Hmgcs2抑制劑在制備治療可卡因成癮的藥物中的用圖
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及HMGCS2抑制劑在制備治療可卡因成癮的藥物中的用途。
【背景技術】
[0002] 可卡因（Cocaine)又稱古柯堿，化學名為苯甲酰甲基芽子堿（methyl benzoylecgonine)，一般呈白色晶體狀，無臭，味苦而麻，其最早用于局部麻醉和治療哮 喘，是最強的天然中樞興奮劑，因其對中樞神經系統(tǒng)的興奮作用而導致濫用，1985年起成為 世界性主要毒品之一。
[0003] 可卡因成癮，是一種慢性復發(fā)性腦部疾病，屬于藥物依賴（drugdependence)類疾 病，可卡因成癮會引起大腦結構和功能的可塑性變化，相關腦區(qū)包括伏隔核、紋狀體、前額 皮質、海馬和腹側被蓋區(qū)，健康也受到多方面的危害，包括精神頹廢、人格缺損、心智功能紊 亂、并發(fā)相應的感染合并癥以及吸毒者不顧一切地尋求和使用毒品而誘發(fā)各種違法犯罪活 動。
[0004] 可卡因成癮的主要特點表現(xiàn)為即使患者在知曉用藥的嚴重后果后，依然強迫性索 取和使用以滿足欲望、對藥物的尋覓和索取失去控制、對事物失去興趣、成癮記憶十分深 亥IJ，即使經過戒斷治療若干年后，接觸與成癮有關的刺激（如毒友、與過去用藥有關的環(huán)境 等）都可能誘發(fā)復吸。
[0005] 鑒于可卡因成癮危害甚大，找到合適的治療靶點和藥物，治療可卡因成癮迫在眉 睫。

【發(fā)明內容】

[0006] 為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一類治療可卡因成癮的藥物。
[0007]HMGCS2 :3羥3甲戊二酰輔酶A合成酶2,又稱為3羥基-3甲基戊二酰輔酶A合成 酶線粒體亞型。
[0008] HMGCS2抑制劑：抑制3羥3甲戊二酰輔酶A合成酶2的活性或者表達的物質。
[0009] 本發(fā)明首先提供了HMGCS2抑制劑在制備治療可卡因成癮的藥物中的用途。
[0010] 優(yōu)選地，所述治療可卡因成癮的降低HMGCS2酶活的藥物。進一步優(yōu)選地，
[0011] 所述降低HMGCS2酶活的藥物是化合物I，其結構式如下：
[0012]
化學式為C1SH2S05,分子量為324. 41。
[0013] 本發(fā)明還提供了一種治療可卡因成癮的藥物，它是以HMGCS2抑制劑為活性成分， 加上藥學上可接受的輔料或者輔助性成分制備而成的制劑。
[0014] 優(yōu)選地，所述HMGCS2抑制劑為降低HMGCS2酶活的藥物。進一步優(yōu)選地，
[0015]所述降低HMGCS2酶活的藥物是化合物I，其結構式如下：
化學式為C1SH2S05,分子量為324. 41。
[0016] 優(yōu)選地，所述制劑是注射制劑。
[0017]HMGCS2抑制劑可以有效減弱可卡因獎賞行為，治療可卡因成癮，臨床應用前景良 好。
[0018] 以下通過實施例形式的【具體實施方式】，對本發(fā)明的上述內容作進一步的詳細說 明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發(fā)明權利要 求書記載的內容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。
【附圖說明】
[0019] 圖1小鼠條件性位置偏好箱
[0020] 圖2條件性位置偏好實驗設計示意圖。GroupI:生理鹽水組；GroupII:可卡因 組。S:腹腔注射生理鹽水；C:腹腔注射可卡因。
[0021] 圖3小鼠自發(fā)活動箱
[0022] 圖4可卡因處理誘導小鼠伏隔核HMGCS2的表達及活性。（A)可卡因條件性位置 偏好小鼠伏隔核HMGCS2的表達水平。⑶可卡因單次給藥后30min(Single-30min)和 24h(Single_24h)，連續(xù)給藥7天〇tepeated-7days)后伏隔核HMGCS2的表達水平。（C) 可卡因條件性位置偏好小鼠伏隔核HMGCS2的酶活性。Saline，SA:腹腔注射生理鹽水組； Cocaine，C0:腹腔注射可卡因組。n= 6/組。*p〈0. 05,可卡因條件性位置偏好成癮、單次 給藥后30min和24h、連續(xù)給藥7天，各組與生理鹽水組比較有統(tǒng)計學差異。
[0023] 圖5伏隔核注射HMGCS2小分子抑制劑對可卡因誘導的行為敏化的影響。（A) 伏隔核注射Hymeglusin干擾可卡因自發(fā)活動行為敏化模型建立模式圖。（B)伏隔核注 射Hymeglusin對可卡因誘導的自發(fā)活動的影響，n= 15/組。（C)Hymeglusin預處理 對可卡因行為敏化小鼠伏隔核HMGCS2的酶活性的影響，n= 6/組。Saline-Saline: 伏隔核注射生理鹽水-腹腔注射生理鹽水組；Hymeglusin-Saline:伏隔核注射 Hymeglusin-腹腔注射生理鹽水組；Saline-Cocaine:伏隔核注射生理鹽水-腹腔 注射可卡因組；Hymeglusin-Cocaine:伏隔核注射Hymeglusin-腹腔注射可卡因組。 *p〈0. 05，Hymeglusin-Saline組、Saline-Cocaine組、伏Hymeglusin-Cocaine組分別與 Saline-Saline組比較有統(tǒng)計學差異。#p〈0. 05，Hymeglusin_Cocaine組與Saline-Cocaine 組比較有統(tǒng)計學差異。
[0024] 圖6伏隔核注射HMGCS2小分子抑制劑對可卡因條件性位置偏好的影響。（A) 伏隔核注射Hymeglusin干擾可卡因條件性位置偏好模型建立模式圖。（B)伏隔核注射 Hymeglusin對可卡因條件性位置偏好的影響，n=15/組。（C)Hymeglusin預處理對可卡 因條件性位置偏好小鼠伏隔核HMGCS2的mRNA轉錄的影響，n=15/組。（D)Hymeglusin 預處理對可卡因條件性位置偏好小鼠伏隔核HMGCS2的蛋白表達的影響，n=15/組。 Saline-Saline:伏隔核注射生理鹽水-腹腔注射生理鹽水組；Hymeglusin-Saline:伏隔核 注射Hymeglusin-腹腔注射生理鹽水組；Saline-Cocaine:伏隔核注射生理鹽水-腹腔注 射可卡因組；Hymeglusin-Cocaine:伏隔核注射Hymeglusin-腹腔注射可卡因組。*p〈0. 05， Hymeglusin-Saline組、Saline-Cocaine組、Hymeglusin-Cocaine組分別與Saline-Saline 組比較有統(tǒng)計學差異。#p〈〇.〇5，Hymeglusin_Cocaine組與Saline-Cocaine組比較有統(tǒng)計 學差異。
[0025] 圖7HMGCS2小分子抑制劑對可卡因條件性位置偏好小鼠伏隔核能量形式的 影響。（A)Hymeglusin干擾可卡因條件性位置偏好模型下伏隔核ATP的含量變化。（B) Hymeglusin干擾可卡因條件性位置偏好模型下伏隔核乙酰輔酶A(Acetyl-C〇A)的含量 變化。（C)Hymeglusin干擾可卡因條件性位置偏好模型下伏隔核檸檬酸合酶活性的變 化。（D)HymegluSin干擾可卡因條件性位置偏好模型下伏隔核NAD+/NADH比率的變化。 Saline-Saline:伏隔核注射生理鹽水-腹腔注射生理鹽水組；Hymeglusin-Saline:伏隔核 注射Hymeglusin-腹腔注射生理鹽水組；Saline-Cocaine:伏隔核注射生理鹽水-腹腔注 射可卡因組；Hymeglusin-Cocaine:伏隔核注射Hymeglusin-腹腔注射可卡因組。n= 6/ 組。*p〈0. 05,Hymeglusin-Saline組、Saline-Cocaine組、Hymeglusin-Cocaine組分別與 Saline-Saline組比較有統(tǒng)計學差異。#p〈0. 05，Hymeglusin_Cocaine組與Saline-Cocaine 組比較有統(tǒng)計學差異。
[0026] 圖8沉默伏隔核Hmgcs2對可卡因行為敏化的影響。（A)慢病毒shHmgcs2在伏 隔核注射示意圖。（B)伏隔核注射shHmgCS2慢病毒對可卡因誘導的自發(fā)活動的影響，n= 15/組。（C)可卡因行為敏化模型下，伏隔核注射shHmgcs2慢病毒對HMGCS2mRNA轉錄水 平的影響，n= 6/組。（D)可卡因行為敏化模型下，伏隔核注射shHmgCS2慢病毒對HMGCS2 蛋白表達水平的影響，n= 6/組。*p〈0.05，shHmgcs2_Saline組、shControl-Cocaine 組、shHmgcs2_Cocaine組分別與shControl-Saline組比較有統(tǒng)計學差異。#p〈0. 05， shHmgcs2_Cocaine組與shControl-Cocaine組比較有統(tǒng)計學差異。
[0027] 圖9沉默伏隔核HmgCS2基因對可卡因條件性位置偏好的影響。（A)伏隔核 注射shHmgcs2慢病毒對可卡因誘導的條件性位置偏好的影響，n = 15/組。（B)可 卡因行為敏化模型下，伏隔核注射shHmgCS2慢病毒對HMGCS2酶活性的影響，n = 6/ 組。*p〈0. 05，shHmgcs2_Saline組、shControl-Cocaine組、shHmgcs2_Cocaine組 分別與shControl-Saline組比較有統(tǒng)計學差異。#p〈0. 05，shHmgcs2_Cocaine組與 shContro 1-Cocaine組比較有統(tǒng)計學差異。
[0028] 圖10沉默伏隔核HmgCS2基因對可卡因條件性位置偏好小鼠伏隔核能量形式的影 響。（A)伏隔核注射shHmgcs2慢病毒干擾可卡因條件性位置偏好模型下伏隔核ATP的含量 變化。（B)伏隔核注射shHmgCS2慢病毒干擾可卡因條件性位置偏好模型下伏隔核乙酰輔酶 A(Acetyl-C〇A)的含量變化。（C)伏隔核注射shHmgCS2慢病毒干擾可卡因條件性位置偏好 模型下伏隔核檸檬酸合酶活性的變化。（D)伏隔核注射shHmgCS2慢病毒干擾可卡因條件 性位置偏好模型下伏隔核NAD+/NADH比率的變化。n= 6/組。*p〈0. 05,shHmgcs2-Saline 組、shControl-Cocaine組、shHmgcs2_Cocaine組分別與shControl-Saline組比較有統(tǒng)計 學差異。#P〈〇. 05,shHmgcs2_Cocaine組與shControl-Cocaine組比較有統(tǒng)計學差異。
[0029] 圖11泳道1:空白對照；泳道2:陽性對照；泳道3~泳道9:PLLU2G-shHmgcs2①~ ⑧號克??；M:100bpDNALadder。
[0030] 圖12重組載體結構示意圖。
[0031] 圖13PLLU2G-shHmgcs2質粒轉染293T細胞48h病變情況。
[0032] 圖14PLLU2G-shcontrol質粒轉染293T細胞48h病變情況。
【具體實施方式】
[0033] 實驗例1HMGCS2抑制劑治療可卡因成癮
[0034] 1 前言
[0035] 本研究中，采用藥理與遺傳手段，向小鼠伏隔核內定位注射關鍵酶的小分子抑制 劑或沉默關鍵酶基因的慢病毒，結合iH-NMR代謝組學分析確認HMGCS2抑制劑可以有效治 療可卡因成癮。
[0036] 2材料與方法
[0037] 2. 1實驗材料
[0038] 2. 1. 1實驗試劑
[0039] (1)鹽酸可卡因，購自中國藥品生物制品鑒定所。
[0040] (2)生理鹽水，購自四川科倫藥業(yè)股份有限公司。
[0041] (3)Hymeglusin((1233A;F244 ;L-659-699))，購自美國Sigma-Aldrich公司，其結
構式 化 ， 學式為C1SH2S05，分子量為324. 41。
[0042] (4)HMG_CoA合成酶活