具有膠原蛋白合成能力的新型的肽及其用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種肽及其用途，更詳細(xì)而言，涉及一種具有膠原蛋白合成能力的新 型的肽及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 人隨著年齡增大會引起皮膚老化，其代表的癥狀為皺紋（Wrinkle)。皺紋是表示年 齡的1個現(xiàn)象，產(chǎn)生皺紋的代表的原因起因于在皮膚的真皮中形成基質(zhì)的膠原蛋白發(fā)生分 解。由于發(fā)生老化，皮膚膠原蛋白的生成降低。
[0003] 作為促進(jìn)膠原蛋白合成的現(xiàn)有的物質(zhì)，已知有類視黃素（RE36068)、TGF-M轉(zhuǎn)化 生長因子，Transforming growth factor)、樺木酸（JP8-208424)、野生日本薯截萃取物（大 韓民國公開專利第2009-0055079)等。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 發(fā)明所要解決的問題
[0005] 這種現(xiàn)有的膠原蛋白合成促進(jìn)劑存在其效率降低、或作為重組蛋白質(zhì)成本昂貴、 為天然萃取物時再現(xiàn)性降低的缺點(diǎn)。
[0006] 本發(fā)明用于解決包含所述問題點(diǎn)在內(nèi)的多種問題點(diǎn)，其目的在于：提供一種能夠 以比較廉價的成本有效地促進(jìn)膠原蛋白合成的新型肽及其用途，由此，可作為用于減輕皮 膚老化或改善皺紋的化妝料組合物或創(chuàng)傷治療劑等使用。但是，這種要解決的問題為示例， 并不由此限定本發(fā)明的范圍。
[0007] 用于解決問題的技術(shù)方案
[0008] 根據(jù)本發(fā)明的一個觀點(diǎn)提供一種用于減輕皮膚老化的組合物，其含有具有序列號 1中所記載的氨基酸序列的YIGSR肽作為有效成分。
[0009] 根據(jù)本發(fā)明的其它觀點(diǎn)提供一種用于改善皺紋的化妝料組合物，其含有YIGSR肽 或在所述肽的N末端添加了棕櫚?；傻碾难苌镒鳛橛行С煞郑鯤GSR肽具有序 列號1中所記載的氨基酸序列。
[0010] 根據(jù)本發(fā)明的其它觀點(diǎn)提供一種用于創(chuàng)傷治療的藥學(xué)的組合物，其含有YIGSR肽 或在所述肽的N末端添加了棕櫚?；傻碾难苌镒鳛橛行С煞郑鯤GSR肽具有序 列號1中所記載的氨基酸序列。
[0011] 根據(jù)本發(fā)明的其它觀點(diǎn)提供一種皮膚填充劑，其含有YIGSR肽或在所述肽的N末 端添加了棕櫚酰基而成的肽衍生物作為有效成分，所述HGSR肽具有序列號1中所記載的 氨基酸序列。
[0012] 根據(jù)本發(fā)明的其它觀點(diǎn)提供一種創(chuàng)傷治療方法，其包括：將在藥學(xué)上有效的量的 YIGSR肽或在所述肽的N末端添加了棕櫚?；傻碾难苌锝o藥于遭受創(chuàng)傷的個體的階 段，所述HGSR肽具有序列號1中所記載的氨基酸序列。
[0013] 根據(jù)本發(fā)明的其它觀點(diǎn)提供一種YIGSR肽或其衍生物，其用于創(chuàng)傷治療中，所述 YIGSR肽具有序列號1中所記載的氨基酸序列，所述衍生物在所述肽的N末端添加了棕櫚酰 基而成。
[0014] 根據(jù)本發(fā)明的其它觀點(diǎn)一種YIGSR肽或其衍生物在改善皺紋用化妝料組合物的 制造中的應(yīng)用，所述HGSR肽具有序列號1中所記載的氨基酸序列，所述肽衍生物在所述肽 的N末端添加了棕櫚?；?。
[0015] 發(fā)明的效果
[0016] 根據(jù)如上所述進(jìn)行的本發(fā)明的一個實(shí)施例，可以體現(xiàn)具有膠原蛋白合成能力的新 型的肽。當(dāng)然，并不通過這種效果而限定本發(fā)明的范圍。
【附圖說明】
[0017] 圖1是通過蛋白質(zhì)印跡分析及實(shí)時RT-PCR分析確認(rèn)了本發(fā)明的一個實(shí)施例的 YIGSR肽處理引起的Hs27細(xì)胞中膠原蛋白表達(dá)變化的結(jié)果，圖1A是根據(jù)YIGSR肽處理濃 度（0、10 2、10 iUUOUO'lO'KAK^nM)確認(rèn)了膠原蛋白I蛋白質(zhì)表達(dá)變化的坐標(biāo)圖，圖 1B是根據(jù)YIGSR肽（103nM)處理時間（0、0. 5、6、12及24小時）確認(rèn)了膠原蛋白I蛋白質(zhì) 表達(dá)變化的坐標(biāo)圖，圖1C是根據(jù)HGSR肽處理濃度（0、10、102、10 3、104、105nM)確認(rèn)了膠原 蛋白I mRNA表達(dá)變化的坐標(biāo)圖。
[0018] 圖2是通過MTT分析確認(rèn)了本發(fā)明的一個實(shí)施例的HGSR肽處理細(xì)胞引起的生存 率變化的結(jié)果，圖2A是根據(jù)HGSR肽處理濃度（0、10、10 2、103、104、105nM)變化確認(rèn)了 Hs27 細(xì)胞的生存率的坐標(biāo)圖，圖2B是根據(jù)YIGSR肽（103nM)處理時間（0、0. 1、0. 25、0. 5、1、3、6、 12及24小時）顯示Hs27細(xì)胞的生存率的坐標(biāo)圖。
[0019] 圖3是通過蛋白質(zhì)印跡分析確認(rèn)了本發(fā)明的一個實(shí)施例的YIGSR肽處理引起的 MMP-1水解酶的表達(dá)變化的照片。
[0020] 圖4是為了確認(rèn)參與本發(fā)明的一個實(shí)施例的YIGSR肽引起的膠原蛋白表達(dá)增加的 信號機(jī)制，使用蛋白質(zhì)印跡分析確認(rèn)了作為層粘連蛋白受體的下位信號傳遞的FAK、Pyk2、 及ERK的磷酸化水平的結(jié)果，圖4A是蛋白質(zhì)印跡照片，圖4B是對蛋白質(zhì)印跡圖像進(jìn)行了濃 度分析的坐標(biāo)圖。
[0021] 圖5是確認(rèn)了 FAK或ERK抑制劑處理引起的對由本發(fā)明的一個實(shí)施例的HGSR 肽所誘導(dǎo)的膠原蛋白生成產(chǎn)生了抑制的蛋白質(zhì)印跡分析照片，圖5A是作為FAK抑制劑的 PF573228處理時的結(jié)果，圖5B是作為ERK抑制劑的TO98059處理時的結(jié)果。
[0022] 圖6是表示本發(fā)明的YIGSR肽衍生物（Pal-YIGSR)的濃度依賴性膠原蛋白合成活 性的免疫印跡分析結(jié)果。
[0023] 圖7是比較本發(fā)明的YIGSR肽衍生物（Pal-YIGSR)及比較例的膠原蛋白合成活性 的免疫印跡分析結(jié)果。
[0024] 圖8是比較了本發(fā)明的YIGSR肽衍生物（Pal-YIGSR)及比較例的肽的ERK磷酸化 活性的免疫印跡分析結(jié)果。
[0025] 圖9是表示本發(fā)明的HGSR肽衍生物（Pal-YIGSR)的濃度依賴性皮膚成纖維細(xì)胞 增殖活性的坐標(biāo)圖。
[0026] 圖10是比較了由本發(fā)明的HGSR肽衍生物（Pal-YIGSR)及比較例的肽的暴露時 間而產(chǎn)生的膠原蛋白合成活性的免疫印跡分析結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0027] 以下，對本發(fā)明更詳細(xì)地進(jìn)行說明。
[0028] 根據(jù)本發(fā)明的一個觀點(diǎn)，提供一種用于減輕皮膚老化的組合物，其含有YIGSR肽 或在所述肽的N末端添加了棕櫚?；傻碾难苌镒鳛橛行С煞?，所述HGSR肽具有序 列號1中所記載的氨基酸序列。
[0029] 本發(fā)明的一個實(shí)施例的具有序列號1中所記載的氨基酸序列的HGSR肽在轉(zhuǎn)錄水 平上調(diào)節(jié)膠原蛋白的表達(dá)，并產(chǎn)生處理量及處理時間依賴性地增加膠原蛋白I的生成的效 果。此時，提供以下效果：所述序列號1中所記載的YIGSR肽通過在10 3~10 4nM的低濃度 下使膠原蛋白I的生成顯著地增加，作為所述肽衍生物的Pal-YIGSR，即使在50~100 yM 的高濃度下也會產(chǎn)生使膠原蛋白I的生成顯著地增加。另外，這種增加膠原蛋白生成的效 果是作為層粘連蛋白受體的下位信號傳遞機(jī)制的FAK、Pyk2、及ERK的磷酸化引起的，而并 不是分解膠原蛋白的MMP-1水解酶表達(dá)的抑制而引起的。因此，可以作為減輕由于減少膠 原蛋白I的減少含量而促進(jìn)的皮膚老化的組合物而利用。
[0030] 所述皮膚老化減輕用組合物可以以化妝料組合物的形態(tài)提供。
[0031 ] 在化妝料組合物中使用本發(fā)明的一個實(shí)施例的肽時，在其劑型上沒有特別限定， 例如，具有柔軟化妝水、營養(yǎng)化妝水、按摩霜、營養(yǎng)霜、潤膚膏、凝膠或皮膚粘合型化妝料的 劑型的化妝料組合物，可以為如化妝水、軟膏、凝膠、霜、貼劑（patch)或噴霧劑那樣的經(jīng)皮 給藥型劑型。
[0032] 本發(fā)明的組合物可以進(jìn)一步含有在化妝品制造中通常使用的適當(dāng)?shù)妮d體、賦形劑 及稀釋劑。根據(jù)化妝品的劑型而適當(dāng)?shù)貏┬瓦x擇，可列舉：凡士林、液體石蠟、凝膠化烴（別 名：Plastibase)等經(jīng)類；中鏈脂肪酸甘油三酯、豬油、加硬PET(hard PET)、可可脂等動植 物性油；鯨蠟醇、硬脂醇、硬脂酸、棕櫚酸異丙酯等高級脂肪酸醇及脂肪酸、及其酯類；聚乙 二醇（聚乙二醇）、1，3-丁二醇、甘油、明膠、白糖、糖醇等水溶性基劑；甘油脂肪酸酯、聚乙 二醇硬脂酸酯、聚氧乙烯固化蓖麻油等乳化劑；丙烯酸酯、海藻酸鈉等粘合劑；液化石油氣 體、二氧化碳等噴射劑；對羥基苯甲酸酯類等防腐劑等。
[0033] 根據(jù)本發(fā)明的其它觀點(diǎn)，提供一種用于改善皺紋的化妝料組合物，其含有HGSR 肽或在所述肽的N末端添加了棕櫚?；傻碾难苌镒鳛橛行С煞?，所述HGSR肽具有 序列號1中所記載的氨基酸序列。
[0034] 此時，在具有序列號1所示的氨基酸序列的HGSR肽產(chǎn)生在103~10 4nM的低濃度 下顯著地增加膠原蛋白I的生成的效果。
[0035] 根據(jù)本發(fā)明的其它觀點(diǎn)，提供一種創(chuàng)傷治療用藥學(xué)的組合物，其含有YIGSR肽或 在所述肽的N末端添加了棕櫚?；傻碾难苌镒鳛橛行С煞?，所述HGSR肽具有序列 號1中所記載的氨基酸序列。
[0036] 原來，YIGSR肽是經(jīng)常保存在層粘連蛋白（Laminin)等膠原蛋白結(jié)合蛋白質(zhì)中的 部位，作為膠原蛋白