一種硫酸頭孢喹諾的肺靶向plga微球制劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及獸用制劑技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種硫酸頭孢喹諾的肺靶向PLGA微球 制劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 頭孢喹諾是第1個動物專用第4代頭孢菌素類抗生素，因其強(qiáng)抗菌活性、廣抗菌譜 和低耐藥性而被國內(nèi)外廣泛應(yīng)用于治療家畜的呼吸系統(tǒng)疾病。
[0003] 我國對頭孢喹諾及其制劑的研究開發(fā)相對較晚，目前僅有硫酸頭孢喹諾原料藥及 其注射劑（混懸注射液、注射粉針劑）獲得農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)生產(chǎn)和銷售許可，與之相匹配的劑型 種類比較少。頭孢喹諾口服吸收不好，注射吸收較為迅速，在體內(nèi)半衰期較短，僅為1~3 小時。為達(dá)到有效治療濃度，需要多次注射給藥，給臨床應(yīng)用帶來了很大的不便。因此，開 發(fā)具有靶向緩釋性能的制劑迫在眉睫。
[0004]PLGA肺靶向微球可在肺部被截留，使負(fù)載的藥物富集于肺部，有效提高藥物治療 水平，大大降低藥物對非靶器官的毒副作用；同時，PLGA微球的緩釋性能，可使藥物達(dá)到長 效的目的，進(jìn)而避免了頻繁給藥的不便。
[0005] 如何解決家畜用硫酸頭孢喹諾普通制劑所存在的局限性，提高其應(yīng)用價值，深度 開發(fā)以其為原料的新制劑，并應(yīng)用到生產(chǎn)實(shí)際中是本發(fā)明要解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種硫酸頭孢喹諾的肺靶向PLGA微球制劑 及其制備方法，制劑載藥量較高，包封率也大大提高，可以實(shí)現(xiàn)藥物選擇性集中于肺部，提 高藥效，減少毒副反應(yīng)，同時可實(shí)現(xiàn)藥物在肺部緩慢釋放，起到長效的作用。
[0007] 為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種硫酸頭孢喹諾的肺靶向PLGA微球制劑，其 中，其制備方法為：
[0008] 1)分別稱取硫酸頭孢喹諾藥物和PLGA載體，以探頭超聲將藥物分散到5~20 % 明膠溶液，作為內(nèi)水相，將PLGA加入到有機(jī)溶劑中，渦旋溶解作為油相；
[0009] 2)將所述內(nèi)水相和所述油相按照體積比為1:7~15混合，探頭超聲乳化，形成初 乳；
[0010] 3)配制1%PVA水溶液作為外水相，將步驟2)得到的所述初乳與所述外水相按照 體積比1:5~20混合，在2500~5000rpm轉(zhuǎn)速下，以高速剪切機(jī)剪切乳化20-30s，形成復(fù) 乳；
[0011] 4)將步驟3)得到的所述復(fù)乳分散到0. 25%PVA水溶液中，置于磁力攪拌器上低 速攪拌3~5h，揮發(fā)除去有機(jī)溶劑，然后4000rpm離心5-10min收集微球，用超純水洗滌微 球三遍，抽濾，冷凍干燥，即得肺靶向PLGA微球制劑。
[0012] 其中，所述步驟1)中硫酸頭孢喹諾與PLGA的質(zhì)量比為：1:5-20。
[0013] 其中，所述肺靶向PLGA微球制劑的粒徑范圍為7-35um。
[0014] 其中，上述步驟1)中明膠溶液的濃度為10-15%。
[0015] 其中，所述明膠溶液中還含有海藻酸丙二醇酯、瓜爾豆膠、羥甲基纖維素和酪蛋 白酸鈉，所述明膠、海藻酸丙二醇酯、瓜爾豆膠、羥甲基纖維素和酪蛋白酸鈉的質(zhì)量比為： 10-15:0. 05-0. 1:0. 01-0. 05 ：0. 03-0. 3:0. 01-0. 1〇
[0016] 其中，所述步驟1)中的有機(jī)溶劑為二氯甲烷、乙酸乙酯的混合溶劑，質(zhì)量比為： 1:0-3:1;或者，所述步驟1)中的有機(jī)溶劑為二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的混合溶劑， 質(zhì)量比為：1-2:0. 1-1 :0? 1-0. 5:0. 2-0. 6。
[0017] 其中，PLGA的濃度為5~30%，所述PLGA中PLA與PGA的聚合比例為：1:0-9:1。
[0018] 其中，步驟3)中1 %PVA水溶液含有1 %NaCl;步驟4)中0.25 %PVA水溶液含有 1 %NaCl〇
[0019] 其中，步驟3)中1%PVA水溶液含有1%NaClU%KCl和1%ZnCl;步驟4)中 0? 25 %PVA水溶液含有 1 %NaCl、1 %ZNCl。
[0020] 本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明所制備的微球包封率在60%以上，85%以上的微球 粒徑分布在7~35um范圍內(nèi)，因此微球制劑可靶向富集到肺部，有效提高藥物的療效，降 低藥物的毒副作用；同時可延長藥物在肺部的滯留時間，維持血藥濃度平穩(wěn)，起到長效的作 用。
[0021] 說明書附圖
[0022] 圖1為本發(fā)明載藥PLGA微球的表觀形態(tài)圖：(A)載藥PLGA微球光學(xué)顯微鏡下放 大100倍；(B)載藥PLGA微球光學(xué)顯微鏡下放大400倍；(C)和（D)SEM觀察結(jié)果；
[0023] 圖2為載藥PLGA微球體外溶出速率圖；
[0024] 圖3為單劑量尾靜脈注射后，藥物在各臟器中的分布圖；
【具體實(shí)施方式】
[0025] 為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種硫酸頭孢喹諾的肺靶向PLGA微球制劑，其 中，其制備方法為：
[0026] 1)分別稱取硫酸頭孢喹諾藥物和PLGA載體，以探頭超聲將藥物分散到5~20 % 明膠溶液，作為內(nèi)水相，將PLGA加入到有機(jī)溶劑中，渦旋溶解作為油相；
[0027] 2)將所述內(nèi)水相和所述油相按照體積比為1:7~15混合，探頭超聲乳化，形成初 乳；
[0028] 3)配制1%PVA水溶液作為外水相，將步驟2)得到的所述初乳與所述外水相按照 體積比1:5~20混合，在2500~5000rpm轉(zhuǎn)速下，以高速剪切機(jī)剪切乳化20-30s，形成復(fù) 乳；
[0029] 4)將步驟3)得到的所述復(fù)乳分散到0? 25%PVA水溶液中，置于磁力攪拌器上低 速攪拌3~5h，揮發(fā)除去有機(jī)溶劑，然后4000rpm離心5-10min收集微球，用超純水洗滌微 球三遍，抽濾，冷凍干燥，即得肺靶向PLGA微球制劑。
[0030] 其中，所述步驟1)中硫酸頭孢喹諾與PLGA的質(zhì)量比為：1:5-20。
[0031] 其中，所述肺靶向PLGA微球制劑的粒徑范圍為7-35um。
[0032] 其中，上述步驟1)中明膠溶液的濃度為10-15%。
[0033] 其中，所述明膠溶液中還含有海藻酸丙二醇酯、瓜爾豆膠、羥甲基纖維素和酪蛋 白酸鈉，所述明膠、海藻酸丙二醇酯、瓜爾豆膠、羥甲基纖維素和酪蛋白酸鈉的質(zhì)量比為： 10-15:0. 05-0. 1:0. 01-0. 05 ：0. 03-0. 3:0. 01-0. 1〇
[0034] 其中，所述步驟1)中的有機(jī)溶劑為二氯甲烷、乙酸乙酯的混合溶劑，質(zhì)量比為： 1:0-3:1 ;或者，所述步驟1)中的有機(jī)溶劑為二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的混合溶劑， 質(zhì)量比為：1-2:0. 1-1 :0? 1-0. 5:0. 2-0. 6。
[0035] 其中，PLGA的濃度為5~30%，所述PLGA中PLA與PGA的聚合比例為：1:0-9:1。
[0036] 其中，步驟3)中1 %PVA水溶液含有1 %NaCl;步驟4)中0. 25 %PVA水溶液含有 1 %NaCl〇
[0037] 其中，步驟3)中1 %PVA水溶液含有1 %NaCl、1 %KCl和1 %ZnCl;步驟4)中 0? 25 %PVA水溶液含有 1 %NaCl、1 %ZnCl。
[0038] 一、頭孢喹諾肺靶向微球的特性考察
[0039] I. 1微球外觀形態(tài)觀察
[0040] PLGA微球的表觀形態(tài)是通過光學(xué)顯微鏡和掃描電鏡來觀察的。
[0041] 光學(xué)顯微鏡觀察前的樣品處理方法：稱取適量微球粉末，分散到一定體積的生理 鹽水中，玻璃棒蘸取一滴到載玻片上，將蓋玻片自液滴一側(cè)輕輕蓋上，置于顯微鏡下觀察即 可。
[0042] 掃描電鏡觀察前的樣品處理方法：在樣品臺上粘貼好雙面導(dǎo)電膠，用牙簽蘸取微 球樣品粉末后，在導(dǎo)電膠上輕輕滾幾下，使少量微球粉末沾到導(dǎo)電膠上，吹風(fēng)機(jī)吹掉未粘住 的樣品后，噴金處理，上機(jī)觀察。
[0043] 1. 2微球粒徑測量
[0044] 微球藥物含量測定方法的建立及微球載藥性能檢測
[0045] 色譜工作條件
[0046] 色譜柱：AgilentC18 柱（150mmX4. 6mm，5ym)
[0047] 流動相：乙腈-高氯酸鈉溶液（12 :88)
[0048] UV檢測波長：