金花茶提取物在制備抗焦慮癥藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及金花茶提取物在制備抗焦慮癥藥物中的應(yīng)用，屬于金花茶的藥用技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]金花茶[Camellianitidissima Chi]屬山茶科(Theaceae)山茶屬(Camellia)金花茶組植物(Camellia Sect1n Chrysantha Chang)，是山茶花家族中唯一具有金黃色花瓣的品種，被譽(yù)為“茶族皇后”、“植物界大熊貓”等，已被列為國家一級、世界二級珍稀保護(hù)植物，并于2011年11月獲得我國國家地理標(biāo)志保護(hù)產(chǎn)品稱號。全球范圍內(nèi)已知金花茶組植物有34種和5個變種，除越南北部3種以及我國云南、貴州、四川各產(chǎn)一種外，其余28種與5個變種均產(chǎn)于我國廣西壯族自治區(qū)境內(nèi)。
[0003]金花茶花和葉為廣西壯族民間傳統(tǒng)用藥，具有較高的藥用價值，《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)》記載，金花茶的性味為微苦，澀，平，功能與主治為清熱解毒、利尿消腫，用于咽喉炎、痢疾、腎炎、高血壓、月經(jīng)不調(diào)等。近年來，藥理學(xué)研宄證明，金花茶具有顯著的抑菌、抗氧化、抗腫瘤、降血脂以及降血糖等多種作用。劉炎玲等開展的金花茶濃縮液抗菌試驗，發(fā)現(xiàn)其對白色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、綠膿桿菌、乙型鏈球菌、白喉桿菌等效果較好【劉炎玲，傅鏡遠(yuǎn).廣西金花茶生物學(xué)功能作用的研宄.健康必讀，2011(11):347-348】。秦小明等研宄發(fā)現(xiàn)金花茶葉水提取物對羥基自由基和超氧陰離子自由基均有顯著的清除作用【秦小明，林華娟，寧恩創(chuàng)，等.金花茶葉水提物的抗氧化活性研宄.食品科技，2008，33(2): 189-191】。李琳等研宄證明金花茶花水提取物對人胃癌MGC-803細(xì)胞的增殖有抑制作用【李琳，沈筱蕓，戴璐，等.金花茶水提取物對人胃癌MGC-803細(xì)胞增殖的影響.廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2013，30(3): 344-346】。韋璐等運(yùn)用超聲波浸提工藝對金花茶多糖進(jìn)行提取，以初步分離后的多糖喂食高血脂癥的小鼠，結(jié)果表明金花茶多糖具有明顯的降血脂功能【韋璐，秦小明，林華娟，等.金花茶多糖的降血脂功能研宄.食品科技，2008，33 (7): 247-249】。夏星等發(fā)現(xiàn)金花茶葉提取物對四氧嘧啶致高血糖小鼠有可靠的降血糖作用，可用于輔助控制糖尿病患者的血糖水平【夏星，黃嘉駿，王志萍，等.金花茶葉的降血糖作用及急性毒性研宄.時珍國醫(yī)國藥，2013，24(5):3-4】。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明通過分析金花茶提取物對小鼠焦慮模型的行為影響，為金花茶應(yīng)用于制備抗焦慮癥藥物研宄提供了依據(jù)，因此，本發(fā)明的目的為提供金花茶的新用途。
[0005]本發(fā)明提供了金花茶提取物在制備抗焦慮癥藥物中的應(yīng)用。
[0006]本發(fā)明所述金花茶優(yōu)選為山茶科植物金花茶(拉丁學(xué)名為Camellia nitidissimaChi)。
[0007]本發(fā)明所述金花茶提取物優(yōu)選為金花茶葉提取物，進(jìn)一步優(yōu)選為金花茶葉水提取物。
[0008]本發(fā)明所述金花茶提取物的制備方法可以采用本領(lǐng)域常見的提取方法，本發(fā)明所述金花茶提取物的制備方法優(yōu)選為將金花茶葉加水提取，冷凍干燥提取液，得到金花茶提取物。
[0009]本發(fā)明所述金花茶葉與水的重量比優(yōu)選為1:15?25。
[0010]本發(fā)明所述提取溫度優(yōu)選為80?100 °C。
[0011]本發(fā)明所述提取時間優(yōu)選為1.5?2.5h。
[0012]本發(fā)明所述提取次數(shù)優(yōu)選為I?3次。
[0013]本發(fā)明有益效果為:本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)金花茶提取物可用于制備抗焦慮癥藥物，應(yīng)用于焦慮癥病人的輔助治療。
【附圖說明】
[0014]本發(fā)明附圖3幅，
[0015]圖1為應(yīng)用例2小鼠在明箱停留時間結(jié)果；
[0016]圖2為應(yīng)用例3小鼠進(jìn)入開臂次數(shù)百分比結(jié)果；
[0017]圖3為應(yīng)用例3小鼠在開臂滯留時間百分比結(jié)果。
【具體實施方式】
[0018]下述非限制性實施例可以使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
[0019]實施例1
[0020]金花茶葉水提取物的制備方法，所述制備方法為將金花茶葉干燥、粉碎至60目以下，得到金花茶葉粗粉，向金花茶葉粗粉中加入第一份蒸餾水，所述金花茶葉粗粉與第一份蒸餾水的重量比為1:20，100°C提取2h，過濾，5000r/min離心5min，得到濾液I和濾渣I，向濾渣I中加入第二份蒸餾水，所述濾渣I與第二份蒸餾水的重量比為1:20，100°C提取2h,過濾，5000r/min離心5min，得到濾液II，將濾液I與濾液II合并后過濾，冷凍干燥，得到金花茶葉水提取物干粉。
[0021]下述生理鹽水的配制方法為將0.9g氯化鈉溶解于10mL蒸餾水中，高壓蒸汽滅菌；
[0022]下述低劑量金花茶葉水提取物的配制方法為將0.2g實施例1制備的金花茶葉水提取物干粉溶解于上述32mL生理鹽水后用0.22 μ m濾膜過濾除菌；
[0023]下述高劑量金花茶葉水提取物的配制方法為將Ig實施例1制備的金花茶葉水提取物干粉溶解于上述32mL生理鹽水后用0.22 μ m濾膜過濾除菌；
[0024]下述地西泮(Diaz印am)混懸液的配制方法為將7.5mg地西泮研磨后溶解于上述30mL生理鹽水。
[0025]應(yīng)用例I
[0026]實施例1制備的金花茶葉水提取物的急性及慢性毒性實驗
[0027]急性毒性實驗
[0028]將32只正常小鼠按體重隨機(jī)分成4組，每組8只，即實施例1制備的金花茶葉水提取物500mg/kg劑量組、實施例1制備的金花茶葉水提取物1000mg/kg劑量組、實施例1制備的金花茶葉水提取物2000mg/kg劑量組和實施例1制備的金花茶葉水提取物4000mg/kg劑量組，小鼠禁食6h后各組均按0.4mL/25g體重灌胃給藥，24h后觀察各組小鼠的毒性癥狀和死亡率。
[0029]慢性毒性實驗
[0030]將32只正常小鼠按體重隨機(jī)分成4組，每組8只，即實施例1制備的金花茶葉水提取物500mg/kg劑量組、實施例1制備的金花茶葉水提取物1000mg/kg劑量組、實施例1制備的金花茶葉水提取物2000mg/kg劑量組和實施例1制備的金花茶葉水提取物4000mg/kg劑量組，小鼠禁食12h后各組均按0.4mL/25g體重于每天上午9:30?10:30灌胃給藥，一日一次，連續(xù)給藥7d，于第7d給藥后次日觀察各組小鼠的毒性癥狀和死亡率。
[0031]結(jié)論:在急性及慢性毒性試驗中，各組小鼠均未出現(xiàn)死亡，且未表現(xiàn)出毒性癥狀，通過急性及慢性毒性試驗，對金花茶葉水提取物進(jìn)行安全性評價，結(jié)果說明金花茶葉水提取物無毒副作用，可長期服用。
[0032]應(yīng)用例2
[0033]實施例1制備的金花茶葉水提取物對小鼠明暗箱實驗
[0034]將32只正常小鼠按體重隨機(jī)分成4組，每組8只，即生理鹽水空白對照組、陽性藥地西泮組(4mg/kg/d)、低劑量金花茶葉水提取物組(100mg/kg/d)、高劑量金花茶葉水提取物組(500mg/kg/d)，各組均按0.4mL/25g體重于每天上午9:30?10:30灌胃給藥，一日一次，連續(xù)給藥7d，于第7d給藥Ih后將小鼠單個放入明暗箱中央，背朝隔板，記錄小鼠5min內(nèi)在明箱的停留時間，結(jié)果見附圖1。
[0035]所述明暗箱由有機(jī)玻璃制成，明暗箱的長45cmX寬27cmX高27cm，暗箱為黑色，占明暗箱體積的3/5，明箱內(nèi)為白色，上方設(shè)有40W的白熾燈照明，兩箱之間的隔墻高出箱壁20cm，中間有一個7.5cmX7.5cm的門洞供動物穿過。
[0036]結(jié)論:低劑量金花茶葉水提取物組和高劑量金花茶葉水提取物組都能明顯提高小鼠在明箱中的停留時間，與生理鹽水空白對照組比p〈0.05，結(jié)果表明金花茶葉水提取物具有良好的抗焦慮作用。
[0037]應(yīng)用例3
[0038]實施例1制備的金花茶葉水提取物對小鼠高架十字迷宮實驗
[0039]將32只正常小鼠按體重隨機(jī)分成4組，每組8只，即生理鹽水空白對照組、陽性藥地西泮組(4mg/kg/d)、低劑量金花茶葉水提取物組(100mg/kg/d)、高劑量金花茶葉水提取物組(500mg/kg/d)，各組均按0.4mL/25g體重于每天上午9:30?10:30灌胃給藥，一日一次，連續(xù)給藥7d,于第7d給藥Ih后單個將小鼠置于十字迷宮中央?yún)^(qū)，頭朝開臂，分別記錄小鼠5min內(nèi)的行為指標(biāo):進(jìn)入開臂和閉臂的次數(shù)(以小鼠四爪跨過中央?yún)^(qū)與各臂間的分界線為準(zhǔn))；在兩臂滯留的時間，計算小鼠進(jìn)入開臂的次數(shù)和在開臂滯留時間分別占總次數(shù)(進(jìn)入開臂與閉臂次數(shù)之和)和總時間(在開臂與閉臂滯留時間之和)的百分比，結(jié)果見附圖2和3。
[0040]所述高架十字迷宮包括兩個長30cm X寬5cm的開臂和兩個長30cm X寬5cm X高15cm的閉臂，閉臂上部敞開，中央有一個5cmX5cm的開闊部，兩種類型的雙臂呈相對位置的十字型，迷路距地面45cm，開臂的周邊有一高出0.25cm的沿，迷路由有機(jī)黑色玻璃制成，迷路上方設(shè)有4個40W的日光燈照射。
[0041]結(jié)論:低劑量金花茶葉水提取物組可明顯增加高架十字迷宮模型實驗中小鼠進(jìn)入開臂次數(shù)的百分比，且能明顯提高小鼠在開臂的滯留時間百分比，與生理鹽水空白對照組比P〈0.05，而高劑量金花茶葉水提取物組雖也能在一定程度上提高開臂次數(shù)百分比和開臂滯留時間百分比，但與生理鹽水空白對照組比不具有明顯差異P>0.05，結(jié)果表明金花茶葉水提取物具有良好的抗焦慮作用。
【主權(quán)項】
1.金花茶提取物在制備抗焦慮癥藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于:所述金花茶提取物為金花茶葉提取物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于:所述金花茶提取物為金花茶葉水提取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于:所述金花茶提取物的制備方法為將金花茶葉加水提取，冷凍干燥提取液，得到金花茶提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于:所述金花茶葉與水的重量比為1:15?25。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于:所述提取溫度為80?100°C。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于:所述提取時間為1.5?2.5h。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于:所述提取次數(shù)為I?3次。
【專利摘要】本發(fā)明涉及金花茶提取物在制備抗焦慮癥藥物中的應(yīng)用，屬于金花茶的藥用技術(shù)領(lǐng)域，通過分析金花茶提取物對小鼠焦慮模型的行為影響，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)金花茶提取物可用于制備抗焦慮癥藥物，應(yīng)用于焦慮癥病人的輔助治療。
【IPC分類】A61P25-22, A61K36-82
【公開號】CN104825661
【申請?zhí)枴緾N201510267358
【發(fā)明人】徐永平, 賀棟業(yè), 羅新星, 張萍, 李曉宇, 王麗麗, 李淑英
【申請人】大連賽姆生物工程技術(shù)有限公司
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2015年5月22日