol copolymer)。在某 些情況下，所述方法進(jìn)一步包括將第二聚合物與所述有機(jī)溶劑組合，其中所述第二聚合物 是用靶向配體官能化的聚乳酸-聚乙二醇共聚物。在某些情況下，所述方法進(jìn)一步包括將 第二聚合物與所述有機(jī)溶劑組合，其中所述第二聚合物是用靶向配體官能化的聚乳酸-共 聚-聚乙醇酸-聚乙二醇共聚物。在某些實施方案中，所述靶向配體可以與所述聚乙二醇 共價地結(jié)合。
[0030] 在某些實施方案中，所述有機(jī)酸包含2種或更多種有機(jī)酸的混合物。例如，在某些 實施方案中，所述有機(jī)酸包含2種有機(jī)酸的混合物、3種有機(jī)酸的混合物、4種有機(jī)酸的混合 物或5種有機(jī)酸的混合物。
[0031] 在另一個方面，提供了制備多個治療性納米顆粒的方法。所述方法包括將治療劑、 第一聚合物和有機(jī)酸與有機(jī)溶劑組合以形成具有約1至約50%固體的第一有機(jī)相，將所述 第一有機(jī)相與第一水溶液組合以形成第二相，乳化所述第二相以形成乳相，淬滅所述乳相 以形成淬滅相，和過濾所述增溶相以回收所述治療性納米顆粒。
[0032] 在另一個方面，提供了治療性納米顆粒。所述治療性納米顆粒如下制備：乳化包含 第一聚合物、治療劑和有機(jī)酸的第一有機(jī)相從而形成乳相，淬滅所述乳相從而形成淬滅相， 和過濾所述淬滅相以回收所述治療性納米顆粒。
[0033] 在另一個方面，提供了治療性納米顆粒。所述治療性納米顆粒包含約0. 2至約35 重量％的Bcr-Abl酪氨酸-激酶抑制劑和約50至約99. 8重量％的二嵌段聚乳酸-聚乙二 醇共聚物或二嵌段聚乳酸-共聚-聚乙醇酸-聚乙二醇共聚物，其中所述治療性納米顆粒 包含約10至約30重量％的聚乙二醇。
[0034] 在某些實施方案中，所述治療性納米顆?？梢赃M(jìn)一步包含具有在25°C小于約3. 5 的有機(jī)酸。在另一個實施方案中，所述有機(jī)酸可以具有在25 °C約-1至約2的pK a。 [0035] 在某些情況下，所述有機(jī)酸可以是三氟乙酸。
[0036] 在某些實施方案中，所述治療性納米顆粒的流體動力學(xué)直徑可以是約60至約 150nm。在另一個實施方案中，所述治療性納米顆粒的流體動力學(xué)直徑可以是約90至約 140nm〇
[0037] 在某些情況下，所述治療性納米顆?？梢园s1至約10重量％的Bcr-Abl酪 氨酸-激酶抑制劑。在其它情況下，所述治療性納米顆?？梢园s2至約5重量％的 Bcr-Abl酪氨酸-激酶抑制劑。
[0038] 在某些實施方案中，當(dāng)置于在37°C的磷酸鹽緩沖溶液中時，所述治療性納米顆粒 可以基本上保留Bcr-Abl酪氨酸-激酶抑制劑至少1分鐘。在其它實施方案中，當(dāng)置于 在37°C的磷酸鹽緩沖溶液中時，所述治療性納米顆粒可以基本上立即釋放小于約5%的 Bcr-Abl酪氨酸-激酶抑制劑。在其它實施方案中，當(dāng)置于在37°C的磷酸鹽緩沖溶液中時， 所述治療性納米顆粒可以在約1小時釋放約〇. 01至約25%的Bcr-Abl酪氨酸-激酶抑制 劑。在其它實施方案中，當(dāng)置于在37°C的磷酸鹽緩沖溶液中時，所述治療性納米顆?？梢栽?約4小時釋放約10至約45%的Bcr-Abl酪氨酸-激酶抑制劑。
[0039] 在某些情況下，所述Bcr-Abl酪氨酸-激酶抑制劑可以是達(dá)沙替尼或其藥學(xué)上可 接受的鹽。在其它情況下，所述Bcr-Abl酪氨酸-激酶抑制劑可以選自伊馬替尼、尼洛替尼、 達(dá)沙替尼、波舒替尼、普納