或甲醇溶液進行醇提，經(jīng)過濾得到濾液；該濾液在真空度為0.09 MPa、溫度為50°C的條件下經(jīng)減壓干燥至膏狀，即得小葉黑柴胡醇提物1881.2 go
[0030]其中:醇提條件是指料液比為Ikg:20L、溫度為60°C、提取次數(shù)為I次、每次提取時間為3 ho
[0031]⑵液液分配富集:小葉黑柴胡醇提物用其質(zhì)量50倍的分析純水分散，得到分散液；該分散液用其50倍體積的乙酸乙酯萃取3次，合并得到乙酸乙酯萃取液；乙酸乙酯萃取液在真空度為0.09 MPa、溫度為50°C的條件下經(jīng)減壓干燥得小葉黑柴胡乙酸乙酯部位697.8 go
[0032]⑶樹脂柱色譜除雜:在小葉黑柴胡乙酸乙酯部位中加入其質(zhì)量5倍的體積分數(shù)為5%的甲醇溶液進行溶解，然后經(jīng)樹脂柱分離，并依次以水溶液、體積分數(shù)為90%的甲醇溶液按5倍的柱體積進行梯度洗脫，收集90%甲醇洗脫物；該90%甲醇洗脫物在真空度為0.09MPa、溫度為50°C的條件下經(jīng)減壓干燥即得小葉黑柴胡浸膏粗粉。
[0033]其中:樹脂柱為HP20SS型樹脂柱。小葉黑柴胡乙酸乙酯部位與樹脂比例為I g:30 mLo
[0034]⑷硅膠柱層析分離:在小葉黑柴胡浸膏粗粉中加入其質(zhì)量2倍體積分數(shù)為100%的甲醇溶液進行溶解，經(jīng)硅膠柱色譜分離后，用10倍柱體積的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，按每份500 mL收集餾分，并經(jīng)薄層色譜檢測，其中展開劑為氯仿、甲醇按5 mL:5 mL的體積比混合而成的混合溶劑，顯色劑為體積濃度10%的濃硫酸乙醇溶液，合并Rf值為0.2-0.7的餾分；Rf值為0.2-0.7的餾分在真空度為0.09 MPa、溫度為50°C的條件下經(jīng)減壓干燥，即得呈黃色粉末狀的小葉黑柴胡浸膏粉416.2 go
[0035]其中:氯仿-甲醇混合溶劑是指氯仿和甲醇按7:3的體積比(mL/ mL)混合而成的溶劑。
[0036]娃膠柱的尺寸為60 mmX 100謹。
[0037]實施例3 —種抗結(jié)腸癌小葉黑柴胡浸膏粉的規(guī)?；苽浞椒?，包括以下步驟:
⑴提取:將5.0 Kg小葉黑柴胡藥材粉碎至80目后，加入體積分數(shù)為95%的乙醇溶液或甲醇溶液進行醇提，經(jīng)過濾得到濾液；該濾液在真空度為0.08 MPa、溫度為60°C的條件下經(jīng)減壓干燥至膏狀，即得小葉黑柴胡醇提物942.2 go
[0038]其中:醇提條件是指料液比為Ikg:15L、溫度為80°C、提取次數(shù)為2次、每次提取時間為2 ho
[0039]⑵液液分配富集:小葉黑柴胡醇提物用其質(zhì)量40倍的分析純水分散，得到分散液；該分散液用其40倍體積的乙酸乙酯萃取3次，合并得到乙酸乙酯萃取液；乙酸乙酯萃取液在真空度為0.08 MPa、溫度為60°C的條件下經(jīng)減壓干燥得小葉黑柴胡乙酸乙酯部位346.2 go
[0040]⑶樹脂柱色譜除雜:在小葉黑柴胡乙酸乙酯部位中加入其質(zhì)量3倍的體積分數(shù)為15%的甲醇溶液進行溶解，然后經(jīng)樹脂柱分離，并依次以水溶液、體積分數(shù)為90%的甲醇溶液按3倍的柱體積進行梯度洗脫，收集90%甲醇洗脫物；該90%甲醇洗脫物在真空度為0.08MPa、溫度為60°C的條件下經(jīng)減壓干燥即得小葉黑柴胡浸膏粗粉309.8 g。
[0041]其中:樹脂柱為MCI型樹脂柱。小葉黑柴胡乙酸乙酯部位與樹脂比例為I g:30
mLo
[0042]⑷硅膠柱層析分離:在小葉黑柴胡浸膏粗粉中加入其質(zhì)量3倍體積分數(shù)為90%的甲醇溶液進行溶解，經(jīng)硅膠柱色譜分離后，用8倍柱體積的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，按每份300 mL收集餾分，并經(jīng)薄層色譜檢測，其中展開劑為氯仿、甲醇按5 mL:5 mL的體積比混合而成的混合溶劑，顯色劑為體積濃度10%的濃硫酸乙醇溶液，合并Rf值為0.2-0.7的餾分；Rf值為0.2-0.7的餾分在真空度為0.08 MPa、溫度為60°C的條件下經(jīng)減壓干燥，即得呈黃色粉末狀的小葉黑柴胡浸膏粉206.9 go
[0043]其中:氯仿-甲醇混合溶劑是指氯仿和甲醇按5:5的體積比(mL/ mL)混合而成的溶劑。
[0044]娃膠柱的尺寸為50 mmX80 mm。
[0045]上述實施例1~3制得的小葉黑柴胡浸膏粉在制備抗結(jié)腸癌藥物或保健食品中的應(yīng)用是指:該小葉黑柴胡浸膏粉作為有效組分按常規(guī)方法與藥學(xué)上可接受的任何載體制成各類抗結(jié)腸癌藥用制劑，或作為有效組分按常規(guī)方法與食品科學(xué)上可接受的任何載體制成各類保健類食品。
【主權(quán)項】
1.一種抗結(jié)腸癌小葉黑柴胡浸膏粉的規(guī)模化制備方法，包括以下步驟: ⑴提取:將小葉黑柴胡藥材粉碎至30~100目后，加入體積分數(shù)為95%的乙醇溶液或甲醇溶液進行醇提，經(jīng)過濾得到濾液；該濾液經(jīng)減壓干燥至膏狀，即得小葉黑柴胡醇提物； ⑵液液分配富集:所述小葉黑柴胡醇提物用其質(zhì)量30~50倍的分析純水分散，得到分散液；該分散液用其30~50倍體積的乙酸乙酯萃取3次，合并得到乙酸乙酯萃取液；所述乙酸乙酯萃取液經(jīng)減壓干燥得小葉黑柴胡乙酸乙酯部位； ⑶樹脂柱色譜除雜:在所述小葉黑柴胡乙酸乙酯部位中加入其質(zhì)量2~5倍的體積分數(shù)為5~20%的甲醇溶液進行溶解，然后經(jīng)樹脂柱分離，并依次以水溶液、體積分數(shù)為90%的甲醇溶液按2~5倍的柱體積進行梯度洗脫，收集90%甲醇洗脫物；該90%甲醇洗脫物經(jīng)減壓干燥即得小葉黑柴胡浸膏粗粉； ⑷硅膠柱層析分離:在所述小葉黑柴胡浸膏粗粉中加入其質(zhì)量2~5倍體積分數(shù)為80-100%的甲醇溶液進行溶解，經(jīng)硅膠柱色譜分離后，用5~10倍柱體積的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，按每份200~500 mL收集餾分，并經(jīng)薄層色譜檢測，其中展開劑為氯仿、甲醇按5:5的體積比混合而成的混合溶劑，顯色劑為體積濃度10%的濃硫酸乙醇溶液，合并Rf值為0.2-0.7的餾分；所述Rf值為0.2-0.7的餾分經(jīng)減壓干燥，即得呈黃色粉末狀的小葉黑柴胡浸膏粉。2.如權(quán)利要求1所述的一種抗結(jié)腸癌小葉黑柴胡浸膏粉的規(guī)模化制備方法，其特征在于:所述步驟⑴中醇提條件是指料液比為Ikg:10~20L、溫度為60°C ~95°C、提取次數(shù)為1~3次、每次提取時間為1~3 ho3.如權(quán)利要求1所述的一種抗結(jié)腸癌小葉黑柴胡浸膏粉的規(guī)?；苽浞椒ǎ涮卣髟谟?所述步驟⑴、所述步驟⑵、所述步驟⑶及所述步驟⑷中的減壓干燥條件均是指真空度為0.06-0.09 MPa,溫度為 50-65 °C。4.如權(quán)利要求1所述的一種抗結(jié)腸癌小葉黑柴胡浸膏粉的規(guī)模化制備方法，其特征在于:所述步驟⑶中樹脂柱為HP20SS型樹脂柱或MCI型樹脂柱。5.如權(quán)利要求1所述的一種抗結(jié)腸癌小葉黑柴胡浸膏粉的規(guī)模化制備方法，其特征在于:所述步驟⑷中氯仿-甲醇混合溶劑是指氯仿和甲醇按7:3~3:7的體積比混合而成的溶劑。6.如權(quán)利要求1所述的一種抗結(jié)腸癌小葉黑柴胡浸膏粉的規(guī)?；苽浞椒?，其特征在于:所述步驟⑷中娃膠柱的尺寸為30 mm~60 mmX60 mm -100 mm。7.如權(quán)利要求1所述的一種抗結(jié)腸癌小葉黑柴胡浸膏粉的規(guī)模化制備方法制得的小葉黑柴胡浸膏粉在制備抗結(jié)腸癌藥物或保健食品中的應(yīng)用，其特征在于:該小葉黑柴胡浸膏粉作為有效組分按常規(guī)方法與藥學(xué)上可接受的任何載體制成各類抗結(jié)腸癌藥用制劑，或作為有效組分按常規(guī)方法與食品科學(xué)上可接受的任何載體制成各類保健類食品。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種抗結(jié)腸癌小葉黑柴胡浸膏粉的規(guī)?；苽浞椒ǎ摲椒òㄒ韵虏襟E：⑴提?。盒∪~黑柴胡藥材粉碎后經(jīng)醇提、過濾、減壓干燥至膏狀，即得小葉黑柴胡醇提物；⑵液液分配富集：小葉黑柴胡醇提物經(jīng)分散、萃取、減壓干燥得小葉黑柴胡乙酸乙酯部位；⑶樹脂柱色譜除雜：小葉黑柴胡乙酸乙酯部位溶解后經(jīng)樹脂柱分離，并進行梯度洗脫，收集90%甲醇洗脫物；該90%甲醇洗脫物經(jīng)減壓干燥即得小葉黑柴胡浸膏粗粉；⑷硅膠柱層析分離：小葉黑柴胡浸膏粗粉溶解后經(jīng)硅膠柱色譜分離、洗脫，并經(jīng)薄層色譜檢測，收集Rf值為0.2~0.7的餾分；該餾分經(jīng)減壓干燥，即得呈黃色粉末狀的小葉黑柴胡浸膏粉。本發(fā)明工藝簡單、易規(guī)?；瘜嵤①|(zhì)量穩(wěn)定可控。
【IPC分類】A61P35/00, A23L1/29, A61K36/233
【公開號】CN105106258
【申請?zhí)枴緾N201510587571
【發(fā)明人】張莉, 黨軍, 王啟蘭, 邵赟, 梅麗娟, 陶燕鐸, 趙建強
【申請人】中國科學(xué)院西北高原生物研究所
【公開日】2015年12月2日
【申請日】2015年9月15日