22重量份、蜂糖罐32重量份、粉菝葜20重量份、匍伏堇14重量份、丹皮16重量份、馬鞭草 23重量份、鳳尾草32重量份、鋪地黍28重量份、紫花地丁 22重量份、青黛33重量份、白茅 根30重量份、十萼茄26重量份和蛇菰34重量份、葛根21重量份、火炭母草34重量份、瞿 麥30重量份和鴉膽子3重量份。
[0062] 其制備方法如下: 第一步,將馬齒莧、地榆、升麻、金果欖、芡實、蛇蓮、大青葉、槐花、委陵菜、蜂糖罐和粉 菝葜按所述比例混合,用相對于獲得的混合物質(zhì)量的4倍的醇濃度為90%的乙醇溶解,加熱 回流3小時后提取,過濾,得第一過濾液;將濾渣再次用相對于獲得的混合物質(zhì)量的2倍的 醇濃度90%的乙醇溶解,加熱回流2小時后提取,過濾,得第二過濾液;合并第一過濾液和 第二過濾液,減壓回收乙醇并濃縮至藥液濃度為0. 8g生藥/mL,經(jīng)體積為5L的大孔吸附樹 脂柱洗脫,先用5倍樹脂柱體積的去離子水或蒸餾水洗脫,再用3倍樹脂柱體積的醇濃度為 90%乙醇洗脫,收集乙醇洗脫液,減壓濃縮除去乙醇,干燥并粉碎成粉末; 第二步,將馬鞭草、鳳尾草、鋪地黍、紫花地丁、青黛、白茅根、十萼茄和蛇菰按所述比例 混合,加相對于獲得的混合物質(zhì)量的3倍的醇濃度90%的乙醇,加熱回流提取2次,提取液 合并,用管式離心機離心除雜,將除雜后的提取液于65°C的條件下減壓濃縮至60°C時相對 密度為1. 22的膏體,將濃縮后的膏體用噴霧干燥器干燥成粉末; 第三步,將剩余原料藥材按所述比例混合,加相對于獲得的混合物質(zhì)量的3倍的水溶 解,加熱煎煮3小時,過濾;將濾渣再次用相對于獲得的混合物質(zhì)量的1. 5倍的水溶解,再次 加熱煎煮1. 5小時,過濾;合并兩次的過濾液,減壓濃縮除去水分,干燥并粉碎成粉末; 第四步,將第一步、第二步和第三步獲得的粉末混合,隨后過篩成100目的細粉,將獲 得的細粉投入混合攪拌機中攪拌,即獲得散劑。
[0063] 藥物組合物的毒性試驗: 1、試驗藥物 選取見血住33g、戟葉瓦韋20g、聚頭薊25g、堿地馬藺31g、黨參18重g、及己32g、大蒜 25g、菟絲31g、枳犋21g、大黃24g、錦線鏢32g、白頭翁31g、馬齒莧28g、地榆32g、升麻16g、 金果欖25g、芡實32g、蛇蓮30g、大青葉30g、槐花34重量份、委陵菜22g、蜂糖罐32g、粉菝 葜20g、匍伏堇14g、丹皮16g、馬鞭草23g、鳳尾草32g、鋪地黍28g、紫花地丁 22g、青黛33g、 白茅根30g、十萼茄26g和蛇菰34g混合,粉碎成粉末;將獲得粉末加入1700g冷水中浸泡 25小時,以文火煎煮,煎煮時間為1. 5小時,將煎煮液過濾,獲得第一濾液,收集濾渣;將過 濾獲得的濾渣再次加入1700g冷水中,以文火煎煮3次,每次煎煮1小時,過濾并合并過濾 液,獲得第二濾液;合并兩次濾液,減壓濃縮除去部分水,獲得湯劑,湯劑的生藥濃度為3g/ ml 〇
[0064] 2、試驗方法:選用SD大鼠,給予不同濃度(18. 0、6. 0、2. Og生藥/kg)的本發(fā)明的 中藥添加劑的湯劑,每天灌胃一次,連續(xù)90天,末次給藥后24小時各組活殺1/2動物(雌 雄各半),其余1/2動物繼續(xù)觀察2周后活殺。試驗期間觀察動物的外觀、一般行為、攝食 量、體重變化,給藥后90天和停藥2周進行血液學(RBC、HB、網(wǎng)織紅細胞、PLT、CT、WBC及 分類)和血液生化(AST、ALT、ALP、6111、8^、(:代&、了?、1\8幾、41^、〇101^)、尿液生化、臟器 系數(shù)、病理組織學等指標檢查。試驗結(jié)果表明:本發(fā)明的中藥添加劑在高、中、低劑量組動 物一般狀態(tài)良好,外觀體征、行為活動、進食量和體重增長均無異常變化;三個劑量組及 對照組血液學檢查、血液生化學、尿液生化檢查均在正常范圍,組間無顯著差異;各組主要 臟器組織病理學檢查未見明顯異常。上述指標停藥2周后也未見改變。本試驗用藥劑量分 別為臨床用藥劑量的180、60、20倍,根據(jù)試驗結(jié)果本發(fā)明的中藥制劑在高、中、低三個劑量 (18. 0、6. 0、2. Og生藥/kg)連續(xù)90天給藥對大鼠無明顯影響,無明確的毒性革El器官和敏感 指標,恢復期觀察也未見延遲性毒性反應,提示本發(fā)明的中藥制劑臨床應用的劑量安全性 較高。
[0065] 對比試驗 山東省聊城市某豬養(yǎng)殖場,2012年12月底,發(fā)現(xiàn)將近450只77日齡仔豬出現(xiàn)不同程度 的消瘦、黏液性或出血性下痢,以拉稀,糞便呈粥樣或水樣,內(nèi)含黏液、黏膜或血液為特征, 甚至出現(xiàn)死亡仔豬,取新鮮糞便中帶血絲的黏液少許,或取小塊有明顯病變的大腸粘膜直 接抹片,在空氣中自然干燥后經(jīng)火焰固定,以草酸銨結(jié)晶紫液、姬姆染色液染色4分鐘,涂 片水洗陰干后,在顯微鏡下觀察,可看到豬痢疾蛇行螺旋體,或?qū)⑸鲜霾×?小滴置于載玻 片上,在滴1滴生理鹽水,混勻,而后蓋上玻片,以暗視野顯微鏡檢查(400倍),發(fā)現(xiàn)有呈蛇 樣活潑運動的菌體時,即可確診為豬痢疾。
[0066] 選取77日齡確診的患病仔豬180只,將180只患病豬隨機分成三組,分別為實施 例組1、實施例組2和對照組,三組的患病豬在體重、病情等方面均無顯著差異,具有可比 性。實施例組1、實施例組2和對照組分別使用本發(fā)明實施例1的粉針劑、實施例2的散劑 和傳統(tǒng)藥物進行治療;其中,粉針劑采用皮下注射,每次5g,每天一次,連續(xù)注射6天;散劑 的使用方法是將散劑按照5g:500g的重量比例傳統(tǒng)飼料中,連續(xù)飼喂6天;傳統(tǒng)藥物為皮 下注射高免血清〇. 2毫升,飼喂傳統(tǒng)飼料。實驗周期為6天,實驗前后分別稱取各組患病豬 體重,期間記錄患病豬的痊愈情況及死亡數(shù),計算出平均日增重及痊愈率,以及痊愈數(shù)的時 間比較,結(jié)果如表1,表2和表3所示。其中,治愈:體重正常、不再有黏液性或出血性下痢, 糞便里沒出現(xiàn)粥樣或水樣,內(nèi)含黏液、黏膜或血液的現(xiàn)象,抽樣取新鮮糞便的黏液少許,在 空氣中自然干燥后經(jīng)火焰固定,以草酸銨結(jié)晶紫液、姬姆染色液染色4分鐘,涂片水洗陰干 后,在顯微鏡下觀察,沒有看到豬痢疾蛇行螺旋體;無效:臨床癥狀沒有改善甚至加重或死 亡。
[0067] 表1各組仔豬平均體重對照表
【主權(quán)項】
1. 一種治療仔豬痢疾的藥物組合物,其特征在于,所述藥物組合物包括以下原料藥材: 見血住、戟葉瓦韋、聚頭薊、堿地馬藺、黨參、及己、大蒜、菟絲、枳犋、大黃、錦線鏢、白頭翁、 馬齒莧、地榆、升麻、金果欖、芡實、蛇蓮、大青葉、槐花、委陵菜、蜂糖罐、粉菝葜、匍伏堇、丹 皮、馬鞭草、鳳尾草、鋪地黍、紫花地丁、青黛、白茅根、十萼茄和蛇菰。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療仔豬痢疾的藥物組合物,其特征在于,所述藥物組合 物中各原料藥材的重量份數(shù)比為:見血住10-35重量份、戟葉瓦韋12-22重量份、聚頭薊 10-30重量份、喊地馬藺11_31重量份、黨參14_28重量份、及己15_35重量份、大蒜15_25 重量份、英絲13-33重量份、枳棋11-21重量份、大黃12-26重量份、錦線鏢14-36重量份、 白頭翁11-33重量份、馬齒莧10-30重量份、地輸13-33重量份、升麻10-20重量份、金果欖 13_27重量份、突實14_34重量份、蛇蓮11_32重量份、大青葉10_30重量份、槐花12_36重 量份、委陵菜10-28重量份、蜂糖罐14-36重量份、粉菝葜10-20重量份、匍伏堇12-24重量 份、丹皮1〇 _20重量份、馬鞭草11-23重量份、鳳尾草12-32重量份、鋪地泰15-35重量份、 紫花地丁 12-24重量份、青黛13-33重量份、白茅根12-31重量份、十萼前11-29重量份和 蛇蔬14_35重量份D
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療仔豬痢疾的藥物組合物,其特征在于,所述藥物組 合物中各原料藥材的重量份數(shù)比為:見血住33重量份、戟葉瓦韋20重量份、聚頭薊25重量 份、喊地馬藺31重量份、黨參18重量份、及己32重量份、大蒜25重量份、英絲31重量份、 枳犋21重量份、大黃24重量份、錦線鏢32重量份、白頭翁31重量份、馬齒莧28重量份、地 榆32重量份、升麻16重量份、金果欖25重量份、芡實32重量份、蛇蓮30重量份、大青葉30 重量份、槐花34重量份、委陵菜22重量份、蜂糖罐32重量份、粉菝葜20重量份、匍伏堇14 重量份、丹皮16重量份、馬鞭草23重量份、鳳尾草32重量份、鋪地黍28重量份、紫花地丁 22重量份、青黛33重量份、白茅根30重量份、十萼前26重量份和蛇 34重量份D
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的治療仔豬痢疾的藥物組合物,其特征在于,所述藥 物組合物還包括葛根、火炭母草、瞿麥和鴉膽子。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的治療仔豬痢疾的藥物組合物,其特征在于,所述藥 物組合物中各原料藥材的重量份數(shù)為:見血住10-35重量份、戟葉瓦韋12-22重量份、聚頭 薊10-30重量份、喊地馬藺11_31重量份、黨參14_28重量份、及己15_35重量份、大蒜15_25 重量份、英絲13-33重量份、枳棋11-21重量份、大黃