用于防止紫外線引起的皮膚細胞損傷的包含穗花杉雙黃酮的組合物的制作方法
【專利說明】用于防止紫外線引起的皮膚細胞損傷的包含穗花杉雙黃酮 的組合物
[0001] 本申請是2011年7月22日提交的發(fā)明名稱為"用于防止紫外線引起的皮膚細胞 損傷的包含穗花杉雙黃酮的組合物"的中國專利申請201110238460. 4的分案申請。
技術領域
[0002] 本發(fā)明涉及用于防止紫外線引起的皮膚細胞損傷的包含穗花杉雙黃酮的組合物。
【背景技術】
[0003] 核纖層蛋白是在細胞核中形成原纖維網(wǎng)絡（fibrillarnetwork)的蛋白質(zhì)。核纖 層蛋白根據(jù)蛋白質(zhì)結構和基因表達模式分為A型和B型。核纖層蛋白A型在核膜內(nèi)部形成 纖層（lamina)。核纖層蛋白A型基因上的突變引起被稱為核纖層蛋白?。↖aminopathy)的 疾病。典型實例是Hutchison-Gilford早老綜合征（HGPS)、非典型性維爾納氏綜合征和下 頌末端發(fā)育不良癥（mandibuloacraldysplasia,MAD)，也被稱為早衰。早衰主要是由基因 的第1824位的點突變引起的，由胸腺嘧啶代替胞嘧啶，產(chǎn)生一種在表達過程中不能被正確 加工成蛋白質(zhì)并在細胞核積聚的核纖層蛋白基因形式。
[0004] 早衰的代表性癥狀包括硬皮病皮膚、脫發(fā)、骨質(zhì)缺損、牙齒形成延遲（delayed toothformation)、生長遲緩和皮下脂肪丟失（lossofsubcutaneousfat)。據(jù)報道在早 衰患者中有細胞核的結構和功能異常。核畸變（nuclearaberration)是代表性實例。
[0005] 根據(jù)最新研究，在未患早衰的老年人中也觀察到核畸變。在年齡為81-91歲之間 的老年人中發(fā)生的核畸變與早衰患者的核畸變非常相似。
[0006] 并且，如在早衰患者中發(fā)現(xiàn)的，在老年人中發(fā)現(xiàn)DNA損傷標記磷酸化H2AX增加。
[0007] 因此，需要探索一種能夠控制核畸變、缺陷核纖層蛋白A型的表達和磷酸化H2AX 的表達的用于抗老化的物質(zhì)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 技術問題
[0009] 本發(fā)明涉及用于防止由紫外線引起的皮膚細胞損傷或用于抗老化的組合物，其包 含穗花杉雙黃酮作為活性成分。
[0010] 技術方案
[0011] 本發(fā)明提供用于防止皮膚細胞損傷以防止由紫外線輻射引起的對皮膚細胞的核 膜的損傷的組合物，其包含穗花杉雙黃酮作為活性成分。
[0012] 本發(fā)明還提供用于防止皮膚細胞損傷以控制由紫外線輻射引起的缺陷核纖層蛋 白A型的表達的組合物，其包含穗花杉雙黃酮作為活性成分。
[0013] 本發(fā)明還提供用于防止皮膚細胞損傷以控制由紫外線輻射引起的磷酸化H2A組 蛋白家族的成員X(H2AX)的表達的組合物，其包含穗花杉雙黃酮作為活性成分。
[0014] 本發(fā)明還提供用于對抗由紫外線輻射引起的老化的組合物，其包含穗花杉雙黃酮 作為活性成分。
[0015] 本發(fā)明還提供用于防止由紫外線輻射引起的對皮膚細胞的損傷的化妝品組合物， 其包含穗花杉雙黃酮作為活性成分。
[0016] 本發(fā)明還提供用于防止由紫外線輻射引起的對皮膚細胞的損傷的藥物組合物，其 包含穗花杉雙黃酮作為活性成分。
[0017] 在以下詳細說明、附圖和權利要求中會清楚其它特征和方面。
【附圖說明】
[0018] 從以下所給出的特定示例性實施方案的描述并結合附圖會清楚本發(fā)明的上述目 的和其它目的、特征和優(yōu)點，在所述附圖中：
[0019] 圖1顯示在19歲和39歲個體的細胞中，由紫外線B輻射引起的對細胞核的損傷；
[0020] 圖2顯示39歲個體的細胞核提取物中的早衰蛋白（progerin)(-種核纖層蛋白 突變體）和磷酸化H2AX的蛋白質(zhì)印跡結果；并且
[0021] 圖3比較在紫外線B處理組和穗花杉雙黃酮處理組中，在39歲個體的細胞中由核 纖層蛋白A型缺陷引起的核損傷和磷酸化H2AX表達的程度。
【具體實施方式】
[0022] 從下文中所述的以下實施方案的說明并參考附圖會清楚本發(fā)明的優(yōu)點、特征和方 面。但是，本發(fā)明可以以不同形式實施，而不應被解釋為限于本文所述的實施方案。相反， 提供這些實施方案是為了使本發(fā)明詳盡而完整，并將向本領域技術人員充分表達本發(fā)明的 范圍。本文所用的術語僅僅是出于描述具體實施方案的目的，而并非意圖限制示例性實施 方案。除非上下文中另有明確說明，本文所用的單數(shù)形式"a"、"an"和"the"意圖也包括復 數(shù)形式。還應理解，當用于本說明書中時，術語"包含"和/或"包括"表示存在所述特征、 整數(shù)、步驟、操作、要素和/或組分，但不排除一種或多種其它特征、整數(shù)、步驟、操作、要素、 組分和/或它們的組合的存在或添加。
[0023] 下文中會參考附圖詳細地描述示例性實施方案。
[0024] 穗花杉雙黃酮由化學式1表示：
[0025]
[0026] 本發(fā)明的發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)用紫外線處理成纖維細胞導致缺陷核纖層蛋白A型的表 達增加和核膜的結構畸變。并且，磷酸化H2A組蛋白家族的成員X(H2AX，NCBI參考序列 NP_002096. 1)的表達增加。他們還發(fā)現(xiàn)用穗花杉雙黃酮處理降低了缺陷核纖層蛋白A型的 表達，并且保持了核膜的結構。并且，經(jīng)穗花杉雙黃酮處理降低了DNA損傷標記磷酸化H2AX 的表達。
[0027] 所述紫外線可以是紫外線A、紫外線B或紫外線C。
[0028] 本發(fā)明提供用于對抗由紫外線輻射引起的老化的組合物，其包含穗花杉雙黃酮作 為活性成分。
[0029] 本發(fā)明提供抗老化方法，其包括向個體給藥有效量的穗花杉雙黃酮。該抗老化方 法可以包括向個體給藥化妝品組合物或藥物組合物形式的穗花杉雙黃酮。
[0030] 本發(fā)明還提供用于防止由紫外線引起的對皮膚細胞的損傷的化妝品組合物或藥 物組合物，其包含穗花杉雙黃酮作為活性成分。
[0031] 所述用于防止對皮膚細胞的損傷的藥物組合物可以包含穗花杉雙黃酮以及藥學 上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。
[0032] 可以按照本領域已知的方法將本發(fā)明的藥物組合物制備成用于口服給藥的制劑， 例如散劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、混懸劑、乳劑、糖漿劑、氣霧劑等；或者用于腸胃外給藥的 制劑，例如局部用溶液劑、栓劑、無菌注射劑等。可以包含在本發(fā)明的藥物組合物中的載體、 賦形劑或稀釋劑可以是例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤蘚醇、麥芽糖 醇、淀粉、阿拉伯膠、海藻酸鹽、明膠、磷酸媽、娃酸媽、纖維素、甲基纖維素、微晶纖維素、聚 乙烯吡咯烷酮、水、羥苯甲酯、羥苯丙酯、滑石、硬脂酸鎂或礦物油。此外，常用的填充劑、增 稠劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、表面活性劑等可用作稀釋劑或賦形劑。用于口服給藥的固體 制劑包括片劑、丸劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑等?？梢酝ㄟ^將一種或多種賦形劑（例如淀粉、 碳酸鈣、蔗糖、乳糖、明膠等）添加到本發(fā)明的組合物中來制備固體制劑。除簡單賦形劑外， 還可以添加潤滑劑，例如硬脂酸鎂或滑石。用于口服給藥的液體制劑包括混懸劑、內(nèi)部溶液 劑（internalsolution)、乳劑、糖楽；劑等。除簡單賦形劑（例如水或液體石錯）外，它們還 可以包含各種其它賦形劑，例如潤濕劑、甜味劑、香料、防腐劑等。用于腸胃外給藥的制劑包 括無菌水溶液劑、非水溶液劑、混懸劑、乳劑、凍干制劑和栓劑。對于非水溶液劑或混懸劑， 可以使用丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄欖油、注射用酯如油酸乙酯等。作為栓劑的基質(zhì)，可 以使用witepsol、聚乙二醇、吐溫61、可可脂、月桂脂（laurinbutter)、甘油明膠等。
[0033] 可以取決于目的而將本發(fā)明的組合物口服給藥或腸胃外（例如靜脈內(nèi)、皮下、腹 內(nèi)或局部）給藥。可以取決于患者的情況、體重、年齡和性別、飲食、排泄率、疾病的嚴重性、 組合物類型、給藥時間、給藥方法、給藥途徑、給藥期等而不同地確定給藥劑量?；趦龈芍?劑的重量，每日給藥劑量是100-300mg/kg，特別是100-200mg/kg。必要時，所述組合物可以 一天給藥一次或數(shù)次。
[0034] 現(xiàn)在會描述實施例和實驗。以下實施例和實驗僅用于說明的目的，而并非意圖限 制本發(fā)明的范圍。
[0035] 實施例1.在19歲和39歲個體中，由紫外線B輻射引起的核纖層蛋白A型的表達
[0036] 將19歲或3