恩他卡朋在預(yù)防或治療肥胖等代謝綜合征中的應(yīng)用
【專(zhuān)利說(shuō)明】恩他卡朋在預(yù)防或治療肥胖等代謝綜合征中的應(yīng)用
[0001] 發(fā)明人：黃牛、智剛、柴繼杰、彭士明、侯楠楠（中國(guó)北京）
[0002] 受讓人：北京生命科學(xué)研宄所
【背景技術(shù)】
[0003] 世界范圍內(nèi)，肥胖癥已經(jīng)成為了人類(lèi)健康的嚴(yán)重威脅。導(dǎo)致肥胖癥，這一慢性疾病 的因素包括環(huán)境因素和遺傳因素。最近，人們利用全基因組關(guān)聯(lián)研宄（GWAS，genome-wide associationstudies)方法發(fā)現(xiàn)單一基因FTO(fatmassandobesity)基因與肥胖表型顯 著相關(guān)。1_4而且，F(xiàn)T0基因與肥胖的關(guān)系在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型上（FT0基因敲除小鼠，F(xiàn)T0基 因過(guò)表達(dá)小鼠和FT0-I367F突變小鼠）得到了進(jìn)一步的驗(yàn)證。5_8具體來(lái)說(shuō)，F(xiàn)T0基因全身 敲除和神經(jīng)細(xì)胞特異敲除的小鼠與野生型相比體重明顯偏低5'而FT0基因過(guò)表達(dá)的小鼠 則會(huì)導(dǎo)致肥胖8。一個(gè)FT0基因的錯(cuò)義突變（I367F)會(huì)導(dǎo)致FT0蛋白的酶活性降低，從而導(dǎo) 致小鼠體重偏低。VT0基因在機(jī)體內(nèi)多個(gè)組織中都有表達(dá)，特別是下丘腦中控制能量代謝 的核團(tuán)9,這一結(jié)果支持了FT0影響機(jī)體能量代謝的觀點(diǎn)。6
[0004] FT0蛋白是a-酮戊二酸和亞鐵離子依賴(lài)的核酸去甲基化酶。9'1(|它首選的底物是 信使核糖核酸（mRNA)上的N6-meA，這一修飾化的堿基多分布于信使核糖核酸終止密碼子附 近，影響著信使核糖核酸的翻譯過(guò)程。n'12然而，目前人們對(duì)于FT0蛋白的作用機(jī)理仍不清 楚，特別是FT0蛋白的上游下游作用元件和調(diào)控機(jī)制尚未報(bào)道。所以亟需發(fā)現(xiàn)類(lèi)藥性的FT0 小分子抑制劑，利用其來(lái)研宄FT0蛋白的功能，和開(kāi)發(fā)全新的治療或預(yù)防肥胖疾病的藥物。
[0005] 現(xiàn)有的已被批準(zhǔn)可供病人使用的藥物有著明確的安全評(píng)價(jià)，所以人們可以快速評(píng) 價(jià)這些藥物對(duì)于感興趣的生物學(xué)靶點(diǎn)是否有新的治療用途。在此，我們通過(guò)基于結(jié)構(gòu)的虛 擬篩選方法，發(fā)現(xiàn)了一個(gè)已知的美國(guó)FDA批準(zhǔn)的藥物一一恩他卡朋作為FT0蛋白的抑制劑， 并通過(guò)體外酶活實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖動(dòng)物模型檢測(cè)了恩他卡朋的生物學(xué) 活性。

【發(fā)明內(nèi)容】
[0006] 概述
[0007] 本發(fā)明提供了用于抑制體重增長(zhǎng)的方法和組合物，所述的方法同時(shí)也適用于促進(jìn) 體重減輕，降低血清低密度脂蛋白、膽固醇、低密度脂蛋白-膽固醇、和/或甘油三酯，和/ 或治療肥胖相關(guān)或代謝類(lèi)疾病，或改善或減輕與肥胖相關(guān)或代謝類(lèi)疾病的病理或嚴(yán)重性或 一種肥胖相關(guān)或代謝類(lèi)疾病的癥狀，這些肥胖相關(guān)或代謝類(lèi)疾病選自糖尿病、高血糖癥、糖 尿病性腎病、高血脂、冠狀動(dòng)脈心臟病、動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、心血管或腦血管疾病，或肝、 腎或甲狀腺疾病。
[0008] 一方面，本發(fā)明提供了抑制體重增加，促進(jìn)體重減輕，降低血清低密度脂蛋白、膽 固醇、低密度脂蛋白-膽固醇、和/或甘油三酯，或治療動(dòng)脈粥樣硬化的方法，該方法包括 給予需要治療的患者有效劑量的恩他卡朋（(2E) -2-氰基-3- (3, 4-二羥基-5-硝基苯 基）-N,N-二乙基 _2_ 丙稀酰胺），英文名稱(chēng)（2E) -2_cyan〇-3- (3, 4-dihydroxy-5_nitrophe nyl) -N,N-diethylprop-2-enamide，或其制藥學(xué)上可接受的鹽。
[0009] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了抑制體重增加的方法，該方法包括給予需要治療的 患者有效劑量的恩他卡朋與一種或多種不同的藥物的聯(lián)用，來(lái)抑制體重增加、促進(jìn)體重減 輕、降低血清低密度脂蛋白、膽固醇、低密度脂蛋白-膽固醇或甘油三酯，或治療動(dòng)脈粥樣 硬化。
[0010] 在具體實(shí)施方案中，患者符合一個(gè)或多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，例如（a)未被診斷為帕金森氏 ??；(b)年齡小于50,40或30歲；（c)為肥胖或體重超重；（d)患有或被診斷患有以下 肥胖相關(guān)疾病，包括糖尿病、高血糖癥、糖尿病性腎病、高血脂癥、冠狀動(dòng)脈心臟疾病、動(dòng) 脈粥樣硬化、高血壓、心血管或腦血管疾病，或肝，腎或甲狀腺疾?。唬╡)具有基因型：SNP rs7202116(G)，rsl421085(C)，或rs9939609(A);和 / 或（f)病理性表達(dá)或過(guò)表達(dá)FT0 或 Fto〇
[0011] 在具體的實(shí)施方案，該方法進(jìn)一步包括檢測(cè)患者是否滿足一種或多種的指標(biāo)，特 別是基因型的SNPrs7202116(G)，或過(guò)表達(dá)FT0或Fto。
[0012] 在具體的實(shí)施方案，該方法進(jìn)一步包括評(píng)價(jià)抑制體重增加結(jié)果、促進(jìn)體重減輕，和 /或改進(jìn)或改善一種或多種所適用的指標(biāo)。
[0013] 在具體的實(shí)施方案中，該方法進(jìn)一步包括給予需要治療的患者有效劑量的其他一 種或多種不同的藥物用于抑制體重增加、促進(jìn)體重減輕、降低血清低密度脂蛋白、膽固醇、 低密度脂蛋白-膽固醇、或甘油三酯，或治療動(dòng)脈粥樣硬化，具體而言，其特征在于，恩他卡 朋和其他的藥物的共同包裝、共同制劑或共同給藥。
[0014] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，包括恩他卡朋與一種或多種其它 不同的抑制體重增加、促進(jìn)體重減輕、降低血清低密度脂蛋白、膽固醇、低密度脂蛋白-膽 固醇、或甘油三酯，或治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物共同包裝或共同制劑。
[0015] 在具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法和藥物組合物中涉及的恩他卡朋的劑量為 0. 25-5克，或克/天，或0. 5-5克，或克/天。
[0016] 本發(fā)明包括所有本文列舉的具體實(shí)施方案的組合。
【附圖說(shuō)明】
[0017]圖1，恩他卡朋的化學(xué)結(jié)構(gòu)
[0018] 圖2,在去甲基酶活實(shí)驗(yàn)中，恩他卡朋對(duì)FT0蛋白的劑量依賴(lài)性抑制
[0019] 圖3,恩他卡朋對(duì)Huh-7細(xì)胞甘油三酯合成的劑量依賴(lài)性抑制。X-軸是化合物濃 度，Y-軸是用染色方法測(cè)量的甘油三酯的濃度。
[0020] 圖4,恩他卡朋對(duì)大鼠體重的影響（*p-value〈0. 05)
[0021] 圖5,恩他卡朋對(duì)大鼠進(jìn)食量的影響
[0022] 圖6,恩他卡朋對(duì)大鼠血清低密度脂蛋白-膽固醇的影響〇**p-value〈0. 005)
[0023] 圖7,恩他卡朋對(duì)大鼠脂肪組織和肝臟組織的影響
[0024] 圖8,恩他卡朋對(duì)低密度脂蛋白受體缺失小鼠的抗動(dòng)脈粥樣硬化的效果。a和b，對(duì) 照組和給藥組小鼠主動(dòng)脈弓斑塊油紅染色面積。c，兩組主動(dòng)脈弓斑塊面積定量統(tǒng)計(jì)分析
[0025] 圖9,恩他卡朋對(duì)肥胖小鼠的體重的影響（*p-value〈0. 05)
[0026] 本發(fā)明的具體實(shí)施方案的描述
[0027] 在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了抑制體重增加或促進(jìn)體重減輕的方法，包括給予需要 治療的患者有效劑量的恩他卡朋（(2E) -2-氰基-3- (3, 4-二羥基-5-硝基苯基）-N，N-二 乙基-2-丙烯酰胺），或一個(gè)制藥學(xué)上可接受的鹽，以及包括立體異構(gòu)體，特別是E-Z異構(gòu) 體，包括多晶型，特別是E異構(gòu)體的A晶型（如US5135950)。
[0028] 本發(fā)明的方法和組合物也適用于相關(guān)的適應(yīng)癥：促進(jìn)體重減輕，降低血清低密度 脂蛋白、膽固醇、低密度脂蛋白-膽固醇、和/或甘油三酯，和/或治療肥胖相關(guān)疾病或改善 或減輕與肥胖相關(guān)疾病的病理、嚴(yán)重程度或癥狀，所述疾病選自糖尿病、高血糖癥、糖尿病 性腎病、高血脂、冠狀動(dòng)脈心臟病、動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、心血管或腦血管疾病，或肝、腎或 甲狀腺疾病。因此，本發(fā)明提供了恩他卡朋與一種或多種不同的用于治療相關(guān)適應(yīng)癥的藥 物的共同包裝、共同制劑或共同給藥的方法和組合物。本發(fā)明進(jìn)一步包括檢測(cè)，確定或診斷 檢測(cè)患者是否滿足一種或多種的適用的指標(biāo)，和/或檢測(cè)導(dǎo)致的患者相應(yīng)條件或癥狀的改 進(jìn)或改善。
[0029] 在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抑制體重增加的方法，包括給予需要治療的患者 有效劑量的恩他卡朋，和一種或多種其它不同的抑制體重增加、促進(jìn)體重減輕、降低血清低 密度脂蛋白、膽固醇、低密度脂蛋白-膽固醇、和/或甘油三酯，或治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物 聯(lián)用，具體而言，其特征在于，恩他卡朋和這些藥物的共同包裝、共同制劑或共同給藥。
[0030] 優(yōu)選的治療這些適應(yīng)癥的其它不同的藥物，包括其它不同的抑制體重增加的藥 物，特別是食物攝取抑制劑和/或食物吸收抑制劑；特別是奧利司他，西布曲明，氯卡色林， 利莫那班，二甲雙胍，艾塞那肽，普蘭林肽，或其制藥學(xué)上可接受的鹽，以及降低膽固醇的藥 物，如他汀類(lèi)藥物，包括阿托伐他?。⑵胀祝ニ。▉?lái)適可），洛伐他?。澜抵?普伐他?。ㄆ绽蹋鹗娣ニ。啥ǎ?，辛伐他?。ㄊ娼抵蚱渲扑帉W(xué)上可接受的鹽。
[0031] 在具體實(shí)施方案中，患者符合一種或多種非帕金森病的指標(biāo)，并且該方法可以進(jìn) 一步包括檢測(cè)