抗hiv病毒的馬來酸b07凝膠制劑配方及制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及病毒學(xué)，具體為一種預(yù)防艾滋病的凝膠產(chǎn)品 及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 艾滋?。ˋcquired immunodeficiency syndrome，AIDS)是由人類免疫缺陷病毒 (Human immunodeficiency virus，HIV)感染引起的以全身免疫系統(tǒng)嚴(yán)重?fù)p害為特征的傳 染性疾病，自其被發(fā)現(xiàn)以來，已嚴(yán)重威脅人類的生存，對(duì)全球人口健康和社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展產(chǎn) 生巨大的影響。HIV的傳播途徑主要是不安全的性接觸、靜脈注射、輸血、分娩、哺乳等。最 初HIV僅在吸毒和同性戀人群中傳播，而現(xiàn)在性傳播，尤其是異性間性傳播已成為艾滋病 傳播的主要途徑，其比例達(dá)80%，在非洲一些國(guó)家更高達(dá)90%，其中女性感染者比例呈逐漸 增加的趨勢(shì)。我國(guó)自1985年發(fā)現(xiàn)第一例艾滋病患者開始，HIV感染人數(shù)不斷上升，尤以近 年來發(fā)展勢(shì)頭迅猛。隨著我國(guó)艾滋病傳播模式的轉(zhuǎn)變，性接觸己逐漸成為我國(guó)HIV/AIDS的 主要傳播途徑。因此，對(duì)于我們這樣一個(gè)人口基數(shù)巨大的國(guó)家，為了有效地控制艾滋病，需 要加大預(yù)防方面的投入，尤其是要注意HIV性傳播的預(yù)防。
[0003] 為降低HIV性傳播或性傳播疾病采取了很多預(yù)防措施，包括禁欲、一夫一妻制、常 規(guī)使用安全套以及男性包皮環(huán)切術(shù)。但是對(duì)于HIV高致病地區(qū)的人群，由于社會(huì)、經(jīng)濟(jì)和文 化因素不能有效利用上述預(yù)防措施。聯(lián)合國(guó)艾滋病規(guī)劃署和世界衛(wèi)生組織提出開發(fā)具有預(yù) 防功能的新技術(shù)來保護(hù)人群免受感染。各種新技術(shù)中，又以局部使用的殺微生物劑最受關(guān) 注，局部使用的殺微生物劑能使性伙伴即使在不使用安全套的情況下避免感染HIV，但遺憾 的是目前所開發(fā)殺微生物劑大多是由于安全性、有效性和可接受性問題導(dǎo)致開發(fā)失敗。因 此，開發(fā)有效的殺微生物劑來預(yù)防HIV的性接觸傳播是目前全球艾滋病預(yù)防的首要任務(wù)和 重要課題。最近的臨床試驗(yàn)顯示，一種含有1% TDF (核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，NRTI)的陰道 凝膠可顯著降低HIV性傳播的風(fēng)險(xiǎn)。在性交前和后使用該凝膠的婦女HIV感染率平均減少 了 39%。在那些用藥高依從性（即在>80%情況下都堅(jiān)持使用該凝膠）的女性中，HIV的感染 率可減少54%，而在那些用藥低依從性（即在〈50%情況下堅(jiān)持使用該凝膠)的女性中，HIV的 感染率只減少了 28%。這些研究成果為殺微生物劑的凝膠制劑的研發(fā)又點(diǎn)燃了新的希望。
[0004] 殺微生物劑是一種含有抗HIV成分的制劑，包括凝膠、乳脂等不同劑型，可阻止 HIV黏附或侵入陰道或直腸黏膜內(nèi)的靶細(xì)胞或抑制病毒在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制，從而起到預(yù)防艾 滋病的作用。研發(fā)具有長(zhǎng)期或短期緩釋功能的殺微生物劑劑型，并使用比NRTI活性更好的 非核苷類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑（NNRTI)或HIV進(jìn)入抑制劑（EI)成為當(dāng)前國(guó)際殺微生物劑研究 的熱點(diǎn)和最前沿。HIV-I入侵人體必需借助于人體細(xì)胞表面的CCR5或CXCR4受體蛋白，近 年來，以CCR5為靶標(biāo)設(shè)計(jì)進(jìn)入抑制劑或者殺微生物劑受到了各國(guó)研究人員和跨國(guó)制藥公 司的關(guān)注與研究。一系列的CCR5小分子抑制劑被發(fā)現(xiàn)，例如馬拉韋羅maraviroc，維利韋 羅vicriviroc，以及阿普拉韋羅aplaviroc等等。國(guó)際著名病毒學(xué)家姜世勃教授也發(fā)現(xiàn)了 一個(gè)很強(qiáng)抗HIV活性的CCR5小分子抑制劑，被稱作B07。后續(xù)研究不斷證實(shí)，B07分子及 其衍生物是研制預(yù)防HIV性傳播的最佳殺微生物劑成分。B07分子抑制HIV病毒的相關(guān)研 究可以參考以下文章 ：Dong Μ-χ, Lu L, Li H, Wang X，Lu H, Jiang S, et al. Design, synthesis, and biological activity of novel 1,4-disubstituted piperidine/ piperazine derivatives as CCR5 antagonist-based HIV-I entry inhibitors. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2012;22:3284-6。B07 分子抑制 HIV-1 感染 的IC50濃度為6. 17nM，效力非常強(qiáng)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種預(yù)防艾滋病的新型凝膠產(chǎn)品及其制備方法，這種凝膠 制品以馬來酸B07為主要的殺微生物劑活性物質(zhì)。
[0006] 本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的： 一種抗HIV病毒的馬來酸B07凝膠制劑配方，包括馬來酸B07和輔料，所述馬來酸B07 含量為0. 2~5%，所述馬來酸B07由B07鹽酸鹽與馬來酸反應(yīng)而得。
[0007] B07鹽酸鹽的制備按下述專利及發(fā)表的文章進(jìn)行制備獲得，中國(guó)發(fā)明專利 ZL201010182303.1;董銘心等，Bioorg. MedChem. Lett. 2012,22:3284-3286〇
[0008] 本領(lǐng)域技術(shù)人員可以采用多種途徑將B07鹽酸鹽與馬來酸反應(yīng)得到馬來酸B07。 其中，馬來酸B07的經(jīng)典合成方法如下：B07鹽酸鹽用水溶解，用碳酸鈉中和至pH=8~9，然 后二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉或硫酸鎂干燥，除去溶劑后得到B07游離物，將B07游離物溶 于乙酸乙酯中，劇烈攪拌下一次加入馬來酸，馬來酸：B07游離物=1.05:1 (重量比)，再加入 乙醇或乙酸乙酯，反應(yīng)液立即出現(xiàn)白色固體，攪拌，抽濾，乙酸乙酯洗滌，干燥得固體馬來酸 B07〇
[0009] 在已公開的專利（201010182303. 1)中，B07鹽酸鹽具有多種結(jié)構(gòu)，本申請(qǐng)中，優(yōu)選 B07鹽酸鹽的分子式如下：
式中，X=N，R=F。
[0010] 上述抗HIV病毒的馬來酸B07凝膠制劑包括溫控型凝膠制劑和非溫控型凝膠制劑 兩種。
[0011] 對(duì)于抗HIV病毒的馬來酸B07溫控型凝膠制劑，輔料包括凝膠劑和防腐劑。
[0012] 凝膠劑由泊洛沙姆407和泊洛沙姆188組成，泊洛沙姆為聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌 段共聚物，是一類新型的高分子生物材料，其毒性低，刺激性小，生物相容性好，是一個(gè)理想 的溫控型緩釋控釋材料。在本發(fā)明溫控型凝膠中，泊洛沙姆接觸創(chuàng)面體溫后，能夠自然成 膠，使其均勻彌散于創(chuàng)面，并在創(chuàng)面上形成一層保護(hù)膜，使其它成分持久緩慢釋放。
[0013] 防腐劑由尼泊金甲酯和/或尼泊金丙酯組成。尼泊金酯類是國(guó)際上公認(rèn)的廣譜性 高效食品防腐劑，抑菌范圍廣，對(duì)霉菌、酵母菌和革蘭氏陰性菌的抑制效果好。目前尼泊金 酯已廣泛應(yīng)用于食品、飲料、化妝品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。在本發(fā)明配方中用尼泊金甲酯和尼泊金 丙酯作為抑菌防腐劑。
[0014] 那么溫控型的抗HIV病毒的馬來酸B07凝膠制劑配方，包括以下質(zhì)量濃度的各組 分： 馬來酸B07 0· 2~5%， 甘油 0· 5~5%， 透明質(zhì)酸鈉 0. 015~0. 25%， 泊洛沙姆407 10~50%， 泊洛沙姆188 1~5%， 尼泊金甲酯鈉 0. 05~1%， 尼泊金丙酯鈉 0. 01~0. 8%， 苯氧乙醇 0.13~0.98%， 水 余量。
[0015] 對(duì)于溫控型的凝膠制劑，在非使用狀態(tài)下呈液態(tài)狀，便于灌裝、運(yùn)輸?shù)?，在使用時(shí)， 即應(yīng)用于人體內(nèi)時(shí)，隨著溫度上升可迅速變?yōu)槟z狀。
[0016] 選擇馬來酸B07作為主要抗病毒活性成分，其針對(duì)HIV各種亞型病毒具有廣譜的 抑制活性，而且安全性高，穩(wěn)定性強(qiáng)，適合在凝膠劑型中長(zhǎng)效發(fā)揮功能。
[0017] 選擇泊洛沙姆作為凝膠基質(zhì)材料，其毒性低，刺激性小，生物相容性好，是一個(gè)理 想的溫控型緩釋控釋材料，并且對(duì)馬來酸B07有明顯的緩釋作用。
[0018] 選擇透明質(zhì)酸