源自亞麻蛋白質(zhì)水解的亞麻提取物作為活性抗微生物劑的用圖
【專利說明】源自亞麻蛋白質(zhì)水解的亞麻提取物作為活性抗微生物劑的 用途
[0001] 本發(fā)明屬于化妝品和藥學(xué)領(lǐng)域，更特別地屬于皮膚病學(xué)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及用于保 護(hù)皮膚及附件免受微生物侵襲（microbial stress)的亞麻子提取物。
[0002] 本發(fā)明還涉及用于提高抗微生物肽的表達(dá)水平的亞麻子提取物。
[0003] 本發(fā)明的術(shù)語"皮膚附件"包括在體表存在的所有角蛋白附件，特別是體毛、睫毛、 眉毛、指甲和頭發(fā)。
[0004] 表皮的主要功能是在生物和外部環(huán)境之間提供保護(hù)屏障。在表皮中，兩種類型的 屏障在起作用：由皮膚本身形成的物理屏障，其是通過強(qiáng)的細(xì)胞間凝聚力（橋粒，緊密連接 部）和角蛋白細(xì)胞的耐磨性而確保的；以及由皮膚分泌物（皮脂，汗液）形成的化學(xué)屏障， 其使得能夠?qū)棺儜?yīng)原和刺激物，并且由于角質(zhì)層的酸性PH以及水解酶和抗微生物肽的 存在而起到抗菌作用。免疫系統(tǒng)的細(xì)胞形成能夠清除那些試圖穿透表皮的微生物的第三種 防御屏障。
[0005] 與外部環(huán)境直接接觸的皮膚被暴露于海量的微生物中，這些微生物定植在表皮和 附件（毛囊，皮脂腺和汗腺）的淺層。皮膚維持著一個有利于某些微生物的穩(wěn)定的生態(tài)系 統(tǒng)，這些微生物的生長所需是與局部環(huán)境相適應(yīng)的。人體皮膚可能具有超過一千種的細(xì)菌， 并且它們的總數(shù)估計為1〇12個細(xì)菌。健康個體的皮膚微生物菌群是共生微生物菌群，其包 括常居皮膚菌群和暫時性皮膚菌群。
[0006] 常居皮膚菌群是以革蘭氏陽性菌為主，特別是葡萄球菌屬（例如金黃色葡萄球 菌（S. epidermidis))、棒狀桿菌屬（例如微小棒狀桿菌（C. minutissimum))和丙酸桿菌屬 (例如，痤瘡丙酸桿菌（P.acnes))。常居菌群的其它細(xì)菌是例如某些微球菌屬或短桿菌屬。
[0007] 暫時性皮膚菌群是多形態(tài)的，并且可以包括來自消化道或鼻咽或環(huán)境的潛在致病 菌。其包括腸球菌、金黃色葡萄球菌（golden staph)和革蘭氏陰性菌（特別是不動桿菌屬 (Acinetobacter)、腸桿菌屬（Enterobacter)//假單胞菌屬（Pseudomonas))和真菌（如白 色念珠菌（C. Albicans))。
[0008] 暫時性皮膚菌群的細(xì)菌通常是短暫停留在皮膚上，皮膚的環(huán)境是不適于它們的。 但是，它們可能作為機(jī)會致病菌，并且在具有弱化的防御系統(tǒng)的個體中引起感染，例如在全 身性疾?。庖咭种苹颊?、糖尿病患者）的情況下或在皮膚屏障功能改變的情況下（銀肩 病或特應(yīng)性皮炎）。
[0009] 任何皮膚損傷導(dǎo)致其天然防御線的弱化。皮膚隨后易受病原微生物的攻擊。另外， 常居的或暫時性的皮膚微生物菌群隨后可以充當(dāng)機(jī)會致病菌，定植于傷口，然后，如果條件 適宜的話，導(dǎo)致局部性和/或全身性感染過程。
[0010] 皮膚共生微生物菌群有助于通過參與皮膚的化學(xué)屏障功能而維持生態(tài)系統(tǒng)和皮 膚健康。事實上，皮膚常居菌類在皮膚對病原微生物定植的抗性中發(fā)揮重要的作用，因為 它們與致病菌競爭空間和食物，釋放抗菌物質(zhì)（抑制劑，產(chǎn)生不利的PH條件或者受體修飾 (receptor modification))，其降低致病菌的生長并連續(xù)刺激免疫系統(tǒng)，使得能夠調(diào)節(jié)皮 膚和皮膚附件的細(xì)菌群落。
[0011] 此外，角質(zhì)形成細(xì)胞和皮脂腺細(xì)胞還特別通過表達(dá)抗微生物肽（AMP)來參與皮膚 常居菌群的平衡并保護(hù)皮膚對抗病原微生物。AMP是一個具有抗多種病原微生物的活性譜 的具有少于100個氨基酸的多肽家族，所述病原微生物包括細(xì)菌、真菌、有包膜病毒和原生 動物。AMP的作用機(jī)制包括直接抗微生物活性和引發(fā)宿主反應(yīng)，所述引發(fā)導(dǎo)致細(xì)胞因子的釋 放、炎癥、血管發(fā)生和表皮細(xì)胞再生。AMP的直接抗微生物活性的機(jī)制包括它們以多聚體蛋 白的形式粘附在目標(biāo)微生物的細(xì)胞膜上，導(dǎo)致目標(biāo)微生物的溶胞。
[0012] 在人類中，兩組AMP是經(jīng)由皮膚而優(yōu)勢表達(dá)的：防衛(wèi)素（DEFB)和上皮細(xì)胞抗菌肽， 它們是非特異性的固有免疫系統(tǒng)的陽離子介質(zhì)。
[0013] 人類抗菌肽hCAP18是一種非活性前肽。其C-末端片段LL37具有廣譜活性的抗 微生物活性并調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答。在表皮中，激肽釋放酶（參與脫肩過程的原酶（primordial enzyme))負(fù)責(zé)將抗菌肽轉(zhuǎn)錄后成熟成為LL-37。
[0014] 防衛(wèi)素是以前體前多肽原形式表達(dá)的具有少于50個氨基酸的小陽離子肽。防衛(wèi) 素家族可以分為兩組：在上皮細(xì)胞表面上表達(dá)的α-防衛(wèi)素（其位于小腸的中性白細(xì)胞和 帕內(nèi)特細(xì)胞中）和β -防衛(wèi)素。被稱為DEFBl至6的6個β -防衛(wèi)素已經(jīng)在人體組織中被 確定，包括在皮膚中表達(dá)的DEFB1、2和3。DEFB1、2和3是經(jīng)由健康皮膚上層的角質(zhì)形成細(xì) 胞而組成性表達(dá)的，并且通過抑制病原微生物的生長和病原微生物對皮膚表面的侵襲而參 與皮膚的化學(xué)屏障。
[0015] 在本文中，AMP的性質(zhì)表現(xiàn)出特別有利于增強(qiáng)皮膚對抗微生物侵襲的保護(hù)功能和 促進(jìn)皮膚常居菌群的平衡。
[0016] 已存在若干引入到用于局部施用的化妝品或藥品的物質(zhì)。文獻(xiàn)US 2009/0005300 和US 2010/0215591描述了天然的或合成的AMP及其在藥物或化妝品組合物中作為抗菌劑 的用途。然而，仍然需要開發(fā)新的成分，其使產(chǎn)生皮膚功能的健康和完整性成為可能。此外， 還需要開發(fā)新的成分以改善皮膚的外觀，特別是用于具有敏感性和應(yīng)激性皮膚的人群。
[0017] 本發(fā)明旨在提供一種具有天然來源優(yōu)勢且能夠保護(hù)皮膚共生微生物菌群的活性 劑。發(fā)明人已經(jīng)證明了本發(fā)明中所描述的亞麻子提取物的抗微生物活性。特別的是，已經(jīng) 證明，當(dāng)施用在皮膚上時，該亞麻子提取物對皮膚共生菌群具有很強(qiáng)的保護(hù)活性，以免經(jīng)由 引起皮膚應(yīng)激反應(yīng)的傳染原的攻擊。
[0018] 因此，能夠提高皮膚AMP的表達(dá)水平的新的活性成分使得考慮新的美容和治療視 角成為可能。
[0019] 根據(jù)第一個方面，本發(fā)明涉及作為活性抗微生物劑的亞麻子提取物。
[0020] 參考說明書會更好地理解本發(fā)明和因此所產(chǎn)生的益處。
[0021] 本發(fā)明通常涉及哺乳動物，更具體地涉及人類。
[0022] 術(shù)語"抗微生物"或"免于微生物侵襲的保護(hù)"涉及微生物的死亡、抑制它們的生 長或阻止它們的生長。"抑制病原微生物的生長"是指降低病原微生物的生長，例如降低菌 落數(shù)目和/或病原微生物菌落的大小，而術(shù)語"阻止微生物的生長"是指停止微生物生長。
[0023] "微生物（Microorganisms或microbes) "是指在古菌或細(xì)菌以及單細(xì)胞和絲狀真 菌（例如酵母菌）、單細(xì)胞或絲狀藻類、單細(xì)胞和多細(xì)胞寄生蟲和病毒的系統(tǒng)發(fā)育區(qū)域中發(fā) 現(xiàn)的任何有機(jī)體。
[0024] 根據(jù)具體的特征，本發(fā)明涉及用于保護(hù)皮膚和皮膚附件免于微生物侵襲的亞麻子 提取物。
[0025] 對具有化學(xué)屏障功能改變或局部免疫系統(tǒng)弱化的皮膚使用亞麻子提取物或包含 其的組合物使得皮膚和皮膚附件能夠受到保護(hù)，并且使更好地抵抗由致病微生物或機(jī)會微 生物的侵襲成為可能。
[0026] 根據(jù)具體的特征，本發(fā)明涉及亞麻子提取物，其用于提高抗微生物肽的表達(dá)水平。
[0027] 優(yōu)選地，本發(fā)明涉及亞麻子提取物，其用于提高防衛(wèi)素和/或抗菌肽的細(xì)胞表達(dá) 水平。
[0028] 根據(jù)具體的特征，本發(fā)明涉及亞麻子提取物，其用于刺激皮膚的免疫防御。
[0029] 根據(jù)具體的特征，本發(fā)明涉及亞麻子提取物，其用于治療皮膚和皮膚附件的金黃 色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)感染。
[0030] 本發(fā)明還涉及亞麻子提取物，其用于治療皮膚的特應(yīng)性皮炎和/或酒渣鼻。
[0031] 酒渣鼻是一種由細(xì)菌引起的皮膚病癥，其可能與致使皮膚保護(hù)系統(tǒng)易受攻擊的因 子相關(guān)。特應(yīng)性皮炎也是一種皮膚病癥，其中抗菌肽的表達(dá)被異常降低。
[0032] 有利地，本發(fā)明的亞麻子提取物使刺激皮膚細(xì)胞生成抗菌肽類型的AMP成為可 能，且不引起皮膚的毒性反應(yīng)或過敏反應(yīng)。
[0033] 根據(jù)第二個方面，本發(fā)明涉及亞麻子提取物用于增強(qiáng)皮膚和皮膚附件的化學(xué)屏障 功能的用途。
[0034] "增強(qiáng)化學(xué)屏障功能"意味著在健康皮膚和/或敏感皮膚上施用亞麻子提取物或包 含它的化妝品組合物使提高AMP的細(xì)胞表達(dá)水平成為可能。亞麻子提取物在表皮上具有局 部作用，并且使緩解皮膚刺激（如敏感皮膚的發(fā)紅或不適）成為可能。
[0035] 根據(jù)具體的特征，本發(fā)明涉及亞麻子提取物用于保護(hù)皮膚和皮膚附件的共生微生 物菌群和/或限制所述共生微生物菌群的失衡的用途。
[0036] 有利地，本發(fā)明的亞麻子提取物的美容用途使通過在表皮中局部刺激AMP的表達(dá) 而維持皮膚的良好化學(xué)屏障功能成為可能，這有助于維持皮膚的共生微生物區(qū)系的生態(tài)系 統(tǒng)的平衡和有利條件。
[0037] 本發(fā)明使用的亞麻子提取物可以是任何類型的亞麻子提取物。
[0038] 根據(jù)優(yōu)選的特征，亞麻子提取物來源于亞麻子蛋白質(zhì)的水解。
[0039] 更優(yōu)選地，所述亞麻子提取物包含按照干提取物的重量計至少0. l_5g/l的肽化 合物，按照干提取物的重量計〇. l_2g/l的糖，并基本上包含分子量低于5kDa(優(yōu)選分子量 低于2. 5kDa)的肽化合物。
[0040] 術(shù)語"肽"指通過肽鍵或通過修飾的肽鍵相互連接的兩個或更多個氨基酸的鏈；術(shù) 語"多肽"指具有較大尺寸的肽；術(shù)語"肽化合物"指存在于混合物中的蛋白質(zhì)片段、肽和游 離的氨基酸。
[0041] 術(shù)語"水解產(chǎn)物或來自水解"指在植物物質(zhì)水解之后獲得的任何物質(zhì)或物質(zhì)的混 合物、或分離的制劑。
[0042] 為