大黃酚前體脂質(zhì)體的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種大黃酚前體脂質(zhì)體的制備方法，特別涉及一種自組裝法制備大黃 酚前體脂質(zhì)體的方法。 (二）
【背景技術(shù)】
[0002] 大黃酚是寥科植物大黃中有效成分之一，屬蒽醌類化合物，具有止咳、抗菌、抗衰 老、利尿、抗癌、止血、降血糖、收縮血管、降低血管脆性等方面功效。但是，大黃酚溶解度低、 易氧化、對(duì)胃腸道刺激大，不能長(zhǎng)時(shí)間保存，臨床上難以給藥。脂質(zhì)體是由與中心的水性內(nèi) 核同心排列的一層或多層脂質(zhì)雙分子層構(gòu)成的微觀球體，具有減緩藥物釋放、增加藥物靶 向性、降低藥物副作用、提高藥物穩(wěn)定性、增加對(duì)組織細(xì)胞的親和性、促進(jìn)藥物吸收、提高生 物利用度、改變藥物在體內(nèi)分布等特點(diǎn)，是一種新型藥物制劑。然而，藥物制劑對(duì)穩(wěn)定性的 要求很高，需要高溫滅菌，一般脂質(zhì)體制劑難以滿足條件，前體脂質(zhì)體是將磷脂、藥物及附 加劑等以適宜方法制成的不具備完整脂質(zhì)雙分子層囊泡結(jié)構(gòu)的一種液態(tài)或固態(tài)制劑，經(jīng)稀 釋或水化即能轉(zhuǎn)化成脂質(zhì)體。
[0003]目前，前體脂質(zhì)體的制備方法有多種，例如載體沉積法、噴霧干燥法、粉末研磨法、 冷凍干燥法、真空旋轉(zhuǎn)法、流化床包衣法等。上述方法存在操作繁瑣，工藝復(fù)雜，制備的脂質(zhì) 體使用過程中水合速度較慢，局部溶解不完善，分散不均勻等問題。
[0004] 本發(fā)明采用自組裝法制備的前體脂質(zhì)體以良好流動(dòng)性的液態(tài)貯存，不僅解決了水 溶液中磷脂氧化與水解的問題，而且解決了脂質(zhì)體混懸液中脂質(zhì)分子聚集、雙分子層融合、 沉降、藥物泄漏等不利因素造成的儲(chǔ)存期短的問題，使得脂質(zhì)體制品的物理化學(xué)穩(wěn)定性顯 著提高。前體脂質(zhì)體加入注射用水水合后，立即分散成脂質(zhì)體溶液，適合口服、靜脈給藥，從 而使脂質(zhì)體制品工業(yè)化生產(chǎn)成為現(xiàn)實(shí)，作為臨床藥物應(yīng)用質(zhì)量進(jìn)一步提高。前體脂質(zhì)體是 提高脂質(zhì)體穩(wěn)定性的有效思路和方法，普通脂質(zhì)體的穩(wěn)定性和高溫滅菌問題在前體脂質(zhì)體 這里得到了有效解決，而且它適于工業(yè)化大生產(chǎn)。 (三）

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種條件溫和、制備工藝簡(jiǎn)單的大黃酚前體脂質(zhì)體的制備方 法。
[0006] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0007] -種大黃酚前體脂質(zhì)體的制備方法，所述制備方法為：將大黃酚溶解于含有卵磷 月旨、膽固醇、PEG-2000(聚乙二醇-2000)、維生素E的無水乙醇中，得到混合液，所得混合液 經(jīng)微孔濾膜過濾除菌后，直接注入水合介質(zhì)中，室溫下即自組裝成大黃酚前體脂質(zhì)體，并于 0~4°C密封保存；
[0008] 所述水合介質(zhì)為水、0. 9wt%生理鹽水或3wt%~8wt%葡萄糖水溶液；
[0009] 所述大黃酚與卵磷脂、膽固醇、PEG-2000、維生素E的質(zhì)量比為1 :2~20 :1~8 : 1 ~10 :1 ~10 ;
[0010] 所述無水乙醇的體積用量以大黃酸的質(zhì)量計(jì)為2~5mL/mg ;
[0011] 所述無水乙醇與水合介質(zhì)的體積比為1 :1~2。
[0012] 本發(fā)明大黃酚前體脂質(zhì)體的制備方法中，優(yōu)選所述大黃酚與卵磷脂、膽固醇、 PEG-2000、維生素E的質(zhì)量比為1 :8~10 :1~3 :2~5 :2~4。
[0013] 通常，所述微孔濾膜的孔徑為0. 45 ym。
[0014] 本發(fā)明大黃酚前體脂質(zhì)體直接以液劑形式保存。
[0015] 本發(fā)明的有益效果在于：與載體沉積法、噴霧干燥法、粉末研磨法、冷凍干燥法、真 空旋轉(zhuǎn)法、流化床包衣法等制備方法相比，本發(fā)明制備方法將反應(yīng)混合液直接注入水合介 質(zhì)中，室溫下自組裝成前體脂質(zhì)體，反應(yīng)條件溫和，工藝操作簡(jiǎn)單，時(shí)間較短，有利于脂質(zhì)體 藥物的工業(yè)化生產(chǎn)，且所得前體脂質(zhì)體的藥物包封率高于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法制得的前體脂質(zhì)體。 (四）【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限 于此。
[0017] 實(shí)施例1
[0018] 實(shí)驗(yàn)儀器：旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（RE52-99);紫外可見分光光度計(jì)（TU-1810);循環(huán)水式真 空栗（SHZ-D(III));低速離心機(jī)（SU-05)。
[0019] 實(shí)驗(yàn)試劑：大黃酚標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；大黃酚試品（江蘇省濰安 市巍偉植化研究所）；卵磷脂（北京華清美恒天然產(chǎn)物技術(shù)開發(fā)有限公司）；膽固醇（北京 鼎國(guó)生物技術(shù)有限責(zé)任公司）；PEG-2000(北京鼎國(guó)生物技術(shù)有限責(zé)任公司）；其它均為分 析純?cè)噭?br>[0020] 實(shí)驗(yàn)方法：
[0021] 將大黃酚（3mg)溶解于含有卵磷脂（24mg)、膽固醇（6mg)、PEG-2000 (12mg)、維生 素E (IOmg)的無水乙醇（IOmL)中，得到混合液，所得混合液經(jīng)微孔濾膜（孔徑為0.45 ixm) 過濾除菌后，直接注入0. 9wt %生理鹽水（定容至25mL)中，室溫，pH = 7. 8條件下，快速自 組裝成大黃酚前體脂質(zhì)體，密封、4°C低溫保存。
[0022] 大黃酚自組裝前體脂質(zhì)體包封率檢測(cè)：
[0023] 移取上述制得的大黃酚前體脂質(zhì)體2mL，加注射用水（7mL)水化，振搖至全部溶 解，轉(zhuǎn)移至IOmL容量瓶中，定容，混合均勻。精密量取2. OmL溶液置于離心管中，在1000 r/ min的條件下離心6次，每次20s，棄去上層清液。精密移取5. OmL甲醇溶解離心所得沉淀， 以甲醇做參比，用722S可見分光光度計(jì)在428nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，用濃度（C)對(duì)吸光度 (A)作線性回歸A = 0. 0427C+0. 0212 (R2= 0. 9999)，計(jì)算游離大黃酚的量。然后采用如下 公式，計(jì)算大黃酚前體脂質(zhì)體包封率，結(jié)果見表1。
[0024]
[0025] 注：游離大黃酚的質(zhì)量，W,&為總大黃酚的質(zhì)量。
[0026] 實(shí)施例2
[0027]將大黃酚（3mg)溶解于含有卵磷脂（24mg)、膽固醇（4. 8mg)、PEG-2000 (6mg)、維生 素E (IOmg)的無水乙醇（IOmL)中，得到混合液，所得混合液經(jīng)微孔濾膜（孔徑為0.45 ixm) 過濾除菌后，直接注入水（定容至25mL)中，室溫，pH = 7.8條件下，快速自組裝成大黃酚 前體脂質(zhì)體，密封、4°C低溫保存。
[0028] 所得大黃酚自組裝前體脂質(zhì)體包封率檢測(cè)方法同實(shí)施例1，結(jié)果見表1。
[0029] 實(shí)施例3
[0030] 將大黃酚（3mg)溶解于含有卵磷脂（30mg)、膽固醇（5mg)、PEG-2000 (15mg)、維生 素E (IOmg)的無水乙醇（IOmL)中，得到混合液，所得混合液經(jīng)微孔濾膜（孔徑為0.45 ixm) 過濾除菌后，直接注入水（定容至25mL)中，室溫，pH = 7.8條件下，快速自組裝成大黃酚 前體脂質(zhì)體，密封、4°C低溫保存。
[0031] 所得大黃酚自組裝前體脂質(zhì)體包封率檢測(cè)方法同實(shí)施例1，結(jié)果見表1。
[0032] 實(shí)施例4
[0033] 將大黃酚（3mg)溶解于含有卵磷脂（36mg)、膽固醇（9mg)、PEG-2000 (12mg)、維生 素E (IOmg)的無水乙醇（IOmL)中，得到混合液，所得混合液經(jīng)微孔濾膜（孔徑為0.45 ixm) 過濾除菌后，直接注入水（定容至25mL)中，室溫，pH = 7.8條件下，快速自組裝成大黃酚 前體脂質(zhì)體，密封、4°C低溫保存。
[0034] 所得大黃酚前體脂質(zhì)體包封率檢測(cè)方法同實(shí)施例1，結(jié)果見表1。
[0035] 實(shí)施例5
[0036] 將大黃酚（3mg)溶解于含有卵磷脂（24mg)、膽固醇（4mg)、PEG-2000 (8mg)、維生素 E(IOmg)的無水乙醇（IOmL)中，得到混合液，所得混合液經(jīng)微孔濾膜（孔徑為0.45 ixm)過 濾除菌后，直接注入5wt %葡萄糖水溶液（定容至25mL)中，室溫，pH = 7. 8條件下，快速自 組裝成大黃酚前體脂質(zhì)體，密封、4°C低溫保存。
[0037] 所得大黃酚自組裝前體脂質(zhì)體包封率檢測(cè)方法同實(shí)施例1，結(jié)果見表1。
[0038] 表1實(shí)施例1~5包封率檢測(cè)結(jié)果
[0039]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種大黃酚前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，所述制備方法為：將大黃酚溶解 于含有卵磷脂、膽固醇、PEG-2000、維生素E的無水乙醇中，得到混合液，所得混合液經(jīng)微 孔濾膜過濾除菌后，直接注入水合介質(zhì)中，室溫下即自組裝成大黃酚前體脂質(zhì)體，并于O~ 4 °C密封保存； 所述水合介質(zhì)為水、〇. 9wt%生理鹽水或3wt%~8wt%葡萄糖水溶液； 所述大黃酚與卵磷脂、膽固醇、PEG-2000、維生素E的質(zhì)量比為1 :2~20 :1~8 :1~10:1~10; 所述無水乙醇的體積用量以大黃酸的質(zhì)量計(jì)為2~5mL/mg; 所述無水乙醇與水合介質(zhì)的體積比為1 :1~2。2. 如權(quán)利要求1所述的大黃酚前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，所述大黃酚與卵 磷脂、膽固醇、PEG-2000、維生素E的質(zhì)量比為1 :8~10 :1~3 :2~5 :2~4。3. 如權(quán)利要求1所述的大黃酚前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，所述微孔濾膜的 孔徑為〇. 45ym。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種大黃酚前體脂質(zhì)體的制備方法：將大黃酚溶解于含有卵磷脂、膽固醇、PEG-2000、維生素E的無水乙醇中，得到混合液，所得混合液經(jīng)微孔濾膜過濾除菌后，直接注入水合介質(zhì)中，室溫下即自組裝成大黃酚前體脂質(zhì)體，并于0～4℃密封保存；本發(fā)明制備方法將反應(yīng)混合液直接注入水合介質(zhì)中，室溫下自組裝成前體脂質(zhì)體，反應(yīng)條件溫和，工藝操作簡(jiǎn)單，時(shí)間較短，有利于脂質(zhì)體藥物的工業(yè)化生產(chǎn)，且所得前體脂質(zhì)體的藥物包封率高于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)法制得的前體脂質(zhì)體。
【IPC分類】A61P39/06, A61P31/04, A61P7/04, A61K31/122, A61P11/14, A61P3/10, A61P9/14, A61P7/10, A61P35/00, A61K9/127
【公開號(hào)】CN105193725
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510638851
【發(fā)明人】王永利, 庚麗麗, 魏珍, 王立華, 吳亮飛
【申請(qǐng)人】河北北方學(xué)院
【公開日】2015年12月30日
【申請(qǐng)日】2015年9月30日