一種包埋趨磁細(xì)菌磁小體的藥物緩釋納米微球及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種藥物緩釋納米微球，具體涉及一種包埋趨磁細(xì)菌磁小體的藥物緩 釋納米微球，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前大多數(shù)臨床藥物存在耐受性差、細(xì)胞毒副作用強(qiáng)、口服吸收差、水溶性差、生 物半衰期短等缺陷，從而影響藥物的臨床應(yīng)用。為達(dá)到改善藥物性能的目的，國(guó)內(nèi)外發(fā)展了 擇時(shí)脈沖釋藥、藥物前體設(shè)計(jì)、透皮給藥和納米微球等技術(shù)。其中，納米微球緩釋技術(shù)具有 對(duì)靶器官有特異趨向性、藥物釋放持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)、提高生物利用度等優(yōu)勢(shì)。
[0003] 納米微球作為一種藥物輸送平臺(tái)，可以提高活性藥物成分，如難溶性藥物、離子性 藥物、蛋白質(zhì)、多肽和小干擾RNA(SiRNA)等的功效。納米微球本身沒(méi)有藥理作用，也不與藥 物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。納米微球作為藥物載體具有以下優(yōu)點(diǎn)：①提高藥物利用率；②提高藥物 的選擇性；③減少藥物對(duì)正常組織的傷害，降低毒副作用；④將藥物靶向輸送到病變部位， 實(shí)現(xiàn)靶向給藥。
[0004] 趨磁細(xì)菌（Magnetotactic bacterium)是一類(lèi)在外磁場(chǎng)的作用下能作定向運(yùn)動(dòng) 并在體內(nèi)形成納米磁性顆粒一磁小體（Magnetosome)的細(xì)菌，近年來(lái)，趨磁細(xì)菌及磁小體 已成為新的生物資源被廣泛研究于材料學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、物理學(xué)、地質(zhì)學(xué)等多個(gè)學(xué)科領(lǐng)域， 并在仿生學(xué)、生態(tài)學(xué)、醫(yī)學(xué)、地質(zhì)學(xué)、工業(yè)處理、衛(wèi)生檢驗(yàn)等多個(gè)領(lǐng)域得到應(yīng)用。趨磁細(xì)菌 不是分類(lèi)學(xué)上的名詞，它是對(duì)體內(nèi)含磁性顆粒并表現(xiàn)出趨磁行為的所有細(xì)菌的通稱(chēng)。通 過(guò)對(duì)目前已分離純化的一些趨磁細(xì)菌菌株的16S rDNA序列的系統(tǒng)進(jìn)化分析，發(fā)現(xiàn)趨磁細(xì) 菌只存在于Proteobacteria和Nitrospira這2個(gè)門(mén)內(nèi)，多數(shù)位于Proteobacteria門(mén)的 a亞綱和S亞綱，而Nitrospira門(mén)中只有Magnetobacterium bavaricum -種趨磁細(xì)菌 的存在。在最新版的伯杰系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)中，趨磁細(xì)菌被分別歸入Magnetospirillum和 Magnetobacterium屬中。其中對(duì)M. magnetotacticumMS-l、Magnetospiri_llumsp. AMB-1 及 M. gryphiswaldense MSR-I等菌株的研究較為普遍與深入。
[0005] 磁細(xì)菌體內(nèi)合成鏈狀排列、具有外膜包被的Fe304或Fe3S4磁性顆粒一體。磁小 體顆粒為單磁疇晶體，大小均勻、納米級(jí)（20~120nm)、具有較大的比面值，顆粒外有生物 膜包被，不產(chǎn)生細(xì)胞毒性，具有極好的生物相容性，因此可以作為新一代納米磁性材料。本 發(fā)明將磁小體與生物材料混和制備緩釋納米微球，根據(jù)不同的治療目的，可將納米微球作 為口服緩釋劑型，也可以用于制備靶向載藥的緩釋劑型，可以應(yīng)用到生物醫(yī)藥領(lǐng)域，實(shí)現(xiàn)磁 固定靶向緩釋給藥。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] -種包埋趨磁細(xì)菌磁小體的藥物緩釋納米微球，由以下成分組成：
[0007]
[0008] 所述的藥物成分為抗腫瘤藥物喜樹(shù)堿、阿霉素、長(zhǎng)春新堿、紫杉醇、秋水仙堿、嘌呤 霉素中的一種或幾種。
[0009] 進(jìn)一步地，由以下成分組成：
[0010]
[0011] 所述的趨磁細(xì)菌選擇Magnetospirillum屬或Magnetobacterium屬趨磁細(xì)菌； 尤其選擇 M. magnetotacticum MS-1、Magnetospiri-llumsp AMB-1 及 M. gryphiswaldense MSR-I菌株中的一種或幾種。
[0012] 納米微球的粒徑為IOOnm~50μm ;納米微球?yàn)楸砻婀饣膶?shí)心球體或顆粒。
[0013] 殼聚糖的分子量為IOKDa~2000KDa，優(yōu)選300KDa~lOOOKDa，更優(yōu)選350KDa。
[0014] 殼聚糖的脫乙酰度為50 %~90%，優(yōu)選60 %~80%，更優(yōu)選75 %。
[0015] 輔料為甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥乙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲 基纖維素、羥甲基纖維素和羥甲基纖維素鈉、乳糖、甘露聚糖、果膠、海藻酸鈉、海藻酸鉀、瓊 月旨、角叉等膠、刺槐豆膠、爪耳樹(shù)膠和西黃蓍膠中的一種或幾種。
[0016] 包埋趨磁細(xì)菌磁小體的藥物緩釋納米微球的制備方法，包括以下步驟：
[0017] (1)將培養(yǎng)結(jié)束的趨磁細(xì)菌收集，超聲破壁釋放磁小體，施加外加磁場(chǎng)吸附分離磁 小體；
[0018] (2)將磁小體用生理鹽水沖洗數(shù)次，將殼聚糖、輔料、藥物成分混合均勻；
[0019] (3)將步驟（2)中混合液通過(guò)噴霧干燥來(lái)制備納米微球。
[0020] 進(jìn)一步地：
[0021] 超聲條件為：功率100~1000W，優(yōu)選200~500W，更優(yōu)選300W。
[0022] 噴霧干燥條件為：進(jìn)風(fēng)溫度80~180°C，優(yōu)選120~160°C，更優(yōu)選150°C;出風(fēng)溫 度70~100°C，優(yōu)選80~90°C，更優(yōu)選85°C;收集噴霧干燥粉末，得緩釋納米微球。
[0023] 上述的納米微球具有顯著的藥物緩釋功效，可作為口服緩釋劑型，也可以用于制 備靶向載藥的緩釋劑型，適宜作為磁性靶向載藥新劑型進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用。
【附圖說(shuō)明】
[0024] 下面結(jié)合附圖及其實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
[0025] 圖1藥物緩釋納米微球示意圖
[0026] 圖2包埋趨磁細(xì)菌磁小體的藥物緩釋納米微球結(jié)構(gòu)示意圖
[0027]1 :磁小體；2 :包埋的藥物成分。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 實(shí)施例1 一種包埋趨磁細(xì)菌磁小體的藥物緩釋納米微球
[0029] 緩釋納米微球的組成為：趨磁細(xì)菌的磁小體1份、殼聚糖1份、甲基纖維素1份、喜 樹(shù)堿10份。
[0030] 包埋趨磁細(xì)菌磁小體的緩釋納米微球的制備是通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)的：
[0031] (1)將培養(yǎng)Magnetospiri-llumsp. AMB-I結(jié)束的趨磁細(xì)菌收集，500W超聲破壁lh， 釋放磁小體，施加外加磁場(chǎng)吸附回收磁小體。
[0032] (2)將磁小體用生理鹽水沖洗3次，將分子量為lOKDa、脫乙酰度為50 %的殼聚糖、 甲基纖維素、喜樹(shù)堿按照上述比例混合均勻，通過(guò)噴霧干燥來(lái)制備納米微球；噴霧干燥條件 為：進(jìn)風(fēng)溫度80°C，出口溫度70°C，進(jìn)樣速度5mL/min。
[0033] (3)收集噴霧干燥粉末，得緩釋納米微球。制備所得的納米微球的平均粒徑為 100nm、微球表面光滑的實(shí)心球體。
[0034] 實(shí)施例2 -種包埋趨磁細(xì)菌磁小體的藥物緩釋納米微球
[0035] 緩釋納米微球的組成為：趨磁細(xì)菌的磁小體9份、殼聚糖20份、羥丙基纖維素4 份、阿霉素10份。
[0036] 包埋趨磁細(xì)菌磁小體的緩釋納米微球的制備是通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)的：
[0037] (1)將培養(yǎng)M. gryphiswaldense MSR-I結(jié)束的趨磁細(xì)菌收集，600W超聲破壁0? 5h， 釋放磁小體，施加外加磁場(chǎng)吸附回收磁小體。
[0038] (2)將磁小體用生理鹽水沖洗5次，將分子量為lOOKDa、脫乙酰度為80 %的殼聚 糖、羥丙基纖維素、阿霉素按照上述比例混合均勻，通過(guò)噴霧干燥來(lái)制備納米微球；噴霧干 燥條件為：進(jìn)風(fēng)溫度120°C，出口溫度90°C，進(jìn)樣速度18mL/min。
[0039] (3)收集噴霧干燥粉末，得緩釋納米微球。制備所得的納米微球的平均粒徑為 300nm、微球表面光滑的實(shí)心球體。
[0040] 實(shí)施例3 -種包埋趨磁細(xì)菌磁小體的藥物緩釋納米微球
[0041] 緩釋納米微球的組成為：趨磁細(xì)菌的磁小體10份、殼聚糖5份、果膠5份、長(zhǎng)春新 堿10份。
[0042] 包埋趨磁細(xì)菌磁小體的緩釋納米微球的制備是通過(guò)以下方式