一種稀土羥基乙叉二膦酸鹽的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種稀土羥基乙叉二膦酸鹽在制備抗骨質(zhì)疏松癥 藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 骨質(zhì)疏松癥（Osteoporosis，簡(jiǎn)稱(chēng)0P)是一種以骨量減少，骨的微觀結(jié)構(gòu)退化為特 征，致使骨脆性增加而易于發(fā)生骨折的一種全身性骨骼疾病。骨質(zhì)疏松癥是一個(gè)全球性的 健康問(wèn)題，嚴(yán)重性?xún)H次于心血管病，其發(fā)病率己在世界常見(jiàn)病、多發(fā)病中躍居第六位。我國(guó) 把骨質(zhì)疏松癥列為國(guó)家重點(diǎn)攻關(guān)的老年疾病之一。
[0003]目前的抗骨質(zhì)疏松藥物不盡人意，雌激素替代療法（ERT)是目前預(yù)防和治療絕經(jīng) 后骨質(zhì)疏松最主要的方法，但是近年來(lái)的研究表明ERT易使絕經(jīng)后婦女患乳腺癌、子宮內(nèi) 膜癌和卵巢癌的危險(xiǎn)性增加。另外，臨床使用最為普遍的治療骨質(zhì)疏松藥物大都價(jià)格昂貴， 無(wú)法普及使用，故尋找其它藥物來(lái)預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松是當(dāng)前研究工作的一個(gè)活躍領(lǐng)域。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種稀土羥基乙叉二膦酸鹽的應(yīng)用，制備的抗骨質(zhì)疏松癥 藥物對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠的成骨細(xì)胞活力下降和骨生物力學(xué)強(qiáng)度降低有明顯的治療作用， 而無(wú)明顯毒副作用，應(yīng)用前景廣闊。
[0005] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案： 一種稀土羥基乙叉二膦酸鹽的應(yīng)用：稀土羥基乙叉二膦酸鹽用于制備抗骨質(zhì)疏松癥的 藥物。
[0006] 藥物由羥基乙叉二膦酸鑭、羥基乙叉二膦酸鈰、羥基乙叉二膦酸鐠、羥基乙叉二膦 酸釹、羥基乙叉二膦酸钷、羥基乙叉二膦酸釤、羥基乙叉二膦酸銪、羥基乙叉二膦酸釓中的 一種或幾種組成。
[0007] 羥基乙叉二膦酸鑭是將氯化鑭、氧化鑭、氫氧化鑭中的一種或幾種加入到羥基乙 叉二膦酸溶液中制備而成。
[0008] 羥基乙叉二膦酸鈰是將氯化鈰、氧化鈰、氫氧化鈰中的一種或幾種加入到羥基乙 叉二膦酸溶液中制備而成。
[0009] 羥基乙叉二膦酸鐠是將氯化鐠、氧化鐠、氫氧化鐠中的一種或幾種加入到羥基乙 叉二膦酸溶液中制備而成。
[0010] 羥基乙叉二膦酸釹是將氯化釹、氧化釹、氫氧化釹中的一種或幾種加入到羥基乙 叉二膦酸溶液中制備而成。
[0011] 羥基乙叉二膦酸钷是將氯化钷、氧化钷、氫氧化钷中的一種或幾種加入到羥基乙 叉二膦酸溶液中制備而成。
[0012] 羥基乙叉二膦酸釤是將氯化釤、氧化釤、氫氧化釤中的一種或幾種加入到羥基乙 叉二膦酸溶液中制備而成。
[0013] 羥基乙叉二膦酸銪是將氯化銪、氧化銪、氫氧化銪中的一種或幾種加入到羥基乙 叉二膦酸溶液中制備而成。
[0014] 羥基乙叉二膦酸釓是將氯化釓、氧化釓、氫氧化釓中的一種或幾種加入到羥基乙 叉二膦酸溶液中制備而成。
[0015] 本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn)在于：將稀土羥基乙叉二膦酸鹽應(yīng)用于制備抗骨質(zhì)疏松癥藥 物，對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠的成骨細(xì)胞活力下降和骨生物力學(xué)強(qiáng)度降低有明顯的治療作用， 而無(wú)明顯毒副作用，應(yīng)用前景廣闊。
【具體實(shí)施方式】
[0016] -、體外試驗(yàn) 將稀土羥基乙叉二膦酸鹽(羥基乙叉二膦酸鑭、羥基乙叉二膦酸鈰、羥基乙叉二膦酸 鐠、羥基乙叉二膦酸釹、羥基乙叉二膦酸钷、羥基乙叉二膦酸釤、羥基乙叉二膦酸銪、羥基乙 叉二膦酸釓）分別用PBS(磷酸鹽緩沖液）配制成lOmg/mL儲(chǔ)備液，臨用前稀釋成1000^/ mL，100M-g/mL〇 _7] 實(shí)驗(yàn)步驟：取原代培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞（0B)以2XIO4個(gè)/mL接種于96孔板，每孔 體積90ML，在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。待細(xì)胞貼壁后，加入稀土羥基乙叉二膦酸鹽的PBS溶 液10ML，使稀土羥基乙叉二膦酸鹽的終濃度為100Kg/mL，10Pg/mL，培養(yǎng)48h后，每孔加入 MTT溶液（5mg/mL)10ML，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中孵育4h，傾去上清液后，每孔加入DMSO100ML，振 蕩后用酶標(biāo)儀于570nm處測(cè)定各孔吸光度值。同時(shí)設(shè)定空白組（以同體積的PBS代替提取 物)，根據(jù)下面公式計(jì)算細(xì)胞存活率（Cellviability)=(稀土羥基乙叉二膦酸鹽組OD值/ 空白組OD值）X100%。
[0018] 所得結(jié)果見(jiàn)表1。
[0019] 表1稀土羥基乙叉二膦酸鹽對(duì)成骨細(xì)胞增殖的影響
注：1、與對(duì)照組比較 *P〈〇. 05, #P〈0. 01，P〈0. 001， 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，鑭、鋪、銪、IL的羥基乙叉二膦酸鹽在lOOl^g/mL和lOPg/mL濃度條件下， 對(duì)成骨細(xì)胞均具有明顯的促增殖作用。
[0020] 二、稀土羥基乙叉二膦酸鹽體內(nèi)藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)施例 1.實(shí)驗(yàn)方法： I. 1劑量設(shè)計(jì)與分組：三個(gè)實(shí)驗(yàn)組的劑量分別為500、100、20mg/kgBW;另設(shè)去勢(shì)模型 對(duì)照、雌二醇陽(yáng)性對(duì)照及假手術(shù)陰性對(duì)照組。
[0021] 1. 2卵巢摘除術(shù)： 首先經(jīng)大鼠腹腔注射50mg/kgBW戊巴比妥鈉溶液麻醉，中下腹部去毛用碘酒感和酒精 進(jìn)行局部消毒后，沿腹壁正中線(xiàn)做Icm左右切口對(duì)大鼠實(shí)施去勢(shì)手術(shù)，摘除雙側(cè)卵巢。另取 一組大鼠手術(shù)同上但不摘除雙側(cè)卵巢，作假手術(shù)對(duì)照。
[0022] 1. 3動(dòng)物分組： 將手術(shù)動(dòng)物根據(jù)體重隨機(jī)分為三個(gè)實(shí)驗(yàn)組和兩個(gè)對(duì)照組，即高劑量組、中劑量組、低劑 量組、去勢(shì)模型對(duì)照、雌二醇陽(yáng)性對(duì)照，另設(shè)假手術(shù)陰性對(duì)照，每組10只動(dòng)物單籠飼養(yǎng)。三 個(gè)實(shí)驗(yàn)組按設(shè)計(jì)量以ImVlOOgBW經(jīng)口灌胃給予受試物，假手術(shù)陰性對(duì)照及去勢(shì)模型對(duì)照 以等量去離子水灌胃；雌二醇陽(yáng)性對(duì)照給予劑量為2mg/kgBW。全部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均飲用去離 子水，每周稱(chēng)重一次，實(shí)驗(yàn)周期為12周。
[0023] 1. 4測(cè)定： 動(dòng)物喂養(yǎng)12周后斷頭處死，用SD-1000骨密度儀，測(cè)量大鼠股骨中點(diǎn)及股骨遠(yuǎn)心端的 骨密度。
[0024] 2.稀土羥基乙叉二膦酸鹽對(duì)大鼠骨密度的影響： 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與模型對(duì)照組比較，稀土羥基乙叉二膦酸鹽中、高劑量組均顯著提高大 鼠股骨遠(yuǎn)心端骨密度值和骨中點(diǎn)骨密度值（P< 0. 05)。
[0025] 本發(fā)明所述的具有抗骨質(zhì)疏松作用的藥物，其治療和預(yù)防的骨質(zhì)疏松包括成骨細(xì) 胞增殖活力下降及骨密度下降，從而防止因成骨細(xì)胞活力下降和骨強(qiáng)度下降而造成的骨折 危險(xiǎn)的增加。
[0026] 藥效實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明具有以下藥效作用： 1、對(duì)于原代培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞的增殖具有明顯的促進(jìn)作用，與空白組比較，差異有 顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示本發(fā)明的幾組藥物均有明顯的促成骨細(xì)胞增殖的作用。
[0027] 2、對(duì)去勢(shì)引起骨質(zhì)疏松癥模型動(dòng)物骨生物力學(xué)強(qiáng)度下降有明顯的治療作用。本發(fā) 明幾組藥物均可明顯提高去勢(shì)引起骨質(zhì)疏松癥模型動(dòng)物的骨抗折強(qiáng)度和骨抗壓強(qiáng)度。結(jié)果 表明本發(fā)明的幾組藥物均有明顯加骨生物力學(xué)強(qiáng)度的作用，提示這些成分組均具有明顯的 減少骨質(zhì)疏松引起的骨質(zhì)風(fēng)險(xiǎn)的作用。
[0028] 3、安全性試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明未見(jiàn)明顯毒副作用。
[0029] 4、本發(fā)明的稀土羥基乙叉二膦酸鹽與羥基乙叉二膦酸鈉相比，成本低，且具有一 定的骨革E向作用。
[0030] 以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡依本發(fā)明申請(qǐng)專(zhuān)利范圍所做的均等變化與 修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種稀土羥基乙叉二膦酸鹽的應(yīng)用，其特征在于：稀土羥基乙叉二膦酸鹽用于制備 抗骨質(zhì)疏松癥的藥物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：藥物由羥基乙叉二膦酸鑭、羥基乙叉二膦 酸鈰、羥基乙叉二膦酸鐠、羥基乙叉二膦酸釹、羥基乙叉二膦酸钷、羥基乙叉二膦酸釤、羥基 乙叉二膦酸銪、羥基乙叉二膦酸釓中的一種或幾種組成。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：羥基乙叉二膦酸鑭是將氯化鑭、氧化鑭、 氫氧化鑭中的一種或幾種加入到羥基乙叉二膦酸溶液中制備而成。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：羥基乙叉二膦酸鈰是將氯化鈰、氧化鈰、 氫氧化鈰中的一種或幾種加入到羥基乙叉二膦酸溶液中制備而成。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：羥基乙叉二膦酸鐠是將氯化鐠、氧化鐠、 氫氧化鐠中的一種或幾種加入到羥基乙叉二膦酸溶液中制備而成。6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：羥基乙叉二膦酸釹是將氯化釹、氧化釹、 氫氧化釹中的一種或幾種加入到羥基乙叉二膦酸溶液中制備而成。7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：羥基乙叉二膦酸钷是將氯化钷、氧化钷、 氫氧化钷中的一種或幾種加入到羥基乙叉二膦酸溶液中制備而成。8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：羥基乙叉二膦酸釤是將氯化釤、氧化釤、 氫氧化釤中的一種或幾種加入到羥基乙叉二膦酸溶液中制備而成。9. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：羥基乙叉二膦酸銪是將氯化銪、氧化銪、 氫氧化銪中的一種或幾種加入到羥基乙叉二膦酸溶液中制備而成。10. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于：羥基乙叉二膦酸釓是將氯化釓、氧化釓、 氫氧化釓中的一種或幾種加入到羥基乙叉二膦酸溶液中制備而成。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種稀土羥基乙叉二膦酸鹽的應(yīng)用，稀土羥基乙叉二膦酸鹽用于制備抗骨質(zhì)疏松癥的藥物。該藥物對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠的成骨細(xì)胞活力下降和骨生物力學(xué)強(qiáng)度降低有明顯的治療作用，而無(wú)明顯毒副作用，應(yīng)用前景廣闊。
【IPC分類(lèi)】A61K31/663, A61P19/10
【公開(kāi)號(hào)】CN105079008
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510552307
【發(fā)明人】朱林華, 朱甜, 戴春燕, 沈梅, 朱祺東
【申請(qǐng)人】海南師范大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年11月25日
【申請(qǐng)日】2015年9月2日