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棕櫚植物液及其提取物預(yù)防胰腺癌的抗增殖效果的制作方法

文檔序號:9264202閱讀:563來源:國知局
棕櫚植物液及其提取物預(yù)防胰腺癌的抗增殖效果的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種癌癥抗增殖作用的組合物。更具體地講,涉及一種棕櫚類化合物,包括但不限于用于預(yù)防胰腺癌的酚類化合物。
【背景技術(shù)】
[0002]油棕果(油棕)包含大量脂溶性或水溶性的生物活性劑,例如維他命E (生育酚、生育三烯酚)、類胡蘿卜素和植物留醇。脂溶性生育三烯酚表現(xiàn)出在人體癌細(xì)胞,例如前列腺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、黑色素瘤和肺癌中具有抗腫瘤效果。水溶性油棕酚類(OPP)已經(jīng)證實(shí)表現(xiàn)出潛在的抗癌性能。Sambanthamurthi等(2011)已表明酸類在接種腫瘤的小鼠體內(nèi)抑制腫瘤發(fā)展;然而,沒有公開文獻(xiàn)表明使用棕櫚植物液抑制胰腺癌中腫瘤的生長。Sekaran等(2010)已經(jīng)證實(shí)OPP可以在不同的癌細(xì)胞系,例如體外的乳腺癌、肺癌、皮膚癌中抑制增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。還發(fā)現(xiàn)OPP能減緩體外腫瘤的生長。然而,可獲得的研宄中沒有公開油棕生物活性劑對胰腺癌細(xì)胞生長的影響。因此,本發(fā)明的目的是利用油棕植物液的提取物來治療胰腺癌(PaCa)。
[0003]胰腺癌(PaCa)因其侵襲性和早期轉(zhuǎn)移而成為低存活率癌癥死亡的一個(gè)誘因。盡管最近更集中地研宄該領(lǐng)域,但PaCa的死亡率依然相當(dāng)高。PaCa患者的常規(guī)治療是胰腺切除,或器官的手術(shù)切除,其次是化療,靶向和/或放射治療。
[0004]吉西他濱(gemcitabine)是嘌呤類似物,用作晚期胰腺癌治療的標(biāo)準(zhǔn)臨床化療劑;然而,該化療劑已表現(xiàn)出短存活時(shí)間的低調(diào)腫瘤響應(yīng)速率。厄洛替尼(erlotinib)是通過抑制細(xì)胞生長信號處理但又在臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)出稍微提高存活效益而用作吉西他濱的輔劑的一種靶向表皮生長因子受體酪氨酸激酶。
[0005]可用于靶向PaCa的化療劑的有害副作用,例如,心臟病發(fā)作、中風(fēng)和死亡,已經(jīng)有文件記錄。由于它們對正常組織的劑量限制性毒性,這導(dǎo)致優(yōu)點(diǎn)較為有限。因此,本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種替代形式以用最小的副作用增強(qiáng)對胰腺癌的化療活性。
[0006]本發(fā)明的另一個(gè)目的是抑制大多數(shù)吉西他濱治療患者承受的副作用和化療耐藥性。開發(fā)新的治療劑以便改善天然植物提取物的預(yù)后變得至關(guān)重要。
[0007]本發(fā)明的又另一個(gè)目的是提供一種結(jié)合藥物使用的生物活性膳食劑,以達(dá)到減輕毒性和單獨(dú)治療的劑量需求的多效作用。
[0008]核因子kB(NF-kB)廣泛用作控制細(xì)胞增殖和細(xì)胞存活的基因調(diào)節(jié)劑,并且在癌細(xì)胞轉(zhuǎn)化、細(xì)胞侵襲和細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用。P65是NF-kB的亞組,它干擾靶基因的啟動子序列,而啟動子序列繼而誘導(dǎo)涉及炎癥、抗細(xì)胞凋亡和增殖的基因表達(dá)。這種信號處理通道已經(jīng)定向作為PaCa患者的抗癌治療策略。NF-kB是通過各種各樣的刺激(例如炎癥和氧化應(yīng)激)激活的共同且組成性表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子。在受到刺激時(shí),NF-kB易位至細(xì)胞核并結(jié)合其靶基因的啟動子以開始特定基因的轉(zhuǎn)錄。NF-kB的過度表達(dá)會導(dǎo)致細(xì)胞凋亡抵抗、血管生成、癌細(xì)胞的迀移和侵襲。
[0009]研宄已經(jīng)表明,相比于正常的胰腺組織,NF-kB在大約67%的胰腺癌中被組成性激活,并且這與侵犯期的胰腺癌以及耐藥性有關(guān)。基于NF-kB在胰腺癌調(diào)節(jié)致癌基因活性以及棕櫚植物液的抗炎劑反應(yīng)的作用,本發(fā)明的目的是描述棕櫚植物液在胰腺癌細(xì)胞模型中的作用,其特征在于NF-kB通道的潛在下調(diào)。
[0010]因此,本發(fā)明的又另一個(gè)目的是提供一種通過調(diào)節(jié)NF-kB通道用于胰腺癌的抗增殖的組合物。
[0011]本發(fā)明的另一目的是提供根據(jù)從植物液,S卩,棕櫚油研磨過程的含水液流,提取的化合物用于提供胰腺癌的抑制作用的一種改進(jìn)的組合物和方法。
[0012]因此,本發(fā)明還涉及一種從研磨過程的油棕液提取生物活性物的過程。油棕加工產(chǎn)生富含酚類化合物、莽草酸、果酸、水果糖和甘油的大量植物液,這些成分可以通過傳統(tǒng)的膜過濾技術(shù)進(jìn)一步富集。
[0013]在參照如附圖所示并且如以下描述所述的本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例時(shí),本發(fā)明的其他目的和優(yōu)點(diǎn)會變得顯而易見。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0014]本發(fā)明涉及一種抑制癌細(xì)胞增殖的組合物,其中所述組合物包含來源于油棕提取物和植物液的油棕酚類。所述組合物通過抑制集落形成、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)基因表達(dá)、誘導(dǎo)抗侵襲效果并且誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯在S期而用于預(yù)防來自PANC-1和BxPC-3細(xì)胞系的胰腺癌。
[0015]細(xì)胞凋亡與誘導(dǎo)半胱天冬酶、抑制細(xì)胞存活蛋白以及抑制抗細(xì)胞凋亡蛋白有關(guān)。本文公開的抗細(xì)胞凋亡蛋白是存活素。所述組合物還下調(diào)來自Bcl-2族的Bcl-XL基因表達(dá)。
[0016]所述組合物通過增加例如活化型半胱天冬酶3、半胱天冬酶9或聚(ADP-核糖)多聚酶(PARP)的促細(xì)胞凋亡蛋白的表達(dá)來誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
[0017]本發(fā)明還公開了一種通過下調(diào)p65亞單位活性來抑制NF-KB活性的組合物。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)基因表達(dá)被下調(diào)以減少細(xì)胞侵襲、細(xì)胞迀移和新陳代謝。所述組合物可以提供作為具有藥用載體的化合物。
[0018]本發(fā)明進(jìn)一步公開了使用治療有效量的組合物來制備用于通過給藥于有需求的個(gè)體而預(yù)防或抑制個(gè)體中胰腺癌的生長的藥物。該組合物可以附帶或不附帶常規(guī)的化療或放療或手術(shù),或者可以口服給藥或者作為食品增補(bǔ)劑給藥。
【附圖說明】
[0019]參照【具體實(shí)施方式】、所附權(quán)利要求書和附圖可以更好地理解本發(fā)明的這些和其他特征、方面和優(yōu)點(diǎn),其中:
[0020]圖1示出了從油棕植物液獲得的富含酚類的提取物(指定為棕汁(PJ))對胰腺癌細(xì)胞系PANC-1和BxPC-3的存活和生長(A和B)以及集落生成(C和D)的影響;
[0021]圖2示出了通過組蛋白試劑盒/DNA ELISA方法(A和B)以及流式細(xì)胞術(shù)(C和D)的細(xì)胞凋亡分析;
[0022]圖3示出了 PJ對基因表達(dá)的作用;
[0023]圖4示出了 PJ對PANC-1 (A)和BxPC_3⑶癌細(xì)胞系的細(xì)胞周期調(diào)控的響應(yīng);
[0024]圖5示出了在PANC-1和BxPC_3細(xì)胞中進(jìn)行PJ治療之后NF_kB活性的下調(diào);并且
[0025]圖6示出了在PANC-1和BxPC_3細(xì)胞系抑制細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移。
【具體實(shí)施方式】
[0026]參照附圖圖示并且以下描述中詳述的非限制性實(shí)施例更全面地解釋本文的實(shí)施例及其各種特征和有利細(xì)節(jié)。熟知元件和加工技術(shù)的描述已省略,以便不會不必要地模糊本文中的實(shí)施例。本文中使用的實(shí)例僅僅旨在便于理解本文中的實(shí)施例可以實(shí)施的方式,并且進(jìn)一步允許本領(lǐng)域的技術(shù)人員實(shí)施本文中的實(shí)施例。因此,實(shí)例不應(yīng)理解為限制本文中的實(shí)施例的范圍。
[0027]本發(fā)明提供棕汁(PJ),該棕汁構(gòu)成從油棕果(油棕)和/或其植物液獲得的水溶性富含酚類的提取物,并且有文件記錄對乳腺癌細(xì)胞具有高抗氧化、抗炎和抗致癌活性。
[0028]本發(fā)明還公開了通過用不同劑量的棕汁(PJ)治療兩個(gè)胰腺癌細(xì)胞系(PANC-1和BxPC-3)的富含酚類的提取物的抗腫瘤效果。通過以劑量依賴方式使用(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑鑰)(MTS)測定法、細(xì)胞質(zhì)組蛋白DNA片段定量測定法和基質(zhì)膠侵襲測定法觀察到PJ誘導(dǎo)抗增殖、細(xì)胞凋亡和抗侵襲效果。實(shí)時(shí)PCR已經(jīng)確認(rèn)PJ通過減少M(fèi)MP-9和VEGF的基因表達(dá)誘導(dǎo)的
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