載多烯紫杉醇的πιΡΕ62(ι(ι(ι-?3-Ρ0?Λ_~ 15QQ膠束凍干制劑具有以下優(yōu) 占·
[0032] 1，選用的mPEG2_-b-PDLLA_~ 15QQ嵌段聚合物材料，無毒、無免疫原性，在體內(nèi)可 生物降解，具有良好的生物相容性；對于多烯紫杉醇的包載增溶是利用其在水溶液中自組 裝形成膠束的特點實現(xiàn)，無需使用Tween-80等增溶劑，消除了由傳統(tǒng)溶媒帶來的用藥安全 隱患，極大提高了多烯紫杉醇的安全性；
[0033] 2,制得的載有多烯紫杉醇的mPEG_-b-PDLLA_~ 15QQ膠束凍干制劑可明顯提高多 烯紫杉醇的水溶性，具有包封率高（>90%)、載藥量高（10%~25%)、粒徑小（15~25nm)、分 散系數(shù)窄（〇.〇9〈P. I.〈0. 15)、分布范圍集中的特點，且提高了生物利用度；凍干過程明顯 提高了載多烯紫杉醇膠束的穩(wěn)定性，便于制劑的保存和運輸；
[0034] 3,臨床用藥方便，所述凍干制劑加入注射用水、生理鹽水或5%葡萄糖注射液等之 后，可迅速溶解分散成透明的膠束溶液，粘度低，流動性好，并且在室溫條件下6小時內(nèi)粒 徑變化小于1%，極大提高了用藥安全性，完全滿足了臨床的用藥需求；
[0035] 4,本發(fā)明的制備方法簡單易行、條件溫和可控、重復性好；通過控制投藥量和分散 溶液體積，可得到一系列不同濃度的載藥膠束，易于生產(chǎn)過程的控制，易于工業(yè)化生產(chǎn)的實 施；
[0036] 5,通過體外細胞毒實驗和動物體內(nèi)實驗證實，本發(fā)明的多烯紫杉醇膠束制劑，可 顯著提高抗胰腺癌和轉移性乳腺癌的治療效果，降低多烯紫杉醇的系統(tǒng)毒性，具有良好的 臨床應用價值。
【附圖說明】
[0037] 圖1為本發(fā)明制備例2的mPEG2_-b-PDLLA13(l(l嵌段共聚物嵌段結構的 1H-NMR譜 圖。
[0038] 圖2為本發(fā)明制備例2的mPEG2_-b-PDLLA13(l(l嵌段共聚物的滲透凝膠色譜（GPC) 譜圖。
[0039] 圖3顯示了激光粒度儀測定本發(fā)明的多烯紫杉醇膠束的動態(tài)光散射（DLS)粒徑分 布圖。
[0040] 圖4為本發(fā)明的包載多烯紫杉醇膠束的透射電鏡圖（TEM)。
[0041] 圖5為本發(fā)明的添加各種凍干保護劑后載藥膠束復溶后溶液在6小時內(nèi)的粒徑變 化圖。
[0042] 圖6為本發(fā)明的載藥膠束在PBS溶液中的體外釋放曲線圖。
[0043] 圖7為市售多烯紫杉醇、多烯紫杉醇膠束和空白膠束的MTT實驗結果圖。
[0044] 圖8為本發(fā)明的多烯紫杉醇膠束對荷4T1腫瘤的Balb/c小鼠體重變化影響圖。
[0045] 圖9為市售多烯紫杉醇和本發(fā)明的多烯紫杉醇膠束以荷4T1腫瘤的Balb/c小鼠 肺HE染色對比圖。
[0046] 圖10為市售多烯紫杉醇和本發(fā)明的多烯紫杉醇膠束對胰腺癌的治療效果對比圖 (a)和體重變化曲線（b)。
【具體實施方式】
[0047] 下面通過實施例方式進一步說明本發(fā)明，但并不意味著將本發(fā)明限制在所述的實 施例范圍之內(nèi)。
[0048] 制備例 lmPEG^c-b-PDLLAi。。。合成
[0049] 將2克mPEG2(l(l(l減壓除水后，加入0. 5%(w/w)辛酸亞錫，在IKTC下攪拌0. 5小時， 然后加入I. 1克D，L-丙交酯，在N2保護和130°C加熱條件下，反應5小時，靜置室溫后，用 二氯甲烷溶解，然后滴入在_20°C下冰凍2小時的乙醚中，將析出的產(chǎn)物過濾，室溫減壓干 燥，后處理工作（以二氯甲烷溶解后滴入冰凍乙醚中）重復2次即可得2克產(chǎn)物。PDLLA嵌 段分子量通過 1H-NMR測定為1000。
[0050] 制備例 2mPEG2_-b-PDLLA13QQ 合成
[0051] 將2克mPEG_減壓除水后，加入0. 5%(w/w)辛酸亞錫，在IKTC下攪拌0. 5小時， 然后加入1. 4克D，L-丙交酯，在N2保護和130°C加熱條件下，反應5小時，靜置室溫后，用二 氯甲烷溶解，然后滴入在_20°C下冰凍2小時的乙醚中，將析出的產(chǎn)物過濾，室溫減壓干燥， 后處理工作（以二氯甲烷溶解后滴入冰凍乙醚中）重復2次即可得2. 1克產(chǎn)物。PDLLA嵌段 分子量通過1H-NMR測定為1300 (圖1)，通過GPC分析其多分散系數(shù)為1.20 (圖2)。
[0052] 制備例 SmPEG^-b-PDLLAi合成
[0053] 將2克mPEG_減壓除水后，加入0. 5%(w/w)辛酸亞錫，在IKTC下攪拌0. 5小時， 然后加入1. 7克D，L-丙交酯，在N2保護和130°C加熱條件下，反應5小時，靜置室溫后，用二 氯甲烷溶解，然后滴入在_20°C下冰凍2小時的乙醚中，將析出的產(chǎn)物過濾，室溫減壓干燥， 后處理工作（以二氯甲烷溶解后滴入冰凍乙醚中）重復2次即可得2. 1克產(chǎn)物。PDLLA嵌段 分子量通過1H-NMR測定為1500。
[0054] 實施例載多烯紫杉醇聚合物膠束制劑的制備
【主權項】
1. 一種多烯紫杉醇納米膠束制劑，其包含抗腫瘤藥物多烯紫杉醇、兩親性嵌段共聚物 甲基聚乙二醇 2_-b-聚D，L-乳酸、以及任選的藥學上可接受的凍干保護劑。
2. 根據(jù)權利要求1所述的納米膠束制劑，其中所述兩親性嵌段共聚物甲基聚乙二醇 2000_b_聚D,L-乳酸優(yōu)選地為甲基聚乙二醇2_-b-聚D,L-乳酸;所述凍干保 護劑為PEG2_、泊洛沙姆188、乳糖、葡萄糖、山梨醇、甘露醇、mPEG_-b-PDLLA13(l(l、人血白蛋 白、PVPK30中的任意一種或多種的混合物，優(yōu)選葡萄糖、mPEG_-b-PDLLA13QQ、人血白蛋白。
3. 根據(jù)權利要求1-2中任一項所述的納米膠束制劑，其中多烯紫杉醇和兩親性嵌段共 聚物甲基聚乙二醇2_-13-聚D，L-乳酸Hicic^15tici的質量比為1:3~1:9,優(yōu)選1:5 ;凍干保護 劑的添加量為基于凍干制劑總量的質量百分比計的1~10%，優(yōu)選5%質量。
4. 根據(jù)權利要求1-3中任一項所述的納米膠束制劑，其中所述膠束制劑是凍干形式， 采用注射用水、5%葡萄糖注射液或0. 9%氯化鈉注射液作為臨床用藥的分散介質。
5. 根據(jù)權利要求1所述的納米膠束制劑，其特征為：所述納米膠束制劑的載藥量在 10%~25%之間，優(yōu)選15%~18% ;復溶后的納米粒徑在15nm~25nm之間，粒子的分散系數(shù) P.I.在0. 09~0. 15之間；多烯紫杉醇在所述膠束中包封率至少達到85%。
6. -種制備根據(jù)權利要求1-5中任一項的多烯紫杉醇納米膠束制劑的方法，包括以下 步驟： (1) 將多烯紫杉醇和甲基聚乙二醇__13-聚D，L-乳酸溶于有機溶劑中； (2) 除去有機溶劑，得到含多烯紫杉醇的聚合物脂膜； (3) 加入注射用水，在25°C~60°C下水化； (4) 渦旋振蕩或超聲，得到納米膠束溶液； (5) 任選地加入凍干保護劑，0. 22iim無菌微孔濾膜過濾除菌，放入-50°C~_70°C冰箱 冷凍12小時之后冷凍干燥，即可得到包載多烯紫杉醇的甲基聚乙二醇2_-b-聚D，L-乳酸 KK1C^15CK1納米膠束制劑。
7. 根據(jù)權利要求6的方法，其中在步驟（1)中所述的有機溶劑為乙腈、甲醇、乙醇和三 氯甲烷，可單獨或者混合使用，優(yōu)選乙腈。
8. 根據(jù)權利要求6或7的方法，其中在步驟（2)中通過減壓除去有機溶劑和/或在真 空條件下除去有機溶劑；其中在步驟（3)中在25°C~60°C、優(yōu)選35°C~45°C下水化1~2 小時。
9. 根據(jù)權利要求6-8中任一項的方法，其中在步驟（4)中渦旋振蕩或超聲1~5分鐘。
10. 根據(jù)權利要求1-5中任一項所述的納米膠束制劑在制備用于治療轉移性乳腺癌或 胰腺癌的藥物中的應用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種包載難溶性抗腫瘤藥物多烯紫杉醇的聚合物納米膠束制劑及其制備方法和用途。本發(fā)明的膠束制劑為甲基聚乙二醇2000-b-聚D,L-乳酸1000-1500嵌段共聚物載多烯紫杉醇膠束，其粒徑范圍為15nm～25nm，粒子的分散系數(shù)P.I.在0.09～0.15之間。本發(fā)明的膠束制劑具有如下優(yōu)點：膠束的粒徑小、分布范圍集中、包封率高、載藥量高、凍干后穩(wěn)定，且復溶穩(wěn)定性良好，可明顯提高多烯紫杉醇的水溶性，顯著提高多烯紫杉醇的對于轉移性乳腺癌和胰腺癌的治療效果，毒副作用低。本發(fā)明的膠束制劑可特別地制備成凍干制劑，用于靜脈注射。
【IPC分類】A61P35-00, A61K9-19, A61K31-337, A61K47-34
【公開號】CN104840968
【申請?zhí)枴緾N201410053888
【發(fā)明人】高鐘鎬, 李云飛, 陳衛(wèi), 楊飛飛, 黃偉, 金明姬
【申請人】中國醫(yī)學科學院藥物研究所
【公開日】2015年8月19日
【申請日】2014年2月17日