一種黃精中多種活性成分提取分離的方法
【專利說明】一種黃精中多種活性成分提取分離的方法
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明屬于黃精的提取方法，特別屬于提取黃精總皂苷、黃精總黃酮和黃精多糖的方法。
【背景技術(shù)】
[0003]黃精是百合科黃精屬(PolygonatumMi 11.)宿根性草本植物，別名黃雞萊、狗姜等。近年來，國內(nèi)外對黃精屬植物的研宄不斷深入，已從該屬植物中分離得到多糖、皂苷、黃酮等多種活性成分。已有研宄表明黃精多糖具有增強(qiáng)免疫功能、抗腫瘤、抗輻射、增強(qiáng)記憶力、抗疲勞等作用；黃精皂苷的生物活性研宄多集中在降血糖、抗腫瘤、抗HIV等方面；而黃精黃酮也具有較廣泛的生物活性，包括消除疲勞、保護(hù)血管、防止動脈粥樣硬化、降血糖、降血脂、擴(kuò)張毛細(xì)血管、抗衰老、抗菌及活化大腦等功能。因此提取分離黃精中的多糖、留體皂苷和黃酮等活性成分具有重要的社會和經(jīng)濟(jì)價值。
[0004]黃精多糖的獲得主要包括脫脂?醇析?脫蛋白?透析?干燥等環(huán)節(jié)，在提取工藝上，目前主要有水提法、弱酸提取法、弱堿提取法、酶提法、超聲輔助提取法、微波輔助提取法及超臨界流體萃取法等。上述黃精多糖提取過程存在時間長、成本高、過程復(fù)雜、多糖純度低等方面的不足。中國專利CN 103788224公開的一種從中藥黃精中提取黃精多糖的方法采用微波輔助抽提?濃縮?超聲振蕩?去蛋白?過柱的工藝路線，經(jīng)過反復(fù)分離純化獲得黃精多糖，此工藝存在過程復(fù)雜、工藝時間較長、有機(jī)溶劑耗量大等方面的缺點(diǎn)。
[0005]黃精總皂苷的獲得主要包括提取?分離?純化等環(huán)節(jié)，在提取工藝上，目前主要有加熱回流法、索氏提取法、超聲波法、微波法等。CN 101837091專利公開的?種連續(xù)提取黃精皂甙和黃精多糖的工藝采用浸泡提取?萃取?上柱的工藝路線，按文獻(xiàn)所說黃精皂苷收率為黃精總重的3.9%，為黃精總皂苷的90.7%，純度為95.3%，但是本工藝中所用有機(jī)溶媒用量大、工藝時間長等缺點(diǎn)。
[0006]黃精黃酮的獲得主要包括提取?分離?純化等3個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，在提取工藝上，目前主要有浸提法、索式法、微波法、回流法等。王文君等公開發(fā)表了黃精黃酮提取方法，其采用脫脂?超聲輔助提取?脫色?干燥工藝路線，工藝過程復(fù)雜，所需有機(jī)溶劑量大，時間長，同時提取率偏低。
[0007]近年來，閃式提取技術(shù)逐漸被用于中藥材活性成分的提取，可大大減少提取時間，提高其中活性成分的得率。因?yàn)殚W式提取器在工作時，內(nèi)刃高速轉(zhuǎn)動并與外刃發(fā)生切割作用過程中，會在內(nèi)刃中心形成強(qiáng)力渦流，并帶動已粉碎的物料內(nèi)外翻動，從而產(chǎn)生劇烈攪拌作用，物料中被提取的物質(zhì)分子隨著破碎顆粒的變小而暴露于溶劑環(huán)境中并迅速轉(zhuǎn)移至溶劑中，提取溶劑與物料顆粒間化學(xué)成分的分布隨破碎的進(jìn)行在平衡與不平衡之間快速交替進(jìn)行，最終達(dá)到徹底粉碎，完全平衡的提取，進(jìn)而溢出有效含量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明所解決的問題是提供一種以黃精生藥為原料，提取工藝簡單、時間短，又能得到高純度黃精多糖、黃精皂苷、黃精黃酮的提取方法。
[0009]本發(fā)明解決問題的技術(shù)方案依次包括提取黃精總皂苷的方法、提取黃精總黃酮的方法、提取黃精多糖的方法。
[0010]一種黃精中多種活性成分提取分離的方法，包括如下步驟:
(1)黃精皂苷的提取分離
將生黃精藥材粉末與乙醇混合，用閃式提取技術(shù)提取，抽濾，得到黃精總皂苷提取液和黃精藥渣；將黃精總皂苷提取液中的乙醇用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行回收，得黃精總皂苷粗產(chǎn)品；將黃精總皂苷粗產(chǎn)品用蒸餾水稀釋，加至準(zhǔn)備好的大孔樹脂進(jìn)行吸附，先用蒸餾水進(jìn)行洗脫，洗脫至流出液不顯Molish反應(yīng)為止，再用乙醇進(jìn)行洗脫，直至洗脫液無皂苷視為洗脫完全，揮干乙醇后真空冷凍干燥至恒重，得到黃精皂苷成品；
(2)黃精黃酮的提取分離
將生黃精藥材粉末與乙醇?鹽酸溶液混合，用閃式提取技術(shù)提取，抽濾，得到黃精黃酮提取液和黃精藥渣；將黃精黃酮提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器將乙醇進(jìn)行回收，得黃精黃酮粗產(chǎn)品；將黃精黃酮粗產(chǎn)品用蒸餾水稀釋，加至準(zhǔn)備好的大孔樹脂進(jìn)行吸附，先用蒸餾水進(jìn)行洗脫，洗脫至流出液不顯Molish反應(yīng)為止，再用乙醇進(jìn)行洗脫，直至洗脫液無黃酮視為洗脫完全，揮干乙醇后真空冷凍干燥至恒重，得到黃精黃酮成品；
(3)黃精多糖的提取分離
合并上述(1)、(2)中黃精藥渣，并添加蒸餾水混合，用閃式提取技術(shù)提取，抽濾，得到多糖提取液；將多糖提取液加至準(zhǔn)備好的大孔樹脂進(jìn)行吸附，并用蒸餾水進(jìn)行洗脫，直至洗脫液無多糖視為洗脫完全；將洗脫液經(jīng)噴霧干燥得到黃精多糖。
[0011]上述黃精中多種活性成分提取分離的方法，優(yōu)選的步驟和條件如下:
(1)黃精皂苷的提取分離
a.將黃精粉末與50%?80%的乙醇混合(體積百分比)，用閃式提取器提取0.5?1.5min，抽濾，得到黃精提取液和黃精藥渣；所述黃精粉末與所述乙醇的比為1:10?20(克/升);
b.將黃精提取液中的乙醇用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行回收，得乙醇提取物；將乙醇提取物用石油醚萃取脫脂；將脫脂后的提取物用水飽和正丁醇進(jìn)行多次萃取，合并正丁醇提取液，回收正丁醇后得黃精總皂苷粗產(chǎn)品；
c.將黃精粗總皂苷用蒸餾水溶解至濃度為0.8?lmg/ml，加至準(zhǔn)備好的大孔樹脂進(jìn)行吸附，先用蒸餾水進(jìn)行洗脫，洗脫至流出液不顯Molish反應(yīng)為止，再用體積濃度為70%?80%的乙醇(體積百分比)，進(jìn)行洗脫，直至洗脫液無皂苷視為洗脫完全，揮干乙醇后真空冷凍干燥至恒重，得到黃精皂苷成品；
(2)提取分離黃精黃酮
a.將黃精粉末與80%?90%的乙醇(體積百分比)混合，用閃式提取器提取0.5?
1.5min，抽濾，得到黃精提取液和黃精藥渣；
b.將黃精提取液中的乙醇溶液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行回收，得乙醇溶液提取物；將乙醇溶液提取物用石油醚萃取脫脂；將脫脂后的提取物用水飽和正丁醇進(jìn)行多次萃取，合并正丁醇提取液，回收正丁醇后得黃精總黃酮粗產(chǎn)品；
C.將黃精粗總黃酮產(chǎn)品用蒸餾水稀釋至濃度為0.8?lmg/ml加至準(zhǔn)備好的大孔樹脂進(jìn)行吸附，先用蒸餾水進(jìn)行洗脫，洗脫至流出液不顯Molish反應(yīng)為止，再用體積濃度為80%?90%的乙醇(體積百分比)，進(jìn)行洗脫，直至洗脫液無皂苷視為洗脫完全，揮干乙醇后真空冷凍干燥至恒重，得到黃精黃酮成品成品；
(3)提取分離黃精多糖
a.合并上述黃精藥渣，并蒸餾水混合，用閃式提取器提取0.5?1.5min，抽濾得多糖提取液；所述黃精藥渣為步驟(I) a和步驟(2) a所得；所述黃精藥渣與蒸餾水質(zhì)量比1:10?12(w/w)；
b.將多糖提取液加至準(zhǔn)備好的大孔樹脂進(jìn)行吸附，并用蒸餾水進(jìn)行洗脫，直至洗脫液無多糖視為洗脫完全；將洗脫液經(jīng)噴霧干燥得到黃精多糖。
[0012]與現(xiàn)有的技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果表現(xiàn)在:
1.本發(fā)明應(yīng)用閃提技術(shù)提取黃精中多種活性成分，使提取時間縮短至0.5?1.5min，且全過程均在常溫下下進(jìn)行，有效避免了黃精中總皂苷、總黃酮及多糖活性在高溫下受到的破壞；
2、本發(fā)明方法實(shí)現(xiàn)了黃精中多種活性成分快速高效的提取，其中，黃精總皂苷收率為黃精總重量的4.95%，純度為89.49% ;黃精黃酮的收率為黃精重量的1.97%，純度為82.81% ；黃精多糖的收率為黃精重量的28.37%，純度為88.76% ;不僅充分利用了黃精資源，提高了原材料的使用價值，而且本技術(shù)在提取總皂苷和總黃酮的同時，并不影響多糖的提取，回收率高，低污染(所有有機(jī)溶劑均可重新回收)、操作簡單等特點(diǎn)。
[0013]3、本發(fā)明方法所使用的有機(jī)溶劑毒性較小，易于回收；且本方法具有工序少、設(shè)備簡單、操作方便、可行性好、生產(chǎn)成本低廉等特點(diǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0014]下面結(jié)合實(shí)施例對發(fā)明作詳細(xì)的說明。下述乙醇的百分比為體積百分比。
[0015](一)黃精皂苷的提取分離:
實(shí)施例1:
精密稱取4克生黃精藥材粉末與40ml50%的乙醇混合，用閃式提取技術(shù)提取0.5min，抽濾，得到黃精總皂苷提取液和黃精藥渣；將黃精總皂苷提取液中的乙醇用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行回收，得黃精總皂苷粗產(chǎn)品；將黃精總皂苷粗產(chǎn)品用蒸餾水稀釋至濃度0.8mg/ml，加至準(zhǔn)備好的大孔樹脂進(jìn)行吸附，先用蒸餾水進(jìn)行洗脫，洗脫至流出液不顯Molish反應(yīng)為止，再用體積濃度為70%的乙醇，進(jìn)行洗脫，直至洗脫液無皂苷視為洗脫完全，揮干乙醇后真空冷凍干燥至恒重，得到黃精皂苷成品；所得黃精皂苷的收率為6.85%，純度為81.21%。
[0016]實(shí)施例2:
精密稱取4克生