一種治療前列腺癌的中藥組合物及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于前列腺癌治療領域，特別涉及一種治療前列腺癌的中藥組合物及其制 備方法和應用。
【背景技術】
[0002] 前列腺癌（PCA)是男性常見的惡性腫瘤之一。在歐美國家，前列腺癌已成為男性 癌癥發(fā)病率第一的癌種，死亡率僅次于肺癌。近年來我國隨著人口的逐漸老齡化，人們生活 水平與生活質量條件的改善，前列腺癌的發(fā)病率及死亡率也呈逐年快速上升趨勢，對前列 腺癌的研究與藥物開發(fā)已成為世界最熱門的課題之一。
[0003] 前列腺癌可分為性激素依賴性和非性激素依賴性兩種類型。通常的用激光從外部 照射、放射性物質植入或進行根治手術，復發(fā)率較高。對于性激素依賴性前列腺癌給予性激 素進行治療，大部分會轉變?yōu)榧に氐挚剐?；化療藥物的副作用大且療效不理想。對于非性?素依賴性前列腺癌，目前尚無有效的治療手段。當病人被診斷為癌癥第三或第四期，或前列 腺癌復發(fā)轉移時，絕大部分患者只能等待死亡。因此，人們很需要副作用小、治療方便的治 療方法，換言之，臨床需要副作用小、療效高、成本低的新穎藥物。
[0004]CN103816258公開了一種治療前列腺癌的中藥組合物，由如下重量份數(shù)的原料制 備得到：珠子參50-70份、水丁香10-20份、土鱉蟲40-60份、白花蛇舌草10-20份、白側耳 15-25份、茯苓15-25份、草金杉10-20份、甘草10-20份。而事實上幾種組分的作用相似， 提高了生產成本。CN1478538公開了一種治療前列腺癌的中藥組合物，但是大青葉與冬凌草 都有抑制腫瘤的功效，菊花與黃芩都具有清熱解毒功效，類似作用有重疊，同樣提高了生產 成本。

【發(fā)明內容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種治療前列腺癌的中藥組合物及其制備方 法和應用，該中藥組合物簡化了組合物的組方，利于質量控制、降低生產成本，同時產品療 效沒有受到影響，具有良好的應用前景。
[0006] 本發(fā)明的一種治療前列腺癌的中藥組合物，由重量比2-3 :1_2 :1_2 :0. 5-1. 5 : 〇. 5-1. 5的靈芝、黃芩、冬凌草、三七和甘草為原料制成。
[0007] 由重量比2-3 :1. 5-2 :1. 5-2 :1-1. 5 :1-1. 5的靈芝、黃芩、冬凌草、三七和甘草為 原料制成。
[0008] 由重量比3 :2 :2 :1 :1的靈芝、黃芩、冬凌草、三七和甘草為原料制成。
[0009] 由重量比2:1.5:2:1.5:1的靈芝、黃芩、冬凌草、三七和甘草為原料制成。
[0010] 本發(fā)明的一種治療前列腺癌的中藥組合物的制備方法，包括：通過混合提取或目 的物提取制備。
[0011] 所述混合提取方法為：
[0012] (1)準備原料：將靈芝、黃芩、冬凌草、三七和甘草以重量比為2-3 :1_2 :1_2 : 0. 5-1. 5 :0. 5-1. 5的比例進行粉碎混合，將所述的中藥混合物分成六等份；
[0013] (2)提取生物堿：
[0014] i)將步驟（1)得到的一份中藥混合物用0. 1 %鹽酸乙醇液滲濾或分次浸濾，得到 酸性乙醇提取液；
[0015] ii)減壓濃縮得到濃縮物；
[0016] iii)酸性水（pH= 4-5)洗滌，過濾，得到殘渣，殘渣用酸性水洗滌，得到酸性水 液；
[0017] iv)向步驟iii)中得到的酸性水液中加氨水沉淀，過濾得到總生物堿沉淀；
[0018] 或者a)向步驟iii)中得到的酸性水液中加稀酸至pH= 2,用氯仿萃取，得到氯仿 層和水層；蒸發(fā)氯仿層中的氯仿，得到弱生物堿；
[0019] b)所述的水層加堿至pH= 6-7,用氯仿提取，得到水層和氯仿層，蒸發(fā)氯仿層中的 氯仿，得到強生物堿；
[0020] c)上述b)得到的水層用堿調節(jié)到pHIO,然后用丁醇提取，蒸發(fā)丁醇層中的丁醇， 得到水溶性的生物堿；
[0021] d)合并上述a)、b)和c)得到的生物堿，得到總生物堿；
[0022] (3)提取多糖：將步驟⑴得到的一份中藥混合物用95-KKTC的熱水提取，棄去殘 渣，濾液放置12小時后，向上清液中加入濃度50%以上的乙醇，離心得到多糖沉淀；
[0023] (4)提取內酯：將步驟⑴得到的一份中藥混合物用乙醚回流，除去色素，回收乙 醚，得到總內酯；
[0024] (5)提取皂甙：將步驟⑴得到的一份中藥混合物用石油醚回流，蒸發(fā)石油醚得到 脫脂粗粉，用90-95 %乙醇提取，減壓濃縮得到濃縮液；
[0025] a)濃縮液依次用氯仿、乙醇提取，減壓回收氯仿、乙醇，得到總甙粗品；
[0026] 或者b)濃縮液用丁醇提取，減壓回收丁醇，得到皂甙粗品；
[0027] (6)提取香豆精：將步驟⑴得到的一份中藥混合物加水煎煮1-2小時，濃縮水煎 液，加濃鹽酸，除去雜質不溶物，放置澄清液，得到香豆精的粗結晶；
[0028] (7)提取黃酮：將步驟⑴得到的一份中藥混合物加70-80%乙醇浸漬，減壓回收 乙醇液中的乙醇，殘留物用水溶解，過濾，得到水液；用乙酸乙酯提取水液，減壓濃縮乙酸 乙酯液，得到總黃酮；
[0029] 將步驟⑵~（7)提取得到的生物堿、多糖、內酯、皂戒、香豆精、總黃酮混合，得到 中藥組合物。
[0030] 所述目的物提取方法為：
[0031] (1)提取黃芩甙：
[0032] i)向上述黃芩組分中加入10-15 (體積）倍量水煎煮1-2小時，過濾；
[0033] ii)用酸將濾液調到pHl-2,在80_90°C下保持30-40分鐘，離心沉淀；沉淀物加水 攪拌均勻，加堿將pH調節(jié)到中性，再加入3-5倍（體積）量的乙醇，過濾；
[0034] iii)向濾液中加酸將pH調節(jié)到1-2,攪拌，在80_90°C下保持30-40分鐘，過濾；
[0035] iv)所得的沉淀物用分別用水、50%乙醇洗滌，再用95%乙醇洗滌或重結晶，得到 黃芩甙；
[0036] (2)提取三七皂甙：
[0037]i)用濃度在50%以下的甲醇提取三七根部粗粉中的可溶成分，減壓濃縮甲醇提 取液，向殘留物中加入3-5倍（體積）量水；
[0038]ii)水溶液用乙醚提取，水層再用正丁醇萃取，減壓蒸干，經硅膠柱層析，用CHC13、 MeOH和H20以65 : 35 : 10洗脫得到三七皂甙；
[0039] (3)提取冬凌草甲素用乙醚提取冬凌草葉干粉，棄去殘渣，回收乙醚液中的乙醚， 得到綠褐色殘留物；用甲醇溶解殘留物，脫色得到澄明甲醇液，減壓濃縮后室溫放置過夜， 過濾，甲醇母液蒸干，研細；用乙醚洗脫，結晶；優(yōu)選地，再用中性A1203吸附，用乙醚洗脫， 結晶；
[0040] (4)提取甘草素、異甘草素甘草用3-4倍（體積）量的90-95 %乙醇提取，乙醇液 經石油醚萃取，水層拌入硅膠，用MeOH和H20以7 : 3洗脫，濃縮洗脫液，得到殘留物；向殘 留物中加水至完全溶解，向水溶液中加乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯層用5%Na2C03水液萃取， 用稀酸將碳酸鈉水液調節(jié)到PH5-6,再用乙酸乙酯萃取，干燥乙酸乙酯液，經聚酰胺柱分離， 用10-90 %乙醇水溶液梯度洗脫得到甘草素和異甘草素；
[0041] (5)使包含靈芝糖肽和靈芝e-D葡聚糖的靈芝多糖（有市售，上海農科所出品） 與上述步驟（1)_(4)提取得到的活性成分混合得到中藥組合物。
[0042] 還包括步驟（6):
[0043]a)將所述步驟（1)-(5)得到的活性成分粉碎至彡200微米細粉；
[0044]b)粉碎，干燥無漏籽/海棗籽或酸石榴籽/矮石榴籽，用8倍體積量的無水乙醇提 取，減壓濃縮，用乙炔化鉀處理，得到粉末；
[0045]c)將a)、b)所得的物質以100-200 : 1的重量比混合。
[0046] 還包括步驟d):將c)中得到的混合物裝入膠囊。
[0047] 本發(fā)明的一種治療前列腺癌的中藥組合物在制備治療前列腺癌的藥物中的應用。
[0048] 本發(fā)明注重人體的整體調節(jié)，標本兼治，對激素依賴型和非依賴型前列腺癌都有 一定的治療作用，毒副作用??；聯(lián)合化療藥物治療前列腺癌可增強療效，降低不良反應；對 手術后與放、化療的癌癥患者，可明顯促進機體正常功能的恢復；對術后復發(fā)者有較強的抑 制癌細胞生長作用。本發(fā)明可填補市場上前列腺癌中藥制劑的空白，同時填補激素非依賴 性前列腺癌國產藥物的空白，并可彌補全球激素非依賴型前列腺癌治療藥物的不足。
[0049]有益效果
[0050] 本發(fā)明簡化了組合物的組方，利于質量控制、降低生產成本，同時產品療效沒有受 到影響，具有良好的應用前景。
【具體實施方式】
[0051] 下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內容之后，本領域技術人 員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定 的范圍。
[0052] 實施例1
[0053] (1)準備原料：將靈芝、黃苳、冬凌草、三七和甘草以重量比為3千克、2千克、2千 克、1千克、1千克的比例進行粉碎混合，將所述的中藥混合物分成六等份；
[0054] (2)提取生物堿：
[0055] i)將步驟（1)得到的一份中藥混合物用0. 1 %鹽酸乙醇液滲濾或分次浸濾，得到 酸性乙醇提取液；
[0056] ii)減壓濃縮得到濃縮物；
[0057] iii)酸性水（pH=4-5)洗滌，過濾，得到殘渣，殘渣用酸性水洗滌，得到酸性水 液；
[0058] iv)向步驟iii)中得到的酸性水液中加氨水沉淀，過濾得到總生物堿沉淀；
[0059] 或者a)向步驟iii)中得到的酸性水液中加稀酸至pH= 2,用氯仿萃取，得到氯仿 層和水層；蒸發(fā)氯仿層中的氯仿，得到弱生物堿；
[0060]b)所述的水層加堿至pH= 6-7,用氯仿提取，得到水層和氯仿層，蒸發(fā)氯仿層中的 氯仿，得到強生物堿；
[0061]C)上述b)得到的水層用堿調節(jié)到PH10,然后用丁醇提取，蒸發(fā)丁醇層中的丁醇， 得到水溶性的生物堿；
[0062] d)合并上述a)、b)和c)得到的生物堿，得到總生物堿；回收上述的氯仿、丁醇，供 提取步驟循環(huán)使用；使所述的生物堿殘渣低溫干燥，結晶；
[0063] (3)提取多糖：將步驟⑴得到的一份中藥混合物用95°C的熱水提取上述得到的 中藥粗粉達2小時，棄去殘渣，濾液放置12小時后，向上清液中加入濃度60%的乙醇，離心 得到多糖沉淀；所述的多糖沉淀用乙醚精制；
[0064] (4)提取內酯：將步驟⑴得到的一份中藥混合物用乙醚回流，除去色素，回收乙 醚，得到總