沉淀加入可包含20%蛋黃和80% 乳糖的溶液的第 一凍存培養(yǎng)基。然后可以檢查這些精子細(xì)胞的活動力。如果可接受,可將這些管帶到可編 程溫度控制機(jī)(PolyScience-MiniTube)上或者可以手動處理以便經(jīng)過約2小時的時間將 溫度從約21°C降低到約5°C。在定時溫度變化之后,可以將這些樣品放置在約5°C的冷藏 室中,其中向這些樣品中加入第二凍存培養(yǎng)基,該第二凍存培養(yǎng)基可包含蛋黃、乳糖、甘 油和Equex Stem,或者可以僅僅包含冷凍保護(hù)劑如甘油、或預(yù)先冷卻到5°C的具有滲透壓穩(wěn) 定劑的冷凍保護(hù)劑。在10分鐘之后,可以將性別分選的精子細(xì)胞樣品放置在人工授精吸管 中,然后使這些吸管暴露于液氮蒸汽(距離該液氮大約4cm)中持續(xù)一個短的時段(例如10 分鐘)并且然后將其直接放置到液氮中長期保存。
[0242] 當(dāng)準(zhǔn)備使用這些性別分選的精液樣品時,通過融化/加溫(例如放置于設(shè)定在約 37°C的水浴中持續(xù)約15秒)這些吸管將其解凍。然后可以在融化之后30、90和/或150 分鐘分析這些精子細(xì)胞的活動力和活力,用于標(biāo)準(zhǔn)比較。
[0243] 實(shí)例6-動情期同步。
[0244]出于便利的目的,本發(fā)明考慮到可以在一個或多個有待授精的母豬中使動情期同 步和/或誘發(fā)定時排卵。此外,由于性別分選的精子常常經(jīng)過預(yù)先獲能,重要的是使母豬在 大約排卵6小時之內(nèi)授精。使動情期同步或定時排卵有助于確保情形如此。一般來說,這 使得必需向一個或多個有待授精的母豬使用一種或多種激素或激素類似物。存在著若干在 小母豬中誘導(dǎo)動情期/定時排卵的方式,將其描述于下文。
[0245]為了建立動情期同步以及排卵時間,可以向母豬施用一種或多種激素或激素類似 物。這些激素和激素類似物典型地包括,例如,PG600、OvuGel、eCG、hCG、和/或孕激素,并 且可以與定時注射一起手動地施用,或者借助于一種置于母豬生殖道中的可編程裝置進(jìn)行 施用。本文考慮的可編程裝置以定時釋放的方式釋放一種或多種激素或激素類似物,而育 種者除了對用于釋放所述一種或多種激素或激素類似物的初始參數(shù)進(jìn)行編程之外,不必監(jiān) 控該裝置或提供任何輸入。如下文包括的在本領(lǐng)域中已知的用于誘導(dǎo)和/或同步化動情期 的任何下列方法通常可以與本發(fā)明一起使用。
[0246] (a)運(yùn)輸和公豬誘導(dǎo)的動情期。小母豬一般在大約180-210日齡時達(dá)到初情期。 然而,初情期的自然達(dá)到受到許多內(nèi)在和外在因素的影響,如基因型、環(huán)境和與公豬的接 觸。許多育種者和農(nóng)民指出,當(dāng)小母豬為六個月齡時普遍觀察到首次動情期。動情期的開 始常常與動物從小母豬增殖者到商業(yè)農(nóng)場的重新安置或運(yùn)輸一致。毫無疑問,在豬中最 有名的應(yīng)激因素是運(yùn)輸。如果在運(yùn)輸時小母豬的年齡接近于初情期的正常開始,則大約 25% -35%的小母豬在運(yùn)輸之后一周內(nèi)將顯現(xiàn)動情期。這種運(yùn)輸誘導(dǎo)的動情期可以用來使 一部分小母豬同步。
[0247] 雖然運(yùn)輸可誘導(dǎo)動情期,很顯然公豬的接觸是初情期刺激的一種有力形式??刂?公豬接觸的效率(作為初情期刺激)的主要因素是在引入公豬時的小母豬的年齡。當(dāng)在小 母豬4月齡開始公豬接觸時,初情期反應(yīng)極小。有人提出當(dāng)小母豬太年幼而不能做出反應(yīng) 時,幼年小母豬可能在一個發(fā)育階段對公豬刺激變得習(xí)以為常。相反地,當(dāng)公豬引入延遲到 最接近于初情前期時(6個月齡和以上),由于不同的原因該反應(yīng)再次受到限制。由于在引 入時小母豬的相對年長的年齡(即,6個月),這些小母豬的實(shí)際初情期年齡并不比未刺激 的動物之下降低很多。當(dāng)在160天區(qū)間的小母豬年齡發(fā)生公豬引入時,從首次公豬接觸到 初情期的間隔以及在初情期的小母豬年齡均被降低到最低限度,同時發(fā)生初情動情期的最 大同步化。
[0248] (b)口服和延時釋放孕激素。針對動情期同步的這種方法通討施用口服給藥的孕 酮或合成孕激素而利用卵巢活動的抑制??梢垣@得定時釋放可注射形式的一些孕激素,如 烯丙孕素(參見下文)。逐一地或者成組地以15_30mg烯丙孕素/豬/天的比例飼喂處于 周期中的小母豬持續(xù)14到18個連續(xù)天數(shù),在最后一次孕激素飼喂之后2到8天之間產(chǎn)生 動情期的同步開始。
[0249] (c)促件腺激素。eCG/hCG(PG600R)目前,用于誘導(dǎo)處于非周期的雌性的卵泡生長 和排卵的最常用外源激素組合是eCG(以前稱為懷孕母馬的血清促性腺激素(PMSG))與人 絨毛膜促性腺激素(hCG)的組合。產(chǎn)品PG600R含有400IU PMSG和200IU hCG。這種激素 可以作為組合藥物購買并且對于誘導(dǎo)處于非周期的豬的動情期和排卵是具有成本效益的。 小母豬常常在處理之后3-6天顯示出動情期并且排卵時間是大約110-120小時。如果小 母豬在處理開始時每日被給予公豬接觸,則該反應(yīng)率得以提高。PG600包含懷孕母馬的血 清促性腺激素(另外稱為馬絨毛膜促性腺激素("PMSG"或"eCG"))和人絨毛膜促性腺激 素("hCG")(英特威(Intervet)公司)。OvuGel是處于緩釋配方中的另一種可商購的促 性腺激素(醋酸曲普瑞林),其可經(jīng)由一種陰道內(nèi)遞送系統(tǒng)(凝膠醫(yī)學(xué)科學(xué)公司(Gel Med Sciences,Inc.))進(jìn)行施用。
[0250] (d)前列腺素。PGFw有效于誘導(dǎo)黃體溶解、流產(chǎn)、以及在懷孕兩周以上之后在懷 孕的(以及假孕的)小母豬中迅速返回到動情期。一種用于同步化的方法是使小母豬單圈 交配(pen-mate)三周,然后在兩周后用PGF2a處理。
[0251] (e)延時釋放激素。另一種方法涉及在動情周期的特定時間點(diǎn)直接注射可商購的 制劑,如烯丙孕素或四烯雌酮。例如,在本發(fā)明的一個實(shí)施例中,通過在小母豬的動情周期 的第1卜14天施用15-30mg稀丙孕素/天持續(xù)4到7天來實(shí)現(xiàn)同步化和定時排卵。在停止 烯丙孕素24小時之后,可以施用400到2000IU的PMSG,然后在72到83小時之后施用500 到 1000IU 的 hCG。
[0252] 實(shí)例7-排卵檢測。
[0253] 可以通過檢查母豬的卵泡完成母豬中的排卵檢測。在相對于排卵的適當(dāng)時間在輸 卵管中建立充足的精子庫的重要性的實(shí)現(xiàn)在豬中的人工授精的管理中是關(guān)鍵性的。具體地 說,當(dāng)母豬在動情期期間很可能排卵的知曉對于實(shí)現(xiàn)成功授精是高度有益的。為此,在本發(fā) 明的具體實(shí)施例中,在誘導(dǎo)動情期之后使用超聲檢查母豬的卵泡。在本發(fā)明的一個具體實(shí) 施例中,在hCG注射之后30小時開始,通過經(jīng)直腸超聲針對排卵前卵泡的存在每4小時檢 查一次母豬的卵巢。在超聲檢查之后2-3小時選出顯示多個排卵前卵泡(卵泡腔直徑>6_) 的母豬用于授精。
[0254] 實(shí)例8-使用腹腔鏡術(shù)或深部宮內(nèi)導(dǎo)管授精
[0255] -旦制備了性別分選的公豬精液樣品,該樣品可以用來使母豬授精。在本發(fā)明中 可以使用任何常規(guī)的人工授精技術(shù),包括宮頸內(nèi)授精。然而,深部宮內(nèi)導(dǎo)管和腹腔鏡術(shù)在豬 中是特別有意義的,因?yàn)樗鼈冊试S使用降低劑量的精子細(xì)胞用于成功受精,部分地是由于 它們能夠?qū)⒕蛹?xì)胞放置在母豬的生殖道的關(guān)鍵區(qū)域中,包括但不限于,子宮角、輸卵管、 壺腹、峽部以及子宮輸卵管接合處。使用降低的精子細(xì)胞劑量允許使用少得多的在遺傳上 優(yōu)越的公豬用于育種目的,這具有降低育種者的成本并且減少由于必須供養(yǎng)大量公豬所致 的環(huán)境危害的益處。
[0256] (a)使用深部宮內(nèi)導(dǎo)管授精。使用深部宮內(nèi)導(dǎo)管允許人們將精子細(xì)胞置入母豬的 子宮角中并且理想地處于子宮輸卵管接合處。這樣一種深部宮內(nèi)導(dǎo)管的使用和構(gòu)造披露于 美國專利號6, 695, 767中,其披露內(nèi)容特此通過引用以其全文結(jié)合。這樣一種深部宮內(nèi)導(dǎo) 管可以任選地包括一個視頻攝像機(jī)或內(nèi)窺鏡,以允許操作者看見該導(dǎo)管的路徑,這樣可以 在將精子細(xì)胞放置在一個還是兩個子宮角之間作出選擇??商娲?,當(dāng)與放射照相裝置或 熒光檢查裝置結(jié)合使用時,該深部宮內(nèi)導(dǎo)管在母豬生殖道之內(nèi)的位置可以被可視化。由于 它的長度,深部宮內(nèi)導(dǎo)管允許操作者達(dá)到母豬的生殖道的遠(yuǎn)端區(qū)域,包括子宮角一這是使 用用于人工授精的標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)管不可達(dá)到的區(qū)域。在本發(fā)明的一個實(shí)施例中,該深部宮內(nèi)導(dǎo)管 的長度是 1. 8m、l_2m、1-2. 5m、l_3m、2_3m、2-3. 5m 或 2. 5_3m。
[0257] 該深部宮內(nèi)導(dǎo)管可以被引入處于動情期母豬的宮頸管的內(nèi)側(cè),該母豬可以是超排 卵的,但也可以是自然周期或以別的方式誘導(dǎo)的??蓪o毒液體潤滑劑應(yīng)用到該導(dǎo)管上以 便于它穿過陰道。該導(dǎo)管可以包括一個外管或護(hù)套以及一個在該外管或護(hù)套之內(nèi)的柔性探 頭。在本發(fā)明的一個實(shí)施例中,一旦該導(dǎo)管已經(jīng)行進(jìn)到宮頸管,則該柔性探頭可以進(jìn)一步在 該導(dǎo)管的外管之內(nèi)行進(jìn)。該柔性探頭可以行進(jìn)直到達(dá)到子宮角的前面部分。當(dāng)該柔性探頭 在子宮角內(nèi)行進(jìn)時,它可以彎曲并且因此繼續(xù)沿子宮角的曲折路徑行進(jìn)。雖然不是絕對必 要,但是通過該導(dǎo)管的外管引入小量的液體可以促進(jìn)該柔性探頭在其通過宮頸管的通道中 前進(jìn)及其穿過子宮角前進(jìn)。一旦該柔性探頭已被引入達(dá)到子宮角內(nèi)的最終位置,可以將包 含在一個注射器中的精子細(xì)胞樣品連接到該柔性探頭的近端,并且可以將其通過在該柔性 探頭內(nèi)的柔性管道引入到子宮環(huán)境中。為了避免精子細(xì)胞的損失并且確保該精子細(xì)胞樣品 已經(jīng)完全從該柔性管道中排空,隨后可以通過該柔性管道引入小量液體。此后,可以撤回包 括該外管和該柔性探頭的導(dǎo)管。在本發(fā)明的另一個方面,這個過程也可以用于將胚胎傳遞 到子宮角中或者從子宮角中移出胚胎。
[0258] (b)使用腹腔鏡術(shù)授精。使用腹腔鏡術(shù)使母豬授精的優(yōu)點(diǎn)在于,精子細(xì)胞在母豬的 生殖道內(nèi)的放置可以比使用導(dǎo)管甚至更為精確,因此進(jìn)一步使得能夠使用降低的精子細(xì)胞 劑量用于授精。可以靶向子宮的特定區(qū)域,如輸卵管、峽部、壺腹、或子宮輸卵管接合處。作 為非限制性實(shí)例,下列程序可以與本發(fā)明一起使用以使母豬經(jīng)由腹腔鏡術(shù)授精。
[0259] 例如,可以將50ml管中含有的具有約lx 106個精子細(xì)胞/ml的24ml的性別分選 的精子細(xì)胞樣品分裝到2個15ml的管中并且在約3076g在約21°C范圍內(nèi)的溫度離心幾分 鐘(2-5或4分鐘)。如果需要,可將上清液在相同條件下再次離心。然后將生成的精液沉 淀混合并檢查濃度(經(jīng)由Nucleo計數(shù)儀)。用BTS將濃縮的性別分選的精子細(xì)胞樣品稀釋 到10x 106個細(xì)胞/ml的終濃度并檢查這些精子細(xì)胞的活動力和活力。(在該整個過程中 該精子細(xì)胞樣品應(yīng)當(dāng)被保持在室溫(21°C )下。)
[0260] 可以將母豬分組或分開,例如,可將它們單獨(dú)分配到廄的機(jī)械通風(fēng)限制設(shè)施中。母 豬(2 - 6產(chǎn)次)在約第21天斷奶。然后在斷奶后24小時可以通過用約1250IU的馬絨毛 膜促性腺激素(eCG;Folligon,英特威國際有限公司(Intervet International B.V.),博 克斯梅爾(Boxmeer),荷蘭-或一種等效化合物)肌肉內(nèi)注射每個雌性來誘導(dǎo)動情期;72小 時后,用約750IU人絨毛膜促性腺激素(hCG;VeterinCorion,迪瓦沙(Divasa),F(xiàn)armavic S. A.,巴塞羅納,西班牙)或一種等效物對它們進(jìn)行處理。每天進(jìn)行一次動情期檢測(例如 在上午7:00),在eCG注射之后2天開始。檢測動情期的一種方式是允許雌性與成熟公豬鼻 對鼻接觸,并且通過施加反壓來識別展現(xiàn)出靜立發(fā)情反射的母豬,其被考慮為處于動情期; 在此時可以對卵巢進(jìn)行掃描。使用5MHz的多掃描角度換能器通過經(jīng)直腸超聲檢查,可在 hCG注射約30小時之后開始以周期間隔(例如每4個小時)檢查卵巢的成熟卵泡,以便找 到排卵前卵泡的存在。只有顯示多個排卵前卵泡(卵泡腔直徑>6_)的母豬才被選出用于 授精。在超聲檢查后2-3小時之內(nèi)進(jìn)行授精。
[0261] 然后,一旦這些母豬被鎮(zhèn)靜(可以借助于阿扎哌隆施用;賜靜寧(Stresnil) ;2mg/ kg體重,肌肉內(nèi)注射),可以在這些母豬上進(jìn)行腹腔鏡授精。也可以用一種化合物如硫噴妥 鈉(雅培公司(Abbot) ;7mg/kg體重,靜脈內(nèi)注射)誘導(dǎo)如全身麻醉并且用氟燒(3.5% -5%)或一種類似化合物維持。對于手術(shù),可以將母豬置于仰臥位,并且如果可用,使其仰 臥在腹腔鏡支架中。如果使用支架,以高于水平面大約20°的角度將其置于特倫德倫伯 (Trendelenburg)臥位(后肢向上,頭部指向下)。
[0262] 在一個實(shí)施例中,在接近臍部做一個切口(約1. 5cm)。然后以對抗?fàn)恳蛏蠣坷?該切口的邊緣并且使具有插入的0°腹腔鏡的12mm的Optiview套管針(愛惜康內(nèi)鏡外科 公司(Ethicon Endo-surgery),俄亥俄州辛辛那提(Cincinnati 0H),USA)行進(jìn)到該傷口 中。在臍處,借助于輕度切割和適度壓力,穿過皮下脂肪組織、直肌前筋膜、直肌、直肌后筋 膜、腹橫筋膜和腹膜。經(jīng)由監(jiān)視反饋來控制該過程。雖然〇) 2管被連接到該套管針上,但直 到該腹膜被刺穿時才開始充氣。在進(jìn)入腹膜腔和開始形成氣腹之后,移除Optiview的手持 件,并且用0°腹腔鏡代替。用C0 2將腹腔充氣到14mmHg。兩個附屬孔口置于右側(cè)和左側(cè) 部分的半腹部,其分別提供了用于操縱子宮角的腹腔鏡Duval鉗和用于授精針抓持輸卵管 的入口。用峽部區(qū)域中的Duval鉗抓持輸卵管。然后將劑量流(0. lml中含有30-50萬個 精子)插入,并且將性別分選的精子沖洗到輸卵管中。然后在另一個輸卵管中重復(fù)該程序。 在兩側(cè)輸卵管都被授精之后,將套管針移除并且縫合這些切口傷口。
[0263] 本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識到,上述本發(fā)明包括許多發(fā)明實(shí)施例,至少包括下列 各項(xiàng):
[0264] A.-種增加豬的遺傳價值的方法,該方法包括以下步驟:
[0265] 建立針對一個品系的多個交配亞型;
[0266] 確定對于這些交配亞型中的每一個為雄性的子代的百分比、或?qū)τ谶@些交配亞型 中的每一個為雌性的子代的百分比,該百分比相對于對照將導(dǎo)致在該品系中遺傳價值增 加;
[0267] 將來自處于這些交配亞型之一中的雄性豬的精子細(xì)胞樣品分選為一個或多個精 子細(xì)胞亞群,其中一個精子細(xì)胞亞群中的至少60 %的精子細(xì)胞帶有X染色體或Y染色體; 并且
[0268] 用該亞群的精子細(xì)胞使處于這些交配亞型之一中的一個或多個雌性豬授精,以實(shí) 現(xiàn)相對于對照被確定增加遺傳價值的為雄性的子代的百分比或?yàn)榇菩缘淖哟陌俜直取?br>[0269] A1.如A所述的方法,其中被確定增加遺傳價值的為雄性的子代的百分比、或者為 雌性的子代的百分比相對于對照并不增加在該品系中的近親繁殖。
[0270] A2.如A或A1所述的方法,其中該品系包括一個父系或母系。
[0271] A3.如A到A2中任一項(xiàng)所述的方法,其中在該對照中,大約50%的子代是雄性。
[0272] A4.如A到A3中任一項(xiàng)所述的方法,其中在該對照中,有待交配的所有雌性豬用未 分選的精液樣品進(jìn)行授精。
[0273] A5.如A到A4中任一項(xiàng)所述的方法,其中在一個或多個交配亞型中的雄性豬的類 別用包括遺傳價值或年齡的一個或多個特征來定義。
[0274] A6.如A到A5中任一項(xiàng)所述的方法,其中在一個或多個交配亞型中的雌性豬的類 別用包括遺傳價值或產(chǎn)次的一個或多個特征來定義。
[0275] A7.如A到A6中任一項(xiàng)所述的方法,其中在帶有X染色體或Y染色體的精子細(xì) 胞亞群中的精子細(xì)胞的百分比選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:至少65%、至少70%、至少 75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少 99 %和至少100%。
[0276] A8.如A到A7中任一項(xiàng)所述的方法,其中該品系包括一個父系,并且相對于對照被 確定增加該品系的遺傳價值的對于這些交配亞型中的每一個為雄性的子代的百分比、或?qū)?于這些交配亞型中的每一個為雌性的子代的百分比,導(dǎo)致在大約 1〇%到35%之間的對于 該品系為雄性的子代的百分比。
[0277] A9.如A8所述的方法,其中對于該品系為雄性的子代的百分比在大約15 %到30 % 之間。
[0278] A10.如A到A7中任一項(xiàng)所述的方法,其中該品系包括一個母系,并且相對于對照 被確定增加該品系的遺傳價值的對于這些交配亞型中的每一個為雄性的子代的百分比、或 對于這些交配亞型中的每一個為雌性的子代的百分比,導(dǎo)致在大約5%到30%之間的對于 該品系為雄性的子代的百分比。
[0279] All.如A10所述的方法,其中對于該品系為雄性的子代的百分比在大約10%到 25 %之間。
[0280] A12.如A到A7中任一項(xiàng)所述的方法,其中對于這些交配亞型中的每一個為雄性的 子代的百分比、或?qū)τ谶@些交配亞型中的每一個為雌性的子代的百分比在大約〇到10%之 間或者在大約90%到100%之間,并且任何產(chǎn)生的子代是子核或增殖者的成員。
[0281] A13.如A到A12中任一項(xiàng)所述的方法,其中在多個交配亞型中的這些交配亞型的 每一個包括來自該品系的僅僅一個雄性豬或僅僅一個雌性豬。
[0282] A14.如A到A13中任一項(xiàng)所述的方法,其中在多個交配亞型中的這些交配亞型的 每一個包括來自該品系的僅僅一個雄性豬和僅僅一個雌性豬。
[0283] A15.如A到A14中任一項(xiàng)所述的方法,其中這些確定的百分比是使用隨機(jī)性或確 定性方法確定的。
[0284] A16.如A到A15中任一項(xiàng)所述的方法,其中雄性或雌性的遺傳價值是一個或多個 母系性狀的函數(shù)。
[0285] A17.如A到A15中任一項(xiàng)所述的方法,其中雄性或雌性的遺傳價值是一個或多個 父系性狀的函數(shù)。
[0286] A18.如A或A15中任一項(xiàng)所述的方法,其中雄性或雌性的遺傳價值是選擇指數(shù)的 函數(shù)。
[0287] A19.如A或A15中任一項(xiàng)所述的方法,其中雄性或雌性的遺傳價值是EBV的函數(shù)。
[0288] A20.如A18所述的方法,其中該選擇指數(shù)是來源于包含該雄性或該雌性的組的數(shù) 據(jù)的函數(shù)。
[0289] A21.如A16所述的方法,其中這些性狀包括生育力、胎產(chǎn)仔數(shù)和產(chǎn)奶量。
[0290] A22.如A17所述的方法,其中這些性狀包括飼料效率、平均日增重和胴體瘦肉率。
[0291] A23.如A到A22中任一項(xiàng)所述的方法,其中使一個或多個雌性豬授精包括使用通 過一個或多個雌性豬的膜插入的深部宮內(nèi)導(dǎo)管或針向該一個或多個雌性豬的生殖道施用 該亞群。
[0292] A24.如A23所述的方法,其中使用深部宮內(nèi)導(dǎo)管向一個或多個雌性豬的生殖道施 用該亞群包括將所述精子細(xì)胞置入一個或多個子宮角中。
[0293] A25.如A23或A24所述的方法,其中所述深部宮內(nèi)導(dǎo)管包括一個視頻攝像機(jī)或內(nèi) 窺鏡。
[0294] A26.如A23到A25中任一項(xiàng)所述的方法,進(jìn)一步包括經(jīng)由射線照相術(shù)或熒光透視 使該深部宮內(nèi)導(dǎo)管可視化同時插入所述母豬的生殖道中的步驟。
[0295] A27.如A到A26中任一項(xiàng)所述的方法,其中該亞群包含lx 109個或更少的精子細(xì) 胞。
[0296] A28.如A23所述的方法,其中使用通過該一個或多個雌性豬的膜插入的針向該一 個或多個雌性豬的生殖道施用該亞群包括將該亞群注射到該一個或多個雌性豬的一個或 多個輸卵管中。
[0297] A29.如A28所述的方法,進(jìn)一步包括經(jīng)由一個腹腔鏡或視頻攝像機(jī)使插入到所述 一個或多個輸卵管中的所述針可視化的步驟。
[0298] A30.如A到A23和A28到A29中任一項(xiàng)所述的方法,其中該亞群包含lx 106個或 更少的精子細(xì)胞。
[0299] A31.如A到A30中任一項(xiàng)所述的方法,進(jìn)一步包括通過向一個或多個雌性豬施用 一種或多種激素或激素類似物使該一個或多個雌性豬中的動情期同步化或誘導(dǎo)定時排卵 的步驟。
[0300] A32.如A31所述的方法,其中該一種或多種激素或激素類似物包括PG600、 OvuGel、eCG、孕激素、hCG、稀丙孕素或四稀雌酮。