Dpp4抑制劑在防治輻射誘導(dǎo)骨髓抑制藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及DPP4抑制劑在藥學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。更具體的說(shuō)是DPP4抑制劑在制備 防治輻射誘導(dǎo)骨髓抑制藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 機(jī)體暴露于外界物理化學(xué)及體內(nèi)代謝產(chǎn)生的各種有害因素，如暴露于輻射或某些 化學(xué)毒物，以及臨床接受放療、化療的患者。造血系統(tǒng)由少量骨髓造血干細(xì)胞及不同發(fā)育時(shí) 期不同系列的造血細(xì)胞組成，對(duì)各種有害因素非常敏感，受到損傷后會(huì)出現(xiàn)不同程度的抑 制，表現(xiàn)為外周血白細(xì)胞降低、骨髓增殖功能下降甚至發(fā)生再生障礙性貧血，對(duì)患者的生存 質(zhì)量造成嚴(yán)重的危害甚至危及生命。
[0003] 目前臨床上對(duì)出現(xiàn)骨髓抑制多是采用加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)或給與各種生長(zhǎng)因子增加造血細(xì) 胞的增殖。另外一些具有抗氧化損傷作用的化合物或中藥制劑。藥物種類(lèi)很多，多是聯(lián)合 應(yīng)用，單獨(dú)評(píng)價(jià)時(shí)療效不很確定，還會(huì)有各種副作用的產(chǎn)生，如生長(zhǎng)因子類(lèi)，使用造價(jià)也比 較昂貴。
[0004] DPP-4于1966年由Hopsu-Havu和Glenner在鼠肝臟組織勻楽過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，分子 量為liokd，是絲氨酸蛋白酶家族中的一種，分布于細(xì)胞表面，含有766個(gè)氨基酸，其三維晶 體結(jié)構(gòu)在2003年由Rasmussen等確認(rèn)。DPP-4分為兩種形式，一種是在二型細(xì)胞表面表達(dá) (CD26)，另一種為可溶性分子，缺少細(xì)胞內(nèi)和轉(zhuǎn)膜結(jié)構(gòu)域。細(xì)胞表面和可溶性的DPP-4均具 有酶活性，DPP-4的活性部分是Asp - His - Ser節(jié)段。DPP-4的活性體為二聚體，每個(gè)亞單 位包含兩個(gè)結(jié)構(gòu)域，凡是結(jié)構(gòu)的N端為Xaa-Pro-或者Xaa-Ala-的多肽都是DPP-4發(fā)揮活 性的主要底物。
[0005] DPP4發(fā)現(xiàn)在血清/血漿、腦脊髓液、關(guān)節(jié)液和精液中存在，而具有跨膜結(jié)構(gòu)的DPP4 則在多種組織的內(nèi)皮和表皮細(xì)胞中表達(dá)，包括骨髓細(xì)胞，血管靜脈端、胃腸道、肝臟、胰腺、 肺、腎臟、前列腺等。此外，DPP4還在胚胎干細(xì)胞，造血干細(xì)胞，造血祖細(xì)胞以及其他多種成 熟血細(xì)t胞中表達(dá)。
[0006] 迄今，世界范圍內(nèi)已上市7個(gè)DPP-4抑制劑：西格列汀（sitagliptin)、維格 列汀嘲（vildagliptin)、沙格列?。╯axagliptin)、阿格列?。╝logliptin)、利格列汀 (linagliptin)、吉格列汀州（gemigliptin)和替格列?。╰eneligliptin。其中，西格列 汀、維格列汀和沙格列汀已在我國(guó)上市，阿格列汀和利格列汀已在我國(guó)提出臨床申請(qǐng)，吉格 列汀在我國(guó)則由LG Life Sciences授權(quán)雙鶴制藥開(kāi)發(fā)。這些DPP-4抑制劑主要作為治療 2型糖尿病的口服降糖藥物，通過(guò)抑制活性GLP-I的降解失活，提高其濃度，增強(qiáng)其生理作 用，促進(jìn)β細(xì)胞胰島素的分泌、抑制儀細(xì)胞的胰高血糖素分泌，改善胰島功能的紊亂，同時(shí) 沒(méi)有增加體重和低血糖的風(fēng)險(xiǎn)，不良反應(yīng)少見(jiàn)。
[0007] 盡管多種DPP4抑制劑已經(jīng)作為臨床二型糖尿病的治療藥物，但是其在臨床造血 疾病應(yīng)用還鮮有報(bào)道。近期，DPP4在造血系統(tǒng)的功能引起了巨大的關(guān)注。通過(guò)diprotin A(ILE-PRO-ILE)或者VAL-PYR等小多肽分子抑制HSPC上DPP4的活性，進(jìn)而通過(guò)提高細(xì)胞 對(duì)趨化因子CXCL12的趨化性，提高HSPC的歸巢和植入能力。DPP4剪切后的CXCL12雖然 缺失了趨化功能，但是卻能夠抑制全長(zhǎng)CXCL12發(fā)揮作用。Broxmeyer等人的研究發(fā)現(xiàn)接受 DPP4剪切后的細(xì)胞因子無(wú)論是在體內(nèi)還是體外，其促進(jìn)造血細(xì)胞的增殖能力都大幅下降， 并會(huì)降低其相應(yīng)全長(zhǎng)因子的活性。Christopherson等人證實(shí)DPP4在G-CSF動(dòng)員小鼠造血 祖細(xì)胞中起介導(dǎo)作用，而隨后進(jìn)一步證實(shí)DPP4在小鼠造血干細(xì)胞歸巢和植入中起調(diào)節(jié)作 用。
[0008] 本發(fā)明人在實(shí)驗(yàn)中首次發(fā)現(xiàn)：DPP4抑制劑在防治骨髓抑制中具有明顯的治療作 用，特別是防治輻射誘導(dǎo)骨髓抑制更加明顯，基于上述的發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)進(jìn)一步試驗(yàn)從而完成了 本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是尋找能夠保護(hù)輻射誘導(dǎo)骨髓細(xì)胞和功能的損傷得到 防治與治療的藥物。
[0010] 因此，本發(fā)明的一個(gè)目的在提供DPP4抑制劑在制備預(yù)防或治療輻射誘導(dǎo)骨髓抑 制藥物中的應(yīng)用。
[0011] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供DPP4抑制劑與其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、促進(jìn)骨髓細(xì)胞增殖 藥物混合制成組合物，降低放療所帶來(lái)的毒副作用。
[0012] 為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供如下的技術(shù)方案：
[0013] -種DPP4抑制劑在制備預(yù)防輻射誘導(dǎo)骨髓抑制藥物中的應(yīng)用。實(shí)施方式是：DPP4 抑制劑在制備防治輻射誘導(dǎo)骨髓損傷藥物中的應(yīng)用。所述的輻射誘導(dǎo)骨髓損傷，包括：接受 放射治療的腫瘤患者、輻射暴露的工作人員、意外輻射性同位素暴露的人員。
[0014] 本發(fā)明所述骨髓抑制（骨髓抑制性死亡），包括外周血白細(xì)胞下降、骨髓增生不良 或再生障礙性貧血。
[0015] 本發(fā)明進(jìn)一步公開(kāi)了含有DPP4抑制劑的藥物組合物，它是將治療有效量的DPP4 抑制劑與藥學(xué)上可接受的藥用輔料混合制成組合物。
[0016] 本發(fā)明更進(jìn)一步公開(kāi)了含有DPP4抑制劑與其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、促進(jìn)骨髓細(xì)胞增殖藥 物或抗腫瘤藥物的組合物，其中包括臨床各種劑型的治療藥物、預(yù)防藥物及保健食品等等。 它是將DPP4抑制劑與其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、促進(jìn)骨髓細(xì)胞增殖藥物混合制成組合物。
[0017] 本發(fā)明所述的其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括：其他的氨基酸營(yíng)養(yǎng)液、維生素、葡萄糖、脂肪乳、 離子等。
[0018] 本發(fā)明所述促進(jìn)骨髓細(xì)胞增殖的藥物包括：各種中藥制劑如多糖類(lèi)（枸杞、銀耳、 黨參、黃芪、人參多糖等）、生物堿類(lèi)（小檗堿、苦參總堿等）、皂甙類(lèi)（人參皂甙、黃芪甙 等）及其他如六味地黃口服液等升白中藥制劑；人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子（rHuGM- CSF)、升白欣、肌苷、左旋咪唑、三株口服液、康力龍等。
[0019] 本發(fā)明所述的DPP4抑制劑與藥學(xué)上可接受的藥用輔料混合制成各種藥物組合 物，包括：片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、滴丸劑、預(yù)乳劑、微乳劑、混懸劑、糖漿劑、各種腸溶制 劑或注射劑制劑等等。各制劑可以根據(jù)常規(guī)的工藝制備而成。在制備成藥劑時(shí)可以加入 藥學(xué)上可接受的輔料，所述的藥學(xué)上可接受的輔料，包括制劑中常規(guī)的稀釋劑、填充劑（如 甘露醇、乳糖、聚乙二醇），粘合劑（淀粉、微晶纖維素），崩解劑（如羧甲基纖維素、低取 代的羥丙基纖維素），潤(rùn)滑劑（如滑石粉、硬脂酸鎂），濕潤(rùn)劑（如丙二醇、乙醇），穩(wěn)定劑 (EDTA-2Na、硫代硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸鈉、乙醇胺、碳酸氫鈉）等等。
[0020] 當(dāng)DPP4抑制劑與藥學(xué)上可接受的藥用輔料混合組成藥物組合物時(shí)，組合物中含 有的活性成份DPP4抑制劑的量可以根據(jù)患者的病情、醫(yī)生診斷的情況特定的加以應(yīng)用，所 用DPP4抑制劑的量或濃度在一個(gè)較寬的范圍內(nèi)調(diào)節(jié)，通常DPP4抑制劑的量范圍為組合物 的0.5%~90% (重量）。另一優(yōu)選的范圍為0.5%-70%。再一優(yōu)選的范圍為3%-50%。
[0021] 本發(fā)明所述的DPP4抑制劑與其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、促進(jìn)骨髓細(xì)胞增殖藥物混合制成藥 物組合物或DPP4抑制劑作為支持藥物與抗腫瘤藥物配合使用。一般使用常規(guī)的技術(shù)，與制 劑學(xué)上可接受的固體或液體載體結(jié)合，以及使之任意地與制劑學(xué)上可接受的輔助劑和賦形 劑結(jié)合制備成微?；蛭⑶?。固體劑型包括片劑、分散顆粒、膠囊、緩釋片、緩釋微丸等等。固 體載體可以是至少一種物質(zhì)，其可以充當(dāng)稀釋劑、香味劑、增溶劑、潤(rùn)滑劑、懸浮劑、粘合劑、 崩解劑以及包裹劑。惰性固體載體包括磷酸鎂、硬脂酸鎂、滑粉糖、乳糖、果膠、丙二醇、聚山 梨酯80、糊精、淀粉、明膠、纖維素類(lèi)物質(zhì)例如甲基纖維素、微晶纖維素、低熔點(diǎn)石蠟、聚乙二 醇、甘露醇、可可脂等。液體劑型包括溶劑、懸浮液例如注射劑、粉針劑等等。
[0022] 本發(fā)明對(duì)輻射誘導(dǎo)骨髓抑制的試驗(yàn)內(nèi)容主要包括以下幾個(gè)方面：
[0023] I. DPP4抑制劑對(duì)體外照射的骨髓細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用。
[0024] 2. DPP4抑制劑對(duì)接受全身照射的小鼠骨髓細(xì)胞功能損傷具有保護(hù)作用。
[0025] 3. DPP4抑制劑對(duì)機(jī)體沒(méi)有損傷。
[0026] 下面通過(guò)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說(shuō)明DPP4抑制劑在預(yù)防或治療輻射、化學(xué)毒物誘導(dǎo) 骨髓抑制作用的藥理實(shí)驗(yàn)情況。
[0027] -、實(shí)驗(yàn)方法
[0028] 1、骨髓單個(gè)核細(xì)胞分離