一種負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物納米技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]小檗堿又名黃連素，是廣泛存在于毛茛科等植物中的一種異喹啉生物堿。其在自然界中多以本身季銨鹽的形式存在。作為一種傳統(tǒng)中藥有效成分，臨床上一直作為清熱解毒以及抗感染藥物用于胃腸道感染的治療。近些年來(lái)，隨著對(duì)黃連素深入研宄，黃連素的其他臨床功效被廣泛報(bào)道，現(xiàn)有的研宄已經(jīng)證實(shí)其在神經(jīng)官能癥，心血管疾病以及糖尿病有很好的臨床治療效果。除此之外，黃連素與其他商品化的藥物聯(lián)用進(jìn)行治療心律失常、糖尿病、胃腸炎、高血脂等疾病有很好的協(xié)同作用。在增加藥效的同時(shí)還能明顯的降低毒副作用，減少藥物的不適反應(yīng)。
[0003]然而，黃連素水中溶解度低脂溶性差，以至于在胃腸道中很難被充分吸收，在人體中商品化的口服黃連素片劑的生物利用度很低，這大大限制了其在臨床上的廣泛應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒的制備方法。
[0005]本發(fā)明的具體技術(shù)方案如下:
[0006]一種負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒的制備方法，包括如下步驟:
[0007](I)將大豆卵磷脂溶解于二氯甲烷中，制得濃度為I?12mg/mL的大豆卵磷脂溶液；
[0008](2)將黃連素溶解于熱乙醇中，制得濃度為I?8mg/mL的黃連素乙醇溶液；
[0009](3)將上述黃連素乙醇溶液加入到上述大豆卵磷脂溶液中，進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到磷脂單層膜，其中黃連素與大豆卵磷脂的質(zhì)量比為1:2?8 ;
[0010](4)將上述磷脂單層膜用非質(zhì)子性反應(yīng)試劑復(fù)溶，再加入超純水進(jìn)行二次旋蒸，得到納米微粒懸浮液，非質(zhì)子性反應(yīng)試劑與超純水的體積比為I?30:1?30 ;
[0011 ] (5)將噴霧干燥保護(hù)劑加入到上述納米微粒懸浮液中，得原始藥液，噴霧干燥保護(hù)劑在納米微粒懸浮液中的濃度為I?10% ;
[0012](6)將上述原始藥液在一定壓力下通過單線微射流霧化器(為CN 202823728U所公開)霧化，進(jìn)入噴霧干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于O?4°C儲(chǔ)存，即得所述負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒，其粒徑為10nm?200nm，其中單線微射流霧化器的參數(shù)為:進(jìn)樣流量2.5?6.5g/mL，共振頻率16?18kHz，噴嘴大小為80?100 μ m。
[0013]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述步驟(I)為:將大豆卵磷脂溶解于二氯甲烷中，制得濃度為I?10mg/mL的大豆卵磷脂溶液。
[0014]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述步驟(2)為:將黃連素溶解于熱乙醇中，制得濃度為I?6mg/mL的黃連素乙醇溶液。
[0015]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述步驟(3)為:將上述黃連素乙醇溶液趁熱迅速加入到上述大豆卵磷脂溶液中，進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到磷脂單層膜，其中黃連素與大豆卵磷脂的質(zhì)量比為1:2?6。
[0016]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述步驟(4)為:將上述磷脂單層膜用非質(zhì)子性反應(yīng)試劑復(fù)溶，再加入超純水進(jìn)行二次旋蒸，得到納米微粒懸浮液，非質(zhì)子性反應(yīng)試劑與超純水的體積比為15?30:10?25。
[0017]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述步驟(5)為:將噴霧干燥保護(hù)劑加入到上述納米微粒懸浮液中，得原始藥液，噴霧干燥保護(hù)劑在納米微粒懸浮液中的濃度為1.5?6%。
[0018]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述步驟￠)中所述噴霧干燥塔的噴嘴距離塔底的高度為3?4m。
[0019]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述噴霧干燥保護(hù)劑為甘露糖。
[0020]在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述非質(zhì)子性反應(yīng)試劑為乙醇、甲醇、乙腈、甲醇-二氯甲烷混合有機(jī)溶液、乙醇-丙酮混合有機(jī)溶液、乙醇乙腈混合有機(jī)溶液、甲醇-丙酮混合有機(jī)溶劑。
[0021]本發(fā)明的有益效果是:
[0022]1、本發(fā)明制備的納米微粒所攜帶得黃連素的復(fù)合分子在水中分散時(shí)，復(fù)合分子有序排列成外觀類似于脂質(zhì)體的多層囊，該納米微粒能顯著的增加藥物脂溶性，明顯的提高口服藥物的生物利用度。
[0023]2、本發(fā)明將原始藥液在一定壓力下通過單線微射流霧化器霧化，進(jìn)入噴霧干燥塔中干燥，得所述納米微粒，包封率在85 %以上，粒徑均一，復(fù)溶于水后粒徑變化不大，黃連素體外釋放未受影響，長(zhǎng)期儲(chǔ)存穩(wěn)定性好。
【附圖說明】
[0024]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1所制得的負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒的透射顯微鏡表征圖。
[0025]圖2為本發(fā)明實(shí)施例1所制得的負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒的粒徑表征圖。
[0026]圖3為本發(fā)明實(shí)施例6制得的的負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒的掃描顯微鏡表征圖。
[0027]圖4為本發(fā)明實(shí)施例6制得的的負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒的復(fù)溶后的體外釋放和新制的體外釋放對(duì)比圖。
[0028]圖5為本發(fā)明實(shí)施例6所制得的負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒復(fù)溶于水后得到的納米粒透射電鏡圖。
【具體實(shí)施方式】
[0029]以下通過【具體實(shí)施方式】結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行進(jìn)一步的說明和描述。
[0030]下述實(shí)施例制備的負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒的包封率在85%以上，粒徑均一，復(fù)溶于水后粒徑變化不大，黃連素體外釋放未受影響，長(zhǎng)期儲(chǔ)存穩(wěn)定性好。
[0031]實(shí)施例1
[0032](I)將大豆卵磷脂溶解于二氯甲烷中，制得濃度為I?10mg/mL的大豆卵磷脂溶液；
[0033](2)將黃連素溶解于熱乙醇中，制得濃度為I?6mg/mL的黃連素乙醇溶液；
[0034](3)將上述黃連素乙醇溶液趁熱迅速加入到上述大豆卵磷脂溶液中，進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到磷脂單層膜，其中黃連素與大豆卵磷脂的質(zhì)量比為1:2?6 ;
[0035](4)將上述磷脂單層膜用30mL乙醇復(fù)溶，再加入15mL超純水進(jìn)行二次旋蒸15min，得到納米微粒懸浮液；
[0036](5)將甘露糖加入到上述納米微粒懸浮液中，得原始藥液，噴霧干燥保護(hù)劑在納米微粒懸浮液中的濃度為2.5% ;
[0037](6)將上述原始藥液在一定壓力下通過單線微射流霧化器霧化(為CN202823728U所公開，進(jìn)樣流量:5.5g/min、共振頻率:16kHz、噴嘴大小:100 μ m)，進(jìn)入噴霧干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C儲(chǔ)存，即得所述負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒，其粒徑為10nm?200nm，將制得的納米微粒復(fù)溶于水后，所得到的溶液用動(dòng)態(tài)光散射測(cè)定后與干燥后的粒徑比值為?1.6，透射顯微鏡表征圖和粒徑表征圖分別如圖1和圖2所示。
[0038]實(shí)施例2
[0039](I)?(3)同實(shí)施例1 ;
[0040](4)將上述磷脂單層膜用20mL乙醇復(fù)溶，再加入1mL超純水進(jìn)行二次旋蒸15min，得到納米微粒懸浮液；
[0041 ] (5)將甘露糖加入到上述納米微粒懸浮液中，得原始藥液，噴霧干燥保護(hù)劑在納米微粒懸浮液中的濃度為3.5% ;
[0042](6)將上述原始藥液在一定壓力下通過單線微射流霧化器霧化(進(jìn)樣流量:6g/min、共振頻率:16kHz、噴嘴大小:100 μ m)，進(jìn)入噴霧干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C儲(chǔ)存，即得所述負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒，其粒徑為10nm?200nm，將制得的納米微粒復(fù)溶于水后，所得到的溶液用動(dòng)態(tài)光散射測(cè)定后與干燥后的粒徑比值為?1.5。
[0043]實(shí)施例3
[0044](I)?(3)同實(shí)施例1 ;
[0045](4)將上述磷脂單層膜用25mL乙醇復(fù)溶，再加入1mL超純水進(jìn)行二次旋蒸15min，得到納米微粒懸浮液；
[0046](5)將甘露糖加入到上述納米微粒懸浮液中，得原始藥液，噴霧干燥保護(hù)劑在納米微粒懸浮液中的濃度為4% ；
[0047](6)將上述原始藥液在一定壓力下通過單線微射流霧化器霧化(進(jìn)樣流量:5g/min、共振頻率:16kHz、噴嘴大小:100 μ m)，進(jìn)入噴霧干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C儲(chǔ)存，即得所述負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒，其粒徑為10nm?200nm，將制得的納米微粒復(fù)溶于水后，所得到的溶液用動(dòng)態(tài)光散射測(cè)定后與干燥后的粒徑比值為?1.3。
[0048]實(shí)施例4
[0049](I)?(3)同實(shí)施例1 ;
[0050](4)將上述磷脂單層膜用20mL乙醇-丙酮混合有機(jī)溶劑復(fù)溶，再加入12mL超純水進(jìn)行二次旋蒸15min，得到納米微粒懸浮液；
[0051](5)將甘露糖加入到上述納米微粒懸浮液中，得原始藥液，噴霧干燥保護(hù)劑在納米微粒懸浮液中的濃度為5% ；
[0052](6)將上述原始藥液在一定壓力下通過單線微射流霧化器霧化(進(jìn)樣流量:2.5g/min、共振頻率:16kHz、噴嘴大小:100 μ m)，進(jìn)入噴霧干燥塔中干燥，收集塔底的粉末于4°C儲(chǔ)存，即得所述負(fù)載黃連素磷脂復(fù)合納米微粒，其粒徑為10nm?200nm，將制得的納米微粒復(fù)溶于水后，所得到的溶液用動(dòng)態(tài)光散射測(cè)定后與干燥后的粒徑比值為?1.1o
[0053]實(shí)施例5
[0054](I)?(3)同實(shí)施例1 ;
[0055](4)將上述磷脂單層膜用15mL乙醇-乙腈混合有機(jī)溶劑復(fù)溶，再加入15mL超純水進(jìn)行二次旋蒸15min，得到納米微粒懸浮液；
[0056](5)將甘露糖加入到上述納米微粒懸浮液中，得原始藥液，噴霧干燥保護(hù)劑在納米微粒懸浮液中的濃度為1.5% ;
[0057](6)將上述原始藥液在一定壓力下通過單線微射