黃刺果實多糖改善脂代謝紊亂的用圖
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于保健品領域，具體涉及黃刺果實多糖在制備改善脂代謝紊亂的藥物中 的用途。 技術背景
[0002] 脂質的代謝包括脂類在小腸內消化、吸收，由淋巴系統(tǒng)進入血循環(huán)（通過脂蛋白 轉運），經肝臟轉化，儲存于脂肪組織，需要時被組織利用。脂質在體內的主要功用是氧化供 能，脂肪組織是機體的能量倉庫，脂肪也能協同皮膚、骨骼、肌肉保護內臟，防止體溫散發(fā)和 幫助食物中脂溶性維生素的吸收。磷脂是所有細胞膜的重要結構成分，膽固醇是膽酸和類 固醇激素（腎上腺皮質激素和性腺激素）的前體。脂類代謝受遺傳、神經體液、激素、酶以 及肝臟等組織器官的調節(jié)。當這些因素有異常時，可造成脂代謝紊亂（也稱為脂質代謝紊 亂）和有關器官的病理生理變化，如高脂蛋白血癥、脂質貯積病及其造成的臨床綜合征、肥 胖癥、酮癥酸中毒、脂肪肝和新生兒硬腫癥等。
[0003]黃刺，小檗科植物直穗小檗BerberisdasystachyaMaxim?，是與白刺、沙棘（黑 刺）一樣為蒙、藏、維吾爾等少數民族藥用與食用的傳統(tǒng)野生漿果，統(tǒng)稱為"青海三刺"?！肚?海常用中草藥手冊》中對黃刺皮（即根皮）有詳細記載：黃刺皮即為雙子葉植物藥小檗科 植物直穗小檗的莖皮。其果實醫(yī)藥功能也做了簡要的記述，其具有治療腹痛，消化不良，腹 脹，痢疾等功能。
[0004] 目前還未見對黃刺果實多糖改善脂質異常的報道。

【發(fā)明內容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供黃刺果實多糖的新用途。
[0006] 具體地，本發(fā)明提供了黃刺果實多糖在制備改善脂代謝紊亂的藥物、保健品或食 品中的用途。
[0007]進一步地，所述藥物、保健品或食品是改善糖尿病患者脂代謝紊亂的藥物、保健品 或食品，即可用于治療糖尿病合并高脂血癥。
[0008] 其中，所述改善脂代謝紊亂是指降低糖尿病患者膽固醇、甘油三脂或/和低密度 脂蛋白，升尚尚密度脂蛋白。
[0009] 其中，所述糖尿病為I型或II型糖尿病。
[0010] 進一步地，所述糖尿病患者為肝功能正常或受損的患者。本發(fā)明研宄發(fā)現，與格列 本脲等化藥不同的是，黃刺果實多糖對肝功能無損害，因此，可以將黃刺果實多糖用于肝功 能受損患者的治療。
[0011] 其中，所述藥物、保健品或食品為口服劑型；進一步地，所述口服劑型選自片劑、膠 囊劑、丸劑、顆粒劑、散劑、浸膏劑或口服液。
[0012] 本發(fā)明所述的黃刺果實多糖，為小檗科植物直穗小檗Berberisdasystachya Maxim.果實的提取物，提取物中多糖為主要成分。本發(fā)明【具體實施方式】中測定表明，提取物 中多糖含量為93±2% w/w，該多糖純度較高，用此純度下的多糖進行生物活性實驗，其結 果能夠真實的反映出黃刺果實多糖的生物活性，有效地避免了其他成分對多糖活性測定的 干擾。在已知多糖生物活性的基礎上，即便是降低多糖在提取物中的含量，只要適當調節(jié)提 取物用量，使得多糖達到相應的起效濃度，同樣能夠發(fā)揮出相同或相似的生物活性。因此， 本發(fā)明限定，提取物中多糖含量應為60~95% w/w。
[0013] 進一步地，提取物中多糖含量為80~95% w/w，更進一步為90~95% w/w。
[0014] 其中，所述黃刺果實多糖采用水提醇沉法制備得到。
[0015] 進一步地，醇沉步驟中，乙醇終濃度達到60~85% v/v即可，更進一步為70~ 80% v/v，優(yōu)選為 75±2% v/v。
[0016] 進一步地，所述水提醇沉法具體操作如下：將黃刺果實脫脂、去單糖后，加水提取， 水提液脫色、除蛋白、透析除小分子后，加入乙醇至含醇量達到60~85% v/v，靜置，待沉淀 完全，取沉淀，干燥，即得到黃刺果實多糖。
[0017] 更進一步地，透析除去的小分子分子量在3500Da以下。
[0018] 更進一步地，脫脂具體操作如下：將黃刺果實粉碎后，過篩，采用石油醚或乙醚為 提取溶劑，提取后的殘渣過濾，揮干溶劑，得已脫脂黃刺果實殘渣。
[0019] 更進一步地，去單糖的具體操作如下：所得已脫脂黃刺果實殘渣，以70~85% v/ V乙醇提取，提取后的殘渣揮干溶劑，即得已除單糖黃刺果實殘渣；優(yōu)選的乙醇濃度為80% v/v〇
[0020] 更進一步地，透析除小分子后加入乙醇至含醇量至70~80 % v/v，優(yōu)選為75 ± 2 % v/v〇
[0021] 經過上述純化步驟，可以有效提高黃刺果實多糖的純度。當然，若是僅僅需要制備 純度較低的黃刺果實多糖，亦可以省略除醇沉外的其他純化步驟中的一項或多項。
[0022] 另外，對于多糖的脫色處理，常常采用離子交換法（如DEAE-纖維素）、氧化法（如 H 2O2)、吸附法（如活性炭）等，在實際使用過程中可以根據自身需求，結合后期多糖的收率 和純度來選定適合的脫色方法，本發(fā)明一個【具體實施方式】中選用H 2O2脫色，但這并不限于 本發(fā)明僅僅只能使用此種脫色方式。
[0023] 對于除蛋白而言，常用方法有三氯乙酸法、鹽酸法、Sevage法（亦有記載為Sevag 法）等，在實際使用過程中可以根據自身需求，結合后期多糖的收率和純度來選定適合的 除蛋白方法，本發(fā)明一個【具體實施方式】中選用Sevage法，但這并不限于本發(fā)明僅僅只能使 用此種除蛋白方式。
[0024] 其中，所述黃刺為小檗科植物直穗小檗Berberis dasystachya Maxim.。
[0025] 本發(fā)明研宄表明，黃刺果實多糖具有改善脂代謝紊亂的作用，可以降低膽固醇 (TC)、甘油三酯（TG)、低密度脂蛋白（LDL)，升高高密度脂蛋白（HDL);且能夠升高脂代謝 相關的酶活性即升高脂蛋白酯酶和肝酯酶活性，同時能夠降低谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活 性，對肝組織無損傷，可以將其作為安全性良好的改善脂代謝紊亂的藥物、保健品或食品。
【具體實施方式】
[0026] 本發(fā)明【具體實施方式】中使用的黃刺果實多糖采用常規(guī)的多糖提取、純化方式制備 得到，在本發(fā)明中具體操作如下：
[0027] 實施例1:黃刺果實多糖的制備
[0028] 1)黃刺果實脫脂：取成熟的黃刺（即直穗小檗）的果實400g烘干，粉碎后過篩； 取黃刺果實與石油醚混合，混合后超聲提取，離心除去提取液，殘渣過濾，揮干石油醚，得已 除脂黃刺果實殘渣；
[0029] 2)黃刺果實除單糖：已除脂黃刺果實殘渣與乙醇混合，所述乙醇濃度為70~85% v/v，回流提取，離心除去提取液，殘渣過濾后揮干乙醇，得已除單糖黃刺果實殘渣；
[0030] 3)黃刺粗多糖提?。簩⒉襟E2)所得已除單糖黃刺果實殘渣與純水混合，微波輔助 提取，離心得到提取液，殘渣過濾后棄去；提取液濃縮得到粗多糖提取液；
[0031] 4)黃刺粗多糖的純化：粗多糖提取液中依次采用H2O2，進行脫色、Savege法除去蛋 白質，再透析除去3500Da以下小分子物質，得到純化的多糖水提液；
[0032] 5)黃刺果實多糖的制備：將步驟4)所得的已純化的多糖水提液濃縮液加入乙醇 溶液，使乙醇終濃度達到75% v/v，所得沉淀干燥后，即得到黃刺果實多糖BDP共計2. 06g。
[0033] 實施例2 :黃刺果實多糖的制備
[0034] 1)黃刺果實脫脂：取成熟的黃刺（即直穗小檗）的果實400g烘干，粉碎后過篩； 取黃刺果實與石油醚混合，回流提取，離心除去提取液，殘渣過濾，揮干石油醚，得已除脂黃 刺果實殘渣；
[0035] 2)黃刺果實除單糖：已除脂黃刺果實殘渣與乙醇混合，所述乙醇濃度為70~85% v/v，超聲提取，離心除去提取液，殘渣過濾后揮干乙醇，得已除單糖黃刺果實殘渣；
[0036] 3)黃刺粗多糖提取：將步驟2)所得已除單糖黃刺果實殘渣與純水混合，溫浸提 取，離心得到提取液，殘渣過濾后棄去；提取液濃縮得到粗多糖提取液；
[0037] 4)黃刺粗多糖的純化：粗多糖提取液中依次采用H2O 2，進行脫色、Savege法除去蛋 白質，再透析除去3500Da以下小分子物質，得到純化的多糖水提液；5)黃刺果實多糖的制 備：將步驟4)所得的已純化的多糖水提液濃縮液加入乙醇溶液，使乙醇終濃度達到80% v/ v，所得沉淀干燥，即得到黃刺果實多糖BDP共計I. 355g。
[0038] 實施例3 :黃刺果實多糖的制備
[0039] 1)黃刺果實脫脂：取成熟的黃刺（即直穗小檗）的果實400g烘干，粉碎后過篩； 取黃刺果實與石油醚混合，超聲后再回流提取，離心除去提取液，殘渣過濾，揮干石油醚，得 已除脂黃刺果實殘渣；
[0040] 2)黃刺果實除單糖：已除脂黃刺果實殘渣與乙醇混合，所述乙醇濃度為70~85% v/v，超聲提取，離心除去提取液，殘渣過濾后揮干乙醇，得已除單糖黃刺果實殘渣；
[0041] 3)黃刺粗多糖提取：將步驟2)所得已除單糖黃刺果實殘渣與純水混合，回流提 取，離心得到提取液，殘渣過濾后棄去；提取液濃縮得到粗多糖提取液；
[0042] 4)黃刺粗多糖的純化：粗多糖提取液中依次采用H2O 2，進行脫色、Savege法除去蛋 白質，再透析除去3500Da以下小分子物質，得到純化的多糖水提液；
[0043] 5)黃刺果實多糖的制備：將步驟4)所得的已純化的多糖水提液濃縮液加入乙醇 溶液，使乙醇終濃度達到70% v/v，所得沉淀用20mL無水乙醇洗滌3次，其洗滌后的沉淀物 進行噴霧干燥，使得物料水分含量降至10 %以下，得到黃刺果實多糖BDP共計I. 67g。
[0044] 對本發(fā)明方法制備的黃刺果實多糖進行蒽酮-硫酸法測定，其中多糖含量為93% ±2w/w〇
[0045]本發(fā)明以下實施例中使用的黃刺果實多糖劑量，均以多糖提取物總質量計算。 [0046]實施例4黃刺果實多糖改善脂代謝紊亂作用實驗<